吉姆萨配方

吉姆萨染色方法显示X染色质结构

吉姆萨粉1 g ,甘油

(AR) 66 mL ,甲醇(AR) 66 mL 。先将吉姆萨粉溶于少

量甘油中,用研钵研磨成匀浆,再将全部甘油倒入。

放入56 ℃温箱中2 h ,取出将甲醇加入混匀,即配成

原液,于棕色瓶中密封保存备用。临用时加入pH

为6. 8 的磷酸缓冲液( V∶V = 9∶1) 配成吉姆萨染色剂。

（二）吉姆萨染色法

此法可将细胞核与胞质同时染色，故便捷快速；但染液配制技术不易准确掌握，效果常不如HE染色稳定。

1.吉姆萨(Giemsa)染液的配制

（1）取1.5g吉姆萨粉末放入50ml甘油，置于60℃温箱，约3h后溶解。

（2）取出后倒入50ml中性甲醇，即为母液。于棕色瓶可长久保存。需要注意的是，有的甲醇内含醋酸，会使染液中的伊红沉淀出来，不利染色。

（3）将母液与0.1 mol／LPBS(Ph6.9～7.2)按1:9混合即成工作液。吉姆萨染

液对pH极敏感，偏酸时染色过红，偏碱时则过蓝。所以，工作液宜现用现配，保存时间不超过48h以免被CO2酸化。

瑞氏－姬姆萨染色方法

1、试剂配制：

原料:A:瑞氏染粉0.8--1克；吉姆萨染粉0.5克

B:甘油33ml

C：甲醇500ml

配法：将A放入研钵中，加入少量B研磨，再加入少量B磨，再加入少量B磨……倒出，将未溶部分，继续加入B磨……>全溶，加入C，或中间加入C 亦可。

2、染色步骤：

滴数滴入玻片盖满标本，30秒，再加入双蒸水或PBS2-3倍染1-3分中，倾去染液，水洗……封片。

吉姆萨染色液贮备液配制：吉姆萨粉1g，加甘油60ml，加热并搅拌，待溶解冷却至室温，再加甲醇33ml

吉姆萨(Giemsa)氏母液

将吉姆萨粉末1g先溶于少量甘油，在研钵内研磨30min以上，至看不见颗粒为止，再将全部(66mL)剩余甘油倒入，于56℃温箱内保温2h。然后再加入甲醇(66mL)，搅匀后保存于棕色瓶中。母液配制后放入冰箱可长期保存，一般刚配制的母液染色效果欠佳，保存时间越长越好。临用时用pH 6.8的磷酸盐缓冲液稀释10倍。

二、吉姆萨(Giemsa)氏母液

将吉姆萨粉末1g先溶于少量甘油，在研钵内研磨30min以上，至看不见颗粒为止，再将全部(66mL)剩余甘油倒入，于56℃温箱内保温2h。然后再加入甲醇(66mL)，搅匀后保存于棕色瓶中。母液配制后放入冰箱可长期保存，一般刚配制的母液染色效果欠佳，保存时间越长越好。

临用时用pH 6.8的磷酸盐缓冲液稀释10倍。

Giemsa染液的配制:

吉姆萨粉(Giemsa stain) l.0g

甘油(AR) 66ml

甲醇(AR) 66ml

将Giemsa粉放入研钵中，先加入少量甘油，研磨至无颗粒为止，然后再将全部甘油倒入，放56℃温箱中2h后，加入甲醇，将配制好的染液密封保存棕色瓶内(最好于0~4℃保存)。

磷酸盐缓冲液配制：

PH 6.81：Na2HPO4（1/15M）50mL+KH2PO4(1/15M)50mL

PH 6.98: Na2HPO4（1/15M）60mL+KH2PO4(1/15M)40Ml

PH 7.17：Na2HPO4（1/15M）70mL+KH2PO4(1/15M)30mL

PH 7.38：Na2HPO4（1/15M）80mL+KH2PO4(1/15M)20mL