对二甲苯的辛醇水分配系数Kow的测定

实验一对二甲苯的辛醇—水分配系数Kow的测定

一、目的和要求

1．了解测定有机化合物的辛醇—水分配系数Kow的意义和方法。

2．掌握紫外分光光度法测定分配系数的操作技术。

二、实验原理

正辛醇是一种长链烷烃醇，在结构上与生物体内的碳水化合物和脂肪类似。因此，可用正辛醇―水分配体系来模拟研究生物―水体系。有机物的辛醇―水分配系数是衡量其脂溶性大小的重要理化性质。研究表明，有机物的分配系数与水溶解度，生物富集系数及土壤，沉积物吸附系数均有很好的相关性。因此，有机物在环境中的迁移在很大程度上与它的分配系数有关。此外，有机药物和毒物的生物活性亦与其分配系数密切相关。所以，在有机物的危险性评价方面，分配系数的研究是不可缺少的。

化合物在辛醇相中的平衡浓度与水相中该化合物非离解形式的平衡浓度的比值，即为该化合物的辛醇―水分配系数。

Kow ＝ Co／Cw

式中：

Co——该化合物在辛醇相的平衡浓度；

Cw——水相中的平衡浓度；

Kow——分配系数。

本实验通过测定水相中有机物浓度，然后再根据分配前化合物在辛醇相的浓度以及分配后化合物在水相的浓度，计算得到分配系数。

三、仪器和试剂

仪器：

1．UNICO UV2000型紫外可见分光光度计

2．80-2离心机

3．HY-2调速多用振荡器

4．SZ-1快速混匀器

5．微量注射器100μL

6．玻璃容量瓶：10ml，25ml

7．玻璃移液管：0.5ml，1ml，5ml

8．10ml玻璃离心管

9．玻璃滴管

试剂：

1．对二甲苯分析纯

2．无水乙醇分析纯

3．正辛醇分析纯

四、实验步骤

1．标准曲线的绘制（已完成）。

（1）移液管移取1.00ml对二甲苯于10ml容量瓶中，用乙醇定容，摇匀。

（2）微量注射器取该溶液0.10ml于25ml容量瓶中，用乙醇定容，摇匀。此时该溶液浓度为400µL/L。

（3）分别移取该溶液1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml于5只25ml容量瓶中，用水定容，摇匀。

（4）在紫外分光光度计上，选择波长为227nm，以水为参比，测定标准系列的吸光度A。以A对浓度C作图，即得标准曲线。

2．分配系数的测定

（1）移取0.40ml对二甲苯于10ml容量瓶中，用正辛醇稀释至刻度。

（2）移液管取此溶液1ml于10ml离心管中，准确加入9ml水，塞上塞子，平放并固定在振荡器上振荡2小时。

（3）2000转离心10分钟分离，用滴管小心吸去离心管上层辛醇，在227nm下测定水相吸光度，由标准曲线查出其浓度。平行做三份，每次均作试剂空白试验。

五、数据处理

测定分配系数的计算公式：

Kow ＝（Co × V o － Ca × Va）/（Ca × V0）

式中：

Co为辛醇相初始浓度

Ca为平衡后水相中的浓度

V o和Va分别为辛醇相和水相的体积

六、思考和讨论

1．空白实验如何做？

2．如果以环己烷代替正辛醇，试比较对二甲苯的环己烷—水分配系数的大小。

3．试查阅其他估算分配系数的方法。

七、注意事项

1．正辛醇的气味比较大，因此实验时动作要迅速，防止太多的气味溢出。

2．滴管吸取上层辛醇的时候，注意要将辛醇吸干净，以防干扰测定。

3．测定水相吸光度时，用长滴管将水相吸出，注意不要将辛醇吸出。

4．混匀时，注意30秒后放气。