动物防疫样品采集技术规范标准
动物疫病监测常用样品采集方法及注意事项
Common Sample Collection Methods and Precautions for Animal Disease Monitoring
FANG Weihong （Animal Disease Prevention and Control Center of Jian'an District，Xuchang City，Xuchang Henan 461100，China）
0 引言
动物疫病监测、实验室诊断检测等工作皆需依据采 集到的动物样品来开展，检测、分析采集到的样品，能 帮助动物防疫机构对地区动物疫病流行状况充分了解， 高效研制与评估疫苗等，样品采集工作会对动物疫病监 测事业的发展产生直接影响。相关人员需深入学习与掌 握样品采集方面的知识技术，明确各个环节的注意要 点，不断提高样品采集水平。
Abstract：Through the development of animal disease monitoring，the effectiveness of the prevention and control of major animal diseases can be improved，and the safety of animal husbandry production and meat food safety can also be guaranteed．Sample collection is a key link in animal disease monitoring．The standardization and scientific nature of sample collection will have a direct impact on the results of animal disease monitoring．The staff should combine the monitoring items and content，choose a reasonable sample collection method，and strictly control the collection process to avoid irregularities，otherwise the sample quality will be affected． Keywords：animal disease monitoring，sample collection，matters needing attention
动物疫病实验室检验采样方法
动物疫病实验室检验采样方法NY/T 541—2002前言动物病料样品的采集是动物疾病诊断、流行病学调查或免疫监测所不可缺少的重要步骤，在各国的兽医学标准中都把这一部分纳入第一重要内容，广泛应用于动物疾病流行病学调查、动物检疫和科研教学。
世界动物卫生组织[World Organization for Animal Health(英)，Office Intentional des Epizootic(法)，OIE]推荐的诊断方法中，也将该部分内容列为第一部分内容。
本标准是依据世界动物卫生组织(OIE)《诊断试验和疫苗标准手册》(2000版)(Manual of Standards for Diagnostic Tests and Vaccines ，2000)第1·1.1章"Sampling Methods"的技术要求编写的。
本标准与该章的非原则性差异在于:——本标准结合本国实践经验对操作程序和条件作了更具体的陈述和规定；——本标准根据GB/T1.1-2000的规定和汉语习惯将该章的陈述性文本改为规范性标准文件。
本标准的附录A为规范性附录。
本标准由农业部畜牧兽医局提出。
本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。
本标准起草单位:农业部动物检疫所。
本标准主要起草人:吴延功、杜元钊、朱万光、刘佩兰、仰惠芬。
1范围本标准规定了动物疫病诊断实验室的样品采集方法。
本标准适用于病因(原)学、病理组织学、血清学、免疫学等实验室检验所需样品的采集。
2样品采集的一般原则和采集前的准备2.1样品采集所遵循的一般原则2.1.1凡发现患畜(包括马、牛、羊及猪等)有急性死亡时，如怀疑是炭疽，则不可随意解剖，应采取患畜的血液，万不得已时局部解剖作脾脏触片的显微镜检查。
只有在确定不是炭疽后，方可进行剖检。
2.1.2采取病料的种类，根据不同的疾病或检验目的，采其相应的脏器、内容物、分泌物、排泄物或其他材料；进行流行病学调查、抗体检测、动物群体健康评估或环境卫生检测时，样品的数量应满足统计学的要求。
关于动物检疫样品的采集和检疫方法
关于动物检疫样品的采集和检疫方法动物检疫工作是国家重要的防疫工作之一，能够有效防止动物传染病、寄生虫病等疾病的传播。
对于进出口动物及动物产品的检疫工作，样品的采集和检疫方法是至关重要的。
只有做好样品的采集和检疫工作，才能够及时有效地发现并控制动物疾病的传播，保障人畜健康和食品安全。
接下来，我们来详细介绍一下关于动物检疫样品的采集和检疫方法。
一、动物检疫样品的采集方法1. 野生动物样品的采集在进行野生动物样品的采集时，需要做好防护工作，避免接触野生动物可能携带的病原体。
采集人员需要穿戴防护服和口罩，并携带消毒用品。
在野生动物样品的采集过程中，应当选择健康的野生动物进行采集，并确保采集的样品完整无损。
对于野生动物的标本，需要做好标注和记录工作，确保样品的追溯和管理。
2. 家畜样品的采集家畜样品的采集需要严格遵守动物保护法和动物福利法的相关规定，确保在进行样品采集时不会对家畜造成痛苦和伤害。
在进行家畜样品的采集时，需要选择健康的家畜进行采集，并确保采集的样品来源可追溯。
对于家畜样品的采集，应当使用专业的采样器具，并在采集后尽快将样品送至检疫机构进行检测。
3. 动物产品样品的采集动物产品样品的采集需要根据不同的产品特点和检测要求采取相应的采集方法。
对于肉类、乳制品等动物产品样品的采集，需要确保样品的新鲜和干净，并避免交叉污染。
对于冰鲜、冷冻等特殊处理过的动物产品样品，需要在采集时严格控制温度和环境，并选择适当的采样点进行采集。
1. 样品的分析检测对于采集到的动物检疫样品，需要进行分析检测，确保样品中是否存在病原体等相关物质。
对于野生动物样品的检测，需要对样品进行解剖和组织学检测，以及生物学检测等相关工作。
对于家畜样品的检测，需要进行病原体的分离培养和PCR检测等相关工作。
对于动物产品样品的检测，需要进行化学成分分析、微生物检测等相关工作，确保产品的安全合格。
2. 样品的鉴定和报告在进行样品的检测后，需要做好样品的鉴定和结果的报告工作。
动物及动物产品安全专项检验样品要求
附件1 动物产品防疫监督抽样检验样品采样要求
一、抽样人员应熟悉动物防疫的有关法律法规，具有一定的专业技术知识，掌握抽样工作程序和抽样操作技术，一般应为动物防疫监督员。
二、抽样时抽样人员应不得少于两人。
三、动物及动物产品安全专项检验样品的采集依据《动物疫病实验室检验采样方法》（NY/T 541-2002）执行。
四、样品采样的数量
1、家畜产品：根据实际采集猪肉、猪肝脏、牛羊肉、淋巴结等，每份取样100-150克，密封于封口袋中，贴好标签，用防水记号笔写清编号。
2、家禽产品：根据实际采集禽肉、肝脏等，每份取样100-150克，密封于封口袋中，贴好标签，用防水记号笔写清编号。
五、样品分割：样品抽取后，抽样人员在现场将样品分成三份，两份送检，一份抽检单位留样备查。
取样工具和盛样器具应当洁净、干燥，必要时作灭菌处理。
采样必须防止样品间交叉污染。
六、样品包装：用清洁干燥的塑料袋或其它容器盛放，外加标签及加盖抽样单位公章的抽样封条。
七、样品保存：取样过程应采取低温保存措施，取样后应尽快放置零下20℃以下保存。
八、抽样时应填写抽样单，一式三份，分别由抽样单位、被抽样单位和检测单位各保存一份。
抽样人员应按抽样单、标签和抽样封条规定内容逐项填写并盖章。
九、送样：采样后应在一周内送检测单位。
附件3 动物产品动物防疫监督抽样检测结果统计表填报单位（盖章）：填报日期：
填报人：联系电话：。
动物防疫抽样规范
动物防疫抽样规范1范围本文件规定动物防疫抽样的一般要求，抽样前准备，抽样动物种类，抽样范围，抽样数量，抽样，抽样记录及样品的保存运输。
本文件适用于动物疫病实验室血清学监测、病原学监测和病理组织学检查等抽样工作。
2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T18635动物防疫基本术语NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
3.1无菌sterility特定物体的内部和表面无活的微生物存在。
3.2无菌操作asepti coperation用于防止微生物进入动物体组织或其它无菌范围的操作技术。
3.3动物防疫抽样sampling for animal epidemic prevention为了预防、控制、净化、消灭动物疫病，按照一定的规则采集动物体液、脏器等样品的行为。
3.4灭菌sterilization以化学剂或物理方法消灭所有活的微生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、真菌及病毒，从而达到无菌的过程。
4一般要求4.1根据国家和北京市动物防疫的抽样计划，设定常规监测、疫点、疫区、受威胁区疫病监测抽样种类、数量、范围。
4.2抽样人员应是动物防疫人员，能够正确掌握抽样方法，熟练使用采样器具。
4.3根据不同的疫病或检验目的，采其相应的组织脏器、内容物、分泌物、排泄物或其他材料。
在无法估计病因时，要选取有代表性的样品，进行多点、全面的采集。
4.4凡发现动物有急性死亡，在排除炭疽病、狂犬病等烈性人兽共患病的情况下，方可剖检采样。
4.5防止污染环境，防止疫病传播，做好环境消毒和病害尸体无害化的处理。
4.6采集一份样品，使用一套器械与容器，使用过的非一次性用具应先消毒后清洗，一次性用具按照医疗废弃物处理方法处理。
4.7一次性消毒用品不应超期使用。
动物疫病采样技术规范
动物疫病采样技术规范1范围本标准规定了动物疫病检验样品采集、器械准备、包装及废弃物处置、记录、保存、运送等技术。
本标准适用于动物疫病病原学、病理组织学、血清学、免疫学等实验室检验所需样品的采集。
2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款，凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究可以使用这些文件的最新版本。
凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB 16548 畜禽病害肉尸及其产品无害化处理规程GB 16550 新城疫检验技术规范GB/T 18635 动物防疫基本术语GB/T 18935 口蹄疫诊断技术GB/T 18936 高致病性禽流感诊断技术NY/T 541 动物疫病实验室检验采样方法《中华人民共和国动物防疫法》《病原微生物实验室生物安全管理条例》《兽医实验室生物安全技术管理规范》《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范》3术语和定义下列术语和定义适用于本规范。
3.1 样品取自动物或环境、拟通过检验反映动物个体、群体或环境有关状况的材料或物品。
本标准所称样品，系待进行实验室检验的材料。
3.2 病料来自患病或可疑患病动物的被（待）检材料。
3.3 采集通过一定的方法，按照特定的程序和要求，对样品进行收集、处理及整理的过程。
4样品采集原则4.1 动物疫病样品采集遵循适时、典型、无菌、适量和生物统计的原则。
4.2 发现疑似炭疽，禁止解剖。
4.3 根据不同的检验要求进行样品采集，采取包括相应的组织器官、内容物、分泌物、排泄物或其他材料。
4.4 进行流行病学调查、抗体监测、动物群体健康评估或环境卫生检测时，样品数量应满足生物统计学的要求。
4.5 无法估计病因时，可对组织器官、分泌物和排泄物进行系统全面的的采集。
4.6 如患畜（禽）已死亡，应尽快采集样品，死亡时间夏天不得超过6h，冬天不超过24h.5器械准备5.1器械的选择根据采集样品的需要，分别选择不同的器械、容器等器材。
兽医临床样品的采集与送检规范
卫生检疫
பைடு நூலகம்
兽 医 临床 样 品 的 采 集 与 送检 规 范
樊丽鑫 袁 慧 宋红静 （ 河南省西峡县动物卫生监督所 ４ ７ ４ ５ ０ ０ ）
文献标识码 ：Ｃ 文 章编号 ：１ ０ ０ ７ — １ ７ ３ ３ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ６ － ０ ０ ５ ５ ・ ０ ２ 典 型组织 送检 ， 以淋 巴结 、扁桃 体 、肺脏 、肾脾 、血样 为主 。 （ ３ ）作细菌性疾 病检测 ，送检前５ ～ ７ ｄ 内应避免使
单” 。标 明送检单位 信息 ，如 养殖场名称 、送检人 姓名 、
动物 品种 、 日龄 及数 量等 ，还应 填写清 楚动物 临床表 现 情况 ，如发 病率 、死 亡率 、临床 表现 、病理变 化 、免疫
程 序 和 用 药 情 况 等 。 将 登 记 纸 张 与 病 料 一 同 送 至 实 验
（ ５ ）血样 采集 １ ￣ ５ ｍｌ 以上 ，静置平 放 １ ５ ～ ２ ０ ｍｉ ｎ ，充分 析 出血清 后３ — ７ ℃冷藏保 存 。 （ ６ ）样 品 的标 记 ：① 样 品采 集后 ，应 在 包 装袋 上 标 明样 品编 号 ，避 免不 同样 品 混 淆 。②送 检人应认 真填 写“ 客户送样 登记表” 或“ 样 品送 检
泄 物 。 无 法 怀 疑 是 什 么 传 染 病 时 ，应 全 面 采 取 。 （ ４ ） 血
剖检照 片 可发 送 电子版表 格至 兽医 实验室 电子 邮箱 ，以
辅助 诊 断 分 析 。
３ 临床样品的采集
３ ． １ 全血 样品 的采 集 猪 自耳静脉或 前腔静脉 ，家禽 自 翅静脉 ，其他家 畜 自颈静 脉采血 。用注射器 吸５ ％枸橼 酸 钠溶 液０ ． ５ ￣ ｌ ｍｌ （ Ｏ ． １ ｍｌ 的枸橼酸钠溶液溶液可抗 ｌ ｍｌ ｌ ｌ ｆ ｌ 液） ，
动物检疫样品采集及检疫方法
动物检疫样品采集及检疫方法动物检疫是一项重要的防疫工作，其目的是为了防止畜牧业和家禽业的疾病传播以及保护人类的健康。
在动物检疫工作中，采集样品并进行检疫是非常关键的环节。
本文将重点介绍动物检疫样品的采集方法以及检疫的方法和步骤。
1、血液样品：血液样品主要用于检测动物的免疫状态和传染病的诊断。
血液采集可以通过静脉采样、颈静脉穿刺或耳尖采样。
静脉采样是最常用的方法，可以通过静脉导管或针头直接采集血液样本。
2、呼吸道样品：呼吸道样品主要用于检测呼吸道传染病，如禽流感等。
呼吸道样品可以采集咽喉拭子、鼻腔拭子或气管插管样本。
咽喉拭子是常用的采样方法，可以通过棉签或拭子在咽喉部位进行采集。
3、粪便样品：粪便样品主要用于检测肠道传染病，如猪瘟等。
粪便样品采集可以通过直肠检查或粪便收集盒采集。
直肠检查需要专业人员进行，通过插入肛门进行样本采集。
粪便收集盒采集方法相对简单，可以将粪便样品收集在特制的盒子中。
4、组织样品：组织样品主要用于病理检测和疾病诊断。
组织样品的采集需要进行动物解剖，并将有病变的组织取样。
取样后可以进行病理学检查和病原学检测。
动物检疫的方法和步骤：1、样品采集：根据需要，采集相应的样品进行检测。
采样时需要注意卫生和无菌操作，避免交叉污染。
2、样品处理：根据样品的不同特性，进行适当的处理。
如血液样品可以离心分离血清或血浆，粪便样品可以进行稀释或提取，组织样品可以切片或冻存等。
4、样品运输：采集的样品需要进行适当的运输，确保样品的完整性和质量。
运输时需要注意保持恒温和避免振动。
5、样品检测：对采集的样品进行相应的检测和分析，如核酸检测、免疫学检测、生物学检测等。
6、结果分析和判定：根据检测结果进行分析和判定。
合格样品可以放行或放养，不合格样品要进行隔离或处理，以防止疾病传播。
总结：动物检疫样品的采集和检疫是确保畜牧业和家禽业安全的关键环节。
采集样品需要注意卫生和无菌操作，避免交叉污染。
在检疫过程中，对样品进行处理、保存、标记和运输，最终进行检测和分析，以确保动物的健康和人类的安全。
非洲猪瘟实验检测样品采集、包装与运输技术要求
首先袁应使用红色盖子的真空采血管从病猪 的耳缘静脉采血袁待血液静置一段时间后再进行分离袁从而 达到收集血清的目的遥 如此时血清的颜色偏红袁则证明样品 发生了溶血现象袁通常情况下袁一旦生猪死亡袁其血清样品就 很容易溶血遥 如分离好血清样品袁应立即进行检测工作袁或将 血清储存在适宜的温度下遥 若进行抗体检测袁应将血清样品 储存在 -20益 的环境内曰如进行病毒检测袁应将血清样品储 存在 -80益 的环境内遥
外部包装在盛装液体时袁 应不高于 4L曰而在盛装固 体时袁应不高于 4kg遥 同时 样品一定要放在不高于 4益 的环境下袁并送到附近 的动物防疫机构保存遥 在 此过程中袁 不可混合有血
窑
842000
D O I:10援3969/J.IS S N 援1671-6027援2021援08.020
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键
包 猪 词
非洲猪瘟专题
非洲猪瘟是一种急性尧高度接触性的传染病袁可在短时间 内造成生猪的死亡遥 目前袁该病已被世界卫生被列为重要动物 疫病遥 我国将其则为一类传染病袁该病会给养殖场户造成较大 的经济损失遥 因此袁相关人员应认真分析该病的临床症状袁并 研究该病的检测方法袁以保障非洲猪瘟实验检测的准确性遥 1 采样方法
品送至实验室检测袁而在检测过程中袁一定要遵循无菌操作
原则袁并明确样品采集尧包装尧运输的技术要求袁从而提高实
验室诊断的准确性袁并为后期防治非洲猪瘟提供参考性的依
据袁进一步促进养猪行业的稳定发展遥
参考文献
[1] 王海丰.非洲猪瘟实验检测样品采集尧包装与运输技术要求[J].
动物防疫样品采集技术规范标准
动物防疫样品采集技术规1 围本标准规定了动物卫生监督、动物疫情监测样品采集的基本原则、采样前的准备、样品采集的一般程序与要求。
2 规性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 18635-2002 动物防疫基本术语NY/T 541-2002 动物疫病实验室检验采样方法NY/T 5344.6-2006 无公害食品产品抽样规第6部分：畜禽产品NY/T 561-2002 炭疽诊断技术DB 43/306-2006 动物防疫监督管理规《中华人民国动物防疫法》（中华人民国主席令第71号）《高致病性动物病原微生物菌毒种或者样本运输包装规》（农业部公告第503号）３术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
3.1 动物卫生监督对各项有关动物防疫的法律、法规、标准、措施执行情况进行检查和评价，并依据检查情况按规定进行监督、批评以至处罚。
3.2 动物疫情监测对动物疫病的发生、流行、分布及相关因素进行系统的长时间的观察与检测，以把握动物疫病的发生情况和发展趋势。
3.3 样品取自动物或环境、拟通过检验反映动物个体、群体或环境有关状况的材料或物品。
3.4 抽样单元同一饲养地、同一饲养条件下的动物群体或个体；同一产地、同一批次的动物产品。
3.5 病料来自患病或可疑患病动物的被（待）检材料。
3.6 采样从动物或环境取得样品的过程。
3.7 随机抽样按照随机化的原则（总体中每一个观察单位都有同等的机会被选入到样本中），总体中抽取部分观察单位的过程。
3.8 流行率某个时间，特定地区某病（新老）感染动物数占调查动物总数的百分率。
3.9 被动监测动物或动物产品出现异情况、或怀疑有疫病存在，由相关部门作出的针对性监测。
畜禽产品质量安全检测样品采集与贮存规范
畜禽产品质量安全检测样品采集与贮存规范1 范围本标准规定了畜禽产品、排泄物等的抽样准备、抽样原则与方法、记录、样品封存和运输等。
本标准适用于我省畜禽产品监督检验、认证检验和仲裁检验的样品采集与贮存。
2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
DB43/ 426-2009 动物防疫样品采集技术规范3 抽样准备3.1 技术准备3.1.1明确抽样目的，确定检测类型（监督检验、认证检验和仲裁检验）。
3.1.2 了解被抽产品性状、质量安全状况、生产过程控制、生产地区和产品检测标准等。
3.1.3 确定被抽产品检验分析内容和检验项目。
3.1.4确定抽样方案、程序、方法和质量保证措施。
3.2 抽样人员3.2.1抽样人员应熟悉国家畜禽产品质量安全法律法规及相关标准。
3.2.2 抽样人员在抽样前应接受培训，培训内容主要包括：抽样相关知识和产品标准。
3.2.3每次每组抽样人员应不少于2名。
3.3 抽样用品3.3.1 抽样器具根据所抽畜禽产品性质，准备适用于样品抽取和保存要求的器具。
进行微生物检验抽样，应准备灭菌容器。
抽样器具应清洁、无异味、无污染、不渗漏等。
3.3.2 相关物件准备抽样单、任务书、封签、样品包装、贮存器具及抽样人员有效证件等。
4 抽样原则与方法4.1 原则12 并说明来意。
4.2 方法 4.2.1 组批4.2.1.1 养殖场（户）以同一养殖场、同一时段生产的同一产品为一批。
4.2.1.2 屠宰场以同一来源、同一时段屠宰的同种动物为一批。
4.2.1.３ 冷冻（冷藏）库与市场（超市/批发市场/农贸市场）以企业标示的批号或动物产品检疫合格证编号为一批。
4.2.1.4 生鲜乳收购站以同一贮罐、同一时段收购的生鲜乳搅拌均匀后为一批。
4.2.2 养殖场（户）抽样 4.2.2.1 蛋类样品在当日的产蛋架上随机抽样。
鸡样品采集的规范操作技术
现代农业科技2017年第23期动物科学在进行鸡的疫病监测和诊断时,经常需要采集鸡的血液、喉拭子、泄殖腔拭子、粪便和环境污染物等,熟练掌握鸡样品采集操作技术,对快速准确地诊断鸡病、做好鸡病预警预报工作、及时扑灭疫情具有重要意义。
为使从事动物疫病防控工作的初学者尽快掌握本项技术,提高工作效率,做到样品采集快速准确、应激损失降到最低、安全防护科学到位,现将鸡样品采集的规范操作技术阐述如下。
1样品采集前的准备工作一是监测人员准备好防护用品,例如穿戴好隔离衣、防护帽、胶靴或鞋套、乳胶手套、口罩和护目镜等。
二是备齐样品采集器械和用品,例如5mL 一次性注射器、1.5mL 离心管、灭菌试管、pH 值为7.4的磷酸缓冲液、酒精棉球、碘酊棉球、消毒剂、保温箱或泡沫箱、热水袋、冰袋、自封袋、胶布、封口膜、封条、皮筋、无菌棉签、剪刀、笔、记号笔和采样单等[1]。
三是组织好抓鸡人员,准备好高度适宜的采血台或桌椅。
2鸡翅静脉采血技术2.1采血操作一是鸡的保定。
抓鸡人员一手抓住鸡的2个翅膀,一手抓住鸡的2条腿,侧放于采血台(桌椅)上,鸡腹部朝向采血人员,鸡头在采血人员的左侧。
二是采血部位用酒精消毒。
调整注射器,使注射器内留出空隙,安装针头且使针头的斜面和注射器的刻度保持在同一面上。
三是采血人员左手食指拨开覆盖在翅静脉上的羽毛,左手拇指压住翅静脉的近心端,左手心握住干棉球以备止血,右手持注射器,针头斜面朝上,从翅静脉近心端向远心端水平刺入,有回血时左手拇指压住针头基部,稍用力缓缓地吸血,达到2mL 时迅速拔出针头,左手拇指用干棉球按压止血,稍许把鸡放回原处。
四是采好的血吸入少量空气,留有空隙以便血清析出,编号后针头斜向上,用皮筋捆绑和采样单一起放入有热水袋的保温箱(泡沫箱)内。
五是将采血场地清扫干净并消毒。
2.2注意事项一是不注意个人防护,采血人员有时被鸡的粪便、羽毛和血等污染或抓伤。
二是采血台或桌椅高度不合适,鸡的保定不合适,影响规范操作。
高致病性禽流感疫情处置技术规范
高致病性禽流感疫情处置技术规范（试行）第一项样品采集、保存及运输技术规范采集、保存和运输样品应当符合下列要求，并填写采样单。
一、样品采集（一）病禽1．至少从5只濒死禽采集样品。
样品包括：泄殖腔拭子和气管拭子（置于缓冲液中）各5个（小珍禽可采集新鲜粪便）；气管和肺的混样5个，肠管及内容物的混样5个；肝、脾、肾和脑等组织样品（不能混样）各5个。
2．分别采集至少10个病鸡的血样（急性发病期血清）。
（二）病死禽无发病禽时，可从死亡不久的病禽采样，采样要求同病禽。
棉拭子单独放入容器，容器中盛放含有抗菌素的pH值为7.0-7.4的PBS 液。
抗生素的选择视当地情况而定，组织和气管拭子悬液中加入青霉素（2000IU/mL）、链霉素（2mg/mL）、庆大霉素（50μg/mL）、制霉菌素（10000 IU/mL）。
但粪便和泄殖腔拭子所用的抗生素浓度应提高5倍。
加入抗生素后pH值应调至7.0-7.4。
二、样品保存和运输血样要单独存放，不能混合。
样品应密封于塑料袋或瓶中，置于有制冷剂的容器中运输，容器必须密封，防止渗漏。
样品若能在24小时内送到实验室，冷藏运输。
否则，应冷冻运输。
若样品暂时不用，则应冷冻（最好-70℃或以下）保存。
采样单样品名称样品编号采样基数采样数量采样日期保存情况冷冻（藏）被采样单位通讯地址联系电话邮编采样单位盖章采样人签名被采样单位盖章或签名年月日年月日备注：此单一式三份，第一联存根，第二联随样品，第三联由被采样单位保存。
第二项血清学诊断技术规范一. 血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验技术(一)材料准备1. 96孔V型微量反应板，微量移液器（配有滴头）。
2. 阿氏（Alsevers）液、鸡红细胞悬液，配制方法见附录A。
3. pH7.2的0.01mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）。
4. 高致病性禽流感病毒血凝素分型抗原和标准分型血清以及阴性血清。
(二) 操作方法1. 血凝（HA）试验（微量法）（1）在微量反应板的1-12孔均加入0.025mL PBS，换滴头。
鸡样品采集的规范操作技术
鸡样品采集的规范操作技术作者：王守星路东涛赵桂勇崔玉红来源：《现代农业科技》2017年第23期摘要鸡样品采集技术是做好疫病防控工作的一项基本技能，包括鸡血液采集、喉拭子和泄殖腔拭子采集、粪便和环境污染物采集。
尤其是从事疫病监测和疫病诊断的技术人员，必须熟练掌握该技术。
为提高基层防疫队伍基本技能，使其尽快准确掌握样品采集规范操作技术，本文从事前准备、采集操作要领和注意事项等方面进行详细阐述，以供参考。
关键词鸡；样品采集；操作技术中图分类号 S831 文献标识码 B 文章编号 1007-5739（2017）23-0230-02在进行鸡的疫病监测和诊断时，经常需要采集鸡的血液、喉拭子、泄殖腔拭子、粪便和环境污染物等，熟练掌握鸡样品采集操作技术，对快速准确地诊断鸡病、做好鸡病预警预报工作、及时扑灭疫情具有重要意义。
为使从事动物疫病防控工作的初学者尽快掌握本项技术，提高工作效率，做到样品采集快速准确、应激损失降到最低、安全防护科学到位，现将鸡样品采集的规范操作技术阐述如下。
1 样品采集前的准备工作一是监测人员准备好防护用品，例如穿戴好隔离衣、防护帽、胶靴或鞋套、乳胶手套、口罩和护目镜等。
二是备齐样品采集器械和用品，例如5 mL一次性注射器、1.5 mL离心管、灭菌试管、pH值为7.4的磷酸缓冲液、酒精棉球、碘酊棉球、消毒剂、保温箱或泡沫箱、热水袋、冰袋、自封袋、胶布、封口膜、封条、皮筋、无菌棉签、剪刀、笔、记号笔和采样单等[1]。
三是组织好抓鸡人员，准备好高度适宜的采血台或桌椅。
2 鸡翅静脉采血技术2.1 采血操作一是鸡的保定。
抓鸡人员一手抓住鸡的2个翅膀，一手抓住鸡的2条腿，侧放于采血台（桌椅）上，鸡腹部朝向采血人员，鸡头在采血人员的左侧。
二是采血部位用酒精消毒。
调整注射器，使注射器内留出空隙，安装针头且使针头的斜面和注射器的刻度保持在同一面上。
三是采血人员左手食指拨开覆盖在翅静脉上的羽毛，左手拇指压住翅静脉的近心端，左手心握住干棉球以备止血，右手持注射器，针头斜面朝上，从翅静脉近心端向远心端水平刺入，有回血时左手拇指压住针头基部，稍用力缓缓地吸血，达到2 mL时迅速拔出针头，左手拇指用干棉球按压止血，稍许把鸡放回原处。
采血送样规范操作
江油市畜牧兽医局关于印发《动物防疫样品采集、送检技术规范指导手册》的通知各派驻乡镇畜牧兽医站：为加强动物病原微生物实验室生物安全管理，规范高致病性动物防疫样品采集、运输包装等操作规程，根据农业部《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范》以及《动物疫病实验室检验采样方法（NY/T 541-2002）》，我局制定了《动物防疫样品采集、送检技术规范指导手册》，现印发你们，请遵照执行。
江油市畜牧兽医局2014年9月20日- 1 -动物防疫样品采集、送检技术规范指导手册一、范围本手册规定了动物防疫监测的样品采集的基本原则、采样前的准备、样品采集的一般程序与送检要求。
本手册适用于我市动物防控监测的样品采集工作。
二、样品采集的基本原则采样过程应注意无菌操作，使用一次性注射器及针头，其他用具应事先消毒，一套器械与容器只能采集一种样品，抽样时应注意减少和消除影响样品代表性的各种因素，使样品能最大限度地代表总体情况。
三、采样前的准备（一）采样人员采样人员应具有一定的专业技术知识，熟练掌握采样工作程序和采样操作技术。
（二）器具和试剂采样箱、酒精棉、注射器及针头、塑料离心管（每一批样品统一大小）、易封口样品袋、冰袋（三）记录和防护材料采样记录表（见附表一）、标签、签字笔、记号笔、记录本、口罩、一次性手套、防护服、防护帽。
四、采样方法（一）掌握好采血时间要掌握好采血时间与免疫日期的间隔。
鸡新城疫、禽流感、猪瘟、牛羊口蹄疫在免疫２１天后采血，猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病在免疫后２８天采血。
因为疫苗接种后，在动物体内产生抗体并达到一个稳定- 2 -水平，需要时间和过程。
（二）采前消毒，采后止血采血前用７５％酒精棉球局部消毒，以避免畜禽因采血而引起局部感染；鸡的皮肤游离性比较大，采血后容易形成血肿，所以采血完毕，要及时做好止血工作，即用酒精棉球压迫采血部位，防止血流过多。
注意用酒精棉球压迫前要挤净酒精，防止酒精刺激引起流血过多。
动物防疫样品采集技术
2仰卧保定 一般30千克以 下的猪，相对来讲，其体重、 体型都比较小一点，采取仰 卧保定方式。一助手抓握两 后肢，尽量向后牵扯引，另 一助手用手将下颌骨下压， 使头部贴地，并使两前肢与 体中线基本垂直。
迁安市动物疫病预防控制中心
犬的保定 1 扎口保定
用绷带在犬的上下颌缠绕两圈后收紧，交叉绕 于颈部打结，以固定犬嘴不得张开。
迁安市动物疫病预防控制中心
二、动物的采血技术 （一）牛的采血技术
2 尾静脉采血 牛尾静脉的解剖部位在牛尾腹侧中线处。进行牛尾采 血的具体部位为离尾根10厘米左右，第 4、5尾椎骨 交界中点凹陷处。 助手将牛牵好，采血者左手托起牛尾巴，右手对采血 部位消毒后，持一次性注射器，右手食指控制针头深 度，由下向上垂直刺入牛尾腹侧中心线位置约0.5cm 见有回血即可抽血，一般采用5ml即可，拔出采血针， 用酒精棉球压一下针孔防止出血。
迁安市动物疫病预防控制中心
羊的保定
羊的性情温顺，保定较容易。
羊有“聚堆”的习性，为捉捕羊的 后肢造成有利的条件。在羊群中捉 羊时，可抓住一后肢的跗关节或跗 前部，羊能被控制。
迁安市动物疫病预防控制中心
羊的保定
保定者抓住羊的角，骑在羊背
部，作为静脉注射或采血等操作
时的保定。
迁安市动物疫病预防控制中心
迁安市动物疫病预防控制中心
牛的保定
2鼻钳保定法 用鼻 钳经鼻孔夹紧鼻中 隔，用手握持钳柄 加以保定。
迁安市动物疫病预防控制中心
牛的保定
3 两后肢保定法
迁安市动物疫病预防控制中心
牛的保定 两后肢绳套固定
3 两后肢保定法
迁安市动物疫病预防控制中心
牛的保定 两后肢“8”字形缠绕固定 法。 用1条长绳在两后肢跗关节 上胫部作“∞”型缠绕，将 两后肢胫部固定在一起，拉 紧绳子后打一活结固定。
动物防疫样品采集技术规范标准
动物防疫样品采集技术规1 围本标准规定了动物卫生监督、动物疫情监测样品采集的基本原则、采样前的准备、样品采集的一般程序与要求。
2 规性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 18635-2002 动物防疫基本术语NY/T 541-2002 动物疫病实验室检验采样方法NY/T 5344.6-2006 无公害食品产品抽样规第6部分：畜禽产品NY/T 561-2002 炭疽诊断技术DB 43/306-2006 动物防疫监督管理规《中华人民国动物防疫法》（中华人民国主席令第71号）《高致病性动物病原微生物菌毒种或者样本运输包装规》（农业部公告第503号）３术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
3.1 动物卫生监督对各项有关动物防疫的法律、法规、标准、措施执行情况进行检查和评价，并依据检查情况按规定进行监督、批评以至处罚。
3.2 动物疫情监测对动物疫病的发生、流行、分布及相关因素进行系统的长时间的观察与检测，以把握动物疫病的发生情况和发展趋势。
3.3 样品取自动物或环境、拟通过检验反映动物个体、群体或环境有关状况的材料或物品。
3.4 抽样单元同一饲养地、同一饲养条件下的动物群体或个体；同一产地、同一批次的动物产品。
3.5 病料来自患病或可疑患病动物的被（待）检材料。
3.6 采样从动物或环境取得样品的过程。
3.7 随机抽样按照随机化的原则（总体中每一个观察单位都有同等的机会被选入到样本中），总体中抽取部分观察单位的过程。
3.8 流行率某个时间，特定地区某病（新老）感染动物数占调查动物总数的百分率。
3.9 被动监测动物或动物产品出现异情况、或怀疑有疫病存在，由相关部门作出的针对性监测。
重大动物疫病送样要求
重大动物疫病疑似病例采样送样要求一、送样种类：1、禽流感：省中心对各地监测过程中发现的阳性样品进行复核，并通过信息系统上报国家中心。
省中心对禽流感疑似病例进行检测，由国家参考实验室进行确认。
2、口蹄疫：省中心对各地监测过程中发现的疑似病例和阳性样品进行确认，并通过信息系统上报国家中心。
3、小反刍兽疫：省中心对疑似病例进行检测，由国家参考实验室进行确认。
经确认后，通过信息系统上报国家中心。
二、文字材料动物疑似病例样品由动物防疫部门送检，送检样品的同时，需附：1、加盖送样单位公章的采样单一式三份，其中收件单位一份，采样单位一份，随样品一份。
必须注明采样地点、动物种类、样品种类及数量、样品编号、送样人姓名及联系方式等。
2、加盖送样单位公章的疑似病例发生流行情况报告1份。
3、加盖市州级动物疫控中心签字盖章的动物产品（样品）疫病监测委托协议书1份。
三、样品要求（一）高致病性禽流感1、活禽采集气管和泄殖腔双棉拭子，小珍禽或野禽采集新鲜粪便，2ml灭菌离心管加适量PBS液密封保存。
2、死禽采集气管、脾、肺、肝、肾或脑组织3～5g，洁净自封袋或灭菌小瓶密封保存。
3、未免疫禽群无菌血清1.5ml或2ml灭菌离心管密封保存。
（二）口蹄疫1、无菌血清用1.5ml或2ml灭菌离心管密封保存。
2、未破裂水泡用灭菌注射器吸出后装入灭菌离心管密封保存。
3、剪取新鲜水泡皮用灭菌小瓶加适量50%甘油-磷酸盐酸缓冲液（pH7.4）密封保存。
4、O-P液采集时注意防止反刍胃内容物污染，离心管密封保存。
5、屠宰家畜组织样品采集3～5g装入洁净自封袋或灭菌小瓶密封保存。
可采集淋巴结、肾脏或心脏等组织。
（三）小反刍兽疫1、采集口鼻棉拭子或淋巴结用灭菌小瓶或灭菌离心管密封保存。
2、未免疫羊无菌血清用1.5ml或2ml灭菌离心管密封保存。
四、样品保存及运送1、封装样品贴上标签，写明编号，并与采样单和委托协议书一一对应。
2、样品运送过程中用冷藏箱保存，以最快方式派专人送到指定地点，6小时内送达。
动物疫病监测采样技术(修改)规范
• 2. 羽毛采集方法 拔取受检鸡含羽髓丰满 的翅羽或身上其他部位大羽，将含有羽髓 的羽根部分按编号分别剪下收集于小试管 内，于每管内滴加蒸馏水2～3滴(羽髓丰满 时也可不加)，用玻璃棒将羽根挤压于试管 底，使羽髓浸出液流至管口，用滴管将其 吸出。
第四节 动物活体样品的采集及技术要求（3）
• 二、猪活体的样品采集 • 1. 扁桃体采取方法 从活体采取扁桃体样 品时，应使用专用扁桃体采集器：先用开 口器开口，可以看到突起的扁桃体，把采 样钩放在扁桃体上，快速扣动扳机取出扁 桃体放离心管中，冷藏送检。
第三节 血液样品的采集方法及技术要求（8）
• 2. 小鼠采血，可以先麻醉，一般取其仰卧姿势， 在其锁骨与剑突连线的中点沿胸骨左边缘进针5毫 米左右，边刺人边抽吸，即可采血。也可进行尾 静脉采血，固定动物并露出鼠尾。将尾部浸在45 ％左右的温水中数分钟，使尾部血管充盈。再将 尾擦干，用锐器(刀或剪刀)割去尾尖o．3～o．5 厘米，让血液自由滴人盛器或用血红蛋白吸管吸 取，。采血结束，伤口消毒并按压止血。 小鼠通 常采用眼球摘除法采血。若需反复采血可采用毛 细血管眼内眦采血法或断尾采血法。
第三节 血液样品的采集方法及技术要求（11）
• 3．血片 采取末梢血液、静脉血或心血。 取一滴血液样品，滴在已消毒的载玻片上， 另取一片载玻片作推片，将推片自血滴左 侧向右移动，当血滴均匀地附着在两片之 间后再将推片向左平稳地推移(两片成30～ 45度夹角)，推出均匀的血膜，火焰固定后 置于载玻片盒或载玻片架中。
动物疫病监测的采样技术
目的与意义
• 在动物疫病监测中，采样方法、采样部位、 采样数量和样品质量直接决定监测结果的 准确性和监测结论的科学性。因此，对采 样人员采样方法、技术都有特定的要求。 采样人员必须是兽医技术人员，而且应熟 悉采样器具的使用，掌握正确采样方法。 本片旨在为从事采样工作的技术人员如何 科学采样提供技术指导。
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动物防疫样品采集技术规范
1 范围
本标准规定了动物卫生监督、动物疫情监测样品采集的基本原则、采样前的准备、样品采集的一般程序与要求。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 18635-2002 动物防疫基本术语
NY/T 541-2002 动物疫病实验室检验采样方法
NY/T 5344.6-2006 无公害食品产品抽样规范第6部分：畜禽产品
NY/T 561-2002 炭疽诊断技术
DB 43/306-2006 动物防疫监督管理规范
《中华人民共和国动物防疫法》（中华人民共和国主席令第71号）
《高致病性动物病原微生物菌毒种或者样本运输包装规范》（农业部公告第503号）
３术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
3.1 动物卫生监督
对各项有关动物防疫的法律、法规、标准、措施执行情况进行检查和评价，并依据检查情况按规定进行监督、批评以至处罚。
3.2 动物疫情监测
对动物疫病的发生、流行、分布及相关因素进行系统的长时间的观察与检测，以把握动物疫病的发生情况和发展趋势。
3.3 样品
取自动物或环境、拟通过检验反映动物个体、群体或环境有关状况的材料或物品。
3.4 抽样单元
同一饲养地、同一饲养条件下的动物群体或个体；同一产地、同一批次的动物产品。
3.5 病料
来自患病或可疑患病动物的被（待）检材料。
3.6 采样
从动物或环境取得样品的过程。
3.7 随机抽样
按照随机化的原则（总体中每一个观察单位都有同等的机会被选入到样本中），总体中抽取部分观察单位的过程。
3.8 流行率
某个时间内，特定地区某病（新老）感染动物数占调查动物总数的百分率。
3.9 被动监测
动物或动物产品出现异情况、或怀疑有疫病存在，由相关部门作出的针对性监测。
3.10 主动监测
按照特定目的而制定有针对性的监测方案，并按计划实施的监测。
4 样品采集的基本原则
4.1 先排除后采样的原则
急性死亡的动物，怀疑患有炭疽时，应先进行血液抹片镜检，确定不是炭疽后，方可解剖采样。
4.2 尽早采样的原则
采集死亡动物的病料，应于动物死亡后2h以内采集，最迟不得超过6h。
4.3 无菌操作的原则
采样过程应注意无菌操作，刀、剪、镊子、器皿、注射器、针头等用具应事先消毒，一套器械与容器只能采集一种病料。
4.4 合理选择采样方法的原则
根据采样的目的、内容和要求合理选择样品采集的种类、数量、部位与抽样方法，抽样时应注意减少和消除影响样品代表性的各种因素，使样品能最大限度地代表总体情况。
4.5 生物安全防护的原则
采样人员应加强个人防护，严格遵守生物安全操作的相关规定，避免对样品、环境的污染和对采样人员的伤害。
5 采样前的准备
5.1 采样人员
采样人员应熟悉动物防疫的有关法律规定，具有一定的专业技术知识，熟练掌握采样工作程序和采样操作技术。
一次采样不得少于两人，动物卫生监督采样时至少一人为动物防疫监督员。
5.2 器具和试剂
5.2.1 器具
5.2.1.1 动物检疫器械箱、采样箱、保温箱或保温瓶、解剖刀、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、碘酒棉、注射器及针头。
5.2.1.2 样品容器（如西林瓶、平皿、1.5mL 塑料离心管、10mL 玻璃离心管及易封口样品袋、塑料包装袋等）。
5.2.1.3 试管架、塑料盒（1.5mL 小塑料离心管专用）、铝盒、瓶塞、无菌棉拭子、胶布、封口膜、封条、冰袋。
5.2.1.4 取样工具和盛样器具应当洁净、干燥，必要时作灭菌处理。
5.2.2 试剂
根据所采样品的种类和要求，准备不同类型的存放试剂，如PBS 缓冲溶液、30%甘油缓冲溶液等。
5.3 记录和防护材料
采样单、不干胶标签、签字笔、圆珠笔、记号笔、采样单、记录本、口罩、一次性手套、乳胶手套、防护服、防护帽、护目镜、胶靴等。
6 样品采集的一般程序与要求
6.1 采样方法
根据采样目的、内容和要求，选择样品采集的种类和方法
6.2 样品的抽取
6.2.1 被动监测和动物卫生监督检查时，采样应针对有患病征兆的动物或有明显病变的动物产品，在无法确定病因时，采集的样品应尽量全面。
6.2.2 主动监测时，应根据动物年龄、季节、周边疫情情况估计其流行率，确定抽样单元，在抽样单元内遵循随机取样原则，抽样数量应尽量满足统计学要求。
6.2.3 对具有食用、使用价值的样品，严禁随意扩大抽样的种类和数量。
采样数量一般要求见表1。
表1 动物产品样品采集数量
样品抽取后，采样人员在现场将样品分成三份，两份送检，一份留样备查。
6.4 记录和标注
样品信息详见附录B和附录C，采样单应用钢笔或签字笔逐项填写（一式三份），样品标签和封条应用圆珠笔填写，保温容器外封条应用钢笔或签字笔填写，小塑料离心管上可用记号笔作标记。
6.5 样品包装
6.5.1 品种和种类不同的样品不应混样, 每份样品应仔细分别包装，在样品袋或平皿外面贴上标签，标签注明样品名、样品编号、采样日期等。
6.5.2 存放样品的包装袋、塑料盒及铝盒应外贴封条，封条上应有采样人签章，并注明贴封日期，标注放置方向，切勿倒置。
6.5.3 高致病性动物病原微生物样品运输包装参照《高致病性动物病原微生物菌毒种或者样本运输包装规范》执行。
6.6 样品保存和运送
6.6.1 包装好的样品应置于保温容器中运输，保温容器应密封，防止渗漏。
一般使用保温箱或保温瓶，保温容器外贴封条，封条有贴封人（单位）签字（盖章），并注明贴封日期。
6.6.2 一般情况下，样品应在特定温度（2～6）℃下运输，血清样品、拭子样品和组织样品可先作暂时的冷藏或冷冻处理，然后在保温箱内加冰袋冷藏运输。
6.6.3 样品包装后应以最快最直接的途径送往实验室。
样品到达实验室后，若暂时不处理，应冷冻（以-70 ℃或以下为宜）保存，不宜反复冻融。