柞蚕蛹虫草栽培技术

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柞蚕蛹虫草的栽培, 所用的蚕蛹必须是柞蚕滞育蛹, 在保 选将蛹茧放在 0℃以上, 4℃以下的变温中保护, 加深蛹体滞育
蛹期间不能发育。注射接种, 是用针刺破几丁质的蛹皮, 注入 程度, 延长解除滞育时间。作虫草用茧的标准: 千粒茧重 10 kg
蛹虫草菌, 这就要求液体菌种不能有杂菌和过多固形物, 因此 以上( 含 10 kg) , 死笼茧率在 1%以 下 ( 含 1%) , 健 蛹 率 达 95%
2.3 硬 质 塑 料 盘 ( 育 水 稻 苗 用 的 ) 长 60 cm, 宽 35 cm, 边 高 6 cm, 底 面 积 2 100 cm2, 每 盘 装 蚕 蛹 300 个 左 右 ( 雌 雄
6年 ( 2002- 2007 年 ) 实 践 和 完 善 , 目 前 出 草 率 达 75%以 上 , 达 随 机 ) 。
培养基要彻底的灭菌和澄清。蛹虫草菌又是低温型的真菌, 根 以 上 , 内 染 茧 5%以 下 , 目 检 微 粒 子 1%以 下 ( 含 1%) , 没 有 发
收稿日期: 2007- 12- 28
育蛹和不成熟蛹。
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发和利用。
灭 菌 器 、摇 床 、恒 温 箱 ) 、消 毒 室 ( 消 毒 蚕 蛹 、塑 料 盘 、罐 头 瓶
用柞蚕蛹成功培育出蛹虫草, 有自然感染法( 吉林省蚕业 等) 、接种室( 内设紫外灯、超净工作台) 、发菌室( 内设空调、栽
科学研究所 1993 年获国家发明专利) 和人工注射法。注射法 培架) 、出草室( 内设空调、栽培架) 、库房等。各室之间有内隔
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0.08 mL大 于 0.15 mL) , 迅 速 与 蛹 体 平 行 向 后 抽 出 针 体 ( 后 手 不可高抬, 否则出血多) 。然后把接种后蚕蛹放在消过毒的塑 料盘中。每人每小时约接种蚕蛹 350 个, 接完种后将塑料盘送 发菌室内发菌。 4.3 菌丝培养 4.3.1 低温避 光 培 养 发 菌 室 在 使 用 前 三 天 , 用 3%甲 醛 进 行消毒, 室外过道用石灰封闭地面, 发菌室的门窗用黑色塑料 薄膜或窗帘( 黑红布做) 遮挡。将装蛹的塑料盘分层放在栽培 架上发菌。控制发菌室的温度在 16℃左右, 湿度 60%以上。经 7 d 培养以后, 蚕蛹逐渐开始僵化, 把僵化好的蚕蛹随时挑出, 集中放在塑料盘中, 转入下一个室内继续培养, 未僵化好的蚕 蛹放在原发菌室。 4.3.2 提温增菌 促进后熟 挑出来的僵化蛹, 送进另 外 一 个发菌室, 继续在避光的条件下发菌。所不同的是, 温度提高, 控制在 23 ̄24℃, 湿度不变, 这样再经过 7 ̄8 d, 促使菌丝后 熟, 尽早结束菌丝营养生长期, 转向生殖生长阶段。判断营养 生长转向生 殖 生 长 的 主 要 标 志 : 菌 龄 达 15 ̄17 d; 蛹 体 和 环 节 间膜处长出白色菌丝; 蛹顶由白色变成淡褐色。以上三个指 标, 菌龄为参数, 后两条必须具备, 标志着营养生长结束, 转向 生殖生长阶段, 就可转入诱导原基形成阶段。 4.4 诱导原基与出草管理 4.4.1 诱 导 原 基 形 成 将 菌 丝 营 养 生 长 结 束 的 蚕 蛹 装 入 瓶 内, 通过温差刺激, 补光诱发原基尽早形成。首先依据发菌室 的蚕蛹数( 每盘 蛹 约 300 个 , 每 个 罐 头 瓶 放 蚕 蛹 7 ̄8 个 , 每 个 培养架放罐头瓶 300 个) 准备足够数量的罐头瓶。将罐头瓶洗 刷干净, 放 在 消 毒 室 内 ( 包 括 扎 瓶 口 的 塑 料 薄 膜 、绳 等 ) , 用 甲 醛加高锰酸钾熏蒸消毒后备用。其次在上瓶前将长满白点的 蚕蛹, 用臭氧机水消毒 5 min。控净表面多余的水, 在超净工作 台内, 装入罐头瓶( 平摆一层) 中, 用塑料膜复盖瓶口, 用线绳 扎紧瓶口。送入消毒、光线充足的屋内, 摆在栽培架上。温度控 制 : 白 天 保 持 20 ̄22℃, 夜 间 降 温 15 ̄17℃; 白 天 以 自 然 光 为 主 , 傍 晚 用 日 光 灯 补 助 照 明 3 ̄4 h, 湿 度 保 持 在 65%, 湿 度 不 可过高, 防止菌丝徒长; 每天 9: 00 通风 1 次, 每次 30 min。这 样经过 5 ̄8 d 培养, 长出黄色的小芽形成了原基, 转入出草阶 段。 4.4.2 恒 温 出 草 原 基 形 成 后 室 内 温 度 控 制 在 19 ̄22℃, 不 可 高 过 22℃或 低 于 19℃; 室 内 要 有 充 足 的 散 射 光 , 傍 晚 可 加 补助光 3 ̄4 h, 调 整 瓶 子 及 光 源 方 向 , 以 免 蛹 虫 草 在 瓶 内 弯 曲 生长; 待蛹虫草长到 1㎝高时, 可将室内的相对湿度调高到 75%, 用喷雾器向四周墙壁及地面喷水( 水中加消毒剂) 调湿, 并进行适当的通风换气, 以保证空气新鲜。这样经过 15 ̄17 d, 蛹虫草生长高度已接近瓶口, 即可采收。
接 种 柞 蚕 蛹 143.3 万 粒 , 获 得 蛹 虫 草 72.87 万 株 ( 一 粒 蛹 为 一 架子放硬质塑料盘 32 个或摆罐头瓶 300 个。
株草) , 出草率为 50.9%, 比自然感染法( 30%) 提高 20.9%。从 接 种 到 采 草 仅 用 45 d, 比 自 然 感 染 法 ( 65 d) 缩 短 20 d。 又 经
为单细胞组成, 细胞略显呈长方形。成熟的蒴果将种子脱出堆 平 均 单 果 重 17.4 mg, 按 平 均 单 株 成 彭 大 果 58 个/株 计 , 则 每
积肉眼观察, 可见膨大果有胚种子为棕红色, 瘦果无胚种子则 株可产种子 1 g。
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食用菌
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成一定大小且正常成熟的蒴果, 说明天麻属有限花序植物, 在栽 判定种子新鲜程度的根据, 有待进一步研究。
植繁种管理中无需打顶。二是蒴果采收后挖出植株观察, 地下箭
镜下显微测量天麻种子及种胚的大小, 有胚种子长宽变
麻仅部分变空, 仍留有 40% ̄50%的新鲜麻肉, 说明箭麻生理成 幅( 473 ̄851) μm×( 149~270) μm, 平均 637 μm×192 μm, 无胚
文章编号 1000- 8357( 2008) 04- 0045- 02
2 栽培设备
蛹 虫 草 ( Cordceps militarisc ( L) Linr 又 称 北 冬 虫 夏 草 , 2.1 栽培房屋 栽培用房的位置应座北向南, 地势高燥, 通
是 麦 角 菌 科 虫 草 属 的 模 式 种 。 经 研 究 证 明 蛹 虫 草 的 化 学 风良好, 采光时 间 长 , 有 利 保 温 、调 湿 与 通 风 , 上 下 水 道 贯 通 ,
到了高产、节能、增效之目的。现将柞蚕蛹虫草栽培技术总结 2.4 罐头瓶 规格 500 mL, 每瓶装蚕蛹 8 个( 雌雄随机) 。
如下, 以供大家参考。
2.5 柞蚕蛹茧的准备 栽培蚕蛹虫草所用的蚕蛹必须是滞
1 栽培模式
育蛹。一化蚕化蛹后直接使用。二化蚕茧自 10 月上旬采摘回 家, 要在 20℃温度、17℃温度、13℃温度中各保护 20 d。经过摇
2.4 箭 麻 自 身Baidu Nhomakorabea蓄 积 养 分 对 种 子 形 成 的 作 用 天麻正常株开 显乳白色。据此认为, 种子颜色应可作为判定种子质量的外观
花授粉后, 从其种子形成动态可看出三个问题: 一是天麻上、中、 标准。镜检种胚, 可见初收下种子的种胚有棕红色和近黑色两
下整株蒴果大小基本相同, 最终均能正常成熟, 即使顶端也能形 种, 随着贮藏时间的拖长, 均变成棕红色。此种现象能否作为
的栽培工艺繁杂, 条件要求严格, 绝大多数厂家还是用自然感 门相连, 两室之间应有缓冲间, 地面铺设地面砖, 四周用水泥
染法进行小批量生产。经 4 年( 1994- 1997 年) 生产实践, 出草 瓷砖贴墙, 便于洗刷和消毒。
率 低 ( 不 足 30%) , 产 草 量 远 远 满 足 不 了 制 药 生 产 的 需 要 。 2.2 栽培架 要求坚固结实, 既能承重, 又便于拆卸、搬运和
食用菌
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据它的生物学特性, 运用控温、调湿、补光等措施, 使之适合于
柞蚕蛹虫草栽培技术
马文石 李凤芹 金 英
( 吉林省蚕业科学研究所, 吉林永吉 132200)
蛹虫草生长的需要。分批接种、发菌、出草, 往复循环。这样从 翌 12 月 15 日 - 翌 年 3 月 15 日 用 柞 蚕 蛹 生 产 柞 蚕 蛹 虫 草 , 6 月 15 日- 10 月 15 日 用 培 养 基 生 产 蛹 虫 草 , 既 提 高 了 房 屋 的利用率, 又达到长年栽培蛹虫草之目的。
成 分 与 冬 虫 草 基 本 相 同 , 并 具 有 抗 疲 劳 、 提 高 机 体 免 疫 电力充足。栽培蛹虫草所需主要房间, 按工作先后次序一字排
力 、抑 制 肿 瘤 等 作 用 。 因 此 , 国 内 外 有 关 单 位 争 相 研 究 开 开, 即器具洗刷室( 内设水槽、臭氧机) 、菌种制作室( 内设高压
熟后, 其自身蓄积养分, 供给整株种子正常成熟后还有富余。三 种子偏 小 , 长 宽 变 幅 ( 338 ̄540) μm×( 135 ̄189) μm, 平 均
是试验是在未伴栽蜜环菌条件下进行的, 由此表明, 箭麻栽植后 449 μm×156 μm; 测 量 种 胚 的 大 小 , 长 宽 变 幅 ( 148 ̄222) μm×
1998 年笔者进行提高出草率的研究, 依据柞蚕蛹不同阶段的 消毒。规格内径长 140 cm, 宽 60 cm, 高 155 cm, 分 4 层, 每层
生理状态, 真 菌 致 使 柞 蚕 罹 病 原 理 , 蛹 虫 草 的 生 长 特 性 , 以 注 间隔 33 cm, 底层离地面 20 cm。四周和间隔的框架用三角铁
供给种子形成的养分已不再与蜜环菌的活动有关。
( 68 ̄109) μm, 平均 183 μm×82 μm。
2.5 天麻种子和种胚的形态观察及大小测量 镜下观察天 2.6 天麻产种量的测定 测定正常成熟蒴果的单果产籽数,
麻种子长纺锤形, 胚 桃 核 形 , 上 端 尖 , 无 胚 乳 ; 种 皮 膜 质 透 明 , 变 幅 10 953 ̄32 742 粒 , 平 均 21 742 粒 ; 测 定 单 果 产 籽 重 量 ,
3 菌种的选择
选用 长 势 优 良 、无 病 虫 侵 染 的 子 座 ( 子 实 体 ) , 分 离 提 纯 , 做出草鉴定后挑选优良菌株, 进行栽培; 也可到信得过的科研 单位或菌种厂引进优良菌种栽培。
4 室内栽培技术
4.1 注射菌种制作 4.1.1 培 养 基 配 方 葡 萄 糖 1%, 蛋 白 胨 1%, 全 脂 奶 粉 1%, 磷 酸 氢 二 钠 0.1%, 磷 酸 二 氢 钾 0.15%, 硫 酸 镁 0.3%, 活 蚕 蛹 12%, 维生素 B1 20 mg/L, 加水 1 000 mL, pH 自然。 4.1.2 培养基制作 取活蚕蛹 120 g, 把每个蚕蛹用手撕开, 放 入 1 000 mL 冷 水 中 , 煮 沸 后 微 沸 保 持 20 min, 用 4 层 纱 布 过滤, 弃去蛹渣留下滤液, 用开水定溶 1 000 mL。依次加入硫 酸 镁 3 g, 磷 酸 二 氢 钾 1.5 g, 磷 酸 氢 二 钠 1 g, 蛋 白 胨 10 g, 奶 粉 10 g, 充分溶解。然后澄清: 作好的液体培养基放在一旁冷 却, 打一个鸡蛋清于烧杯中, 用筷子搅成泡沫, 当培养基冷却 到30℃左 右 时 , 把 鸡 蛋 清 倒 入 培 养 液 中 , 充 分 搅 拌 均 匀 , 装 入 2 000 mL 三角瓶中, 塞棉塞, 加牛皮纸扎紧瓶口, 放入高压 灭菌器 , 用 0.137 MPa 125℃保 持 20 min。 打 开 灭 菌 器 用 双 层 纱布将澄清液滤出, 放入研碎的维生素 B1 20 mg, 葡萄 糖 10 g 搅拌溶解。装瓶灭菌: 取 500 mL 三角瓶, 装入上述培养基 150 mL, 放入玻璃 球 20 粒 , 加 棉 塞 盖 牛 皮 纸 札 紧 瓶 口 , 放 入 高 压 灭 菌 器, 用 0.137 MPa 125℃灭菌 30 min。 4.1.3 接种培养 灭菌后的培养基, 在无菌室内, 按无菌操作 规程, 用移植铲将斜面母种接入瓶中约 2 cm2 菌 片 菌 丝 面 朝 上 , 放 在 恒 温 箱 内 ( 25℃) 静 止 培 养 24 h 后 , 用 150 r/min 往 复 式摇床进行振荡培养。培养 96 h 取样对菌种进行分析检测。 4.1.4 合格菌种标准 醪液澄清不混浊, 菌球多, 形状一致, 发育齐一。用手晃动三角瓶, 浮起的菌球 5 min 不下沉, 能嗅 到虫草香味。菌种制成玻片标本, 用显微镜检查, 有无与虫草 菌丝不一样的微生物。经过一系列的检测, 将不被污染的菌种 于第 5 d( 发酵终了前一天) 对蚕蛹进行注射接种。 4.2 注射接种 4.2.1 接种前准备 依据发菌室面积大小, 按 1 m2 摆 栽 培 架 1 个, 硬质塑料盘 32 个, 装蚕蛹 9 600 粒计算出一次栽培数 量, 剖开蚕茧, 倒出蚕蛹, 剔出头部变色蛹、缩膛蛹、软蛹、翅盖 不严蛹、伤蛹、死蛹一同埋掉, 剩下的好蛹备用。将发菌室墙壁 和天棚用石灰浆粉刷一遍。根据需要, 栽培架、塑料盘、罐头瓶 经过洗刷摆在室内, 再用 3%甲醛喷洒, 加温 25℃密闭消毒 24 h 备用。依据接种人员数目, 每人准备 5 套一次性 1 mL 的针管 ( 带 6.5 号 针 头 ) , 100 mL 三 角 瓶 4 个 , 洗 刷 干 净 , 瓶 口 用 高 压 塑料包好扎紧, 将上述用品用牛皮纸包好, 用 0.137 MPa 灭菌 30 min 备用。 4.2.2 注射接种 在消毒室内, 将选好的蚕 蛹 用 臭 氧 水 洗 2 次, 待蛹体表面水稍干, 送入接种室。接种者在超净工作台 内, 将大三角瓶内液体菌种倒入小三角瓶内, 用带针头的针管 吸取菌种, 在蚕蛹翅膀和腹部环节交界处, 与蛹体平行进针 ( 向 头 部 ) , 针 尖 稍 向 下 倾 斜 , 注 入 0.1 mL 菌 种 , ( 不 可 少 于
射法为基准, 对蚕蛹的选择, 菌种制作, 注射方法, 发菌出草的 制作, 用活动螺丝固定, 用铁丝网代替隔板, 焊在隔板框之内,
条件等, 进行了深入的研究, 取得了一些行之有效的技术参 每 层 铁 丝 网 下 安 装 40 W 日 光 灯 1 个 。 每 个 架 子 占 地 面 积
数。于 2001 年在吉林东北虎制药厂进行中间试验, 用注射法 0.84 m2, 每 100 m2 面积放架子 90 个( 包 括 作 业 道 在 内 ) , 每 个
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