铁皮石斛 组织培养 栽培 试验 实验
铁皮石斛组织培养研究进展组织培养.
铁皮石斛组织培养研究进展1、1 种子萌发1.2 基本培养基铁皮石斛种子在N6，改良N6，MS , 1 / 2 MS , SH 、KS 、VW 、KundsonC , 1 / 2N6，White等培养基上均可萌发。
赵天榜等比较风、MS 等14 种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响，除残外，所有的基本培养基均优于其减半培养基，其中以N6最好，SH 、Kn 、MS 次之，l /2MS 、1 / 2 Vw 最差。
曾宋君等田将铁皮石斛种子在SH 、改良N6、MS 、KS 、VW 、KundsonC 培养基中培养，得出最适培养基为改良N6或自制PT 培养基。
罗吉凤等比较了*** / 2MS 、1 / 2 N6和White 培养基对铁皮石斛种子萌发的影响，30d 种子发芽率均达到95 % ，但1 / 2MS 培养基上所萌发的原球茎较大。
1.3 激素在培养基中添加一定浓度的NAA 可促进种子的萌发，浓度以0.2 一0.5mg/L最适合胚的萌发和生长，过高起抑制作用。
2 , 4-D对胚的萌发起抑制作用。
6 一BA 对胚萌发后的生长起抑制作用。
KT 、IAA对胚萌发和成苗的影响不大，当浓度超过1mg/L 时，对胚萌发和成苗起抑制作用。
ABA 有抑制种子萌发和抑制植物生长的作用，但张铭等发现ABA 能显著提高铁皮石斛原球茎的质量，浓度以0.5mg/L为最佳。
1.4 天然添加物在培养基中添加适量的马铃薯汁、香蕉汁、椰乳可促进铁皮石斛种胚的萌发，但张玲等认为香蕉提取物和椰乳对种子萌发和正常发育有不利影响，干扰其正常发育过程。
1.5 炭源在组培过程中适当添加活性炭，可以吸附代谢过程中产生的废弃物，防止组织褐变，并刺激胚胎的发生与生根，可加人2 ％蔗糖。
曾宋君等在改良N6＋NAA 0.2mg/L 的最适培养基上，发现以白糖、片糖为炭源时，胚萌发和成苗的效果比蔗糖好，这可能是白糖、片糖中含有适合胚萌发和成苗的矿质元素2 原球茎增殖2.1 基本培养基铁皮石斛原球茎增殖可以1/2 MS，MS等作为基本培养基。
铁皮石斛实验策划书3篇
铁皮石斛实验策划书3篇篇一《铁皮石斛实验策划书》一、实验背景铁皮石斛是一种珍贵的中药材，具有多种药用价值。
为了深入研究铁皮石斛的生长特性、药用成分以及开发其潜在的药用价值，我们计划进行一系列实验。
二、实验目的1. 了解铁皮石斛的生长环境和生长条件。
2. 研究铁皮石斛的药用成分及其含量。
3. 探索铁皮石斛的药用价值和应用前景。
三、实验材料1. 铁皮石斛种苗。
2. 实验所需的培养基、营养液等。
3. 实验所需的仪器设备，如显微镜、离心机、高效液相色谱仪等。
四、实验内容1. 铁皮石斛的生长环境研究（1）设置不同的光照、温度、湿度等条件，观察铁皮石斛的生长情况。
（2）研究铁皮石斛在不同土壤条件下的生长情况。
2. 铁皮石斛的药用成分研究（1）采用高效液相色谱法等分析方法，测定铁皮石斛中多糖、生物碱等药用成分的含量。
（2）研究不同生长阶段、不同部位铁皮石斛中药用成分的含量变化。
3. 铁皮石斛的药用价值研究（1）进行动物实验，研究铁皮石斛对免疫系统、心血管系统等的影响。
（2）探索铁皮石斛在治疗疾病方面的应用前景。
五、实验步骤1. 铁皮石斛的培养（1）选取健康的铁皮石斛种苗，进行消毒处理。
（2）将种苗接种到培养基中，进行培养。
2. 生长环境研究（1）设置不同的光照、温度、湿度等条件，观察铁皮石斛的生长情况。
（2）定期测量铁皮石斛的生长指标，如株高、茎粗等。
3. 药用成分研究（1）采集不同生长阶段、不同部位的铁皮石斛样本。
（2）采用高效液相色谱法等分析方法，测定样本中多糖、生物碱等药用成分的含量。
4. 药用价值研究（1）选取实验动物，进行分组。
（2）给予不同剂量的铁皮石斛提取物，观察动物的生理指标变化。
（3）分析实验数据，评估铁皮石斛的药用价值。
六、实验时间安排实验时间：[具体时间]实验进度安排：1. [时间区间 1]：完成铁皮石斛的培养和生长环境研究。
2. [时间区间 2]：完成铁皮石斛的药用成分研究。
3. [时间区间 3]：完成铁皮石斛的药用价值研究。
铁皮石斛组培快繁技术实例分享 · 附配方
铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo），属微子目，兰科多年生附生草本植物，是名贵的中药材。
本文在前人研究的基础上，以铁皮石斛的未成熟种子为外植体材料，研究了铁皮石斛的再生体系，其研究结果可为铁皮石斛的工厂化育苗提供技术支撑。
1 材料与方法1.1 外植体材料及培养条件1.1.1 外植体选择实验材料为八成熟的铁皮石斛蒴果。
1.1.2 材料预处理及消毒将铁皮石斛的蒴果先用自来水冲洗干净，再置于洗洁精溶液中摇洗3次，每次摇洗5分钟；取出蒴果用自来水洗净，沥干水后。
在超净工作台上先用75%浓度的酒精消毒3分钟，倒去酒精；再用0.15%的升汞消毒15分钟；倒去升汞消毒液，用无菌水冲洗4-5次，沥干备用。
接种时，将经过表面消毒的蒴果放在无菌的不锈钢盘上，切除头尾约0.5厘米部分并弃去，然后将蒴果中段沿纵轴切开，取出种子，均匀地接种到培养基表面。
1.1.3 培养条件培养室温度为(25±2)℃，以日光灯为光源，光照强度为2000-2500lx，照光10小时/天。
2 结果与分析2.1 初代培养：种子的萌发与无菌材料的建立将铁皮石斛的未成熟种子接种在初代培养基（配方见文末，下同）上，培养约15天后，用肉眼可观察到在培养基表面有浅绿色的小团粒(直径0.5-1.5毫米)。
这些浅绿色颗粒系原球茎体，或为少数原球茎体已萌发出子叶和第1片真叶而形成的无菌实生小苗。
再经过20-25天的培养，大部分原球茎体已萌发，形成了具1-2片真叶的幼苗，同时也产生了一些新增殖的原球茎体。
这些幼苗和原球茎体相互堆挤在一起，占满了初代培养基整个表层及表层上约1.5厘米厚的空间。
此时，铁皮石斛无菌材料的建立即告完成，应该及时将无菌实生小苗或原球茎体转接到新配制的增殖培养基或者生根壮苗培养基上进行培养。
2.2 继代增殖培养建立了铁皮石斛的无菌材料后，将原球茎转接到增殖培养基，培养90天，增殖系数非常高。
铁皮石斛组培方案样本
铁皮石斛组织培养方案报告一、实验目二、理解铁皮石斛培养办法和环节, 纯熟掌握外植体取材、消毒、接种、初代培养操作过程。
三、实验器材超净工作台、高压灭菌锅、电磁炉、长镊子、培养皿、酒精灯、接种工具、烧杯、玻璃棒、移液管、培养箱、剪刀、培养瓶等。
四、实验环节配方：依照不同阶段, 培养基配方有所差别。
如表1表1 各种培养基配方配制（以1000ml幼株生根壮苗培养基为例）10%香蕉（w/w）+MS +3%蔗糖（w/w）+0.8%琼脂（w/w）+2.0mg/L NAA1）量取800ml蒸馏水于干净大烧杯中, 加热至沸腾；2）精确称量100g香蕉果肉, 切成碎片状, 并倒入上述烧杯中, 加热煮沸5min, 其间搅拌使之充分溶解；3）按照大量、微量、Fe2+盐、有机Ⅰ、有机Ⅱ顺序, 量取MS各种母液于盛有50ml蒸馏水烧杯, 混合均匀；4）将2）和3）溶液混合, 然后加入30g蔗糖, 并移取2ml NAA（0.1mg/ml）, 混合均匀；5）加热至沸腾, 加入8g琼脂并煮沸5min, 其间不断搅拌使之充分溶解；6）冷却至50±5℃时, 调pH至5.4—5.6。
分装于培养瓶内, 33.3ml/瓶。
注意事项:①溶解香蕉蒸馏水尽量多, 以保证香蕉各种成分完全溶解；②各种母液混合时, 要按照大量、微量、Fe2+盐、有机Ⅰ、有机Ⅱ顺序；③煮沸时, 小心溶液溢出；④分装时不要污染培养瓶瓶口。
灭菌：1）检查灭菌锅水位、电源、排气阀、排气管、安全阀以及压力表, 保证灭菌锅各指标和功能正常, 以防事故发生；2）把带灭菌培养基装入锅内, 盖上锅盖, 对称而均匀地扭紧螺丝；3）打开电源和排气阀, 调节电压至220V；4）待排气阀排除水蒸气30s—1min后, 关闭排气阀；5）当温度上升到121℃后, 调节电压至135V, 保持20min；6）关闭电源, 使之自动降温至0℃。
10min后, 打开排气阀和锅盖；7）5—10min后, 取出培养基放于实验台上冷却, 待用。
铁皮石斛茎段的培养
实验五铁皮石斛茎段的培养
一、实验目的
本实验以铁皮石斛为材料，学习和掌握以茎段为外植体的植物组织培养方法，熟练掌握灭菌和接种技术。
二、实验原理
铁皮石斛（学名：Dendrobium officinale Kimura et Migo）为兰科石斛兰属多年生草本植物，喜在温暖、潮湿、半阴半阳的环境中生长。
分布于福建、浙江、广西、云南、贵州等地。
铁皮石斛含有多种铁皮石斛素，具有滋阴养血、益胃生津，清热明目的作用。
茎段培养是植物组织培养的常用外植体选择之一，诱导率高，繁殖性强。
以带芽的茎段进行组织培养，易诱导出无菌芽。
三、实验仪器
接种盘，剪刀，接种镊子，三角瓶，培养瓶，超净工作台。
四、实验材料
多年生铁皮石斛茎段
五、实验步骤
1、预处理
取铁皮石斛茎段，去掉叶鞘，剪刀把带腋芽的节剪成1.5cm左右的茎段，放入瓶子中，加入高锰酸钾溶液，浸泡15min。
后用流水冲洗10min。
2、灭菌与接种
预处理后的外植体置于超净工作台上，用75% 酒精灭菌30s，无菌水冲洗3次，后用0.1%升汞浸泡12~17min，然后用无菌水冲洗5次后，备用。
在无菌条件下，芽体朝上接种于诱导培养基上。
3、培养
培养基为MS+2.0mg/L6-BA。
接种结束后，将培养瓶放置培养室进行光照培养。
六、实验结果记录
3~5天后观察接种的外植体，做好污染数据的记录。
铁皮石斛组织培养实验流程
铁皮石斛组织培养实验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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铁皮石斛的组织培养与快速繁殖研究
Final buds 765
Increase rate/ % 354. 74B**
Physical status* +++
B5
168
975
498. 90A
+++
MS
163
638
296. 02C
++
KC
136
388
181. 80D
+
* + ( 细弱) , + + ( 生长一般) , + + + ( 饱满, 健壮) , 下表同. * The physical status of buds were indicated as, + , tiny and thin; + + , or dinary; + + + , plump and vigorous. The same as below. ** 同一列不同字母者表示相互间比较差异达到极 显著水平, 下表同. ** The different capital letter in the same column indicated very significant difference. The same as below.
pH 至 518. 在超净工作台上, 将铁皮石斛试管苗切成 1~ 2 cm 的茎段, 在以上培养基上接种进行芽诱导. 每 组各接种 25 瓶, 随机抽取其中 20 瓶进行生长性状观测. 培养时间均为 1 个月, 培养温度( 25 ? 1) e , 光照强 度1 500~ 2000 1x, 每天光照 12 h, 下同.
2 结果与分析
211 不同基本培养基对铁皮石斛芽诱导和增殖的影响 4 种基本培养基对铁皮石斛芽诱导效果, 相互之间的比较差异极显著( 表 1) , 其中以 B5 的增殖效果最
铁皮石斛的组织培养
铁皮石斛的组织培养作者：黄子聪来源：《农家科技下旬刊》2014年第09期摘要：铁皮石斛是兰科石斛属多年生附生草本植物，为传统名贵中药。
由于对生境要求十分苛刻，加之人为过分采收，现已濒临灭绝，已被列为“濒危珍稀植物”。
对铁皮石斛的组织培养及人工栽培进行研究，实现保护野生铁皮石斛资源的同时满足人们的消费需求，具有重要的现实意义。
关键词：铁皮石斛；组培快繁一、铁皮石斛组培培养（一）材料与方法1.供试材料供试材料：果荚：从浙江省购买回来的组培苗，栽种于温室大棚中，选择品质纯正的、生长健壮的铁皮石斛单株进行授粉，获得果荚。
茎段：从浙江省购买回来的组培苗，栽种于温室大棚中，选择品质纯正的、生长健壮的、二年生的、具有20厘米以上的铁皮石斛，自上而下剪下15厘米左右，带回实验室，备用。
2.方法（1）消毒方法果荚的消毒方法：将生长了5个月的果荚用消毒的剪刀从植株上剪下，带到超净工作台下，用75%的酒精浸泡2分钟，然后用灭菌去离子水清洗两次，放在灭菌的空瓶中。
播种前，将要切开的部位及花朵着生位置在酒精灯下稍微过火，然后再将基切开，播种。
（2）种子无菌播种将灭菌的果荚在果荚蒂附近的位置上用灭菌的手术刀切开一个约1.5厘米的切口，然后直接将种子均匀地撒在培养基上。
放在培养架上进行光照培养。
培养基配方：Z0：MS+NAA0.1mg/L+土豆汁100g/L（3）原球茎的增殖及分化将转绿的原球茎转接到增殖分化培养基上，每瓶接种6个点，每个点5个原球茎，5瓶一个重复，设3次重复。
茎段的消毒方法：选取茎段特征明显的铁皮石斛单株，用消毒的剪刀从节间靠下的位置将优选单株剪下，然后将叶片摘除，在自来水下将表面的灰尘洗去。
接下来将茎段上的叶鞘撕掉，特别是底部与节相连接的位置要去干净，同时注意不要伤到休眠芽，再用洗洁精进行表面清洗，在自来水下将洗洁精清洗干净，带到超净工作台下，用75%酒精浸泡两分钟，期间不断地搅拌，再用灭菌去离子水清洗2两，切成每段3-5节，用0.1%升汞（加吐温20 2滴）浸泡9分钟，期间不断地搅拌，倒去升汞溶液，再用灭菌去离子水清洗6次，每次2分钟。
铁皮石斛的组织培植
铁皮石斛的组织培植简介铁皮石斛（Dendrobium officinale）是一种珍贵的中药材，被公认为具有滋补养生的功效。
由于其野生资源减少，组织培植成为了其繁殖的重要途径。
本文将介绍铁皮石斛的组织培植方法，用于指导相关研究和实践。
材料与方法1. 无菌实验室条件：培养室温度为25℃，相对湿度为60%-70%，光照强度为3000-4000lx。
2. 培养基配方：- MS培养基：含有葡萄糖（30g/L）、琼脂（8g/L）、pH值调整到5.8。
- 添加生长调节剂：添加6-苄氨基酸（0.1mg/L）和吲哚-3-乙酸（0.5mg/L）。
过程1. 选取健康无病的铁皮石斛茎段作为外植体，将其进行消毒处理。
使用70%酒精浸泡2分钟，随后用0.1%高锰酸钾溶液浸泡10分钟，最后用无菌蒸馏水冲洗3次。
2. 切取消毒后的茎段偏上部位的小芽组织，每个芽组织含有1-2个小芽。
3. 将切取的芽组织置于含有MS培养基和生长调节剂的培养瓶中。
4. 培养瓶密封并置于培养室中，进行组织培养。
每周移植一次，移至新的含有培养基的培养瓶中。
结果与讨论经过适当的组织培养时间，铁皮石斛的小芽可以快速生长并分化出根系。
在合适的培养条件下，每个芽组织可以发育成为整株植物，从而实现大规模繁殖。
值得注意的是，在铁皮石斛的组织培植过程中，应加强对培养基和环境条件的控制。
培养基中添加的生长调节剂和孕育液质量对结果有重要影响。
同时，无菌操作的严格执行也是保证培植过程成功的关键。
结论铁皮石斛的组织培植方法是一种有效的繁殖途径，能够满足市场需求，并促进可持续发展。
通过合理控制培养基配方和环境条件，可以实现铁皮石斛的大规模繁殖与种植，为相关产业的发展提供有力保障。
这一研究对于进一步深入了解铁皮石斛的生物学特性和开发利用具有重要意义。
铁皮石斛的组织培养
由于石斛自然繁殖力极弱，生长缓慢，加之人们掠夺性采挖，资源已严重枯竭。
而石斛栽培一直未解决其存活率低、进入盛产期年限长等问题，故石斛药源一直处于紧张状态。
因此，组织培养、遗传转化、菌根技术、悬浮培养等生物技术在石斛的应用意义重大，甚为迫切。
石斛的组织培养，可用种子、根、茎尖、茎节及叶等为外植体，但以种子进行组培快繁的为多。
原球茎的增殖分化是石斛试管苗繁殖的关键，因此，研究原球茎增殖分化的适宜培养条件非常重要。
特别是应用组织培养技术快速大量繁殖石斛试管苗，是解决其种苗与发展生产的有效途径。
铁皮石斛的组织培养铁皮石斛，又名铁皮兰、节草、耳环石斛等。
野生铁皮石斛为国家珍稀濒危保护植物（三级）。
由于其生长环境要求特殊，野生资源已濒临灭绝。
现云南晨安生物科技开发有限公司对铁皮石斛的组培快繁已获成功，月出苗量50万瓶以上，为铁皮石斛工厂化育苗和大面积栽培闯出了一条新路。
1 胚培养（种子培养）：取人工授粉的铁皮石斛果实，用75％的乙醇表面消毒，30s后再用0.1％升汞溶液消毒8min，无菌水冲洗4~5次。
在无菌操作下，把果实切成0.1mm见方的小块，接种到培养基上，每瓶3~5块。
研究结果表明，N6培养基对种子萌发和生长最好，蔗糖浓度2％最佳，NAA浓度0.2~0.5mg/L最适合胚的萌发和生长；种子培养中加入椰乳对胚萌发和萌发后的初期生长起促进作用；而香蕉汁对继代培养中石斛的生根和壮苗起促进作用，生根和壮苗培养中不加入NAA，只用N6+10％香蕉汁，苗长得更粗壮。
培养温度25~28℃，光照强度1600~2000lx，每日10~12h。
种子萌发后，转管3~4次，当幼苗长出4~5片真叶并具有3~4条1~2cm长的根时，可将试管苗进行炼苗后移栽。
在实验中尚发现，石斛原球茎的增殖与胚龄相关，不同胚龄培养，其萌发率不同：胚龄45天以下，萌发率极低，萌发时间长；60天胚龄的胚具34个细胞，萌发率为6％；90天胚龄的胚细胞为74个，萌发率为87％；120天胚龄的细胞数为90个，萌发率95％以上。
铁皮石斛的组织培养与快速繁殖(1)
移栽前， 先将试管苗练苗 １ 周， 出瓶时注意 不要伤及根茎部， 用流水洗去根部附着的培养基 后， 在阴凉通风处晾根半天， 栽入盛锯木屑和塘 基兰石的穴盘中， 或者混合基质（ ２ 份陶粒 ＋１ 份 腐叶土 ＋１ 份树皮 ＋１ 份锯木屑） ，（ 下转第 １３ 页）
时， 立即喷药防治， 使用的药物与防治红蜘蛛的药
物一样。
４．５ 蚧类
主要有吹绵蚧、盾蚧类等， 为害枝条和果实，
削弱树势， 诱发煤烟病， 降低果实的产量和品质。
防治方法： 冬季用 １６￣２０ 倍液的松脂合剂清园，
并剪去虫枝。防治重点掌握在 ５～６ 月间第 １ 代若
虫盛发期连续喷药 ２ 次， 使用的药剂有： ４０％ 氧化
柑桔类的病虫害种类较多， 介绍几种主要病 虫害的为害症状及防治方法。 ４．１ 疮痂病
主要为害嫩枝叶、幼果。叶片染病开始出现水 渍状小斑点， 后成蜡黄色。果实受害后常长出许多 瘤状突起。防治方法： 第 １ 次在春芽萌动 １ 粒米长 时， 第 ２ 次在谢 花结束时， 各 喷 １ 次 ５０％ 退 菌 特 ５００ 倍液或 ７０％ 甲基托布津 ８００ 倍液。 ４．２ 炭疽病
将增殖后的胚状体转到（ ８） 中壮苗， 可提高 植株的健壮度， 培养 ３０ 天后再转到培养基（ ９） 、 （ １０） 、（ １１） 中 ，（ ９） 、（ １０） 号 培 养 基 迅 速 分 化 长出具根的小苗， ６０ 天后形成的丛生苗已具 ３ 片 真叶和 ４ 条 ３￣５ｃｍ 长的根。（９） 号培养基苗高可 达 ５￣６ｃｍ， 但苗基部易产生丛芽， 不利于试管苗的 移栽， 所以（ ９） 号培养基更有利于生根移栽。 ３ 试管苗的移栽
铁皮石斛的组织培养与快速繁殖
铁皮石斛的组织培养与快速繁殖摘要：实验以铁皮石斛优良品种的茎段为外殖体，诱导丛生芽，壮苗生根，从而实现大量繁殖。
当NAA 的浓度为0.3mg/L , 6-BA 的浓度为5mg/L 时，铁皮石斛丛生芽的增殖率最高。
在MS 培养基中，铁皮石斛壮苗生根的最好培养基为MS + 6 - BA ( 2mg/L ) + 20 ％香蕉汁。
不同激素浓度的6-BA 对铁皮石斛壮苗生根的影响比较得出，不加6-BA 的培养基小苗生根率低、发根迟、根数少；而加人6-BA 后以大幅度提高生根率，尤以在6-BA 0.4mg/L 的培养基中小苗生根快，根数多。
从不同培养基对铁皮石斛试管苗生长的影响看出，幼苗用MS 培养基比用KC 培养基培养生长好。
铁皮石斛培养60d 左右时生长速度最快。
香蕉提取液能促进生长，从而使苗的生长加快。
以MS ＋香蕉汁20 ％的培养基为最好。
关键词：铁皮石斛；组织培养；丛生芽；壮苗生根铁皮石斛是兰科著名的盆载观花植物，具有很高的观赏价值。
近年来，铁皮石斛培养及快速繁殖技术的研究，取得了很大的成果。
本实验对药用铁皮石斛茎段进行组织培养，提出了一套快速繁殖程序，为快速育苗提供了有价值的技术资料和科学依据。
利用组织培养技术，对药用铁皮石斛进行快速繁殖，是目前解决生产种苗问题的有效方法。
1 材料与方法1.1 试验材料铁皮石斛优良品种，来源于日本。
1.2 试验方法1.2.1 外植体的选取和预处理将从日本引进的生长旺盛的铁皮石斛健康植株，以茎芽为中心剪下，芽的上下各留0.5cm的茎段，用洗衣粉浸泡20min 左右，取出后再用自来水反复冲洗数次，备用。
1.2.2 外植体的灭菌将预处理过的外植体用75 ％的酒精溶液灭菌30 s，然后用无菌水冲洗l 次，将茎段腋芽的苞叶拨去，然后将0.1 ％的HgC12 溶液倒人烧杯中灭菌10 min ，灭菌过程中不断摇动烧杯使灭菌更加彻底，最后用无菌水冲洗5 、6 次将HgCl2溶液冲净并接种到培养基上。
关于铁皮石斛组织培养及种植的实习报告(园林园艺系毕业论文范本)作者：温馨燕
关于铁皮石斛组织培养的实习报告一、实习目的：通过实习，使我们懂得铁皮石斛的组织培养及种植技术，从而巩固课本上所学知识，达到理论与实际相结合的目的。
更重要的是，通过实习实训，提高我们分析问题、解决问题的能力，培养自立自强，吃苦耐劳的精神，为我们更好的踏入社会打好基础。
二、实习单位及岗位介绍：1、实习单位介绍：光明食品集团云南石斛生物科技开发有限公司围绕省委、省政府“大力发展生物资源开发创新产业，建设绿色经济强省”的战略部署，由光明食品集团上海东海总公司与云南红土生源药用生物科技开发有限公司共同投资成立，创办为集生物技术和生物保健品研究、开发、生产、经营于一体的生物科技公司。
公司经过股东方云南红土生源公司几年的努力，对已收集到的石斛野生种进行了组培和离体种质保存研究，现已制定了石斛种源筛选鉴定标准和石斛组织培养及种植生长周期标准、环境标准、工艺标准，并全面实施铁皮石斛种苗生产质量规范。
在种苗组培取得成功的基础上，公司同时研发了“铁皮石斛高效密植仿野生栽培方法”，建立了铁皮石斛GAP标准化种植基地600亩，带动并指导农户种植石斛500亩，移栽成活率达到98%以上，居国内领先。
并全面开展了繁育方法试验研究、肥料对比试验研究、种植方式对比试验研究、种植基质对比试验研究、种植密度对比试验研究、遮阴度对比试验研究、病虫害防治研究，以及采收、产地初加工、保鲜及包装、贮存、运输研究工作，石斛质量与生产过程的全面质量管理、石斛规范化生产标准操作规程的制定（SOP），实现了铁皮石斛规模化、规范化、标准化、产业化发展。
三是顺应市场需求，按照国家GMP标准建设了铁皮石斛加工厂69.51亩，包括饮片车间、前处理提取车间、制剂车间和办公楼等配套设施，可年加工铁皮石斛系列产品500吨以上。
2、实习岗位介绍：在光明食品集团云南石斛生物科技开发有限公司实习的这段时间，岗位主要是组培技术人员，进行石斛的增殖培养和生根培养。
此岗位主要负责石斛的无性繁殖，进行严格的操作，消毒、灭菌彻底，以达到提高接种速度、接种质量，降低污染的目的，取得更好的经济效益。
铁皮石斛的快速组培实验分析----农研铁石斛种植
农研铁皮石斛种植铁皮石斛的快速组培实验分析铁皮石斛(Dendrobium Nobil)是兰科石斛属多年生附生兰,但目前由于专业性培育斛的整体水品不是很高,关键的生产环节技术薄弱,造成石斛繁殖系数偏低,工业化生产效率不高,许多名贵品种短缺,品质较低,且市场售价较高。
因此建立和完善石斛组培快繁技术是解决这一问题的重要途径。
本试验以石斛花后假鳞茎带节茎段为外植体诱导丛生芽,研究以丛生芽途径建立植株再生体系。
主要围绕外植体灭菌、腋芽诱导、丛生芽增殖、壮苗生根、炼苗移栽等几方面进行,集中研究不同灭菌方法、不同基本培养基类型、不同激素配比和浓度、不同添加物、不同碳源等多个方面问题。
试验中的培养基方案均采用正交设计,数据采用SPSS软件分析。
通过试验,获得如下主要结果:1、以石斛开花后假鳞茎带节茎段为外植体,最佳的灭菌方法是Ⅱ处理组,即假鳞茎带节茎段→自来水冲洗→洗衣粉上清液浸泡10min并用软刷刷去表面污垢→自来水冲洗30min→置于超静工作台上70%酒精浸泡20s→无菌水冲洗4次→0.1%HgCl_2浸泡15min→无菌水冲洗8次→取出吸干水分并除去包叶→接种,成活率达80%。
2、影响石斛假鳞茎带节茎段诱导腋芽的主要因素是基本培养基、细胞分裂素BA和天然添加物,其次是NAA。
丛生芽诱导最适宜的培养基配方为1/2 MS+BA1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+椰汁150.0mL/L+食糖30.0 g/L+琼脂7.0 g/L,pH5.4,诱导达94.47%。
3、影响石斛丛生芽增殖的主要因素是:(1)基本培养基,以1/2MS最佳;(2)细胞分裂素BA,以1.0mg/L最佳;KT以0.5 mg/L最佳;(3)生长素NAA,以1.0mg/L最佳。
其次,试验中发现添加物、培养基pH值、接入茎段长度、丛植密度对丛芽增殖有显著影响。
丛生芽增殖的最适宜的培养基配方是1/2MS+BA1.0mg/L+NAA1.5mg/L+KT0.5mg/L+食糖30.0g/L+琼脂 6.0g/L+椰汁150.0mL/L,pH5.4。
铁皮石斛细胞悬浮培养实验报告
铁皮石斛细胞悬浮培养实验报告铁皮石斛为兰科多年生附生草本植物，属国家2级保护的贵重濒危药材。
现代药理研究证实，铁皮石斛具有增强机体免疫力、抗肿瘤等作用。
目前，铁皮石斛的市场供需严重不平衡，虽已有离体再生的报道，但其存在育苗周期长、增殖系数低等问题，扩大铁皮石斛药源，以保护铁皮石斛资源、弥补市场供需缺口具有重要意义。
本研究以取自云南的野生铁皮石斛为试验材料，对铁皮石斛高效快繁体系及细胞培养进行了研究，主要研究结果如下：1、建立了一种铁皮石斛腋芽快繁体系。
结果表明：外植体的种类、NAA与6-BA的剂量及配比对丛生芽诱导率具有显著影响。
以含第一茎节的茎段丛生芽的诱导率最高，达66.7%，2～3茎节略次之，诱导率为53.3%，均为较好的外植体材料。
对于激素的筛选发现，NAA 与6-BA的浓度比与丛芽的诱导率及增殖系数呈正相关，其中优化的丛生芽诱导培养基为1/2MS+0.5mg/L NAA+4mg/L6-BA，丛生芽诱导率高达73.3%，增殖系数达19.87。
2、建立了一种基于拟原球茎的铁皮石斛快繁体系(直接体胚再生)。
以丛生芽为外植体，对拟原球茎的诱导、分化、丛生芽生根壮苗的影响因素进行研究，其最适宜培养基分别为：拟原球茎诱导：MS+1mg/LTDZ+0.5mg/LNAA+0.5mg/L2，4-D拟原球茎分化：MS+1mg/LNAA+10mg/L6-BA生根壮苗：1/2MS++1mg/L6-BA+2mg/LNAA+6mg/L IBA+200g/L土豆汁按此体系进行培养，增殖系数最高达52.3。
炼苗移栽：选取5cm以上的石斛苗，移栽至底层水苔1~2cm+蛭石松树皮混合物（体积比为1：2至1：4）+顶层水苔3～5cm，移栽成活率高达98.3%。
3、建立了铁皮石斛愈伤组织诱导及细胞驯化的技术体系。
以拟原球茎为外植体，最佳诱导培养基为：MS+0.5mg/L2，4-D+0.25mg/L 或0.5mg/L KT，仅需7-10d可得长势良好的愈伤组织。
铁皮石斛组织培养研究进展组织培养
铁皮石斛组织培养研究进展1、1种子萌发1.2基本培养基铁皮石斛种子在N6，改良N6 , MS , 1 / 2 MS , SH 、KS 、VW、KundsonC , 1 / 2N6 White等培养基上均可萌发。
赵天榜等比较风、MS等14种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响，除残外，所有的基本培养基均优于其减半培养基，其中以N6最好，SH、Kn、MS次之，I /2MS、1 / 2 Vw 最差。
曾宋君等田将铁皮石斛种子在SH、改良N6、MS、KS、VW、KundsonC 培养基中培养，得出最适培养基为改良N6或自制PT培养基。
罗吉凤等比较了*** / 2MS 、1 / 2 N6和White培养基对铁皮石斛种子萌发的影响，30d种子发芽率均达到95 % ，但1 / 2MS培养基上所萌发的原球茎较大。
1.3激素在培养基中添加一定浓度的NAA可促进种子的萌发，浓度以0.2 —0.5mg/L最适合胚的萌发和生长，过高起抑制作用。
2,4-D对胚的萌发起抑制作用。
6 一BA对胚萌发后的生长起抑制作用。
KT、IAA对胚萌发和成苗的影响不大，当浓度超过1mg/L时，对胚萌发和成苗起抑制作用。
ABA有抑制种子萌发和抑制植物生长的作用, 但张铭等发现ABA能显著提高铁皮石斛原球茎的质量，浓度以0.5mg/L为最佳。
1.4天然添加物在培养基中添加适量的马铃薯汁、香蕉汁、椰乳可促进铁皮石斛种胚的萌发，但张玲等认为香蕉提取物和椰乳对种子萌发和正常发育有不利影响，干扰其正常发育过程。
1.5炭源在组培过程中适当添加活性炭，可以吸附代谢过程中产生的废弃物，防止组织褐变，并刺激胚胎的发生与生根，可加人2 %蔗糖。
曾宋君等在改良N6 + NAA 0.2mg/L 的最适培养基上，发现以白糖、片糖为炭源时，胚萌发和成苗的效果比蔗糖好，这可能是白糖、片糖中含有适合胚萌发和成苗的矿质元素2原球茎增殖2.1基本培养基铁皮石斛原球茎增殖可以1/2 MS，MS等作为基本培养基。
铁皮石斛组织培养
小苗可以用苔藓或水苔!中苗就要树皮石子加苔藓!大苗可用石子树皮等!至于用来培养组织苗的培养基属难告知恩，这个我知道，我就想出了MS培养基，没有其他适合的了吗？培养基也属于商业秘密啊？很多好一些的营养基都是商业密秘!我会去给你找个适合石斛的营养基.只能给你个普通的!希望你喜欢石斛较常见的培养基配方,花宝三克,百分之十到百分之二十的萍果汁一千毫升,蔗糖浓度百分之三点五.琼脂十五克.蒸溜水一千克氢离子浓度调节到一万纳摩/升(PH5.0)常规铁皮石斛开花后采用人工方法授粉，将其种子接种在１／２ＭＳ液体培养基中非共生萌发培养时，再转入含有０．０１％Ｏｒｙｚａｌｉｎ＋０．０１％秋水仙碱的１／２ＭＳ液体培养基中进行诱变处理，然后转入１／２ＭＳ固体培养基上，光照；取新生长的根尖固定，用压片法制备染色体标本，卡宝品红染色液染色，染色体数目为２ｎ＝７６的幼苗为四倍体铁皮石斛，按通常方法进行栽培管理。
现在大部分采用松树皮发孝后来种的！铁皮石斛组织培养的培养基用到的主要基本培养基是MS培养基，也不只是这一种，其它的WV、winte等都可以用，但是一般多用MS培养基，也可以用1/2MS培养基，大量元素减半，其它元素不变。
除此之外，还有加一些生长素（如IAA、IBA、NAA等），细胞分裂素（如6-BA等）。
但是不同的培养时期也不同的激素配合。
如诱导愈伤组织时，要两种激素的配合。
增殖传代时也要两种激素的配合，但生长素为主；分化时以分裂素为主，壮苗和生根以生长素不主。
一般用量都是0.1-10mg/L这个范围里。
此外，还有的加了什么香蕉素，椰看你是用什么外植体，或是想诱导什么先了，一般如果是茎段的话，用一般的MS+0.3mg/L NAA+5mg/L 6-BA做诱导培养基就好，但是如果你要用根茎做外植体诱导原球茎的话，最号用1/2MS加上水解乳蛋白和激动素和6-BA 就好,量看你外植体了，不同的类型不同乳等。
一般NAA：6-BA是10：1，即2：0.2mg/L（一）繁殖技术石斛的繁殖方法分为有性繁殖和无性繁殖两大类，目前生产上主要采用无性繁殖方法。
铁皮石斛杂交种组织培养技术试验
铁 皮 石 斛 杂 交种 组 织 培 养技 术试 验
高 燕， 李 泽 生 ， 耿 秀英 ， 李守 岭 ， 李桂 琳 ， 白燕 冰
（ 云 南省 德 宏 热 带农 业科 学研 究所 ， 云南 瑞 丽 ６ ７ ８ ６ ０ ０ ）
一
２１ 一
摘要 ： 以铁 皮石 斛 杂 交种 子 为 外 植 体 的 组 织培 养技 术 试 验 结 果 ： 铁 皮 石 斛 杂 交种 原球 茎最 佳诱 导培 养基为 ３ ／ ４ Ｍａ ＋ ５ ％椰 子 汁 ； 增 殖分化培养基为 ３ １ ４ Ｍａ ＋ ６ 一 Ｂ Ａ ０ ． ２ ｍ ｇ ・ ＋ Ｎ Ａ Ａ ０ ． １ ｍ ｇ ・ ＋ １ ０ ％马 铃 薯 泥＋ ２ ％香 蕉 泥 ； 壮 苗 生根 培 养基 为 ３ ／ ４ Ｍａ ＋ ６ － Ｂ Ａ ０ ． ２ ｍ ｇ ・ ＋ Ｎ Ａ Ａ １ ． ０ ｍ ｇ ・ Ｌ － １ ＋ ８ ％马铃 薯泥 ＋ ５ ％香 蕉泥 ，
生根 率 可 达 １ ０ ０ ％ 移 栽 成 活率在 ９ ７ ％以 上 。
关键词 ： 铁皮石斛； 种胚 ； 组 织培 养
中图分类号 ： ￥ ６ ８ ２ ． ３ １ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ６ ７ ２ — ４ ５ ０ Ｘ（ ２ ０ １ ４） ０ ２ － ０ ０ ２ １ － ０ ４
乱、 品种 退 化 、 品 质 下 降 等 问 题 成 为 了 影 响 产 业 发 展 的 主 要 瓶 颈 。 铁 皮 石 斛 和 齿 瓣 石 斛 亩 产 值 较 高， 而 以 云 南 广 南 红 杆 软 角 铁 皮 石 斛 较 为优 良 ， 适
应 性强 ， 抗 性好 ； 龙 陵齿瓣石斛 生长快 ， 产 量高 ， 多
外植 体消毒处理 ： 将 铁 皮 石 斛 杂 交 种 果 荚 放 人
组培实验设计性实验方案
正交实验法研究铁皮石斛原球茎分化影响条件[摘要]利用6-BA、IBA、NAA和外源添加物四个因素三水平进行L9 ( 34 )正交实验, 研究各因素对铁皮石斛原球茎分化的影响. 对实验统计通过极差分析及均值分析, 结果表明: 当6-BA的浓度为2 mg /L、IBA 浓度为0.5mg /L、NAA浓度为0.75mg /L和外源添加物为苹果（50g/L）时, 原球茎最易于分化成丛生小苗; 影响原球茎分化程度的因素依次为6-BA浓度﹥外源添加物﹥NAA浓度﹥IBA浓度。
[关键词]铁皮石斛；组织培养；原球茎分化；正交实验。
1 前言1.1 目的意义铁皮石斛(Dendrobium candidum Wall． ex Lindl． ) 为兰科石斛属多年生附生型草本植物，别名铁皮兰，因其茎节处呈黑褐色，又名黑节草[ 1]。
利用石斛茎尖组织培养无病毒植株的无性繁殖技术创立以来, 石斛组织培养技术逐步走向深入化。
目前, 有关铁皮石斛的原球茎分化和生根条件的研究大都基于单因素试验, 如不同培养基、激素浓度、无机盐浓度、碳源、pH 等以及香蕉、马铃薯等附加物[2]。
但是铁皮石斛原球茎分化及生根受培养基中综合因素的共同影响, 不同因子的合理配置决定着培养基的科学性和高效性. 运用正交实验设计可以精简试验次数、克服培养基配方设计的盲目性、大大提高工作效率和试验的可靠性。
1.2 研究进展自1960年法国人Gmore l利用石斛茎尖组织培养无病毒植株的无性繁殖技术创立以来, 石斛组织培养技术逐步走向深入化. 目前, 有关铁皮石斛的原球茎分化和生根条件的研究大都基于单因素试验, 如不同培养基、激素浓度、无机盐浓度、碳源、pH 等以及香蕉、马铃薯等附加物. 运用正交实验设计可以精简试验次数、克服培养基配方设计的盲目性、大大提高工作效率和试验的可靠性. 广东省植物研究所关于籼稻花药的离体培养的报道, 还相继在兰科植物中得到了应用[3], 但尚未应用于铁皮石斛的离体培养. 本实验利用6-BA、IBA、pH 和培养基种类、琼脂浓度、KCl浓度各三因素三水平及空白对照分别设计两套L9 ( 34 )正交实验[4], 以期分别得到有利于铁皮石斛原球茎分化和生根的理想培养基配方.在20 世纪70 年代，谭文澄等就进行铁皮石斛兰组织培养研究并获得完整植株。
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铁皮石斛茎段组织培养与栽培摘要: 为试验铁皮石斛茎段组织培养与栽培，以铁皮石斛茎段为外植体，结合铁皮石斛的生物学特性，综述铁皮石斛组织培养与栽培的过程技术。
观察研究基本培养基、天然附加物和植物生长调节剂对铁皮石斛生长的影响。
验证和探究铁皮石斛茎段组织培养技术并对铁皮石斛的组织培养与栽培管理技术进行了思考与展望。
关键词: 铁皮石斛; 组织培养; 茎段; 移栽; 驯化0.引言铁皮石斛( Dendrobium officinale Kimura et Migo) 是兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium Sw．)多年生草本植物，又名黑节草，俗称铁皮枫斗，分布于云南、安徽、贵州、浙江、江西、广东和广西等地，是我国传统名贵珍稀中药材，其有效成分主要为石斛多糖、石斛碱、氨基酸等，其中石斛多糖的含量高达21.7%，能显著提高机体免疫功能，具有养胃出津、补肾益力、滋阴清热、耐缺氧、抗疲劳、抗肿瘤等功效。
现代药理学研究发现，石斛还具有抗衰老和扩张血管的作用。
铁皮石斛喜荫凉、湿润的环境，常附在高海拔悬崖峭壁或林内树干和岩石缝隙中。
由于其药用价值高、生长条件特殊和分布受局限，且经长期人为采挖，野生资源濒临灭绝。
铁皮石斛是2005版《中华人民共和国药典》收载的3种石斛属植物之一，为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。
铁皮石斛蒴果成熟时易开裂，且种子粒径小，自然繁殖率低，是一种珍稀的药用植物和和名贵的室内观赏植物.。
铁皮石斛自然繁殖力极低, 常规繁殖又较困难, 且多年来对铁皮石斛的采集量远大于其生长量, 野生铁皮石斛自然繁殖已濒临绝迹。
由于药用价值高，人为的过度开采与生态破坏，野生铁皮石斛已濒临灭绝，1987年国务院将其列为国家重点保护植物。
1 材料与方法1. 1 试验材料野生云南铁皮石斛，取材于浙江农林大学组培实验室，取其茎段作为外植体进行组织培养。
1. 2 试验方法1. 2. 1 外植体消毒取铁皮石斛的茎，去除多余叶片后用解剖刀将茎切成含 3 ～ 4 个节点的茎段，保留节点。
依次用中性洗涤剂清洗，自来水冲洗20min，用70% 的乙醇浸泡10 ～60 s，再转入0. 1% 的氯化汞中，灭菌 5 ～11 min 后倒去氯化汞溶液，用无菌水反复漂洗材料3-5 次。
用无菌纸吸去茎段上多余水分，将其切成1 ～2 cm 带一个芽点的茎段，接种到培养瓶中培养。
1. 2. 2 培养基制备铁皮石斛培养基均添加3% 蔗糖，0. 7% 琼脂，pH 值为5. 8。
按不同目的在基本培养基中加入6-BA、NAA、IBA，每个培养瓶分装50 m 培养基，密封。
经过121 ℃高温灭菌25 min。
不定芽的诱导培养基是在基本培养基MS 中加入细胞分裂素和生长素，采用不用浓度水平的NAA 和6-BA。
组培苗的壮苗与生根，将生长状态稳定的试管苗接种于添加不同激素组合的1/2 MS 培养基上。
(1)诱导培养基: ①MS+6-BA0.5mg／I。
+NAA 0.05mg／L+AC(活性炭)29／L；②MS+6-BAl．0mg／L+NAA0．1mg／L+AC29／L。
(2)增殖培养基: 花宝3号39／L+6一BA2．5mg／L+NAA0．25mg ／I。
+AC29／L。
(3)生根培养基:1／2 MS+IBA0．5mg／L+AC29／L。
培养基中添加蔗糖209／L，pH5．2～5．41. 2. 3 培养条件接种铁皮石斛培养材料的组培苗在组织培养室中培养，培养温度为( 26 ±2) ℃，光照14 h/d，光强1 500 ～2 000 lx。
1. 2. 4诱导培养用解剖刀将铁皮石斛的幼嫩茎段切下，接种在诱导培养基①中进行培养。
15～20天后，外植体开始萌动，茎段膨大，切面及顶部组织形成疏松组织。
继续培养20天后，转入培养基②中，切面及顶部膨大组织的表面形成凹凸不平的颗粒物，随着培养时间的延长，颗粒物长大形成直径1～2mm的类原球茎颗粒物。
1. 2. 5增殖培养将诱导形成的原球茎转入到增殖培养基中，原球茎增殖速度很快，增殖倍数可达3～4倍，同时部分原球茎开始分化出芽点并长出1～2片小叶，原球茎的增殖与芽分化同时进行。
1. 2. 6 生根培养取诱导形成的不定芽，要求芽高2 ～3 cm，带3 ～5片叶的不定芽，将其接种到不同处理的生根培养基上，进行培养。
培养30天左右，基部开始出现2～3条约1cm长的白色根，随后逐渐伸长，生根率达到90％以上。
2.移栽与驯化2.1移栽前的准备2.1.1炼苗当苗高3cm以上、具3～4片叶时，便可炼苗。
移栽前先将瓶苗至炼苗房进行2~3周的炼苗，让瓶苗从封闭稳定的环境向开放变化的环境过渡，慢慢适应自然环境，等瓶苗生长健壮、叶色正常，根长3cm以上，肉质茎有3~4个节间、长有4~5片叶，叶色正常，根长3cm以上，有4~5条根，根皮色白中带绿，无黑色根，无畸形，无变异。
炼苗目的：炼苗的主要目的是使组培苗适应外界的环境——温差，湿度差以及微生物环境。
炼苗方法：1）将待炼苗的材料放置于欲移栽的环境，不开盖保持4-5天；2）半开盖保持1-2天后，全开盖再炼苗2-3天2.1.2出瓶组培苗出瓶时，打开瓶塞将培养基与小苗一起轻轻取出，整齐放置于盆中待清洗，污染苗、裸根苗或少根苗分别放置。
正常组培苗先在自来水中洗净培养基，特别要洗掉琼脂，以免琼脂发霉引起烂根，再换自来水清洗一次。
裸根或少根组培苗经过上述清洗后，还需将小苗根部置于100mg/L的ABT生根粉中浸泡15分钟，以进行生根诱导。
污染苗经过清洗后，用1000倍多菌灵浸泡整株小苗10分钟。
后期管理得当可有效控制污染的发生。
栽种于已灭菌的基质中(移栽前浇透水)，放置在遮光度50％～60％、湿度达80％以上的温室中，2个月后，成活率达90％以上。
2.1.3基质的准备移栽铁皮石斛组培苗要选择适宜的基质。
铁皮石斛的根是气生根，有明显的好气性和浅根性，因此，要求基质以疏松透气、排水良好、不易发霉、无病菌和害虫潜藏者为宜。
可以选择水苔、石灰石、碎砖、树皮、刨花、蕨根、板边、菌糠、木糠等为移栽基质。
铁皮石斛不宜深植，种植时根系向四周均匀展开，将基质填充根部、基部必须露出，否则易造成烂根。
移栽后隔5天再浇水效果较好。
30天内每隔1天喷雾1次，水量不宜过多，期间勿施肥，待小苗恢复正常生长后才开始常规的水肥管理。
2.1.4栽培场地的选择铁皮石斛喜温暖、多雾、微风、清洁、散射光环境，忌阳光直射和曝晒。
在移栽过程中要创造条件，为铁皮石斛创造最佳的生长环境。
铁皮石斛原产区大多处于温带和亚热带，全年气候温暖、湿润，冬季气温在0℃以上。
根据铁皮石斛的生长习性，要考虑场地的光照、温度、湿度、通风等自然因素。
笔者认为最好选择在大棚内移栽，而且要移栽在高架畦，这样容易满足铁皮石斛生长的最佳环境要求，而且很多自然因素容易控制。
在建造育苗大棚时要满足以下三个条件：（1）育苗大棚要通电、通水、通路，要求棚宽6m、长30m、棚肩高107m以上、棚顶高2.8m以上，棚顶覆盖塑料无滴薄膜和70%遮荫度的遮荫网，棚内安装有自来水管，大棚四周和入口装有40目的防虫网。
有条件的，棚内还要装有自动或手动控制的喷雾系统（最好既能喷雾，又能喷肥、喷药），这样可以防晒、防雨、防虫、保温、保湿、透气，还能大大减少劳动量。
（2）棚内搭建畦底架空的高架种植畦。
可用角钢、砖头、木条或方条等材料作为种植畦的框架，然后铺设孔径为0.3~0.5cm的塑料平板作为栽培基质的支撑面，要求畦宽1~1.2m，畦长度可自定，畦底架空高度30~50cm。
种植畦上方装有可随时喷雾的喷头，喷雾饿时间最好能控制。
没有条件的，也可以用喷雾器来代替。
搭建高架种植畦的目的是为了使水分和透气容易控制，从而为组培苗生长提供最佳水分，保证通风透气，又能同时喷肥喷药，移栽成活率高，大面积移栽时能大大节省劳动力。
（3）在种植畦上铺5~8cm厚的基质，摊平。
移栽前用0.3%高锰酸钾或1000倍多菌灵药液对基质喷洒消毒。
2.2移栽2.2.1移栽时间移栽最佳季节应为日平均气温在15~30℃时，气温过低或过高均不宜出瓶移栽。
一般来说，在铁皮石斛主产地，除了最冷的1-2月以及最热的7-8月外均可栽培。
部分高海拔地区，除了12月至次年3月，其余时间均可栽培。
2.2.2移栽方法用镊子将组培苗小心取出，洗去培养基后，即可移植到种植畦上。
移栽时用手指在基质挖2~3cm深的小洞，轻轻把石斛根部放入小洞，注意不要弄断石斛的肉质根，然后用基质盖好。
裸根苗或少根苗最好分开种，以便于管理。
移栽密度为500株/m2，株行距为4cm×5cm。
2.3移栽后的管理2.3.1温度管理人工移栽铁皮石斛组培苗要满足其冬暖夏凉的要求。
组培苗生长适宜温度为20~30℃。
夏季温度高时，大棚内须通风散热，并常喷雾来降温保湿，每天喷雾3~5次，每次喷雾2~5分钟；冬季气温低时，大棚四周要密封好，以防冻伤组培苗。
2.3.2湿度管理刚移栽的组培苗对水分很敏感，缺水则生长缓慢、干枯、成活率低。
而喷雾过多则渍水烂根，温度高、湿度大时还易引发软腐病大规模发生。
移栽后一周内（幼苗尚未发新根）空气湿度宜保持在90%左右，一周后，植株开始发新根，空气湿度可保持在70%~80%。
种植畦干湿交潜有利于发根长芽。
2.3.3肥水管理大棚移栽期间的施肥以叶面肥为主。
由于石斛为气生根，因此要喷施适宜的叶面肥作为营养液，以供给植株充足的养分，利早发根长芽。
叶面肥可以选择硝酸钾、磷酸二氢钾、腐植酸类等，以及进口三元复合肥和稀释的MS培养基等。
一般移栽后一周，植株新根发生后开始喷施千分之一的硝酸钾或磷酸二氢钾，7~10天喷一次，连续喷3次。
长出新芽后每隔10-15天喷3‰的三元复合肥等。
一般情况下，施肥后两天停止浇水。
若空气对流太大，则视基质干湿度适当喷雾补水。
3.病虫害防治铁皮石斛的主要病害有软腐病、黑斑病、炭疽病等。
软腐病发病快，严重时整株腐烂解体呈湿腐状；黑斑病危害叶片，使叶片枯萎；石斛炭疽病危害叶片及肉质茎，受害叶片出现黑色或褐色病斑。
针对这些常见病害要加强棚内管理、注意通风透光、适当降低棚内湿度，及时施药并拔出病株带离。
铁皮石斛的主要虫害有蜗牛、菲盾蚧、红蜘蛛等。
其中，蜗牛是常见害虫，危害幼茎、嫩叶、花蕾和幼果。
可用诱杀、人工捕杀或撒石灰、茶麸防治；石斛菲盾蚧寄生于植株叶片边缘或背面吸食汁液，可将集中有菲盾蚧的老枝烧毁或用40％乐果乳油1 000 倍等喷雾杀灭；红蜘蛛可通过除周边环境的杂草或喷低毒杀螨剂800～1 000 倍防治。
铁皮石斛为珍贵药材，因此铁皮石斛的病虫害防治应尽可能以预防、物理防治和生物防治为主，不用或采用低毒农药；一旦发现有病虫害应及时采取相应措施，避免病虫害情的加重。
4.思考与展望有效地控制污染是植物离体培养成功的关键。