蛋白组分抽提试剂盒说明书
适用于质谱分析的酵母蛋白提取
酵母 酵母
BB-319716 BB-319817
酵母总蛋白提取试剂盒 （离心柱，2-D电泳用） 酵母总蛋白提取试剂盒 （无去污剂）
酵母 酵母
BB-319908
酵母蛋白提取试剂盒 （蛋白组、质谱适用）
酵母
下游应用 WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA, purification,kinase assays,activity assays,reporter assays,amine reactive labeling,etc. WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA, purification,kinase assays,activity assays,reporter assays,amine reactive labeling,etc. WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA, purification,kinase assays,activity assays,reporter assays,amine reactive labeling,etc. 磷酸化蛋白质谱,2-D,IEF, WB,IP,ELISA,EMSA,purification,kinase assays,activity assays, reporter assays,amine reactive labeling,etc. 2-D,IEF, WB,purification,etc. WB,IP,ELISA,EMSA,purification,kinase assays,activity assays, reporter assays,amine reactive labeling,etc. 2-D,IEF, WB,purification,etc. 蛋白质谱,2-D,IEF, WB,IP,ELISA,EMSA,purification,kinase assays,activity assays, reporter assays,amine reactive labeling,etc. 蛋白质谱,2-D,IEF, Pull-down, co-IP, WB,IP,ELISA,EMSA,purification,kinase
BCA蛋白定量试剂盒使用说明书
产品使用说明书BCA 蛋白定量试剂盒试剂盒简介以下货号试剂盒可参照此说明书操作：建议同时参考本说明书英文原文（说明书编号TB380）。
BCA Protein Assay Kit ：500 / 2500 rxn 货号71285-3BCA 蛋白定量方法是基于双缩脲反应，即在碱性溶液中蛋白将Cu 2+ 还原成Cu 1+，而根据检测到的单价Cu 离子的浓度可以检测体系中对应蛋白的量。
Bicinchoninic acid 是一种显色剂，可以螯合被还原的铜离子，产生一种在562nm 有强吸收的紫色复合物。
Novagen 的BCA 试剂盒可以用于测定浓度在20-2,000µg/ml 范围内的蛋白的浓度，根据样品量分为标准型和微型两种形式进行测定。
试剂盒提供的组分足够用于500次标准型反应（50µl 蛋白样品加上1ml 反应试剂）或2,500次微型测定（25µl 蛋白样品加上200µl 反应试剂，可以在96孔板中进行高通量定量）。
试剂盒中提供的BSA （牛血清白蛋白，2mg/ml ）为用户制作标准浓度曲线提供了便利。
Novagen 的BCA 试剂盒准确度高，兼容性好，能与各种化学试剂和表面活性剂兼容，可以方便地配合默克Novagen 的BugBuster ®，PopCulture ®，CytoBuster™，Reportasol™和Insect PopCulture 抽提蛋白的细胞裂解试剂一起使用。
有些化学成分，例如螯合剂，强酸、强碱、还原剂等，可能会干扰BCA 法采用的还原及螯合定量过程，详细情况请看说明书后附列表。
试剂盒提供的组分500ml BCA 反应液（0.1M NaOH 缓冲的bicinchoninic acid ，碳酸钠，酒石酸钠，碳酸氢钠，pH11.25） 15ml 4% 硫酸铜3×1ml BSA 标准品（2mg/ml ）储存室温存放。
胞浆蛋白—核蛋白抽提试剂盒说明书
胞浆蛋白—核蛋白抽提试剂盒产品编号产品名称包装SINP001 胞浆－核蛋白抽提试剂盒50×产品简介：细胞核和细胞浆目前成为研究细胞组分的两个热点，获得高浓度的细胞核蛋白和细胞浆蛋白成为得到好的研究结果的重要实验过程。
本试剂盒主要原理是在低渗透压条件下，使细胞充分膨胀，然后破坏细胞膜，释放出细胞浆蛋白，离心得到细胞核沉淀。
最后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。
本试剂盒是本公司非放射性EMSA试剂盒（cat; SIDET001, SIDET003, SIDET004,）实验成功的重要部分，经BCA测定24cm2贴壁细胞(或50ml规格培养瓶养的悬浮细胞)抽提物，核蛋白浓度约为 2.5ug/ul或更高。
抽提得到的蛋白可以用于Western，EMSA，footprinting，报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。
本试剂盒可足够您进行50次抽提操作！包装清单：试剂包装总量5X Buffer A 1瓶35ml/瓶2X Buffer B1支 1.5ml/支Solution I（溶液I）1支 1.75ml/支Solution II（溶液II）1支 1.75ml/支Solution III（溶液III）1支 1.5ml/支PMSF Solution 1支0.85ml/支User Manual (说明书)1份1份/Kit保存温度： 4℃保存。
Ⅰ.准备抽提试剂：按照下列方法制备胞浆－核蛋白抽提液：1.制备3ml胞浆蛋白裂解液I ：试剂体积5X Buffer A0.6mlSolution I（溶液I）30ulSolution II（溶液II）30ulPMSF Solution 15uldd-H2O 2.325ml总体积 3.0ml注：PMSF Solution须在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入。
2.制备1.02ml胞浆蛋白裂解液II：试剂体积Solution III（溶液III）20ul胞浆蛋白裂解液I 1.0ml总体积 1.02ml3.制备1ml核裂解液：试剂体积2X Buffer B25ulSolution I（溶液I）0.5ulSolution II（溶液II）0.5ulPMSF Solution0.25uldd-H2O23.75ul总体积 50ul注：PMSF Solution须在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入。
动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书
动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书产品编号：BTN90707规格：50T产品及特点：本产品用于快速提取动植物总蛋白，用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析以及蛋白活性测定等。
本产品的其主要特点是：1.提取过程十分简便，匀浆离心即可，整个过程只需要十几分钟。
2.采用独特的温和裂解成分，蛋白保持天然活性。
3.适用于各种动植物组织材料，包括新鲜或冰冻的材料。
4.得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
5.一次可以处理100mg左右的样品，足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。
规格及成分：成分规格溶液A50ml5×SDS-PAGE上样液1ml说明书1份保存条件：常温运输，4℃保存，5×SDS-PAGE上样液短期4℃保存，长期可放-20℃保存，有效期一年。
使用方法：使用前，最好请在溶液A中加入自备的1M DTT溶液50μL。
一：匀浆法注意：对致密的实体组织（如肌肉），最好用Polytron式匀浆机匀浆处理。
1.称取动物或植物组织样品100mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到10-15mL的塑料离心管中。
2.加入1ml溶液A，在冰上用Polytron式匀浆机匀浆，直到没有肉眼可见的组织块。
为了避免产热，可以分多次匀浆，其间放冰上让匀浆液冷却。
3.将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4.4℃12,000g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5.将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。
如果要测定蛋白浓度，请使用BCA方法，不要使用Bradford方法（如果要使用，也需要把样品稀释10倍后再测定，否则溶液A中的成分会影响浓度侧定）。
如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液（终浓度为1×），在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
英文特生物技术（北京）有限公司-植物质膜蛋白提取试剂盒说明书
Minute TM 植物质膜蛋白提取试剂盒目录号：SM-005-P描述：植物膜蛋白占植物细胞总蛋白的很小一部分，但是在植物生理学中起着非常重要的作用。
传统的植物膜组分分离纯化方法是蔗糖密度梯度离心法和双液相法。
这些方法虽然比较有效，但是需要超高速离心和大量的起始原材料，操作过十分繁琐和费时。
为了克服植物膜组分提取中的缺点，我们特别开发了此款植物膜组分提取试剂盒。
植物组织首先通过缓冲液A中致敏，匀浆，然后通过一个特殊的离心管柱，在此过程中匀浆的组织通过柱子特有的Z字形通路后细胞膜被切割成大小相等的碎片，后续无需超高速离心，通过差速离心法和密度梯度离心法将天然的质膜组分从未破裂的细胞，细胞核，细胞浆和细胞器的混合物中分离出来。
在每次实验中仅需使用相同量的起始材料，离心力和离心时间，即可高度富集膜组分，并保证一致性良好。
整个操作过程大约1小时可以完成。
应用：试剂盒用于快速从植物组织中分离天然膜组分，可应用于SDS-PAGE，immunoblottings，ELISA，IP，膜蛋白质结构分析，2-D，酶活性测定及其他应用。
试剂盒组份（50次）：1. 25ml Buffer A2. 10ml Buffer B3. 50个离心管柱4. 50个收集管5. 2根塑料研磨棒6. 组织分离粉储存：Buffer A和Buffer B 需在-20℃储存所需附加材料1XPBS涡旋震荡仪台式离心机重要产品信息1.仔细阅读整个操作说明。
将缓冲液A和缓冲液B完全解冻后摇匀，放置于冰上。
将离心管柱和接收管套管放置于冰上预冷。
2.离心机请调整成RCF/Xg模式，按照离心力设置离心机，所有离心步骤都需要在4℃室温下或者低温离心机中进行。
3.研究蛋白磷酸化，磷酸酶抑制剂应在使用前加入缓冲液A中。
蛋白酶抑制剂可以选择添加或不添加，如添加在使用前加入缓冲液A中（请按照蛋白酶或磷酸酶抑制剂母液比例，例如母液是100x，添加时按照1：100添加，1ml缓冲液A添加10ul抑制剂）。
人红细胞膜蛋白提纯分离试剂盒 说明书
人红细胞膜蛋白提纯分离试剂盒说明书好，先从“人红细胞膜蛋白提纯分离试剂盒”的说明书开始，咱们这篇内容得做得自然些，像是聊聊天一样。
首先，咱们要明白这试剂盒是干啥的。
其实很简单，说白了就是帮助咱们从血液中把那些红细胞膜上的蛋白提取出来，干啥用呢？很多实验都需要这些蛋白，比如做一些生物学研究、探究蛋白质和细胞相互作用的机制之类的。
能不能做出来，就得看你使用这款试剂盒的技巧了。
记得第一次使用这个试剂盒的时候，我特别紧张。
因为就像我去做菜一样，明明看过无数次做法，实际操作的时候总觉得心里没底。
你看，说明书上写得都挺清楚的：“将血液样本与试剂混合，轻轻摇晃均匀，离心……”一看这些步骤，心想：“这不就是做饭嘛，似乎也没什么特别的。
”结果，刚开始操作的时候，我的手有点不听使唤，试剂倒不小心洒了出来，弄得台面上都是，还得重新整理一下。
后来才发现，原来这种东西真的得细心，毕竟血液中的每一个小细胞，都是关键。
接着进入重点——提取红细胞膜蛋白。
关键步骤是离心，离心是整个过程的核心，成功与否就在这一步。
每次我都站在离心机旁边，眼睁睁看着试管里的液体被快速旋转，心里都想着：“能不能分得更清楚点？”有时候试剂盒给的离心条件如果设置得不太对，结果就很容易分不清各层，试管里的东西都混在一起了，那就得重新来过，浪费时间又心累。
不过，做几次下来，你会发现其实这些都不是事儿。
就像我现在再做，操作得已经越来越顺手了，试剂盒里的配方和步骤其实挺合理的，你只要按照它的要求走，基本上问题不大。
其实就是需要点耐心，再加上一点点细心。
因为不小心错过了哪个环节，提取出来的蛋白质量会差很多，实验的结果就不准确了，这就是“细节决定成败”的意思了。
说实话，每次看到离心后沉淀物清晰地分层，蛋白提取得一干二净的时候，心里那种成就感真是没法形容，简直是“哇塞，居然做出来了！”你会觉得所有的麻烦和小失误都不算什么，反倒成了回忆的一部分。
好了，讲了这些步骤，也别忘了这款试剂盒的优点。
人(Human)组蛋白H3赖氨酸4(H3K4me3)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）组蛋白H3赖氨酸4(H3K4me3)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被组蛋白H3赖氨酸4(H3K4me3)抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的组蛋白H3赖氨酸4(H3K4me3)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、12.5、25、50、100、200ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
凯基核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒
凯基核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒Cat Number：For Research Use OnlyStore at -20℃for one yearExpire date：一、试剂盒说明本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取核蛋白和/或胞浆蛋白，提取制备过程简便。
制备的核蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性，并且纯度较高。
提取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性测定等后续蛋白质研究。
二、试剂盒组份组份KGP150 （50 test）KGP1100 （100储存温度test）Buffer A 25 mL 25 mL ×24℃Buffer B 1.5 mL 3．0 mL 4℃Buffer C 12.5 mL 25 mL 4℃DTT 50μL100μL-20℃蛋白酶抑制剂250μL500μL-20℃PMSF（100mM）400μL800μL-20℃三、操作步骤Ⅰ 实体组织蛋白的提取1、组织样本，将组织剪切成小块，加入适量的冰冷PBS均浆后，静置5 min ，弃沉淀，小心吸取上清转移至另一离心管中；2、上清4℃离心500×g，3 min，弃上清，估计细胞压积PCV（离心后的紧实细胞体积）；3、每20μL细胞压积中，加入200μL预冷的Buffer A【使用前每mL BufferA加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂】，最大转速涡旋剧烈振荡15s，放置冰上10～15min；4、加入11μL冷Buffer B，最大转速涡旋剧烈振荡5s，放置冰上1min；5、再次最大转速涡旋剧烈振荡5s后，4℃离心，16000×g,5min；6、尽快将上清转入另一预冷的洁净微量离心管，置于冰上，即得胞浆蛋白；7、在离心沉淀物（细胞核）中加入100μL预冷的Buffer C (使用前每mLBuffer C加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂)，最大转速涡旋剧烈振荡15s，放置冰上40min，每间隔10 min涡旋剧烈振荡15 seconds；8、4℃离心，16000×g,,10min，尽快将上清转入一预冷的洁净微量离心管，即得核蛋白；9、上述提取的胞浆蛋白和核蛋白进行蛋白定量（Braford法或BCA法），分装并保存于-80℃，避免反复冻融。
总蛋白提取试剂盒说明书
总蛋白提取试剂盒说明书总蛋白提取试剂盒(Total Protein Extraction Kit)P1250：蛋白抽提试剂盒-I (实体组织和细胞蛋白抽提, 100 extractions)描述：从组织细胞中提取总蛋白是Western Blot的关键步骤。
实体软组织如脑脊髓富含磷脂，神经血管含大量结缔组织，而脂肪则有大量油脂，常规的方法难以有效从这些组织提取蛋白。
本试剂盒为组织或培养细胞总蛋白提取提供完整的解决方案。
用裂解-结合缓冲液匀浆裂解实体组织，或直接用裂解-结合缓冲液重悬培养细胞，然后加入抽提试剂去除非蛋白成分，离心、干燥后即可得到总蛋白。
蛋白沉淀溶解后用常规方法进行蛋白定量。
提取过程可在30-60分钟内完成，可在1.5ml离心管微量提取也可大规模制备，极为简便高效。
通常一次提取10-100mg 组织所获得的总蛋白可进行几十到上百次分析如蛋白质电泳、Western Blot、免疫共沉淀。
组成 1. 裂解-结合缓冲液100 ml 2. 抽提试剂100 ml每毫升裂解缓冲液和抽提试剂可提取10-100mg组织或1 ? 107细胞。
试剂盒的裂解缓冲液是过量的。
适用各种实体软组织(> 1 mg)，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道组织、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等，以及各种原代细胞和永生化细胞系。
保存：室温或4oC保存2年固体组织蛋白提取1.每10-100mg固体组织剪碎后加入0.5-1 ml裂解液，放入玻璃匀浆器内上下手动匀浆15次；或用高速机械匀浆器12,000 rpm 破碎组织。
注意：初始组织的量应在10-100mg范围。
肝肾组织蛋白含量高，提取时应加较少量的组织，否则形成的蛋白膜厚、致密且难溶。
少量小的未破碎组织不影响后续抽提。
2.仅取0.5ml组织匀浆液转移到1.5ml离心管，弃去剩余的组织匀浆液。
每0.5ml组织匀浆液加入2倍体积的(1ml)抽提试剂充分混匀。
室温或4oC静置10分钟，偶尔晃动。
植物蛋白提取试剂盒
凯基植物蛋白提取试剂盒Cat Number：For Research Use OnlyStore at -20℃ for one yearExpire date：一、 试剂盒说明本试剂盒用于从培养植物中提取蛋白， 用含有蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液Lysis Buffer裂解细菌，作用温和，提取过程简便高效。
获得的蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究。
二、 试剂盒组份组份 KGP750 （50 tests）KGP7100（100 tests）储存温度Lysis Buffer 50 mL 100 mL 40C蛋白酶抑制剂 50 μL 100 μL -200CDTT(1M) 0.5 mL 1.0 mL -200CPMSF（100mM） 0.5 mL 1.0 mL -200C三、操作步骤Lysis Buffer工作液配制：每 mL冷 Lysis Buffer加入1μL蛋白酶抑制剂、10μL DTT（1M）和10μL PMSF（100mM），混匀。
冰上保存待用。
步骤1． 取100－200mg的植物放入液氮中过夜，在液氮的环境中研磨样本至粉碎2． 加入1.0ml Lysis Buffer工作液， 4℃孵育30min，期间涡旋混匀3次；5． 4 ℃， 14 000 rpm离心10 min，收集上清为蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；6． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
四、 注意事项1． 所有接触样品的用具及试剂均需预冷。
2． 提取蛋白后，如有必要，可透析除去表面活性剂。
五、 凯基相关产品（详见凯基网站）1、蛋白提取核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒全蛋白提取试剂盒膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒线粒体蛋白提取试剂盒磷酸化蛋白提取试剂盒（简易型）活性蛋白提取试剂盒红细胞裂解液细菌蛋白提取试剂盒酵母蛋白提取试剂盒植物蛋白提取试剂盒蛋白裂解液系列2、蛋白定量BCA法蛋白定量检测试剂盒Bradford法蛋白定量检测试剂盒Lowry法蛋白定量检测试剂盒3、蛋白染色蛋白质银染检测试剂盒蛋白质考马斯亮蓝染色检测试剂盒考马斯亮蓝蛋白快速染液4、蛋白分子量Marker蛋白分子量Marker（14KD-116KD）蛋白分子量Marker（10KD-200KD）预染蛋白分子量Marker（20KD-118KD）预染彩色蛋白分子量Marker（11KD-250KD）5、Western bloting组装试剂盒凯基蛋白提取和SDS-PAGE凝胶电泳试剂盒凯基Western bloting检测试剂盒6、Western bloting化学发光试剂盒ECL检测试剂盒加强型ECL检测试剂盒。
叶绿体蛋白提取试剂盒使用说明
叶绿体蛋白提取试剂盒使用说明货号：R0060规格：50T/100T产品内容：试剂盒组成50T100T提取液A200ml400ml提取液B25ml50ml蛋白酶抑制剂混合物100ul200ul注：蛋白提取液：含多种有效成分，可以充分释放蛋白，又可结合释放出的蛋白防止沉淀。
提取液中已含有磷酸酶抑制剂混合物。
蛋白酶抑制剂混合物：包含6种独立的蛋白酶抑制剂，AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64。
避免反复冻融，试剂盒不能短时间内用完，抑制剂混合物不可一次全部加入提取液。
保存：蛋白提取液2-8℃保存，蛋白酶抑制剂混合物于-20℃保存。
有效期1年。
产品简介：叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器，光合作用就是在叶绿体中进行的,由于具有这一重要功能，所以叶绿体一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。
叶绿体蛋白提取试剂盒用简便快速的方法可以从各种植物样本中提取叶绿体蛋白，提取过程简单方便，可在1小时内提取得到高质量的叶绿体蛋白。
该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。
该试剂盒提取的蛋白具有天然活性，提取的蛋白可用于Western Blotting、免疫共沉淀、酶活测定等各种下游蛋白研究实验。
1．使用方便2．将蛋白提取的时间缩短至1小时。
3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。
蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性。
操作步骤：实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。
整个过程须保持样本处于低温。
1．取新鲜植物样本叶片，洗净擦干后去除叶梗和粗脉。
2．每2g样本加入4ml提取液A。
通用蛋白裂解 抽提试剂使用说明书
使 用 说 明 书◆通用蛋白裂解/抽提试剂◆目录号1911◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外通用蛋白裂解/抽提试剂目录号：1911目录编号包装单位50ml191101100ml191102产品介绍：本产品的主要成分为含有20mM Tris(pH 7.5)、EDTA、NaCl等成份的缓冲液体系中加入了特殊的非离子型去垢剂，以及sodium pyrophosphate等数种蛋白磷酸酶抑制剂，能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。
同时维持了原有的蛋白间相互作用并保留了蛋白的特性和功能，如抗原-抗体结合或酶学活性，因此本试剂抽提得到的蛋白不仅适用于Western blot，免疫沉淀，还适宜于进行蛋白活性功能检测和免疫共沉淀。
由于加入了多种磷酸酶抑制剂，尤其适宜于磷酸化蛋白的免疫共沉淀或Western blot 研究。
此外有些对蛋白天然构象亲和力高的抗体或者只能识别非变性抗原结合位点的抗体，这种情况应该使用本品在非变性条件下裂解细胞。
产品储存：4℃避光注意事项：1.裂解得到的蛋白样品，由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定蛋白浓度，可以选用本公司生产的BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。
2.用户使用前需加入蛋白酶抑制剂如PMSF或者根据需要再加入leupeptin，aprotinin等其它抑制剂。
3.裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）1.对于培养细胞样品：1)取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2)对于贴壁细胞，去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。
按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。
用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
3)对于悬浮细胞，离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。
PH0314 组织蛋白抽提试剂盒操作手册
1PH0314|组织蛋白抽提试剂盒Tissue Protein Extraction KitCatalog No ：PH0314Size ：☐25T Storage ：Store@RT ◆简介组织蛋白抽提试剂应用于组织样本的总蛋白提取。
提取蛋白之前可根据具体实验需要加入蛋白酶抑制剂、盐、还原剂、螯合剂等成分。
使用该提取液提取的组织蛋白，可进行蛋白活性分析、免疫检测、蛋白纯化等下游操作，并可采用BCA、Bradford、Lowry 法进行蛋白定量。
组织蛋白抽提试剂盒中带有蛋白酶抑制剂混合物，可有效避免蛋白提取过程中蛋白的降解。
◆保存Store at RT (Protease Inhibitor Cocktail：-20℃，其它组分室温保存)◆组分Tissue Protein Extraction Reagent——25mlProtease Inhibitor Cocktail——250ul ◆使用参考1.请在蛋白抽提前取出实验所需蛋白抽提试剂进行预冷，按照1:99比例加入蛋白酶抑制剂混合物（例如990μl 抽提试剂中加入10μl 蛋白酶抑制剂混合物），使蛋白酶抑制剂混合物在抽提试剂中成1×工作液。
注意：在进行蛋白抽提前2-3分钟内加入蛋白酶抑制剂混合物。
2.称量实验组织的重量。
按照1：10（g/ml）的比例加入组织蛋白抽提试剂并匀浆处理（抽提试剂的使用量依据不同的组织而定）。
若需要浓缩的蛋白提取物，可适当减少组织蛋白抽提试剂使用量。
3.冰上孵育20分钟（冰上放置时间应根据组织类型不同进行调整）。
4.10,000×g 离心15~20分钟。
5.收集上清，进行下一步的纯化或下游分析。
◆注意事项1.本产品适用于提取心肌、骨骼肌、肾脏、前列腺、皮肤、结肠、肝脏等软组织。
2.为防止蛋白降解，所有的操作尽量在冰上进行。
3.使用本产品提取后蛋白，可采用BCA、Bradford、Lowry 法进行蛋白定量。
BCA蛋白定量试剂盒使用说明书
BCA蛋白定量试剂盒使用说明书一、产品简介BCA 蛋白定量试剂盒是一种常用的、准确且灵敏的蛋白质定量方法。
它基于双缩脲反应，并在碱性条件下，蛋白质将 Cu²⁺还原为 Cu⁺，Cu⁺与 BCA 试剂形成紫色络合物，在 562nm 处有最大光吸收值。
该试剂盒具有操作简便、稳定性好、灵敏度高、线性范围宽等优点，适用于各种蛋白质样品的定量测定。
二、试剂盒组成1、 BCA 工作液 A：＿____2、 BCA 工作液 B：＿____3、蛋白标准品（浓度为_____）：＿____4、 96 孔板：＿____三、所需设备及试剂1、分光光度计或酶标仪（能够测定 562nm 波长）2、移液器（量程包括20μL、200μL、1000μL）3、涡旋振荡器4、离心机5、去离子水或超纯水四、操作步骤1、标准曲线的绘制（1）将蛋白标准品用去离子水或超纯水稀释成一系列不同浓度的标准溶液（如0μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL、1000μg/mL）。
（2）在 96 孔板中，分别加入25μL 不同浓度的标准溶液。
（3）向每个孔中加入200μL BCA 工作液（A 液与 B 液按照_____的比例混合），轻轻振荡混匀。
（4）将 96 孔板在 37℃下孵育 30 分钟。
（5）使用分光光度计或酶标仪在 562nm 处测定各孔的吸光度值。
（6）以蛋白浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
2、样品测定（1）将待测蛋白样品用去离子水或超纯水适当稀释。
（2）取25μL 稀释后的样品加入 96 孔板中。
（3）按照与标准曲线绘制相同的步骤，加入 BCA 工作液，孵育并测定吸光度值。
五、计算样品蛋白浓度根据所测样品的吸光度值，在标准曲线上查出对应的蛋白浓度。
然后乘以样品的稀释倍数，即可得到样品的原始蛋白浓度。
六、注意事项1、实验过程中应避免使用含有 Triton X-100、SDS 等去污剂的溶液，因为这些物质会干扰 BCA 反应。
细胞膜蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒 说明书
¾ 约90分钟即可完成培养细胞或组织的细胞膜蛋白与细胞浆蛋白的分离和抽提。抽提得到的蛋白可以用于SDS-PAGE， Western、酶活性测定等后续实验。
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产品名称 膜蛋白抽试剂A 膜蛋白抽提试剂B
说明书
包装 100ml 30ml
1份
保存条件：
-20℃保存，一年有效。
注意事项： ¾ 需 自 备 PMSF 。 PMSF 一 定 要 在 抽 提 试 剂 加 入 到 样 品 中前2-3分钟内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。
PMSF(ST506)可以向碧云天订购。 ¾ 使 用 本 试 剂 盒 抽 提 到 的 细 胞 膜 蛋 白 与 细 胞 浆 蛋 白 均 可 直 接 用 碧 云 天 生 产 的 BCA 法 蛋 白 浓 度 测 定 试 剂 盒
2. 准备细胞或组织样品： a. 对于细胞 (1) 收集细胞 对于贴壁细胞：培养约2000-5000万细胞，用PBS洗一遍，用细胞刮子刮下细胞或用含有EDTA但不含胰酶的细胞消化 液处理细胞使细胞不再贴壁很紧，并用移液器吹打下细胞。离心收集细胞，吸除上清，留下细胞沉淀备用。尽量避 免用胰酶消化细胞，以免胰酶降解需抽提的目的膜蛋白。 对于悬浮细胞：培养约2000-5000万细胞，直接离心收集细胞，吸除上清，留下细胞沉淀备用。 (2) 洗涤细胞：用适量冰浴预冷的PBS轻轻重悬细胞沉淀，取少量细胞用于计数，剩余细胞4℃，600g离心5分钟沉淀 细胞。弃上清，随后4℃，600g离心1分钟，以沉淀离心管管壁上的残留液体并进一步沉淀细胞，尽最大努力吸尽残 留液体。 (3) 细胞预处理：把1毫升临用前添加了PMSF的膜蛋白抽提试剂A加入至2000-5000万细胞中，轻轻并充分悬浮细胞， 冰浴放置10-15分钟。 b. 对于组织： 取约100毫克组织，用剪刀尽量小心剪切成细小的组织碎片。加入1毫升临用前添加了PMSF的膜蛋白抽提试剂A，轻 轻悬浮组织碎片，冰浴放置10-15分钟。注：如果组织样品比较少，也可以使用更少的组织量，例如30-50mg，后续 试剂的用量及操作步骤不变；组织用量较少时，最后获得的膜蛋白也较少。
生工生物工程(上海) 植物蛋白抽提试剂盒 产品说明书
产品说明书 / Specification Sheet植物蛋白抽提试剂盒产品编号：BSP053产品简介：本试剂盒在利用液氮充分磨碎植物组织的同时，采用特殊的试剂对植物细胞释放出来的蛋白进行沉淀，并使用广谱蛋白酶抑制剂抑制蛋白酶活性，最大程度地保持所抽提蛋白质的完整性。
而且最终的蛋白抽提物呈干粉状，有利于蛋白质的长期稳定保存。
提取的蛋白，包括膜蛋白，核蛋白，胞质蛋白以及在植物组织中含有的稀有蛋白在内的全蛋白。
分离得到的蛋白组分可应用于SDS-PAGE、Western blot等。
每次可以提取100mg植物组织，本试剂盒可以使用50次。
产品特点：1．提取的蛋白质是包括稀有蛋白在内植物细胞的全蛋白质。
2．可以进行50x100mg植物组织。
3．经过适当处理后，可以用于2D电泳，等电点聚焦等实验。
4．对植物细胞的裂解效果和植物细胞的非蛋白质成分去除效果高。
5．不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。
运输和保存条件：常温下运输，收到后将Solution C和Solution D在-20度的条件下保存，Solution A和B 在2-8度的条件下保存，保质期一年。
组成：本试剂盒由Solution A和Solution B构成，可以使用50次。
1、BSP053-1 Solution A 50 ml2、BSP053-2 Solution B 100ml3、BSP053-3 Solution C 120ul4、BSP053-4 Solution D 1ml使用方法：1、实验前，将研钵和研槌置于-20℃冰箱中预冷；将植物组织置于-80℃冰箱中冷冻保存以备后用。
2、当植物组织仍处于冷冻状态时，用剪刀将植物组织剪碎。
3、将剪碎的植物组织置于预冷的研钵中，加入液氮保持植物组织处于冷冻状态，用研槌尽快地将植物组织研磨成粉末状。
4、取大约100mg的组织粉末，加入1ml Solution A和0.7ul Solution C的，将粉末悬浮后，置于-20℃冰箱中，静置45min。
BCA 法蛋白含量测定试剂盒说明书
BCA法蛋白含量测定试剂盒说明书(货号：G0418W微板法96样)一、产品简介：BCA蛋白含量试剂盒提供一种简单，快速，耐去污剂（最多5％）的检测蛋白质浓度的方法。
由于蛋白质能将Cu2+还原成Cu+；BCA可与Cu+结合生成紫蓝色复合物，在562nm 处有最大光吸光值，颜色的深浅与蛋白含量成正比，因此可根据吸光值测定蛋白质浓度。
二、试剂盒组分与配制:试剂名称规格保存要求备注试剂A液体25mL×1瓶4℃保存依据实验用量，临用前试剂A:B=50:1的比例混匀成反应mix试剂B液体0.5mL×1支4℃保存标准品液体1.5mL×1支4℃保存若重新做标曲，则用到该试剂三、所需的仪器和用品：酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅、移液器和蒸馏水。
四、蛋白含量测定：建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！1、样本制备：①组织样本：称取约0.1g组织，加入1mL提取液（提取液可选用酶提取缓冲液、蒸馏水、生理盐水）冰浴匀浆，12000rpm，4℃离心10min，取上清，即待测液。
【注】：依据研究经验，一般需将样本粗提液稀释到适当倍数再进行测定，如10倍。
实验前可以先选2个样本测定，摸索确定适合本次实验的稀释倍数。
②细菌或细胞样本：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取500万细菌或细胞加入1mL提取液；超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），12000rpm，4℃离心10min，取上清，即待测液。
【注】：依据研究经验，一般需将样本粗提液稀释到适当倍数再进行测定，如10倍。
实验前可以先选2个样本测定，摸索确定适合本次实验的稀释倍数。
③液体样本：澄清无色液体样品可以直接测定。
若浑浊，离心后取上清检测。
2、上机检测：①酶标仪预热30min，调节波长到562nm。
②反应mix置于60℃水浴预热30min（仅煮一次即可）。
PH0710 膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒操作手册
PH0710|膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒Membrane and Cytosol Protein Extraction KitCatalog No：PH0710Size:□50T □100T◆产品简介膜蛋白与浆蛋白抽提试剂盒(Membrane and Cytosol Protein Extraction Kit)提供了一种比较简单、方便地从培养细胞或组织中抽提细胞膜蛋白和细胞浆蛋白的方法。
抽提的膜蛋白不仅包括质膜上的膜蛋白，也包括线粒体膜、内质网膜和高尔基体膜等上的膜蛋白,通过匀浆适度破碎细胞，经低速离心去除细胞核和少数未破碎的细胞产生的沉淀，随后取上清高速离心获得细胞膜沉淀和含有细胞浆蛋白的上清，然后通过优化的膜蛋白抽提试剂从沉淀中抽提获取膜蛋白。
约90分钟即可完成培养细胞或组织的细胞膜蛋白与细胞浆蛋白的分离和抽提。
抽提得到的蛋白可以用于SDS-PAGE，Western、酶活性测定等后续实验。
不适合用于蛋白酶、磷酸酯酶等受这些抑制剂影响的酶的活性测定。
本试剂盒采用独特的组分，提取细胞及组织中的膜蛋白。
特殊的溶液系统，在裂解细胞的同时，还可以选择性低地分离提取细胞膜蛋白与细胞器膜蛋白。
提取方法简单，可靠，快速，获得的膜蛋白纯度高，可用于SDS-PAGE 电泳、Western Blot、免疫沉淀等后续实验，每次可以提取107个培养细胞或200mg 动物组织。
◆产品组分◆保存条件常温运输，收到后，DTT 在-20℃保存，其余组分4℃保存，一年有效。
产品名称50T 100T 浓缩洗涤液（10X）50ml 100ml 膜蛋白提取液50ml 100ml DTT60μl 120μl 说明书1份1份使用说明1．准备细胞或组织样品：A．细胞贴壁细胞：培养约2000-5000万细胞，用PBS洗一遍，用细胞刮子刮下细胞或用含有EDTA但不含胰酶的细胞消化液处理细胞使细胞不再贴壁很紧，并用移液器吹打下细胞。
离心收集细胞，吸除上清，留下细胞沉淀备用。
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Overview
Fast and reproducible extraction of subcellular proteomes from mammalian cells
ProteoExtract® Subcellular Proteome Extraction Kit (S-PEK) is designed for fast and
reproducible extraction of subcellular proteomes from adherent and suspension-grown
mammalian cells. The S-PEK takes advantage of the different solubilities of certain subce
compartments in the four selected reagents. In the case of adherent cells, the procedure is
performed directly in the tissue culture dish without the need for cell removal. Cells or the
parts of the cells remain attached to the plate during sequential extraction of subcellular
compartments, until the appropriate extraction reagent is used. Thus, the early destruction
the cellular structure by enzymatic or mechanical detachment of cells from the tissue cultu
plate and any mixing of different subcellular compartments is prevented. For
suspension-grown cells, extraction starts with gentle sedimentation and washing of the cel
The stepwise extraction delivers four distinct protein fractions from one sample:
∙Cytosolic fraction (F1)
∙Membrane/organelle protein fraction (F2)
∙Nucleic protein fraction (F3)
∙Cytoskeletal fraction (F4)
Proteins are obtained in the native state making the S-PEK suitable for many downstream
applications such as 1D and 2D gel electrophoresis, immunoblotting, enzyme activity assa
and protein microarrays.
Sample size: 3-5x106or 25-50 mg tissue.
Catalogue
Number
539790
Brand
Family
Calbiochem®
Synonyms S-PEK Kit
Features and benefits ∙Stepwise extraction resulting in four distinct subcellular proteomes from one sample ∙Highly reproducible
∙No ultracentrifugation steps
∙Fast—needs just 2 hours with 45 minutes hands-on time
∙Produces proteins suitable for functional studies
Application
Data
A:Adherent SAOS cells were extracted according to the Detailed Protocol
Subcellular Extraction of Proteins From Adherent Cells as outlined above. Im
i-iv show the morphology of the cells before and after each extraction s
(200-fold enlarged). The SAOS cells remained attached throughout the extrac
procedure. B:An aliquot of each fraction from A were subjected to SDS-
analysis (F1-F4 = fractions 1-4). The data demonstrate clear differences in
protein banding patterns among the 4 fractions. C:Aliquots of each frac
from A were separated by SDS-PAGE and transferred to PVD membrane for blot
with the indicated antibodies. For c-Fos, the fractions were subjected t
immunoprecipitation, prior to Western blotting, to enrich for any c-Fos pre
in each fraction. The data demonstrate that each marker protein is specific
enriched within the appropriate fraction.
A431 cel ls were stimulated with 0.2 µg/ml TNF-αfor the indicated times. At end of each induction period the cells were extracted as outlined in the Deta Protocol for Subcellular Extraction of Proteins from Adherent Cells. The prot from an aliquot of each fraction were separated by SDS-PAGE and transferre PVD membrane for Western blot analysis using an antibody specific for NF-The data indicate that there is measurable translocation of NF-κ B from cytoplasm to the nucleas as early as 5 min after TNF-α stimulation.
*Tested on rat liver and bovine liver tissue.。