氧化酶阴性可很容易与其他假单胞菌区别
临床医学检验技术(士)：不发酵革兰阴性菌属试卷(题库版)
临床医学检验技术(士)：不发酵革兰阴性菌属试卷（题库版）1、单选铜绿假单胞菌在哪种培养基上培养，可形成微小、无光泽半透明菌落（）A.普通琼脂培养基B.血液琼脂培养基C.麦康凯琼脂培养基D.S-S琼脂培养基（江南博哥）E.肉汤正确答案：C参考解析：1.铜绿假单胞菌在普通琼脂平板培养基上，经18～24h培养，可形成圆形，大小不一，边缘不整齐、扁平、隆起、光滑、湿润的菌落。
2.铜绿假单胞菌在S-S琼脂培养基上可形成类似沙门菌的菌落，稍久菌落可呈棕绿色。
3.铜绿假单胞菌在血液琼脂培养基上经18～24h培养，可形成扁平、湿润、有特殊气味的灰绿色或蓝绿色菌落。
4.铜绿假单胞菌在肉汤中经35℃18～24h培养，液面可形成菌膜，细菌在深层发育不良，呈微浑浊或透明状，菌液上层为蓝绿色。
5.铜绿假单胞菌在麦康凯琼脂培养基上，经18～24h培养，可形成微小、无光泽半透明菌落，48h菌落中心常呈棕绿色。
2、单选对铜绿假单胞菌特征的描述不正确的是（）A.菌体一端有鞭毛B.氧化酶试验阳性C.可产生绿色脂溶性色素D.抵抗力强且对多种抗生素耐药E.主要通过接触引起医源性感染正确答案：C参考解析：铜绿假单胞菌可产生带荧光的水溶性色素（青脓素与绿脓素）。
3、单选在麦康凯培养基上不生长的非发酵菌是（）A.假单胞菌属B.产碱杆菌属C.不动杆菌属D.黄杆菌属E.莫拉菌属正确答案：E参考解析：非发酵革兰阴性杆菌多数在麦康凯培养基上生长，如假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌屑等均可生长，而莫拉菌属和艾肯菌属不生长。
4、单选不属于人畜共患的病原菌是（）A.小肠结核耶尔森菌B.空肠弯曲菌C.炭疽芽孢杆菌D.嗜肺军团菌E.布鲁菌正确答案：D参考解析：人兽共患病原菌种类很多，如耶尔森菌、炭疽芽孢杆菌、布鲁菌属、巴斯德菌属、空肠弯曲菌等。
5、单选下列细菌中属于条件致病菌的是（）A.伤寒杆菌B.霍乱弧菌C.结核分枝杆菌D.金黄色葡萄球菌E.铜绿假单胞菌正确答案：E参考解析：铜绿假单胞菌广泛分布于自然界、土壤、水和空气及人体皮肤、肠道等，为条件致病菌，是医院感染的主要病原菌之一。
临床微生物学检验试题与答案
临床微生物学检验试题与答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.患者男,36岁。
突发商热,休温达39℃,患者发病前管到过牧区,抽取血培养明确原菌,血培养提示;革兰阴性小杆菌生长,在5%~10%CO2环境培养24小时后,在血平板可形成细小菌落,该菌尿素酶阳性,根盐还原试验阳性,动力阴性,四环素治疗后病情稳定,该致病菌可能是(2016年中级师)》A、军团菌B、鲍特菌C、布鲁菌D、嗜血杆菌E、弗郎西斯菌正确答案：C2.对铜绿假单胞菌生化特征的描述,错误的是(2016年初级师)A、氧化分解葡萄糖B、氧化酶阳性C、不利用枸橼酸盐D、还原硝酸盐E、不产生吲哚正确答案：C3.革兰阳性菌和革兰阴性菌的细胞壁都含有(2015/2017年初级师)(2012年初级士)A、脂多糖B、肽聚糖C、膜磷壁酸D、类脂AE、壁磷壁酸正确答案：B4.细菌的耐药性有关的变异(2018年初级士)A、形态变异B、抗原变异C、结构变异D、耐药性变异E、菌落变异正确答案：D5.结核分枝杆菌下列成分中,与其致病性无关的是(2011年中级师)A、蜡质B、硫酸脑苷脂C、索状因子D、内毒素E、磷脂正确答案：D6.0/129敏感试验用于哪种细菌的鉴别(2015年初级士)A、A群链球菌B、肺炎链球菌C、粪肠球菌D、表皮葡萄球菌E、霍乱弧菌正确答案：E7.生物学分类系统中最小的分类单位是(2013年初级师)(2014/2017年初级士)A、目B、种C、群D、科E、属正确答案：B8.患者男,25岁。
发热、腹痛、里急后重,大便次数明显增加,脓血便。
便培养SS琼脂上分离出透明菌落。
生化鉴定初筛结果:KIA培养基K/A,产酸不产气,H2S(-),MIU试验结果为(3-)。
该病原菌可能是(2016年初级师)(2020初级士)A、伤寒沙门菌B、痢疾志贺菌C、普通变形杆菌D、大肠埃希菌E、奇异变形杆菌正确答案：B9.关于外毒素的叙述,正确的是(2017年初级师)A、主要由革兰阳性菌产生B、其基本成分为脂多糖C、耐热D、毒性作用较弱E、不能用甲醛脱毒成类毒素正确答案：A10.患者男,1个月前感到疲劳、食欲减少、发热咳嗽、咳痰带血丝。
什么是氧化酶测试？原理,组成,结果解释
什么是氧化酶测试？原理，组成，结果解释氧化酶测试是用于确定细胞色素c氧化酶是否存在的程序。
该系统的作用是帮助电子在氧化还原染料四甲基对苯二胺与细菌的电子供体之间移动。
它有助于鉴定能够产生细胞色素c氧化酶的细菌；存在于细菌电子传输链中的酶。
之所以称为氧化酶测试，是因为如果存在该酶，该酶将不会导致试剂氧化，从而产生紫色的最终产物（吲哚酚）。
如果找不到酶，则不会发生氧化。
因此，试剂的颜色保持不变。
••纸盘（商业准备）•木质或铂金丝•试剂如：o Kovacs氧化酶试剂o戈登和麦克劳德的试剂o Gaby和Hadley（吲哚酚氧化酶）试剂：2.它有助于区分某些菌株，如莫拉氏菌，奈瑟氏菌，巴斯德氏菌和弯曲杆菌。
3.它有助于区分假单胞菌与其他相关物种。
氧化酶测试可以使用多种方法进行。
我们将在下面讨论常用的方法。
1.干滤纸–这是最方便的方法。
程序如下：1.将滤纸（Whatman＃1）浸入1％的四甲基对苯二胺二盐酸盐溶液中。
2.排水约半分钟。
3.冷冻干燥滤纸，并保存在瓶中；最好是深色的，并带有用螺钉固定的盖。
4.如果使用，则必须除去试纸条，使用蒸馏水润湿试纸条并放入培养皿中。
5.使用环（铂），挑取菌落并在潮湿的部分涂片。
2.湿滤纸–之所以称为湿滤纸法，是因为滤纸浸泡在1％的试剂溶液中。
使用环（由铂材料制成）将培养物擦在滤纸上。
3.直接板–添加试剂；最好在琼脂平板上两到三滴到可疑菌落。
只需添加足够的试剂，因为放置过多的试剂会改变结果。
请注意10秒钟内颜色是否有变化。
这种氧化酶测试应在琼脂平板上进行（非选择性）。
4.拭子法–拭子应浸入试剂中，并应与可疑的分离菌落接触。
请在10秒钟内注意颜色的变化。
5.试管–在营养肉汤（4.5 ml）中培养新鲜细菌。
生长应在18到24小时内完成。
加入Gaby和Hadley试剂（0.2ml）。
摇动试管，以确保混合物充分混合，并且培养物具有充分的氧合作用。
提防颜色变化。
••延迟正向–如果深紫色色调在60秒内出现。
临床医学检验：临床细菌学考试题库真题
临床医学检验：临床细菌学考试题库真题1、名词解释小川型正确答案：是Ol群霍乱弧菌的一种血清型，01群霍乱弧菌的0抗原由A、B、C 三种抗原成分组成，AB抗原组合构成小川型，为常见流行型别。
2、单选西方发达国家计(江南博哥)算和控制工程造价的主要依据是OoA.工程量计算规则及各种取费标准B.招投标文件C.各种造价信息D.造价工程师的经验正确答案：A3、单选目前我国普遍使用的伤寒疫苗是()A.Ty21a减毒活菌苗B.类毒素疫苗C.全菌灭活疫苗D.三联疫苗E.Vi疫苗正确答案：E4、单选在下列革兰阴性杆菌中，动力、氧化酶、硝酸盐还原三项同时阴性的细菌是()A.军团菌B.产碱杆菌C,伤寒沙门菌D.不动杆菌E.痢疾志贺菌正确答案：D5、单选目前麻风病微生物学诊断的主要方法是()A.直接镜检B.分离培养C.麻风菌素试验D.血清学试验E.动物试验正确答案：A6、单选不能立即进行幽门螺杆菌培养时，标本保存的温度是()A.4℃B.45℃C.37℃D.43℃E.-4℃正确答案：A7、单选关于空肠弯曲菌分离培养，叙述正确的是()A.需要普通营养琼脂培养基B.C02培养箱内进行C.需要特殊的培养基D.严格厌氧培养E.普通培养箱内进行正确答案：C8、问答题试述结核分枝杆菌的致病性。
正确答案：结核分枝杆菌主要通过呼吸道、消化道和受损伤的皮肤侵入易感机体，引起多种组织器官的结核病，其中以通过呼吸道引起的肺结核最多见。
肺部感染可分为原发性感染和继发性感染。
肺外感染可发生在脑、肾、肠及腹膜等处。
该菌不产生内毒素和外毒素，也无荚膜和侵袭性酶。
可在细胞内、外生长及大量繁殖，机体对菌体成分和其代谢产物引起免疫损伤及变态反应，从而导致一系列组织学上的病理变化。
9、单选对炭疽病动物采集标本特别禁止()A.取舌尖B.取耳尖C.宰杀后解剖D.局限病灶的病变组织E.穿刺取心血正确答案：C10、判断题产单核李斯特菌在4C能生长，故可进行冷增菌()正确答案：对11、多选厌氧标本送到实验室后，应该()A.在20〜30分钟内处理完毕B.放入冰箱，准备好一切条件后再处理C.最迟不超过2小时处理标本D.在室温保存，2小时内处理完毕E.放入冰箱。
非发酵菌群的分类鉴定
• 该菌的生长特性、营养要求、及其它生物 学性状与铜绿假单胞菌极为相似，所不同 的是氧化酶阴性，这是与假单胞菌属相区 别的重要特性；此外，该菌一端具有3根以 上丛鞭毛，运动活泼，可与氧化酶阴性的 不动杆菌属和副百日咳鲍特氏菌相鉴别。
3、鼻疽（类鼻疽）伯克霍尔德菌
• 鼻疽伯克霍尔德菌（Burkholderia mallei） 和类鼻疽伯克霍尔德菌（ Burkholderia pseudomallei）是鼻疽与类鼻疽的病原菌， 属假单胞菌属rRNA同源群的第二群；2000 年被NCCLS/CLSI（National Committee
脑膜炎败血黄杆菌在血琼脂平板和营养琼脂平板上的菌落特征（37℃，18—24h）
• 黄杆菌属目前共分为8个种和4个未命名 的生物群。它们分别是：
• 脑膜炎败血黄杆菌、芳香黄杆菌、短小黄 杆菌、水田黄杆菌、嗜醇黄杆菌、嗜糖黄 杆菌、嗜温黄杆菌、薮内黄杆菌及黄杆菌 Ⅱb、Ⅱe、Ⅱh、Ⅱi群。其中脑膜炎败血 黄杆菌、芳香黄杆菌、短小黄杆菌和黄杆 菌Ⅱb群可引起人类疾病。
支气管腐败 鲍特氏菌
+ — + +
+ +
鲍特氏菌属
鞭毛染色
脂、巧克力色血琼脂及兔血琼脂上均不能生长。
副百日咳鲍特氏菌和支气管腐败鲍特氏菌营养 要求不高，在上述培养基上均能生长。
• 3、该菌属细菌不分解糖类。其它生化反应见 下表。
鉴别要点
鞭毛 动力 37℃
18—24℃ 尿素酶 硝酸盐还原 氧化酶
百日咳 鲍特氏菌
— — — — —
+
副百日咳 鲍特氏菌
—
— — + — —
铜绿假单胞菌镜下形态和在血平板上的菌落特征
铜绿假单胞菌在普通琼脂培养基上的菌落特征
非发酵菌
铜绿假单胞菌的鉴定
95%以上的铜绿假单胞菌可通过以下几个特征 鉴定： 氧化酶阳性。 菌落较大，生姜样气味。 绿脓素产生。 鉴定无色素/只产生青脓素的铜绿假单胞菌 42℃能够生长 乙酰胺酶的碱化作用 硝酸盐还原
铜绿假单胞菌的耐药性
细菌耐药机制复杂： 外膜通透性降低 产生灭活酶或钝化酶 主动外排系统将抗生素泵出胞外 产生生物膜
临床意义
分布广泛，是非发酵菌中最具临床意义的细菌， 也是医院内感染最多见的细菌，主要引起条件感 染。 感染多发生于烧伤、急性白血病、器官移植病人 等正常防御机制改变或缺损的患者，感染多位于 潮湿部位，如气管造口、留置的导管、创面、外 耳道、角膜等 囊性纤维化病人呼吸道分离的铜绿假单胞菌具有 生物膜（大量藻酸盐包围了菌体），导致本病的 治疗困难其淡蓝色脓性渗出物及闻到绿脓素的生 姜样气味具有特征性。
醋酸钙不动杆菌 鲍曼不动杆菌 溶血不动杆菌 琼氏不动杆菌 约氏不动杆菌 洛菲不动杆菌
生物学特性
严格需氧、氧化葡萄糖、无动力、氧化酶阴性、 硝酸盐还原阴性的革兰染色阴性球杆菌。 常似双球菌，有时不易脱色，易误认阳性菌； 血平板培养24小时后，形成光滑，不透明，凸起， 无色素形成；溶血不动可产生β溶血 大多数菌株麦康凯平板上生长良好，呈无色或淡 粉红色
2007各医院铜绿假单胞菌对各种抗菌药物 的耐药率
医院 HSH BJH TJH PUH ZJH
716 616 530 473 头孢他啶 443
RJH
329 22.2
GZH PED
329 33.1 170 5.5
SCH GSH
137 29.9 68 4.7
39.7 43 16.7 27.7 25.5
猪源嗜麦芽窄食单胞菌的分离鉴定与耐药性研究_梁祥解
第26卷第3期 佛山科学技术学院学报(自然科学版) V ol.26No.3 2008年5月 Journa l of Foshan University(Na tural Science Editio n)May2008文章编号:1008-0171(2008)03-0041-04猪源嗜麦芽窄食单胞菌的分离鉴定与耐药性研究梁祥解1,2,袁 生2,王秋泉2,庄庆均2,张伟国2,骆敏祥2,张 盛2,张浩吉2(1.华南农业大学动物医学系,广东广州510642;2.佛山科学技术学院动物医学系,广东佛山528000)摘要:从临床上疑似嗜麦芽窄食单胞菌感染的病猪,进行病原分离、生化鉴定、特异性PCR鉴定和耐药性试验。
结果获得了猪源嗜麦芽窄食单胞菌分离株20个,其中16株来源于病猪的呼吸系统;该菌对大多数抗生素具有耐药性且呈现多重耐药性,对复方新诺明最敏感。
本研究从病原学角度证实猪嗜麦芽窄食单胞菌的临床感染并对临床用药有指导意义。
关键词:猪;嗜麦芽窄食单胞菌;分离鉴定;药敏试验中图分类号:Q939 文献标识码:A嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas m altophilia)在1960年首次发现时命名为嗜麦芽假单胞菌,后又称为嗜麦芽黄单胞菌(X anthomonas maltophilia),因其基因和生化反应与其他假单胞菌有较大差别,1993年由Palleroni和Bradbury改为现名[1]。
嗜麦芽窄食单胞菌广泛存在于自然环境中,为一种条件性病原菌,可引起人和动物的感染。
近年来,在人医临床上嗜麦芽窄食单胞菌的分离率在非发酵菌属中呈上升趋势,仅次于铜绿假单胞菌,并对多种抗生素耐药,可导致免疫抑制病人严重的感染性并发症,可引起呼吸道、消化道感染,心内膜炎及败血症[2,3]。
而在动物方面,嗜麦芽窄食单胞菌感染的病例和相关的报导较少。
本研究从临床上疑似嗜麦芽窄食单胞菌感染的病猪,进行了病原的分离鉴定和耐药性试验,旨在为从病原学角度证实猪嗜麦芽窄食单胞菌的临床感染并为该菌感染的临床用药提供一定的参考。
铜绿假单胞菌解析
• 书本P163 5.26
样 品 10g
10 ml
BL
100 ml
缓冲液
供试 液
10ml
BL 阳性
BL 阴 性 十六烷基三甲基溴化铵平板
培养温度： 36℃
营养琼脂斜面
培养时间： 十六烷基三甲基溴化铵平板 18~24h （必要时可 延长至48h）
增菌培养
供试品
供试液
胆盐乳糖增菌液
36±1℃ 18~24h
培养基成分：
PDP斜面，是否有色素，有， 用氯仿3-5ml萃取，用无菌 玻璃棒搅碎培养基、混匀， 色素完全在氯仿层。吸管 把氯仿层移到另一试管， 加入盐酸1M1ml，静置后， 盐酸出现粉红为阳性，无 粉红为阴性，阴性斜面培 养1-2天再重新做一遍。如 果仍是阴性。做下一步试 验。 绿脓菌素从有机相转到酸性 水相中会由蓝绿色变为粉 红色。
假单胞菌属
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 革兰氏阴性 细胞单个 直的或弯的杆菌 0.5—1 × 1.5—4微米 单鞭毛或多鞭毛 有机化能异养菌 呼吸代谢，永不发酵 严格好氧菌
模式种：铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌
• 1.0.5-0.8*1.5-3.0微米的杆菌 • 2.细胞单个 • 3.成对或成短链。以极生的单鞭毛运动（有 二个或二个以上的极生鞭毛的细胞，但不 常见） • 4.在中性或碱性培养基种呈蓝色：在酸性培 养基种呈红色 • 5.专性好氧，在硝酸盐培养基中除外。
• 各种抗生素治疗铜绿假单胞菌所致感染过程中都可 能发生耐药。初代敏感菌株在治疗3－4天后可能发 生耐药，有必要重复分离菌株 • 本菌对多种抗生素天然耐药，常用三代头孢和氨基 糖苷类联合治疗
鉴定结果分析
• 从临床标本中分离出来的铜绿假单 胞菌，需要排除污染因素 • 铜绿假单胞菌下呼吸道感染需连续 三次痰培养阳性才能确立。
嗜麦芽窄食单胞菌
试验结果
试验结果
该菌含有β-内酰胺酶，临床治疗首选磺胺类；TMP/SMZ；喹诺酮类；环丙沙星或替卡西林/克拉维酸。嗜麦 芽窄食单胞菌对亚胺培南天然耐药，临床不应选用。尚无标准方法用于嗜麦芽窄食单胞菌单位耐药性检测，药敏 试验纸片法仅有三种抗菌药物：头孢他啶，米诺环素，复方磺胺有判断折点。
谢谢观看
4.嗜麦芽寡养单胞菌的生物学性状：嗜麦芽寡养单胞菌为专性需氧的非发酵型革兰氏阴性极生多鞭毛杆菌， 在血平板上有强的氨味，无溶血；在营养琼脂上显示灰黄色素或无色素，菌落边缘光滑，呈淡黄色或灰白色，直 径0.5mm~1mm，中央突起。还原硝酸盐为亚硝酸盐，氧化酶阴性，强解脂性，DNase阳性，水解明胶和七叶苷，赖 氨酸脱羧酶阳性。在氧化发酵试验中，产酸缓慢或不显产酸，但分解麦芽糖。
2.嗜麦芽窄食单胞菌具有复杂的耐药机制，外膜通透性低，对多种抗生素不易渗透，可产生多种β-内酰胺 酶，如青霉素酶，头孢菌素L2酶以及金属锌酶，因此对β-内酰胺类，氨基糖苷类，喹诺酮类抗生素耐药，同时 对碳青霉烯类抗生素也耐药。由于嗜麦芽窄食单胞菌的耐药性较强，一旦发现该菌感染应及时根据药敏报告合理 用药。
生化反应
生化反应
氧化酶试验阴性，分解葡萄糖、麦芽糖，不分解木糖和甘露醇，葡萄糖OF为氧化型(缓慢)，动力、明胶、赖 氨酸脱羧酶和硝酸盐还原试验均阳性，精氨酸双水解酶、鸟氨酸脱羧酶、枸橼酸盐和脲酶试验均阴性 。
铜绿假单胞菌简介
铜绿假单胞菌简介1 基本简介 铜绿假单胞菌的学名是Pseudomonas aeruginosa，当中的Pseudomonas是由希腊语的pseudo及monas所组成，意即虚假的单元，是早期微⽣物学⽤作描述病菌的。
⽽Aeruginosa则是铜绿（即铜与空⽓中的氧⽓、⼆氧化碳和⽔等物质反应产⽣的物质，⼜称铜锈。
化学式Cu2(OH)2CO3），正好表达了这种细菌所产⽣的青⾊⾊素。
绿脓素（pyocynin）的⽣物合成是以群体效应来调控，就像充满囊肿性纤维化病⼈肺部铜绿假单胞菌的⽣物膜⼀样。
2 病因 (⼀)发病原因 [1]假单胞菌属根据其RNA/DNA的同源性可分为五个主要型，铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是其代表菌种。
铜绿假单胞菌在琼脂平板上能产⽣蓝绿⾊绿脓素，感染伤⼝时形成绿⾊脓液。
本菌为⽆荚膜、⽆芽孢、能运动的⾰兰阴性菌，形态不⼀，成对排列或短链状，为专性需氧菌，最适宜⽣长温度为37℃，致病性铜绿假单胞菌在42℃时仍能⽣长，据此可与荧光假单胞菌等进⾏鉴别，本菌⽣长对营养要求不⾼。
菌体O抗原有两种成分，⼀为内毒素蛋⽩(OPE)，是⼀种保护性抗原，另⼀为酯多糖，具有特异性，根据其结构可将铜绿假单胞菌分成12个⾎清型，此外还可利⽤噬菌体或铜绿假单胞菌素分型。
铜绿假单胞菌对外界环境抵抗⼒较强，在潮湿处能长期⽣存，对紫外线不敏感，湿热55℃ 1h才被杀灭。
此外，临床常见的假单胞菌属细菌还有荧光假单胞菌(P.fluorescens)、恶臭假单胞菌(P.putida)等。
(⼆)发病机制 铜绿假单胞菌有多种产物有致病性，其内毒素是引起脓毒综合征或系统炎症反应综合征(SIRS)的关键因⼦，不过由于铜绿假单胞菌内毒素的含量较低，故在发病上的作⽤要⼩于肠杆菌科细菌。
其分泌的外毒素A(ExoA)是最重要的致病、致死性物质，进⼊敏感细胞后被活化⽽发挥毒性作⽤，使哺乳动物的蛋⽩合成受阻并引起组织坏死，造成局部或全⾝疾病过程。
临床医学检验：临床细菌学考试试题预测题
临床医学检验：临床细菌学考试试题预测题1、多选属于细菌生理生化分类标记的()A.核酸同源值测定B.细菌致病力和毒力C.细菌的生长条件D.菌体成分E.毒性酶类正确答案：B,C,D,E2、单选、伤⅛⅛山南博哥)人进行粪便培养致病菌的最佳时间是()A.潜伏期末B.发病1〜4天C.发病5~10天D.发病2〜3周E.发病4周后正确答案：D3、单选血液增菌培养结果呈均匀混浊生长并有胶陈状凝块者，可能为()A.伤寒沙门菌B.金黄色葡萄球菌C.铜绿假单胞菌D.肺炎链球菌E.粪产碱杆菌正确答案：B4、填空⅛霍乱弧菌的—型和—型属于OT群，其余不被OT群霍乱弧菌抗血清凝集的139个血清群统称为e正确答案：古典生物型；埃托(EIToR)生物型；非OT群霍乱弧菌5、单选引起“游泳池肉芽肿”的常见细菌是()A.堪萨斯分枝杆菌B.偶发分枝杆菌C.蟾分枝杆菌D.猿分枝杆菌E.海分枝杆菌正确答案：E6、多选下列有关变形杆菌的叙述中，正确的有()A.动力活泼B.硫化氢阳性C.苯丙氨酸脱氨酶阳性D.胭酶阳性E.葡萄糖酸盐阴性正确答案：A,B,C,D,E7、单选以下各项，哪一项不是志贺菌与沙门菌的鉴别要点()A.动力B.硫化氢C.葡萄糖发酵D.乳糖发酵E.革兰染色正确答案：C8、单选、判定致病性葡萄球菌的主要试验是()A.耐热DNA酶测定B.甘露醇发酵C.明膝漓化D.触酶试验E.蔗糖发酵试验正确答案：A9、单选乙型溶血性链球菌生长时，菌落周围常出现溶血环，此现象称为()A.B溶血B.Q溶血C.丫溶血D.δ溶血E.溶血正确答案：A10、单这空肠弯曲菌感染最常见的临床表现是()A.发热B.腹泻C.呕吐D.恶心E.失水性休克正确答案：B11、问答题简述福氏志贺菌的生化反应特点。
正确答案：福氏志贺氏菌的主要生化反应为：氧化酶(一)，乳糖(一)，葡萄糖发酵产酸不产气(仅福氏六型产少量气体)，H2S(一),动力(一)，阿睬不定，鸟氨酸脱竣酶(一)。
化妆品中绿脓杆菌的检验与鉴定1
化妆品铜绿假单胞菌检验与鉴定若干问题的探讨摘要依照GB/T 7918.4—87标准对化妆品进行绿脓杆菌的检验，近期从不同类别的化妆品中检出四株铜绿假单胞菌及多株恶臭假单胞菌等假单胞菌。
本文对铜绿假单胞菌检验与鉴定过程中应用十六烷三甲基溴化铵和乙酰胺作为选择性分离培养基，采用微量管手工鉴定与API 20NE、VITEK生化鉴定仪器鉴定进行比较，对不同鉴定方法出现的情况进行了分析和讨论。
关键词铜绿假单胞鉴定分析Discussion of Detection and Identification of Paeudomonasaeruginosa in ComesticsAbstact According to Standards GB/T7918.4-87, we recently detected 4 Paeudomonas aeruginosa and several Pseudomonas putida in varied comestics. This article analysed the adoption of Cetrimide Agar and Acetamide Agar, comparing Synchron artificial identification and API 20NE as well as VITEK.Key words Paeudomonas aeruginosa Identification Analyisis1材料、仪器与方法1.1 材料、仪器样品来源：汕头口岸进出境的化妆品。
主要试剂：SCDLP液体培养基、十六烷三甲基溴化铵、乙酰胺等培养基，革兰氏染液等购自北京陆桥公司、绿脓杆菌微量生化鉴定管，购自广东环凯公司；氧化酶试剂、API 20NE 测试条、VITEK GN/GNI测试卡购自法国生物梅里埃公司。
仪器：VITEK-32型、VITEK2为法国生物梅里埃公司产品。
非发酵菌的鉴定的临床探讨
非发酵菌的鉴定的临床探讨发表时间：2011-08-31T14:47:05.327Z 来源：《中外健康文摘》2011年第19期供稿作者：吕春凤[导读] 非发酵菌主要是指一大群不发酵糖类、专性需氧、不产生芽胞的革兰阴性杆菌。
吕春凤（黑龙江省绥滨农场疾病控制中心 156203）【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）19-0284-02 【关键词】非发酵菌鉴定探讨非发酵菌主要是指一大群不发酵糖类、专性需氧、不产生芽胞的革兰阴性杆菌。
在临床微生物学实验室遇到所有革兰阴性杆菌中，非发酵菌占15%，其中2/3是假单胞菌。
非发酵菌大多为机会致病菌，是引起医院内感染的重要致病菌。
临床标本中遇到的非发酵菌有近10个菌属的数十个种别。
主要菌属有假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属、无色杆菌属、莫拉菌属、金氏杆菌属、黄杆菌属、艾肯菌属、土壤杆菌属等。
1 假单胞菌属1.1 生物学特性直或微弯杆菌，长1.5～5.0μm，宽0.5～1.0μm，革兰染色阴性。
单端鞭毛，1根或数根，有动力。
严格需氧代谢。
氧化酶阳性，触酶阳性。
1.2 常规鉴定从临床标本中分离到的非发酵菌，大约占所有革兰阴性杆菌中的15%，其中铜绿假单胞菌占70%，其次是不动杆菌属，嗜麦芽窄食单胞菌占第三位，荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌、斯氏假单胞菌较少见。
荧光假单胞菌DNA 同源群的鉴定。
该群有3个菌种，铜绿、荧光和恶臭假单胞菌，主要生物学特性是能产生水溶性色素，如青脓素或称荧光素，绿脓素不发荧光，可用氯仿从培养液抽提获得。
此外，尚有少数菌株可产生红脓素、黑脓素，也有不产色素的菌株。
氧化酶阳性、精氨酸双水解酶阳性，一般能在麦康凯琼脂上生长，利用枸橼酸盐，对多粘菌素敏感。
氧化葡萄糖、蔗糖无反应。
据统计，临床标本中铜绿假单胞菌不产绿脓素的菌株约占10%，既不产生绿脓素亦不产生青脓素的也占10%左右。
对于不产生绿脓素的铜绿假单胞鉴定最低限度应具有以下特性：端极一根鞭毛，有动力，在O-F葡萄糖培养基需氧管中产酸，氧化酶阳性，精氨酸双水解酶阳性，42℃生长，其他如硝酸盐还原产生氮气，麦康凯琼脂上生长，对多粘菌素敏感皆有鉴定参考价值。
氧化酶试验
氧化酶试验(oxidasetest)氧化酶又名细胞色素氧化酶、细胞色素氧化酶C或呼吸酶。
试验用于检测细菌/是否有该酶存在。
原理是氧化酶在有分子氧或细胞色素C存在时，可氧化四甲基对苯撑二胺出现紫色反应。
假单胞菌属、气单胞菌属等阳性，肠杆菌科阴性，可区别。
血浆凝固酶：由金黄色葡萄球菌致病性菌株产生。
能使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝固。
在感染部位由于凝固酶的产生，使体液中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白，沉积于细菌表面，可阻碍吞噬细胞对细菌的吞噬和杀灭作用。
凝固酶试验(coagulase test)原理：致病性葡萄球菌→ 凝固酶→ 血浆中纤维蛋白原(液态) 纤维蛋白(固态) → 血浆凝固方法：①玻片法：检测结合凝固酶②试管法：检测游离凝固酶应用：作为鉴别葡萄球菌致病性的重要指标。
一、名词解释汹涌发酵”现象——在牛乳培养基中，产气荚膜梭菌能分解乳糖产酸使酪蛋白凝固，同时产生大量气体将凝固的酪蛋白冲散形成蜂窝状，并将液面上的凡士林向上推挤，甚至冲开棉塞，气势凶猛，称为“汹涌发酵”现象，为本菌特征之一肥达反应——用已知伤寒菌的H(鞭毛)和O(菌体)以及甲型(A)与乙型(B)副伤寒沙门氏菌的标准液与病人血清做凝集试验，用于伤寒副伤寒的辅助诊断或用于流行病学调查的免疫凝集实验。
外斐试验——变形杆菌属的X19,X2.Xk菌株的菌体O抗原与斑疹伤寒立克次体和恙虫病立克次体有共同抗原，故可用OX19，OX2，OXk代替立克次体作为抗原与相应患者血清进行交叉凝集反应，此称外斐试验，辅助诊断立克次体病。
SPA——葡萄球菌细胞壁上的一种蛋白成分，称为葡萄球菌A蛋白。
英文缩写为SPAMRSA—是能产生β—内酰胺酶而破坏青霉素的β—内酰胺环而使青霉素失效而表现出耐药性的一类葡萄球菌。
胆汁溶菌试验——胆汁或胆盐可溶解肺炎链球菌，可能是由于胆汁降低细胞膜表面的张力，使细胞膜破损或使菌体裂解；或者是由于胆汁加速了肺炎链球菌本身自溶过程，促使细菌发生自溶。
嗜麦芽窄食单胞菌的鉴定与耐药性分析
嗜麦芽窄食单胞菌的鉴定与耐药性分析夏 勇 潘树根 袁德辉 (广州市第二人民医院检验科 510150)摘 要 目的:探讨嗜麦芽窄食单胞菌的快速简易鉴定及其对常用抗生素的耐药性。
方法:按氧化酶阴性革兰氏阴性杆菌的临床常规鉴定方法并结合对泰能耐药的特征鉴定嗜麦芽窄食单胞菌;应用Kirby-Bauer扩散法对10种抗生素的药敏情况进行检测。
结果:此种快速简易的鉴定方法与API鉴定系统的结果一致;嗜麦芽窄食单胞菌对临床常用的抗生素广谱耐药,对泰能的耐药率为100%且无任何抑菌环;对庆大霉素、西力欣无敏感株;对舒普深的敏感率最高,达到74%;对百炎净、悉复欢和复达欣的敏感度相对较高,分别为59%,50%,37%。
结论:此方法能准确鉴定嗜麦芽窄食单胞菌。
嗜麦芽窄食单胞菌的耐药性极为严重,治疗该菌引起的感染时合理使用抗生素十分重要,现仍需进一步探讨该菌的耐药机理,这对开发新型高效抗生素尤其重要。
关键词 嗜麦芽窄食单胞菌 鉴定 耐药性1 材料与方法1.1 标本来源及分布 痰及咽拭42例,标本主要来自呼吸内科,其中2株来自新生儿科,心内科及老年病区各1株;血液1例,标本来自呼吸内科;脓液及脓性创面分泌物4例,标本来自五官科与皮肤科;尿液5例来自泌尿外科;脐液2例,标本来自新生儿科;共54例。
1.2 材料 肠杆菌科微量生化鉴定管购自浙江省军区后勤部卫生防疫检验所,药敏纸片由北京天坛药物生物科技开发公司,其中泰能药敏纸片由杭州默沙东药厂提供,药敏试验琼脂由杭州生物试剂厂生产;A P I鉴定卡为法国生物梅里埃公司产品。
1.3 方法 除血液标本增菌培养外,其它标本均接种血平板,35°C,5%CO2培养18～24h后取单个菌落纯培养获得培养物后做氧化酶试验,如果阴性接种克氏双糖铁、半固体动力、肠杆菌科微量生化鉴定管,同时接种A PI鉴定卡430板。
1.4 药敏 采用Kirby-Ba uer扩散法做药敏试验,按1995年美国实验室标准委员会(N CCL S)颁布的分界点表判读药敏试验结果。
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不动杆菌所致疾病包括肺炎、心内膜炎、脑膜 炎、皮肤和伤口感染、腹膜炎和尿道感染等。 不动杆菌对青霉素、氨苄青霉素和头孢他啶均 耐药，大多数菌株对氯霉素耐药，对氨基糖苷 类抗生素耐药的菌株也逐渐增多，不同菌株对 二代和三代头孢菌素耐药性不同，所以每个分 离菌株都应进行药敏试验。多重耐药菌株最常 多见于鲍曼不动杆菌和溶血不动杆菌。
开始被归于奈瑟氏菌科，但最近又被归入莫拉 氏菌科。根据DNA-DNA杂交和营养特征将不动 杆菌属分为17个基因种，但只有7个基因种有菌 名：
– – – – – –
基因种1：乙酸钙不动杆菌，主要分离自土壤 基因种2：鲍曼不动杆菌 基因种4：溶血不动杆菌 基因种5：琼氏不动杆菌 基因种7：约氏不动杆菌 基因种8：洛菲不动杆菌
第四节 寡养单胞菌属
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
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第五节 产碱杆菌属
一、分类
二、细菌特性
三、临床意义
四、微生物学检验
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产碱杆菌科/产碱杆菌属
有医学意义的产碱杆菌属主要有 木糖氧化产碱杆菌木糖氧化亚种 A.xylosoxidans subsp. Xylosoxidans 木糖氧化产碱杆菌脱硝亚种 A.xylosoxidans subsp.denitrificans 粪产碱杆菌A.faecalis 皮氏产碱杆菌A.piechaudii
铜绿假单胞菌感染的控制
易感危重病人不应安排在已有过铜绿假 单胞菌感染的病房 各种抗菌药物、溶液、软膏、器械等应 避免被铜绿假单胞菌污染 采取适当的分型方法对感染菌株进行流 行病学调查和监控
第三节 不动杆菌属
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
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不动杆菌属Acinetobacter
重要的鉴定试验
1、葡萄糖利用（OF试验） OF培养基:蛋白胨和糖类的比例为1:5而不同于 发酵菌的1:2。 2、动力 半固体培养基:应只穿刺培养基顶部4mm，在培 养4-6小时后首次观察结果,24和48小时后再次 观察结果。更准确的方法是湿片法和鞭毛染色。 3、色素形成 非发酵菌可形成多种色素，有助于菌种的鉴定。
广泛分布于自然和医院环境中，能在潮湿和干 燥的表面生存，也可存在于健康人的皮肤，在 非发酵菌中本菌是在临床标本中的分离阳性率 仅次于铜绿假单胞菌而居第二位的条件致病菌， 通常不动杆菌对健康人体不致病，但对体弱者 可引起感染。 本菌能够获得多重耐药性和能够在大多数环境 表面生存，所以由本菌引起的医院获得性感染 有增加的趋势，医院获得性感染最常见的是呼 吸道或手术部位、应用器械或ICU的住院患者。
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微生物学检验
（一）检验程序 （二）标本采集 （三）检验方法 （四）耐药性 （五）结果分析与报告
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铜绿假单胞菌的耐药性
细菌耐药机制
– 外膜通透性降低 – 产生灭活酶或钝化酶 – 主动外排系统将抗生素泵出胞外 – 抗菌药物作用靶位改变
本菌对氨苄西林、安美汀、四环素、优力新、 一、二代头孢菌素、头霉素、大环内酯类、磺 胺等天然耐药 各种抗生素治疗铜绿假单胞菌所致感染过程中 都可能发生耐药。
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荧光假单胞菌
产青脓素，但不能产绿脓素， 4℃生长, 42℃ 不生长, 最适温度25-30℃ 。 见于水和土壤中，都可作为咽部的正常 菌群存在，是人类少见的条件致病菌 荧光假单胞菌和污染的血制品关系密切， 可见于近期接受过血液制品而致菌血症 的患者。
二、铜绿假单胞菌
（一）细菌特性 （二）临床意义 （三）微生物学检验
重要的鉴定试验（续）
硝酸盐还原/产气 是硝酸盐还原成亚硝酸盐，进而释放氮的生化 过程。 吲哚试验 需用含色氨酸丰富的培养基，产吲哚黄杆菌、 脑膜败血黄杆菌、食酸丛毛单胞菌等阳性。 硫化氢 腐败希瓦菌是非发酵菌中唯一在KIA和TSI上产 硫化氢的菌种。
第十一章 非发酵革兰阴性杆菌
第一节 概述 第二节 假单胞菌属 第三节 不动杆菌属 第四节 寡养单胞菌属 第五节 产碱杆菌属 第六节 军团菌属 第七节 其他非发酵革兰阴性杆菌
The end Thank you
第二节 假单胞菌属
一、概述 二、铜绿假单胞菌 三、荧光假单胞菌 四、恶臭假单胞菌 五、斯氏假单胞菌
第六节 军团菌属
一、分类
二、细菌特性
三、临床意义
四、微生物检验
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概述
非发酵菌是一群需氧、无芽孢、氧化分解利用 糖类或是不利用糖做为能量来源的革兰阴性杆 菌。 非发酵菌与其它苛养或非糖发酵的革兰阴性杆 菌之间的界限只是传统意义上的，并不是根据 明确的遗传或表型特点来划分。 通常所讲的非发酵菌指在KIA表面24小时内能 够生长，在底部不生长的需氧革兰阴性杆菌。
寡养单胞菌属(Stenotrophmonas) 艾肯杆菌属(Eikenella)
丛毛单胞菌属(Comamonas)
食酸菌属（Acidovorax）
非发酵菌的基本鉴定要求
1、缺少糖发酵的证据，通常是在KIA或TSI培养 基中无酸产生，斜面和底部均呈红色。
2、氧化酶阳性（不动杆菌、嗜麦芽寡养单胞菌、 唐菖蒲伯克菌、浅黄华丽单胞菌、栖稻黄素单胞 菌阴性），但并非所有氧化酶阳性的革兰阴性杆 菌都是非发酵菌。 3、麦康凯上生长很差或不生长
产碱杆菌属
木糖氧化产碱杆菌木糖氧化亚种通过使OF葡萄 糖和OF木糖产酸而很容易和其他产碱杆菌区别， 可从血、脑脊液、支气管冲洗液和伤口等分离 到，本菌可引起医院内感染，如使住院病人引 起肺炎，菌血症和脑膜炎等。 木糖氧化产碱杆菌脱硝亚种较少从临床标本分 离到，主要见于血、耳、脑脊液和尿。 粪产碱杆菌大部分感染是条件致病，主要来自 潮湿环境，如雾化器、呼吸机和灌洗液等，血、 痰、尿是常见发现部位。
非发酵菌常见菌属
假单胞菌属(Pseudomonas)
不动杆菌属(Acinetobacter) 伯克菌属（Burkholderia） 产碱杆菌属(Alcaligenes) 无色杆菌属(Achromobacter) 莫拉菌属(Moraxella)
金氏杆菌属(Kingella)
黄杆菌属(Flavobaterium) 土壤杆菌属(Agrobacterium) 黄单胞菌属(Xanthomonas)