实体组织和细胞蛋白抽提试剂盒
凯基核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒
凯基核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒Cat Number：For Research Use OnlyStore at -20℃for one yearExpire date：一、试剂盒说明本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取核蛋白和/或胞浆蛋白，提取制备过程简便。
制备的核蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性，并且纯度较高。
提取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性测定等后续蛋白质研究。
二、试剂盒组份组份KGP150 （50 test）KGP1100 （100储存温度test）Buffer A 25 mL 25 mL ×24℃Buffer B 1.5 mL 3．0 mL 4℃Buffer C 12.5 mL 25 mL 4℃DTT 50μL100μL-20℃蛋白酶抑制剂250μL500μL-20℃PMSF（100mM）400μL800μL-20℃三、操作步骤Ⅰ 实体组织蛋白的提取1、组织样本，将组织剪切成小块，加入适量的冰冷PBS均浆后，静置5 min ，弃沉淀，小心吸取上清转移至另一离心管中；2、上清4℃离心500×g，3 min，弃上清，估计细胞压积PCV（离心后的紧实细胞体积）；3、每20μL细胞压积中，加入200μL预冷的Buffer A【使用前每mL BufferA加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂】，最大转速涡旋剧烈振荡15s，放置冰上10～15min；4、加入11μL冷Buffer B，最大转速涡旋剧烈振荡5s，放置冰上1min；5、再次最大转速涡旋剧烈振荡5s后，4℃离心，16000×g,5min；6、尽快将上清转入另一预冷的洁净微量离心管，置于冰上，即得胞浆蛋白；7、在离心沉淀物（细胞核）中加入100μL预冷的Buffer C (使用前每mLBuffer C加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂)，最大转速涡旋剧烈振荡15s，放置冰上40min，每间隔10 min涡旋剧烈振荡15 seconds；8、4℃离心，16000×g,,10min，尽快将上清转入一预冷的洁净微量离心管，即得核蛋白；9、上述提取的胞浆蛋白和核蛋白进行蛋白定量（Braford法或BCA法），分装并保存于-80℃，避免反复冻融。
细胞组织基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)
细胞/组织基因组DNA提取试剂盒（离心柱型）GK022150PrepsGK0222100Preps一.试剂盒组成(a)ACL Solution低温时可能出现结晶，请于37℃温育溶解摇匀后使用，不会影响产率。
(b)首次使用前，必须在Wash Solution瓶中加入4倍体积的无水乙醇，充分混匀后使用。
每次使用后将瓶盖盖紧，以保持Wash Solution中的乙醇含量。
如果发现Wash Solution由于运输或保管不当造成容量严重不准，请用量筒定容后再加入4倍体积的无水乙醇。
(c)Elution Buffer为2.5mmol/L Tris-HCl,pH8.5。
TE(pH8.0)或者水（pH>7.0）均可以使用，但是DNA的洗脱效率通常要低20%左右。
二.制品说明gDNA recovery Column内装有一层惰性大分子材料，它可以选择性吸附核酸物质，但不吸附蛋白质、多糖和其它非核酸类物质。
通过ACL Solution裂解释放出基因组DNA，然后通过gDNA recovery Column来吸附基因组DNA，经简单的洗涤步骤除去非特异性结合的杂质,然后用Elution Buffer、TE或者水洗脱。
客户可根据实验情况在裂解步骤添加proteinase K（目录号0706）以获得更好的裂解效果，或选用本公司的GK0121/GK0122试剂盒，其中含有proteinase K。
三．主要用途从各种动物组织、动物细胞以及啮齿类动物(如鼠等)尾巴等材料中小量提取基因组DNA。
四．主要特点1.适用范围广，适用于各种动物组织材料基因组DNA的抽提。
2.无须酚和氯仿抽提，无须乙醇沉淀。
3.DNA纯度好，得率高，无蛋白质和RNA污染。
五.操作步骤：样品预处理：·动物组织：1.切取5～20mg的动物组织材料，在液氮中将组织研磨成粉末，并转移至1.5ml的离心管中。
2.在gDNA recovery Column中加入200μl Buffer CBS,10,000rpm离心1分钟，弃透过液，备用。
新一代蛋白质提取工具丨Abbkine植物组织总蛋白提取试剂盒
新一代蛋白质提取工具丨Abbkine植物组织总蛋白提取试剂盒Abbkine/ExKine Pro植物组织总蛋白提取试剂盒用于植物组织中提取总蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂，作用温和，可快速获得总蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验，且仅用于科研。
ExKine™Pro植物组织总蛋白提取试剂盒（柱式法），是新一代超快速蛋白质提取工具。
越来越多的证据表明最常用的RIPA缓冲液可能导致蛋白质的随机损失，产生很多难以解释的疑难数据。
ExKine™Pro植物组织总蛋白提取试剂盒（柱式法）使用离心管柱提取技术结合优化的裂解缓冲液可以更快速、更有效地提取总蛋白，无需液氮研磨，使WB结果更加准确。
Abbkine/ExKine™动物细胞/组织总蛋白提取试剂盒组成成分：•变性细胞裂解缓冲液•蛋白质提取滤芯•带盖的收集管•塑料棒Abbkine/ExKine™Pro植物组织总蛋白提取试剂盒（柱式法）特点：•方便快捷：一“柱”到底，全程8分钟。
•多用途：适用样本齐全，植物组织叶片、种子、软茎、根。
•蛋白得率高：从50-200 mg植物组织提总蛋白，得率可达2-8 mg/mL。
•操作简易：无需液氮研磨，优化的裂解缓冲液更加高效提蛋白。
•兼容性好：所得蛋白可用于SDS-PAGE和WB等下游实验。
Abbkine/ExKine™动物细胞/组织总蛋白提取试剂盒使用中注意事项：1. 蛋白酶抑制剂不是必须加入，但是如果下游实验需要较长时间或者蛋白提取后保存较长时间，建议添加蛋白酶抑制剂，使用BCA法测定蛋白浓度，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
研究蛋白磷酸化，磷酸酶抑制剂应在使用前加入Denaturing Cel Lysis Buffer。
2. WB上样前，仍需和Loading Buffer 混匀煮制样品。
3. Plastic Rod可以重复使用，用去离子水彻底冲洗干净，用纸巾擦干。
4. 若蛋白浓度较低，可增加组织的质量或减少Denaturing Cell Lysis Buffer的体积。
组织样本处理
组织样本处理通常情况下，为了方便研究人员对样本的选择和使用，样本库除对原始样本进行分装保存外，尚需对样本做进一步的提纯处理，以获得样本的衍生物，供研究者使用。
这样既能控制样本的使用量，减少对样本不必要的浪费，又能保证其质量不受影响。
可从快速冰冻保存的组织样本中直接提取DNA、RNA和蛋白质；或将OCT包埋组织样本用于制作冰冻组织切片；将福尔马林固定石蜡包埋组织样本用于制作石蜡切片；也可取特定的样本进行细胞培养成为细胞系。
根据处理提纯的样本不同，采取不同的储存方式。
如DNA、RNA和蛋白样本可以放在冻存管中超低温保存，组织切片存放在切片盒中室温下保存，细胞系在液氮中保存。
1.DNA提取从快速冰冻保存的组织样本、OCT包埋组织的样本、福尔马林固定石蜡包埋组织样本或石蜡切片中均可提取DNA 样本，过程稍有区别，但多采用酚-氯仿法从新鲜或冰冻组织，以及细胞等样本中提取DNA，样本的处理按照标准操作程序进行。
用紫外分光光度计法测定DNA的浓度，琼脂糖凝胶电泳检测法检测DNA的纯度。
在DNA 保存区储存DNA样本，DNA样本应保存在-80℃冰箱中，并做好标记。
2.RNA提取RNA很容易被污染和降解。
最好是从经过RNA酶抑制剂处理的组织中提取RNA。
而且，要严格按照标准操作程序进行。
提取所使用的所有器材和试剂应经过高温处理。
在实验过程中必须戴手套而且要勤换，避免造成污染。
RNA提取完后应进行纯度和浓度的检测，测试其是否均一、是否有效去除了DNA、蛋白质和其他杂质，用紫外分光光度计法测定A260/A280不低于1.7~2的范围。
用紫外分光光度计法测定RNA的浓度，RNA提取完后应检测提取RNA的完整性，通过变性琼脂糖电泳进行鉴定，28S（约4.8kb）和18S（约1.9kb）rRNA经EB染色后，两条电泳带的显色强度近似比为2：1。
总RNA中mRNA的分离应按照标准操作程序采用纤维素亲和层析法。
3.蛋白质的提取蛋白质提取多选用新鲜的组织，如冰冻组织需要是快速冰冻且保存时间不长的样本。
动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书
动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书产品编号：BTN90707规格：50T产品及特点：本产品用于快速提取动植物总蛋白，用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析以及蛋白活性测定等。
本产品的其主要特点是：1.提取过程十分简便，匀浆离心即可，整个过程只需要十几分钟。
2.采用独特的温和裂解成分，蛋白保持天然活性。
3.适用于各种动植物组织材料，包括新鲜或冰冻的材料。
4.得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
5.一次可以处理100mg左右的样品，足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。
规格及成分：成分规格溶液A50ml5×SDS-PAGE上样液1ml说明书1份保存条件：常温运输，4℃保存，5×SDS-PAGE上样液短期4℃保存，长期可放-20℃保存，有效期一年。
使用方法：使用前，最好请在溶液A中加入自备的1M DTT溶液50μL。
一：匀浆法注意：对致密的实体组织（如肌肉），最好用Polytron式匀浆机匀浆处理。
1.称取动物或植物组织样品100mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到10-15mL的塑料离心管中。
2.加入1ml溶液A，在冰上用Polytron式匀浆机匀浆，直到没有肉眼可见的组织块。
为了避免产热，可以分多次匀浆，其间放冰上让匀浆液冷却。
3.将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4.4℃12,000g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5.将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。
如果要测定蛋白浓度，请使用BCA方法，不要使用Bradford方法（如果要使用，也需要把样品稀释10倍后再测定，否则溶液A中的成分会影响浓度侧定）。
如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液（终浓度为1×），在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
蛋白提取试剂盒选择指南
蛋白提取试剂盒选择指南蛋白提取试剂盒选择指南样本动物细菌植物真菌酵母昆虫应用I II I II I II I II I II I II蛋白部位应用I：WB、1D电泳、活性检测、纯化；应用II：等点聚焦、2D电泳、质谱总蛋白3101 3181 3123/8 3182 3124 3183 3127 3189 3125 3185 3126 3193膜蛋白3103/16 3188 3151 3187 3152 3184 3156 3190 3157 3192 3153核蛋白3102 3154 3159 3168胞浆蛋白3113 3180磷酸化蛋白3105/8 G+菌3129 核/质3169 藻类-总3131 核/质31681 液体-总3133糖蛋白3107 G-菌3130 叶绿体3179 藻类-膜3170 土壤-总3132膜/胞浆/核分步提取3104 细菌外膜31512 叶绿体膜3175 血浆3137膜/胞浆3111 线粒体3172 血清3138核/胞浆3112 线粒体膜3173线粒体3176/7线粒体膜3158核膜3174石蜡包埋3164甲醛固定3165冻存样品31211 脑组织31227骨组织总蛋白3161 脂肪组织31226蛋白提取试剂盒选择指南相关产品：蛋白提取BB-3101 BestBio贝博生物总蛋白提取试剂盒BB-3102 BestBio贝博生物核蛋白提取试剂盒BB-3103 BestBio贝博生物膜蛋白提取试剂盒BB-3104 BestBio贝博生物膜/胞浆/核蛋白分步提取试剂盒BB-31042 BestBio贝博生物细胞膜/胞浆/核膜蛋白分步提取试剂盒BB-3105 BestBio贝博生物磷酸化蛋白提取试剂盒BB-31051 BestBio贝博生物植物磷酸化蛋白提取试剂盒BB-3106 BestBio贝博生物活性蛋白提取试剂盒BB-3108 BestBio贝博生物磷酸化蛋白富集试剂盒BB-31081 BestBio贝博生物植物磷酸化蛋白富集试剂盒BB-3109 BestBio贝博生物糖蛋白富集试剂盒BB-3111 BestBio贝博生物膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒BB-3112 BestBio贝博生物核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒BB-3113 BestBio贝博生物胞浆蛋白提取试剂盒BB-3114 BestBio贝博生物细胞跨膜蛋白提取试剂盒BB-3115 BestBio贝博生物细胞核蛋白提取试剂盒BB-31152 BestBio贝博生物组织核蛋白提取试剂盒BB-3116 BestBio贝博生物细胞膜蛋白提取试剂盒BB-31161 BestBio贝博生物细胞质膜蛋白提取试剂盒BB-3117 BestBio贝博生物组蛋白提取试剂盒BB-31171 BestBio贝博生物植物组蛋白提取试剂盒BB-31172 BestBio贝博生物昆虫组蛋白提取试剂盒BB-31173 BestBio贝博生物酵母组蛋白提取试剂盒BB-3118 BestBio贝博生物胞浆蛋白/核蛋白/组蛋白提取试剂盒BB-3121 BestBio贝博生物细胞蛋白提取试剂盒BB-31211 BestBio贝博生物冻存细胞蛋白提取试剂盒BB-3122 BestBio贝博生物组织蛋白提取试剂盒BB-31226 BestBio贝博生物脂肪组织蛋白提取试剂盒BB-31227 BestBio贝博生物脑组织蛋白提取试剂盒BB-3123 BestBio贝博生物细菌蛋白提取试剂盒BB-3124 BestBio贝博生物植物蛋白提取试剂盒BB-31241 BestBio贝博生物植物根茎蛋白提取试剂盒BB-3125 BestBio贝博生物酵母蛋白提取试剂盒BB-3126 BestBio贝博生物昆虫蛋白提取试剂盒BB-31262 BestBio贝博生物昆虫胞浆蛋白提取试剂盒BB-3127 BestBio贝博生物真菌蛋白提取试剂盒BB-31272 BestBio贝博生物真菌蛋白提取试剂盒BB-3128 BestBio贝博生物大肠杆菌蛋白提取试剂盒BB-3129 BestBio贝博生物革兰氏阳性菌蛋白提取试剂盒BB-3130 BestBio贝博生物革兰氏阴性菌蛋白提取试剂盒BB-3131 BestBio贝博生物藻类蛋白提取试剂盒BB-3132 BestBio贝博生物土壤蛋白提取试剂盒BB-3133 BestBio贝博生物液体样本蛋白提取试剂盒BB-31332 BestBio贝博生物乳清蛋白提取试剂盒BB-3134 BestBio贝博生物白细胞蛋白提取试剂盒BB-3135 BestBio贝博生物血液单核细胞蛋白提取试剂盒蛋白提取试剂盒选择指南BB-3136 BestBio贝博生物丝状真菌蛋白提取试剂盒BB-3137 BestBio贝博生物血浆蛋白提取试剂盒BB-3138 BestBio贝博生物血清蛋白提取试剂盒BB-3139 BestBio贝博生物血细胞蛋白提取试剂盒BB-3140 BestBio贝博生物全血蛋白提取试剂盒BB-31401 BestBio贝博生物血小板蛋白提取试剂盒BB-31452 BestBio贝博生物溶酶体蛋白提取试剂盒BB-31453 BestBio贝博生物高尔基体蛋白提取试剂盒BB-31454 BestBio贝博生物内质网蛋白提取试剂盒BB-3141 BestBio贝博生物厚壁微生物蛋白提取试剂盒BB-3151 BestBio贝博生物细菌膜蛋白提取试剂盒BB-31511 BestBio贝博生物细菌跨膜蛋白提取试剂盒BB-31512 BestBio贝博生物细菌外膜蛋白提取试剂盒BB-31515 BestBio贝博生物支原体膜蛋白提取试剂盒BB-3152 BestBio贝博生物植物膜蛋白提取试剂盒BB-31521 BestBio贝博生物植物跨膜蛋白提取试剂盒BB-3153 BestBio贝博生物昆虫膜蛋白提取试剂盒BB-31531 BestBio贝博生物昆虫跨膜蛋白提取试剂盒BB-3154 BestBio贝博生物植物核蛋白提取试剂盒BB-3155 BestBio贝博生物植物质膜蛋白提取试剂盒BB-3156 BestBio贝博生物真菌膜蛋白提取试剂盒BB-3157 BestBio贝博生物酵母膜蛋白提取试剂盒BB-31572 BestBio贝博生物酵母膜蛋白/细胞质蛋白提取试剂盒BB-3158 BestBio贝博生物线粒体膜蛋白提取试剂盒BB-3159 BestBio贝博生物真菌核蛋白提取试剂盒BB-3160 BestBio贝博生物大肠杆菌膜蛋白提取试剂盒BB-3161 BestBio贝博生物骨组织蛋白提取试剂盒BB-3162 BestBio贝博生物高脂肪样本蛋白提取试剂盒BB-3163 BestBio贝博生物神经元蛋白提取试剂盒BB-3164 BestBio贝博生物石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒BB-3165 BestBio贝博生物甲醛固定组织蛋白提取试剂盒BB-31651 BestBio贝博生物固定细胞蛋白提取试剂盒BB-3166 BestBio贝博生物冻存样本核蛋白提取试剂盒BB-3167 BestBio贝博生物植物核蛋白/细胞器蛋白提取试剂盒BB-3168 BestBio贝博生物酵母核蛋白提取试剂盒BB-31681 BestBio贝博生物酵母核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒BB-3169 BestBio贝博生物植物核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒BB-3170 BestBio贝博生物藻类膜蛋白提取试剂盒BB-3171 BestBio贝博生物线粒体蛋白提取试剂盒BB-31711 BestBio贝博生物组织线粒体蛋白提取试剂盒BB-3172 BestBio贝博生物植物线粒体蛋白提取试剂盒BB-31721 BestBio贝博生物丝状真菌线粒体蛋白提取试剂盒BB-3173 BestBio贝博生物植物线粒体膜蛋白提取试剂盒BB-3174 BestBio贝博生物细胞核膜蛋白提取试剂盒BB-3175 BestBio贝博生物植物叶绿体膜蛋白提取试剂盒BB-3176 BestBio贝博生物线粒体/胞浆蛋白提取试剂盒BB-3177 BestBio贝博生物组织线粒体/胞浆蛋白提取试剂盒BB-3178 BestBio贝博生物线粒体膜/胞浆蛋白提取试剂盒BB-3179 BestBio贝博生物叶绿体蛋白提取试剂盒BB-31791 BestBio贝博生物植物膜蛋白/叶绿体蛋白提取试剂盒BB-3180 BestBio贝博生物植物胞质蛋白提取试剂盒BB-3181 BestBio贝博生物总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）蛋白提取试剂盒选择指南BB-31812 BestBio贝博生物胞浆蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-31813 BestBio贝博生物植物总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3182 BestBio贝博生物细菌总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3183 BestBio贝博生物植物总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-31836 BestBio贝博生物叶绿体蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3184 BestBio贝博生物植物质膜蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-31841 BestBio贝博生物植物膜蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3185 BestBio贝博生物酵母蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3186 BestBio贝博生物藻类蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3187 BestBio贝博生物细菌膜蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3188 BestBio贝博生物膜蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3189 BestBio贝博生物真菌蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3190 BestBio贝博生物真菌膜蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3191 BestBio贝博生物线粒体蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3192 BestBio贝博生物酵母膜蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3193 BestBio贝博生物昆虫总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3194 BestBio贝博生物丝状真菌蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-31951 BestBio贝博生物血浆蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-31961 BestBio贝博生物细胞蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31962 BestBio贝博生物组织蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31963 BestBio贝博生物植物蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31964 BestBio贝博生物细菌蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31965 BestBio贝博生物昆虫蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31966 BestBio贝博生物酵母蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31967 BestBio贝博生物血液蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31968 BestBio贝博生物真菌蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31981 BestBio贝博生物细胞蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）BB-31982 BestBio贝博生物组织蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）BB-31983 BestBio贝博生物植物蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）BB-31984 BestBio贝博生物细菌蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）BB-31985 BestBio贝博生物昆虫蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）BB-31986 BestBio贝博生物酵母蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）BB-31987 BestBio贝博生物血液蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）BB-31988 BestBio贝博生物真菌蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）。
蛋白提取制备相关产品_百替生物
蛋白提取制备相关产品蛋白抽提试剂盒-I (实体组织和细胞蛋白抽提, 100 extractions)S1250 100 次提取 700 元概述：实体组织如大脑富含磷脂、神经纤维或血管壁含大量结缔组织、而脂肪则有大量油脂，常规方法难以有效从这些组织提取蛋白。
蛋白抽提试剂盒-I用于从各种实体软组织或细胞快速提取总蛋白。
用裂解-结合缓冲液匀浆裂解实体组织，或用裂解结合缓冲液振荡重悬培养细胞，然后加入抽提试剂去除非蛋白成分，离心分离即可得到总蛋白；简便高效，30-60分钟内完成提取。
试剂盒可进行100次提取，可在1.5ml离心管微量提取也可大规模制备。
每次可提取1～100 mg实体组织或1 x 107细胞。
一次从10-100mg实体组织提取的总蛋白的量通常足以进行数十次Western Blot或免疫沉淀。
适用：(1) 各种实体软组织。
如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等。
(2) 各种原代和传代细胞。
组成：(1) 裂解-结合缓冲液100 ml；(2) 抽提试剂100 ml。
每毫升裂解缓冲液和抽提试剂可提取100 mg组织或1 x 107细胞。
储存：室温2年。
蛋白抽提试剂盒-II (液体样品蛋白抽提和回收，100 extraction)S1255 100 次提取 480 元200 次提取 780 元概述：蛋白抽提试剂盒-II 用于液体样品中蛋白浓缩、提取、或脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等。
适用于各种液体样品(10 µl～1000 ml)，如蛋白溶液、胞浆胞核蛋白提取液、细胞或微生物培养基上清液、血液、尿液、脑脊液等各种体液。
蛋白回收率95%，远高于经典的丙酮或三氯醋酸沉淀法，且可有效去除样品中的脂质，不影响后续SDS-PAGE和Western Blot实验。
可用1.5ml离心管微量提取也可大规模制备，15分钟完成提取，简便高效。
该试剂盒也适于从细胞悬液提取总蛋白。
Thermo-Scientific-NE-PER核蛋白-胞浆蛋白抽提试剂盒
Thermo-Scientific-NE-PER核蛋白-胞浆蛋白抽提试剂盒描述Thermo Scientific NE-PER核蛋白-胞浆蛋白抽提试剂盒提供了高效的细胞裂解和抽提方法，可在两个小时之内完成胞浆蛋白与核蛋白的分离操作。
NE-PER核蛋白-胞浆蛋白抽提试剂盒的特性：• 快速—在两个小时之内获得胞核与胞浆内的可溶性蛋白组分• 可靠—NE-PER试剂盒已经被950篇以上的发表文献引用• 通用–适用于培养细胞或组织（仅适用于新鲜样本）的核蛋白抽提• 可扩展—两种规格试剂盒，满足从细胞和组织中抽提样本的应用需求• 方便—操作简单，无需超速梯度离心• 兼容性好—获得样本适合于多种下游应用，包括免疫印迹、凝胶迁移分析、蛋白分析、报告基因分析以及酶活性分析NE-PER试剂盒为用户提供了高效的核蛋白抽提方法，用户只需拥有台式微量离心机、离心管和移液器，进行简单的分步式细胞裂解及核蛋白与胞浆蛋白离心分离即可。
NE-PER试剂盒能够高效地将胞浆蛋白与核蛋白溶解和分离为不同组分，交叉污染以及基因组DNA/mRNA 的干扰均降到了最低。
一旦经过脱盐或稀释，分离后的蛋白即可用于免疫分析和蛋白相互作用实验，如迁移率分析(EMSA)、免疫共沉淀(Co-IP)和拉下实验。
分离胞核和制备核蛋白抽提物的方法很多，但大多数制备核蛋白抽提物的制备方法都很耗时，并需要机械匀浆、冻融循环、反复离心或透析，而这些都可能影响核蛋白的完整性。
NE-PER 核蛋白-胞浆蛋白抽提试剂盒使用了基于试剂的分离方案，能够分步裂解细胞并从胞浆中分离出完整的细胞核，然后再从基因组DNA与mRNA中抽提核蛋白。
这一温和的过程可在两小时之内完成，且使用培养细胞时仅需标准的桌台式离心机即可。
此外，用户还可以从细胞培养物或组织样本中分离得到具有活性的核蛋白与胞浆蛋白。
本试剂盒能够从两百万个细胞中提出200至500µg胞浆蛋白和100至200µg的核蛋白（浓度为1mg/mL）。
凯基核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒
凯基核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒Cat Number：For Research Use OnlyStore at -20℃for one yearExpire date：一、试剂盒说明本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取核蛋白和/或胞浆蛋白，提取制备过程简便。
制备的核蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性，并且纯度较高。
提取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性测定等后续蛋白质研究。
二、试剂盒组份组份KGP150 （50 test）KGP1100 （100储存温度test）Buffer A 25 mL 25 mL ×24℃Buffer B 1.5 mL 3．0 mL 4℃Buffer C 12.5 mL 25 mL 4℃DTT 50μL100μL-20℃蛋白酶抑制剂250μL500μL-20℃PMSF（100mM）400μL800μL-20℃三、操作步骤Ⅰ 实体组织蛋白的提取1、组织样本，将组织剪切成小块，加入适量的冰冷PBS均浆后，静置5 min ，弃沉淀，小心吸取上清转移至另一离心管中；2、上清4℃离心500×g，3 min，弃上清，估计细胞压积PCV（离心后的紧实细胞体积）；3、每20μL细胞压积中，加入200μL预冷的Buffer A【使用前每mL BufferA加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂】，最大转速涡旋剧烈振荡15s，放置冰上10～15min；4、加入11μL冷Buffer B，最大转速涡旋剧烈振荡5s，放置冰上1min；5、再次最大转速涡旋剧烈振荡5s后，4℃离心，16000×g,5min；6、尽快将上清转入另一预冷的洁净微量离心管，置于冰上，即得胞浆蛋白；7、在离心沉淀物（细胞核）中加入100μL预冷的Buffer C (使用前每mLBuffer C加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂)，最大转速涡旋剧烈振荡15s，放置冰上40min，每间隔10 min涡旋剧烈振荡15 seconds；8、4℃离心，16000×g,,10min，尽快将上清转入一预冷的洁净微量离心管，即得核蛋白；9、上述提取的胞浆蛋白和核蛋白进行蛋白定量（Braford法或BCA法），分装并保存于-80℃，避免反复冻融。
生工 细胞核蛋白提取试剂盒
细胞核蛋白质提取试剂盒 Nucleoprotein Extraction Kit产品编号：C500009 包装规格：50 Assays 产品简介本试剂盒提供独特的组份，采用特殊的非离子型去污剂，以及焦磷酸钠等数种蛋白磷酸酶和蛋白酶抑制试剂，能够在非变性和低渗的条件下裂解细胞，经过洗涤去除大部分胞质蛋白和膜蛋白，释放的细胞核能够保持完整，再用Lysis Buffer 对细胞核蛋白质进行抽提的同时可以保持核蛋白质的活性，因此该产品可合适用于SDS-PAGE 电泳、Western Blot 、免疫共沉淀、EMSA 、Pull Down 和转录调控等后续蛋白质或分子生物学相关实验的研究，每次可以从107个培养细胞或200 mg 动物组织提取核蛋白质，本试剂盒可以使用50次。
产品特点 1. 提取的核蛋白质可以最大限度的保持蛋白质的活性，可以用于EMSA ，转录因子分析的实验。
2. 可以从50x107个培养细胞或50x200 mg 动物组织提取核蛋白。
3. 整个实验过程只需要45分钟左右。
4. 在提取的过程中，最大限度的减少了膜和胞质蛋白对核蛋白的污染。
5.不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。
运输和保存条件常温下运输，在收到后，将磷酸酶抑制剂，PMSF 和DTT 在-20℃的环境中保存，其余2-8℃保存，保质期一年。
产品组成 成分 C500009 Lysis Buffer 10 mL Hypotonic Buffer 50 mL 磷酸酶抑制剂 300 μL PMSF 600 μL DTT60 μL操作步骤A 实体组织蛋白的提取 1. 在每1mL 冷Hypotonic Buffer 加入5 μL 磷酸酶抑制剂，10 μL PMSF 和1 μL DTT 混匀。
冰上保存数分钟待用。
2.将100-200mg 固体组织置于培养皿中，手术剪将小块充分剪碎，尽量去除脂肪组织和结缔组织等非目的组织，用PBS 洗涤两次，离心，取沉淀后加入0.6 mL 冷Hypotonic Buffer 混匀， 4℃下玻璃匀浆器上下手动匀浆30-50 次。
胞质和线粒体蛋白质提取试剂盒使用说明
胞质和线粒体蛋白质提取试剂盒使用说明产品编号：C7610包装规格：50Assays产品组成:胞质提取Buffer55mL线粒体溶解Buffer5mL蛋白酶抑制剂60μL磷酸酶抑制剂300μLDTT60μL产品简介胞质和线粒体蛋白质提取试剂盒提供独特的组份可以提取动物细胞及组织中的胞质蛋白和线粒体蛋白。
该方法先将完整的有活性的线粒体和胞质蛋白分离，再处理后获得高纯度的有活性胞质蛋白和变性的线粒体蛋白，不需要超速度离心，方法简单，可靠，快速。
可用于1D，2D电泳，Western Blot，Elisa等蛋白质实验。
提取的完整线粒体也可以经过活性溶解液处理，再用于免疫共沉淀，凋亡，细胞信号传导，能量代谢等生理学研究，或进行线粒体DNA提取，用于基因组学后续研究。
本试剂盒可以每次从1×107个培养细胞或200mg组织中提取所需要的蛋白质，可以使用50次。
产品特点1.整个实验过程大约只需要1小时左右。
2.可以从50×107个培养细胞或50×200mg组织中提取所需要的蛋白质或活性线粒体。
3.活性线粒体的提取量高，高效线粒体溶解Buffer提取的蛋白质，可以用于线粒体蛋白质组学研究。
4.不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。
运输和保存条件常温下运输，收到后将线粒体溶解Buffer、DTT和蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂于-20℃保存，胞质提取Buffer于2-8℃保存，保质期1年。
操作步骤1.收集不少于1×107细胞，用冷PBS（pH7.4）洗涤细胞两次，每次3000rpm（800g）离心5min；组织样本（200mg）尽量去除脂肪组织和结缔组织等非目的组织，于冰上剪碎，再用冷PBS（pH7.4）洗涤三次。
2.在上述细胞或组织样本中加入1mL胞质提取Buffer（使用前每mL胞质提取Buffer加入1μL蛋白酶抑制剂，5μL磷酸酶抑制剂和1μL DTT），置玻璃匀浆器冰上均质30～50次，置于冰上冷却。
P0033_细胞膜蛋白与细胞浆蛋白提取试剂盒 碧云天
使用说明：
1. 准备试剂：室温融解并混匀膜蛋白抽提试剂A和B，融解后立即置于冰浴上。取适量的膜蛋白抽提试剂A和B备用，在 使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 细胞或组织样品的破碎及破碎效果的鉴定：把细胞悬液或组织样品转移到一适当大小的冰浴预冷玻璃匀浆器中，匀 浆约30-50下。匀浆效果与细胞类型和组织类型相关，不同细胞或组织所需的匀浆次数有所不同，需自行优化。通常 可以在匀浆30次后取约2-3微升细胞或组织匀浆液滴在盖玻片上并在显微镜下观察，如见细胞核周晕环(A shiny ring around the nuclei)或完整的细胞形态，说明细胞仍完整。如果有70-80%的细胞均无核周晕环和完整细胞形态，说明细 胞已经充分破碎，则进行下一步实验。否则，重新匀浆10-30次直到细胞至少70%已经破碎。同时记录对于该细胞的 匀浆次数，通常在后续实验时不必再摸索匀浆次数。另外需注意特定的匀浆次数和匀浆器也有关，需同时注意记录 使用的是哪一个匀浆器。 注：如果没有适当的玻璃匀浆器，对于培养的细胞也可以采用冻融法来破碎细胞。把步骤2中的样品在液氮和室温依 次反复冻融两次，然后取少量样品在显微镜下检测细胞破碎的程度。如果细胞破碎的程度不足70%，可增加冻融次 数，直到细胞破碎的程度大于70%。
¾ 膜蛋白抽提试剂中含有蛋白酶抑制剂、磷酸酯酶抑制剂和EDTA等，后续不适合用于蛋白酶、磷酸酯酶等受这些抑制剂影 响的酶的活性测定，但抽提获得的膜蛋白或细胞浆蛋白适合用于检测蛋白的磷酸化水平。
¾ 本试剂盒按照本说明书的操作步骤可以抽提100个细胞或组织样品。
总蛋白提取试剂盒说明书
总蛋白提取试剂盒(Total Protein Extraction Kit)P1250: 蛋白抽提试剂盒-I (实体组织和细胞蛋白抽提, 100 extractions)描述: 从组织细胞中提取总蛋白是Western Blot关键步骤。
实体软组织如脑脊髓富含磷脂, 神经血管含大量结缔组织, 而脂肪则有大量油脂, 常规方法难以有效从这些组织提取蛋白。
本试剂盒为组织或培养细胞总蛋白提取提供完整处理方案。
用裂解-结合缓冲液匀浆裂解实体组织, 或直接用裂解-结合缓冲液重悬培养细胞, 然后加入抽提试剂去除非蛋白成份, 离心、干燥后即可得到总蛋白。
蛋白沉淀溶解后用常规方法进行蛋白定量。
提取过程可在30-60分钟内完成, 可在1.5ml离心管微量提取也可大规模制备, 极为简便高效。
通常一次提取10-100mg组织所取得总蛋白可进行几十到上百次分析如蛋白质电泳、Western Blot、免疫共沉淀。
组成 1. 裂解-结合缓冲液100 ml 2. 抽提试剂100 ml每毫升裂解缓冲液和抽提试剂可提取10-100mg组织或1 ⨯ 107细胞。
试剂盒裂解缓冲液是过量。
适用多种实体软组织(> 1 mg), 如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道组织、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等, 以及多种原代细胞和永生化细胞系。
保留: 室温或4ºC保留2年固体组织蛋白提取1.每10-100mg固体组织剪碎后加入0.5-1 ml裂解液, 放入玻璃匀浆器内上下手动匀浆15次; 或用高速机械匀浆器12,000 rpm 破碎组织。
注意: 初始组织量应在10-100mg范围。
肝肾组织蛋白含量高, 提取时应加较少许组织, 不然形成蛋白膜厚、致密且难溶。
少许小未破碎组织不影响后续抽提。
2.仅取0.5ml组织匀浆液转移到1.5ml离心管, 弃去剩下组织匀浆液。
每0.5ml组织匀浆液加入2倍体积(1 ml)抽提试剂充足混匀。
PH0314 组织蛋白抽提试剂盒操作手册
1PH0314|组织蛋白抽提试剂盒Tissue Protein Extraction KitCatalog No ：PH0314Size ：☐25T Storage ：Store@RT ◆简介组织蛋白抽提试剂应用于组织样本的总蛋白提取。
提取蛋白之前可根据具体实验需要加入蛋白酶抑制剂、盐、还原剂、螯合剂等成分。
使用该提取液提取的组织蛋白，可进行蛋白活性分析、免疫检测、蛋白纯化等下游操作，并可采用BCA、Bradford、Lowry 法进行蛋白定量。
组织蛋白抽提试剂盒中带有蛋白酶抑制剂混合物，可有效避免蛋白提取过程中蛋白的降解。
◆保存Store at RT (Protease Inhibitor Cocktail：-20℃，其它组分室温保存)◆组分Tissue Protein Extraction Reagent——25mlProtease Inhibitor Cocktail——250ul ◆使用参考1.请在蛋白抽提前取出实验所需蛋白抽提试剂进行预冷，按照1:99比例加入蛋白酶抑制剂混合物（例如990μl 抽提试剂中加入10μl 蛋白酶抑制剂混合物），使蛋白酶抑制剂混合物在抽提试剂中成1×工作液。
注意：在进行蛋白抽提前2-3分钟内加入蛋白酶抑制剂混合物。
2.称量实验组织的重量。
按照1：10（g/ml）的比例加入组织蛋白抽提试剂并匀浆处理（抽提试剂的使用量依据不同的组织而定）。
若需要浓缩的蛋白提取物，可适当减少组织蛋白抽提试剂使用量。
3.冰上孵育20分钟（冰上放置时间应根据组织类型不同进行调整）。
4.10,000×g 离心15~20分钟。
5.收集上清，进行下一步的纯化或下游分析。
◆注意事项1.本产品适用于提取心肌、骨骼肌、肾脏、前列腺、皮肤、结肠、肝脏等软组织。
2.为防止蛋白降解，所有的操作尽量在冰上进行。
3.使用本产品提取后蛋白，可采用BCA、Bradford、Lowry 法进行蛋白定量。
生工生物工程(上海) 植物蛋白抽提试剂盒 产品说明书
产品说明书 / Specification Sheet植物蛋白抽提试剂盒产品编号：BSP053产品简介：本试剂盒在利用液氮充分磨碎植物组织的同时，采用特殊的试剂对植物细胞释放出来的蛋白进行沉淀，并使用广谱蛋白酶抑制剂抑制蛋白酶活性，最大程度地保持所抽提蛋白质的完整性。
而且最终的蛋白抽提物呈干粉状，有利于蛋白质的长期稳定保存。
提取的蛋白，包括膜蛋白，核蛋白，胞质蛋白以及在植物组织中含有的稀有蛋白在内的全蛋白。
分离得到的蛋白组分可应用于SDS-PAGE、Western blot等。
每次可以提取100mg植物组织，本试剂盒可以使用50次。
产品特点：1．提取的蛋白质是包括稀有蛋白在内植物细胞的全蛋白质。
2．可以进行50x100mg植物组织。
3．经过适当处理后，可以用于2D电泳，等电点聚焦等实验。
4．对植物细胞的裂解效果和植物细胞的非蛋白质成分去除效果高。
5．不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。
运输和保存条件：常温下运输，收到后将Solution C和Solution D在-20度的条件下保存，Solution A和B 在2-8度的条件下保存，保质期一年。
组成：本试剂盒由Solution A和Solution B构成，可以使用50次。
1、BSP053-1 Solution A 50 ml2、BSP053-2 Solution B 100ml3、BSP053-3 Solution C 120ul4、BSP053-4 Solution D 1ml使用方法：1、实验前，将研钵和研槌置于-20℃冰箱中预冷；将植物组织置于-80℃冰箱中冷冻保存以备后用。
2、当植物组织仍处于冷冻状态时，用剪刀将植物组织剪碎。
3、将剪碎的植物组织置于预冷的研钵中，加入液氮保持植物组织处于冷冻状态，用研槌尽快地将植物组织研磨成粉末状。
4、取大约100mg的组织粉末，加入1ml Solution A和0.7ul Solution C的，将粉末悬浮后，置于-20℃冰箱中，静置45min。
细胞质膜蛋白提取方法
产品组成：
产品编号 规格 试剂 A 试剂 B 试剂 C
蛋白酶抑制剂混合物
BB-31161-1 50T 25ml 250ul 10ml 100ul
BB-31161-2 100T 50ml 500ul 20ml 200μl
产品简介： 贝博质膜蛋白提取试剂盒提供配套试剂，适用于从细胞和动物组织提取细胞质膜蛋
BB-3411 BB-3501 BB-3121 BB-3122 BB-3123 BB-3125 BB-3105 BB-3702
BCA 蛋白定量试剂盒 蛋白 Marker 细菌膜蛋白提取试剂盒 植物总蛋白提取试剂盒 植物膜蛋白提取试剂盒 蛋白酶抑制剂混合物 磷酸酶抑制剂混合物 SDS-PAGE 上样 Buffer
白。提取过程简单方便，可在 1 小时内完成。
使用方法：
A． 细胞质膜蛋白提取 1. 取 5-10×106 个以上细胞①，在 4℃，500g 条件下离心 2-3 分钟，小心吸取培养 基，尽可能吸干，收集细胞。
2. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。 3. 细胞样品中加入 500μl 冷的试剂 A，5ul 试剂 B 和 2ul 蛋白酶抑制剂混合物，高
白约为 20-50μl。 6. 吸取上层部分留作备用分析③。 7. 用 50-200μl 冷的试剂 C 溶解下层膜蛋白部分，即得细胞质膜蛋白。 8. 将上述蛋白提取物定量④后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验⑤。
B． 组织样本质膜蛋白提取 1. 取适量组织样本剪碎，加冷 PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体（或 用液氮研磨），冰上静置 5 分钟，小心将匀浆吸入另一预冷的干净离心管。 2. 在 4℃，500g 条件下离心 2-3 分钟，弃上清。 3. 按照细胞质膜蛋白的提取方法的第 3 步骤往下操作即可。
P0033_细胞膜蛋白与细胞浆蛋白提取试剂盒 碧云天
(P0009/P0010/P0010S/P0011/P0012/P0012S)测定蛋白浓度。抽提获得的细胞膜蛋白不适合用Bradford法测定蛋白浓度。 ¾ 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1. 准备试剂：室温融解并混匀膜蛋白抽提试剂A和B，融解后立即置于冰浴上。取适量的膜蛋白抽提试剂A和B备用，在 使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
¾ 膜蛋白抽提试剂中含有蛋白酶抑制剂、磷酸酯酶抑制剂和EDTA等，后续不适合用于蛋白酶、磷酸酯酶等受这些抑制剂影 响的酶的活性测定，但抽提获得的膜蛋白或细胞浆蛋白适合用于检测蛋白的磷酸化水平。
¾ 本试剂盒按照本说明书的操作步骤可以抽提100个细胞或组织样品。
包装清单：
产品编号 P0033-1 P0033-2
—
产品名称 膜蛋白抽提试剂A 膜蛋白抽提试剂B
说明书
包装 100ml 30ml
1份
保存条件：
-20℃保存，一年有效。
注意事项： ¾ 需 自 备 PMSF 。 PMSF 一 定 要 在 抽 提 试 剂 加 入 到 样 品 中前2-3分钟内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。
PMSF(ST506)可以向碧云天订购。 ¾ 使 用 本 试 剂 盒 抽 提 到 的 细 胞 膜 蛋 白 与 细 胞 浆 蛋 白 均 可 直 接 用 碧 云 天 生 产 的 BCA 法 蛋 白 浓 度 测 定 试 剂 盒
沉淀导致上清样品被污染。 7. 抽提膜蛋白：4℃，14000g离心10秒，尽最大努力吸尽上清。可以轻轻触碰到沉淀，甚至吸走很少量的沉淀。加入膜
蛋白抽提试剂B 200微升(如有必要，也可以加大到300微升)，最高速剧烈Vortex 5秒重悬沉淀，冰浴5-10分钟。重复前 述步骤的vortex和冰浴孵育1-2次，以充分抽提膜蛋白。随后，4℃，14000g离心5分钟，收集上清即为细胞膜蛋白溶 液。可-70℃保存备用。对于一些有特殊用途的膜蛋白，可自行配制适当的膜蛋白抽提试剂进行膜蛋白抽提。
裂解液——精选推荐
全蛋白提取试剂盒Tissue or Cell Total Protein Extraction Kit产品说明：本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白，用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液Lysis Buffer匀浆裂解组织或细胞，作用温和，提取过程简便高效,可以提取出培养细胞或动物组织中的决大多数蛋白质。
获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀，酶活性分析，Pull down,EMSA等后续研究，但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究，因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂，可以每次从107个培养细胞或200mg动物组织提取蛋白质，本试剂盒可以使用50次。
储存条件：2～8℃。
产品特点：1．提取的蛋白质包括膜,核,核基质和胞质蛋白,而且最大限度保持蛋白质活性；2．整个操作过程只需要30分钟左右；3．即可以用于培养细胞（50x107个），有可以用于动物组织（50x200mg）蛋白质的提取；4．避免蛋白酶和磷酸酶对蛋白质的降解，保持蛋白质的完整性和天然活性；5．不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。
编号包装价格产地BSP003 50 Assays 520 生工RIPA裂解液IIRIPA Lysis Buffer II产品说明：RIPA裂解液II对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有中等强度裂解作用，可能是经典但最常用的细胞组织快速裂解液。
使用RIPA Buffer制备用于Western特别是用于免疫共沉淀的裂解产物已经是一种首选的标准操作，适用于大部分抗原表位的检测，特别适用免疫共沉淀检测蛋白质-蛋白质之间的相互作用胞浆磷酸化蛋白和细胞核转录因子检测等。
本产品包括裂解液和蛋白酶和磷酸酶抑制剂组成. 为1倍溶液，可以处理108个细胞或1g 组织。
含有(NaCl,NP-40, deoxycholate, SDS,Tris), proteinase inhibitor and phosphatas inhibitor cocktail 。
全蛋白抽提试剂盒
凯基全蛋白提取试剂盒Cat Number：For Research Use OnlyStore at 4℃ for one yearExpire date：一、 试剂盒说明本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白， 用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液Lysis Buffer匀浆裂解组织或细胞，作用温和，提取过程简便高效。
获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究，但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究，因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂。
二、 试剂盒组份组份 KGP250 （50 tests） KGP2100（100 tests）储存温度 Lysis Buffer 50 mL 100 mL 4℃磷酸酶抑制剂 250 μL 500μL -20℃蛋白酶抑制剂 50 μL 100 μL -20℃PMSF（100mM）500 μL 1000 μL -20℃L三、 操作步骤Ⅰ 实体组织蛋白的提取1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入5 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。
冰上保存数分钟待用。
2． 每100mg固体组织置于培养皿中，手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入5μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。
细胞膜蛋白提取方法
有效期： 一年。
产品简介： 贝博细胞膜蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代细胞样本中提取
膜蛋白，提取的膜蛋白纯度高，不含核膜蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在 1 小时 内完成。制备的膜蛋白保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于 Western Blotting、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。 使用方法：
中间涡旋振荡混匀 2 次。 5. 再次高速涡旋振荡 5 秒，然后在 4℃，500×g 条件下离心 3 分钟，弃沉淀。 6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，加入 10ul 试剂 B，充分混匀。 7. 37℃水浴 10 分钟。 8. 在 37℃ 1000×g 离心 5 分钟。 9. 此时溶液分为两层，小心吸取分离出管底部大约 20ul 液体。 10. 用适量稀释液 C 稀释该溶液，即得膜蛋白样品。 11. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
产品号 BB-3108 BB-3103 BB-3401 BB-3721 BB-3151 BB-3124 BB-3152 BB-3301 BB-3311 BB-3703
PLoS ONE
2012 Volume 7, Issue 3,
（IF=4.411）
相关产品：
产品 总蛋白提取试剂盒 核蛋白提取试剂盒 Bradford 蛋白定量试剂盒 ECL 化学发光检测试剂盒 细胞蛋白提取试剂盒 组织蛋白提取试剂盒 细菌蛋白提取试剂盒 酵母蛋白提取试剂盒 磷酸化蛋白提取试剂盒 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒
1. 提取液制备：每 200ul 蛋白提取液 A 和 C 中分别加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物， 混匀后置冰上备用。
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实体组织和细胞蛋白抽提试剂盒
货号：P060091
描述：从组织细胞中提取总蛋白是Western Blot的关键步骤。
实体软组织如脑脊髓富含磷脂，神经血管含大量结缔组织，而脂肪则有大量油脂，常规的方法难以有效从这些组织提取蛋白。
本试剂盒为组织或培养细胞总蛋白提取提供完整的解决方案。
用裂解-结合缓冲液匀浆裂解实体组织，或直接用裂解-结合缓冲液重悬培养细胞，然后加入抽提试剂去除非蛋白成分，离心、干燥后即可得到总蛋白。
蛋白沉淀溶解后用常规方法进行蛋白定量。
提取过程可在30-60分钟内完成，可在1.5ml离心管微量提取也可大规模制备，极为简便高效。
通常一次提取10-100mg组织所获得的总蛋白可进行几十到上百次分析如蛋白质电泳、Western Blot、免疫共沉淀。
组成 1. 裂解-结合缓冲液100 ml 2. 抽提试剂100 ml
每毫升裂解缓冲液和抽提试剂可提取10-100mg组织或1 107细胞。
试剂盒的裂解缓冲液是过量的。
适用各种实体软组织(> 1 mg)，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道组织、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等，以及各种原代细胞和永生化细胞系。
保存：室温或4ºC保存2年
固体组织蛋白提取
1.每10-100mg固体组织剪碎后加入0.5-1 ml裂解液，放入玻璃匀浆器内上下手动匀浆15
次；或用高速机械匀浆器12,000 rpm 破碎组织。
注意：初始组织的量应在10-100mg 范围。
肝肾组织蛋白含量高，提取时应加较少量的组织，否则形成的蛋白膜厚、致密且难溶。
少量小的未破碎组织不影响后续抽提。
2.仅取0.5ml组织匀浆液转移到1.5ml离心管，弃去剩余的组织匀浆液。
每0.5ml组织匀
浆液加入2倍体积的(1 ml)抽提试剂充分混匀。
室温或4ºC静置10分钟，偶尔晃动。
注意：(1)如组织量<10mg，在下一步离心时形成的蛋白膜易碎，静置30min有助蛋白膜形成。
(2)提取脂肪组织时应4ºC静置40min以上以充分去除油脂。
(3) 0.5ml组织匀浆
液获得的蛋白足以进行几十次Western Blot。
保证每0.5ml组织匀浆液加入2倍体积的
(1 ml)抽提试剂是成功的关键。
3.10,000g 4ºC离心10分钟，溶液分为上下两相，两相中间为蛋白膜。
吸除上层液体；随
后用吸头或针头轻轻拨开蛋白膜，吸除下层液体。
蛋白膜将附着于离心管壁。
注意：(1)离心速度过高将使蛋白膜过于坚固，难以溶解。
(2)如果不能分相，可再加入50μl蒸馏水混匀离心。
(3)如果初始组织量较少(<10mg)，离心后难以得到完整的蛋白膜，此时可吸去上下层液体，加入1ml纯乙醇混匀，10,000g 4ºC离心3分钟。
弃所有液体，蛋白沉淀在管底。
4.敞开管口，室温10分钟空气干燥沉淀。
5.每100mg组织所得到的蛋白加200-1000μl用户自备的缓冲液，95ºC煮10分钟。
室温
放置20~60分钟溶解沉淀。
参见后面的说明。
培养细胞蛋白提取
参见固体组织蛋白提取程序中的斜体字注解
1.消化洗涤并800 g离心收集细胞。
每5-10 x 106细胞加入0.5 ml裂解液，振荡重悬，4ºC
净置2分钟。
2.按比例每0.5 ml裂解液加入1 ml抽提试剂，振荡混匀。
4ºC静置10min。
3.10,000g 4ºC离心10分钟，溶液分为两相，两相中间为蛋白膜。
小心吸除上层相和大部
分下层相，保留两相中间的蛋白絮状物。
如果不能分相，可再加入50μl蒸馏水混匀离心。
4.加入1 ml纯乙醇洗涤沉淀。
10,000g 4ºC离心3分钟，蛋白沉淀在管底。
5.去除管中所有液体，敞开管口，室温空气干燥沉淀。
6.每1 x 106细胞可加入50-200 μl (或适量)的蛋白溶解缓冲液，95ºC煮5-10分钟，室温
放置20-60 分钟溶解沉淀。
离心除去不溶物。
说明
1.未溶解的蛋白沉淀不含盐、去垢剂、和还原剂成分。
干燥蛋白沉淀可4ºC或－20ºC长
期保存。
2.蛋白沉淀溶解步骤：(1)溶解于去离子水或用户自备的缓冲液，95ºC煮10分钟。
室温放
置30~60分钟或4ºC溶解5小时以上至过夜。
12000rpm离心5 min去除任何不溶性沉淀。
没有去垢剂时沉淀溶解缓慢且某些膜/疏水蛋白不能完全溶解。
(2)有效的溶解推荐用此法，用2~5% SDS水溶液、或含5%SDS的自备缓冲液，或含2%SDS的标准SDS-PAGE凝胶上样缓冲液，95ºC 10分钟。
沉淀量少会很快溶解。
如沉淀很多或过分干燥，煮沸后4ºC溶解5小时以上或过夜，可溶性蛋白应该溶解并释放到溶液中。
4ºC 溶解过夜的不溶物主要是不溶性成分，通常不含对实验有用的可检测蛋白。
12000rpm 离心5 min去除任何不溶性沉淀。
但对于绝大多数Western Blot目的，按照上述溶解过程可不加蛋白酶抑制剂，而蛋白不会有明显降解。
但用户仍然可以加入蛋白酶抑制剂。
注意染色体DNA可与蛋白质一起被抽提出来，溶解时形成粘稠物。
含有大量粘稠DNA 的样品在进行电泳时易导致条带变形。
95ºC热变性、振荡、注射针头反复抽吸有助于彻底打断DNA。
3.蛋白沉淀溶解体积。
按照每mg组织2~5μl的比例决定最终的溶解体积，但需要依据组
织类型和实验目的改变。
过小的溶解体积将使沉淀难以快速有效溶解。
样品中的蛋白浓度也可用每单位体积(ml)内的精确的组织初始重量(mg)或细胞数量来表示，通常这种表示方法与蛋白定量结果有很好的平行性。
4.蛋白定量。
根据上述溶解方法溶解，不含染料，稀释后定量。
注意使SDS浓度稀释到
不影响蛋白定量的水平，或选择不受SDS影响的测定方法。
BCA法<5% SDS浓度，Bradford法<0.125% SDS浓度。
5.蛋白样品与2-5⨯标准SDS-PAGE Loading Buffer 混合即可直接上样电泳。
6.按比例可进行大规模的组织(～1g)蛋白提取。
7.提取试剂有刺激性，一旦接触立即用水清洗。
8.试剂盒提供的裂解-结合缓冲液是过量的。