常用脱水剂
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常用的脱水剂
3.正丁醇
此剂易挥发,可与水和乙醇混合,亦是石蜡溶剂,可不经
透明剂直接浸蜡。但一般在应用上还未能完全替代乙醇。多 与乙醇按一定比例混合作脱水之用,但最后需经纯正定醇方 可浸蜡。很少引起组织块的收缩,变脆。
各级浓度的正丁醇
级别 Ⅰ(ml)Ⅱ(ml)Ⅲ(ml)Ⅳ(ml)Ⅴ(ml)Ⅵ(ml)
蒸馏水
乙醇 正丁醇
50
40 10
30
50 20
15
50 35
5
40 55
0
25 75
0
0 100
Ⅰ-Ⅳ中的乙醇可用95%,仅Ⅴ级的用纯乙醇配。Ⅱ中可
过夜。材料经两次正丁醇后,进入1/2正丁醇1/2石蜡,经13小时后,转入纯石蜡。
常用的脱水剂
4.叔丁醇
可与水,乙醇及二甲苯等剂混合,(可套用上表)也可单 独使用,是一种应用很广的脱水剂。此液不会使组织收缩或 变硬,不必经过透明,可直接浸蜡。应用此剂可以简化脱水、 透明等步骤。因此已逐渐代替乙醇,但价格较贵,比酒精贵3 倍。
常用脱水剂
常用的脱水剂
酒精
是最广泛的脱水剂,主要是价格较低,方法易掌握。不足 之处是易引起组织收缩或硬化,不利于切片(尤其是纯酒精脱
水,时间要短)。
按浓度梯度依次进行:
15%→35%→50%→70%→83%→95%→100%→100%;
常用的脱水剂
脱水剂应该具备的特点
(1)必须是亲水性的,能与水成任何比例的混溶; (2)必须能与其他有机溶剂互相混合和取代。
脱水剂种类
(1)非石蜡溶剂的脱水剂:如乙醇、丙酮等,组织脱水后必
须经二甲苯透明才可浸蜡。 (2)石蜡溶剂的脱水剂:如正丁醇、二氧六圜等,组织脱水 后即可直接透蜡,不需经过中间溶剂二甲苯之类的药品。
常用的脱水剂 2.丙酮
为很好的脱水剂,可以代替乙醇,其作用和用法和乙醇相 似,不过其脱水力和收缩力都比乙醇强。能使蛋白沉淀,组织硬 化,不能溶解石蜡,所以仍需经过二甲苯或其他透明剂,然后才 能进行浸蜡和包埋。
入纯石蜡。
常用的脱水剂
5.甘油
是一种良好的脱水剂,尤其对细小柔软的材料更适合。用
甘油脱水可以避免原生质收缩,但脱水前必须洗净固定剂,以
免影响包埋和染色。利用甘油脱水,可以从50%浓度开始至纯 甘油,再换纯乙醇。
常用的脱水剂
6.二氧六环
化学名:1,4-二氧六环 为无色液体,易挥发燃烧,且
有毒,应尽力避免吸入它的蒸气。能与水和乙醇在任何比例下 混合,为石蜡溶剂,脱水至纯二氧六环后,即可进行包埋。 浓度梯度设计为: 30%→50%→70%→90%→100%→100%→100%,每级时间 为1-6小时。
各级浓度的叔丁醇
级别 蒸馏水 乙醇 Ⅰ(ml) Ⅱ(ml) Ⅲ(ml) Ⅳ(ml) Ⅴ(ml) Ⅵ(ml) 40 50 30 50 15 50 0 50 0 25 0 0
正丁醇
10
20
35
50
75
Baidu Nhomakorabea
100
Ⅰ-Ⅳ中的乙醇可用95%,仅Ⅴ级的用纯乙醇配。材料经 两次叔丁醇后,进入1/2叔丁醇1/2石蜡,经1-3小时后,转