6-巯基嘌呤致严重骨髓抑制的遗传分析
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中国实验诊断学
２１ 年 ９ ０１ 月
第 １卷 ５
第 ９期
—
１ ８ｌ 一 ５
参 考文献 ：
［］ １ 王鸿 利 ． 实验诊 断学［ ． Ｍ］北京 ： 民卫生 出版社 ，０６２ ９ 人 ２０ ：８ ．
临床应用进展 ［］福建医药杂志 ， ０ ，９ １ ： ４ Ｊ． ２ ７２（）１ ． Ｏ ２
［］ ５李 碧， 雷 斌。 祝兴元 ． 联合检测尿微量蛋 白诊断糖 尿病早期 肾
ＷＢＣ １× １ ９ ２． ０ ／Ｌ；ＲＢＣ ６ × １ ； ７ ｇ Ｌ；Ｐ ２ ２ ０ Ｈｂ ７ ／ ｒ
．
ＴＭ Ｐ Ｔ基 因位 于染色体 ６ ２ ３上 ， 长为 ３ ｐ２ ． 全 ４ ｋ， ｂ包括 １ 个外显子和 ９ 内含子 。具体步骤以全 ０ 个 基因组 Ｄ Ａ为模板 １ ， Ｎ 分别加入 ｄ Ｔ １ ｒ ｏ Ｎ Ｐ（０ｅ ｌ ｔ ／ ｏ
１ 材 料 与方 法 １ １ 临床 资料 ．
１３ 全 血 Ｄ Ａ 的抽提 ‘ ． Ｎ
取患 者冷 冻 保 存 的 肝 素 抗 凝 血 ｌ ｌ用 全 血 基 ｍ，
因组 Ｄ Ａ纯 化试 剂盒 从 中提取 全基 因组 Ｄ Ａ， 一 Ｎ Ｎ 于
２℃保存 。 ０
１４ Ｔ ＭＴ基 因 的全测序 ． Ｐ
临床生物化 学与检 验学 ， ０ ，３ ３ ：７ ． ２ ２ ２ （） １８ ０
Baidu Nhomakorabea
［］ 岩 ， ３刘 于金霞 ， 张朋 光 ． 肾脏疾 病 １ 例尿 Ｔ ｍ ０ ２ ａ ｍ—Ｈ ｒａ 蛋 白测 ｏｓｌ ｆｌ
定分析 ［ ． Ｊ 中国基层 医药 ， ０ ， （ ）１１ ］ ２ ５ １ １ ：１ ． ０ ２
［］ 文津 ， ４林 徐榕青 ， 张亚敏 ． 尿微量 蛋白检测辅助诊断早期 肾损伤 的
（ 稿 日期 ：０ １ ３ ７ 收 ２ １ —０ —１）
文 章 编 号 ：０７ ２７ ２ １）９ ５ １ ０ １０ —４８ （０ １０ —１８ — ３
６巯基 嘌 呤致严 重 骨 髓 抑 制 的遗 传 分 析 一
［］ ２ 陈庆 海 ． 尿微量 蛋白检测及 临床应用 的研究进展 ［］ 国外 医学 一 Ｊ．
一
损害 的意义 ［］检验医学与临床 ， ０ ， １）９０ Ｊ． ２ ９ （ ：７ ． ０ ２ ［］ ６ 徐晓萍 ， 徐 磊， ． 等 临床实践中慢性肾功能损 伤早期 的实验 室预 警指标分析 【］检验医学 ， １ ，５４ ： ７ Ｊ． ２ ０ ２ （ ）２ ． ０ ５ ［］ ７ 施倩倩 ， 海燕 ， 徐 尿微 量 蛋 白检测 对移 植后 肾功 能 的诊 断价 值 ［］ 国际检验医学杂志 ， １， （ ）７ ． Ｊ． ０ ２ １３ １ ： ２ ８
王 明 ，郭 颖杰 周 慧 李春 怀 ， ，
（． １ 吉林大学第一医院 、 吉林 大学 儿童血液病诊治 中心 ， 吉林 长春 １０２ ； ． ３０ １２ 吉林 大学 生命 科学院）
文献报道 ６ Ｐ的疗效和毒性与其代谢过程相 － Ｍ
关 酶 的基 因多态 性 相 关 ＿ ，Ｐ Ｔ是 ６ＭＰ代 谢 过 程 ｌ ＴＭ Ｊ 一 的关 键酶 之 一 ， 能特 异 地 催 化 ６ＭＰ甲基 化 而 失 活 ， －
基． 嘌 呤 （． Ｍ ） 别 嘌醇 （ ｌｐｒ ｏ） 购 自 巯基 ６Ｍ Ｐ 、 Ａｌ ｕ ｎ１均 ｏ ｉ
Ｓ ｍ 公司。 ｉ ａ ｇ
研究 患 儿 应 用 ６巯 基 嘌 呤 产 生 严 重 骨 髓 抑 制 的原 ． 因 ， 们 对 参 与 ６ＭＰ代 谢 的 巯 嘌 呤 甲 基 转 移 酶 我 ． （ Ｔ 基 因进行 了测 序 和 Ｔ Ｍ 删 ） Ｐ Ｔ酶 活力 测定 。
Ｌ １－、０×ｂｆｒ 、 ） ｔ １ ｔ ｌ ｕｅ ５ 加入 上下 游 引物 ２ ｍ ｌ（ ０ｐ ｏ 表 １各 ０７ ，ａ ． ， 充 三 蒸 水 至终 体 积 为 ） ．５ ＴｑＥ０ ５ 补 ５ ， 匀 。Ｐ Ｒ条 件 为 ： 性 ９ ０ 混 Ｃ 变 ４℃ ４ ， ５Ｓ引物 各 自 的退火 温 度 ４ ， 伸 ７ ０ ｓ延 ２℃ ３ ， 环 ３ ０Ｓ循 ５轮 。扩增 产 物经 ２ ％琼 脂 糖 凝 胶 电泳 检 测 ， 委 托 上 海 生 物 并 工 程有 限 公 司对 其 进 行 测 序 。表 １列 举 了 用 Ｐ Ｒ Ｃ 法扩 增 Ｔ Ｍ Ｐ Ｔ各 外 显 子 的引 物 序 列 ， 物 位 置 和 扩 引
患儿 ， ， ， 诊 急 性 淋 巴 细胞 白血 病 （ 女 ３岁 确 Ｂ细
胞型） 。按全国小儿 白血病协作组化疗方案化疗 ， 诱 导缓 解化 疗 达完 全缓 解 ， 贯 治疗进 入 维持 治疗 ， 序 应
用 ６巯 基 嘌 呤 （０—７ｍ ／ ２天 ） 予 ３ ． ｇ天 ， ． ５ ５ ｇｍ／ 实 ７ ５ｍ ／ 晚睡前 顿 服 ， ２ 天 ； 共 １ 甲氨 喋 呤 （０—４ ｇｍ ／ ） ２ ０ｍ ／ ２次 实予 １ ． ｇ次 ， 周 １次共 ３次 。第 １ 维 持 用 ２５ｍ ／ 每 次 药应 用 ６巯 基 嘌 呤 即 ３ ． ｇ天 晚 睡 前顿 服 １ ． ７ ５ｍ ／ ０天 后外 周 血 常 规下 降 明显 ， 出现 Ⅳ 级骨 髓 的抑 制 ， 外 周血 ＷＢ ． ×１９Ｌ Ｒ Ｃ１６ ×１ ； ｂ４ ／ ； Ｃ０ ７ ０／ ； Ｂ ．２ ０ Ｈ ７ｇＬ ＰＴ７×ｌ９ Ｌ ｏ。停用 ６巯 基 嘌 呤后 ， 常规 恢 复 正 常 。 ． 血 第 ２次 维持 用药 将 ６巯基 嘌 呤每 天的剂 量减 至 ７ｍ ． ｇ 维 持 用 药 后 ， 髓 的 抑 制 程 度 减 轻 ， 周 血 常 规 骨 外
从 而影 响其 主要 活 性 代谢 产 物 Ｔ Ｎ Ｇ ｓ的形 成 。为 了
ＴｑＤ Ａ聚合酶 、Ｎ Ｐ购 自宝 生 物 工程 大 连 有 限公 ａ Ｎ ｄＴ 司； 各种 引物 的定 购 和测序 都 有上 海 生工 生 物技 术 服务有 限公 司完成 ；． 苷 ． ｓ腺 Ｌ甲硫 氨 酸 （Ａ 、一 ＳＭ）６甲
２１ 年 ９ ０１ 月
第 １卷 ５
第 ９期
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１ ８ｌ 一 ５
参 考文献 ：
［］ １ 王鸿 利 ． 实验诊 断学［ ． Ｍ］北京 ： 民卫生 出版社 ，０６２ ９ 人 ２０ ：８ ．
临床应用进展 ［］福建医药杂志 ， ０ ，９ １ ： ４ Ｊ． ２ ７２（）１ ． Ｏ ２
［］ ５李 碧， 雷 斌。 祝兴元 ． 联合检测尿微量蛋 白诊断糖 尿病早期 肾
ＷＢＣ １× １ ９ ２． ０ ／Ｌ；ＲＢＣ ６ × １ ； ７ ｇ Ｌ；Ｐ ２ ２ ０ Ｈｂ ７ ／ ｒ
．
ＴＭ Ｐ Ｔ基 因位 于染色体 ６ ２ ３上 ， 长为 ３ ｐ２ ． 全 ４ ｋ， ｂ包括 １ 个外显子和 ９ 内含子 。具体步骤以全 ０ 个 基因组 Ｄ Ａ为模板 １ ， Ｎ 分别加入 ｄ Ｔ １ ｒ ｏ Ｎ Ｐ（０ｅ ｌ ｔ ／ ｏ
１ 材 料 与方 法 １ １ 临床 资料 ．
１３ 全 血 Ｄ Ａ 的抽提 ‘ ． Ｎ
取患 者冷 冻 保 存 的 肝 素 抗 凝 血 ｌ ｌ用 全 血 基 ｍ，
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２℃保存 。 ０
１４ Ｔ ＭＴ基 因 的全测序 ． Ｐ
临床生物化 学与检 验学 ， ０ ，３ ３ ：７ ． ２ ２ ２ （） １８ ０
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［］ 岩 ， ３刘 于金霞 ， 张朋 光 ． 肾脏疾 病 １ 例尿 Ｔ ｍ ０ ２ ａ ｍ—Ｈ ｒａ 蛋 白测 ｏｓｌ ｆｌ
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［］ 文津 ， ４林 徐榕青 ， 张亚敏 ． 尿微量 蛋白检测辅助诊断早期 肾损伤 的
（ 稿 日期 ：０ １ ３ ７ 收 ２ １ —０ —１）
文 章 编 号 ：０７ ２７ ２ １）９ ５ １ ０ １０ —４８ （０ １０ —１８ — ３
６巯基 嘌 呤致严 重 骨 髓 抑 制 的遗 传 分 析 一
［］ ２ 陈庆 海 ． 尿微量 蛋白检测及 临床应用 的研究进展 ［］ 国外 医学 一 Ｊ．
一
损害 的意义 ［］检验医学与临床 ， ０ ， １）９０ Ｊ． ２ ９ （ ：７ ． ０ ２ ［］ ６ 徐晓萍 ， 徐 磊， ． 等 临床实践中慢性肾功能损 伤早期 的实验 室预 警指标分析 【］检验医学 ， １ ，５４ ： ７ Ｊ． ２ ０ ２ （ ）２ ． ０ ５ ［］ ７ 施倩倩 ， 海燕 ， 徐 尿微 量 蛋 白检测 对移 植后 肾功 能 的诊 断价 值 ［］ 国际检验医学杂志 ， １， （ ）７ ． Ｊ． ０ ２ １３ １ ： ２ ８
王 明 ，郭 颖杰 周 慧 李春 怀 ， ，
（． １ 吉林大学第一医院 、 吉林 大学 儿童血液病诊治 中心 ， 吉林 长春 １０２ ； ． ３０ １２ 吉林 大学 生命 科学院）
文献报道 ６ Ｐ的疗效和毒性与其代谢过程相 － Ｍ
关 酶 的基 因多态 性 相 关 ＿ ，Ｐ Ｔ是 ６ＭＰ代 谢 过 程 ｌ ＴＭ Ｊ 一 的关 键酶 之 一 ， 能特 异 地 催 化 ６ＭＰ甲基 化 而 失 活 ， －
基． 嘌 呤 （． Ｍ ） 别 嘌醇 （ ｌｐｒ ｏ） 购 自 巯基 ６Ｍ Ｐ 、 Ａｌ ｕ ｎ１均 ｏ ｉ
Ｓ ｍ 公司。 ｉ ａ ｇ
研究 患 儿 应 用 ６巯 基 嘌 呤 产 生 严 重 骨 髓 抑 制 的原 ． 因 ， 们 对 参 与 ６ＭＰ代 谢 的 巯 嘌 呤 甲 基 转 移 酶 我 ． （ Ｔ 基 因进行 了测 序 和 Ｔ Ｍ 删 ） Ｐ Ｔ酶 活力 测定 。
Ｌ １－、０×ｂｆｒ 、 ） ｔ １ ｔ ｌ ｕｅ ５ 加入 上下 游 引物 ２ ｍ ｌ（ ０ｐ ｏ 表 １各 ０７ ，ａ ． ， 充 三 蒸 水 至终 体 积 为 ） ．５ ＴｑＥ０ ５ 补 ５ ， 匀 。Ｐ Ｒ条 件 为 ： 性 ９ ０ 混 Ｃ 变 ４℃ ４ ， ５Ｓ引物 各 自 的退火 温 度 ４ ， 伸 ７ ０ ｓ延 ２℃ ３ ， 环 ３ ０Ｓ循 ５轮 。扩增 产 物经 ２ ％琼 脂 糖 凝 胶 电泳 检 测 ， 委 托 上 海 生 物 并 工 程有 限 公 司对 其 进 行 测 序 。表 １列 举 了 用 Ｐ Ｒ Ｃ 法扩 增 Ｔ Ｍ Ｐ Ｔ各 外 显 子 的引 物 序 列 ， 物 位 置 和 扩 引
患儿 ， ， ， 诊 急 性 淋 巴 细胞 白血 病 （ 女 ３岁 确 Ｂ细
胞型） 。按全国小儿 白血病协作组化疗方案化疗 ， 诱 导缓 解化 疗 达完 全缓 解 ， 贯 治疗进 入 维持 治疗 ， 序 应
用 ６巯 基 嘌 呤 （０—７ｍ ／ ２天 ） 予 ３ ． ｇ天 ， ． ５ ５ ｇｍ／ 实 ７ ５ｍ ／ 晚睡前 顿 服 ， ２ 天 ； 共 １ 甲氨 喋 呤 （０—４ ｇｍ ／ ） ２ ０ｍ ／ ２次 实予 １ ． ｇ次 ， 周 １次共 ３次 。第 １ 维 持 用 ２５ｍ ／ 每 次 药应 用 ６巯 基 嘌 呤 即 ３ ． ｇ天 晚 睡 前顿 服 １ ． ７ ５ｍ ／ ０天 后外 周 血 常 规下 降 明显 ， 出现 Ⅳ 级骨 髓 的抑 制 ， 外 周血 ＷＢ ． ×１９Ｌ Ｒ Ｃ１６ ×１ ； ｂ４ ／ ； Ｃ０ ７ ０／ ； Ｂ ．２ ０ Ｈ ７ｇＬ ＰＴ７×ｌ９ Ｌ ｏ。停用 ６巯 基 嘌 呤后 ， 常规 恢 复 正 常 。 ． 血 第 ２次 维持 用药 将 ６巯基 嘌 呤每 天的剂 量减 至 ７ｍ ． ｇ 维 持 用 药 后 ， 髓 的 抑 制 程 度 减 轻 ， 周 血 常 规 骨 外
从 而影 响其 主要 活 性 代谢 产 物 Ｔ Ｎ Ｇ ｓ的形 成 。为 了
ＴｑＤ Ａ聚合酶 、Ｎ Ｐ购 自宝 生 物 工程 大 连 有 限公 ａ Ｎ ｄＴ 司； 各种 引物 的定 购 和测序 都 有上 海 生工 生 物技 术 服务有 限公 司完成 ；． 苷 ． ｓ腺 Ｌ甲硫 氨 酸 （Ａ 、一 ＳＭ）６甲