中药材中4种马兜铃酸的检测方法研究
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世界科学技术一中医药现 代化 ★技术应用研究
摘 要 ： 目的 ： 建 立 同时检 查 Ａ Ａ Ｉ 、 Ａ Ａ Ｉ Ｉ 、 Ａ Ａ Ｉ ｌ ｉ ａ 、 Ａ Ａ Ｉ Ｖ ａ ４种 马兜 铃 酸 的 方 法 。 方 法 ： 药材 经 甲
醇一 水（ ７ ０ ： ３ ０ ， ｖ ／ ｖ ） 溶解 ， 超 声提取 １ ｈ ， 经 离心取上 清液后 ， 采用 高效液相 色谱 法测定药材 中 Ａ Ａ Ｉ 、 Ａ Ａ Ｉ Ｉ 、 Ａ Ａ Ｉ Ｉ Ｉ ａ 、 Ａ Ａ Ｉ Ｖ ａ ４种马兜铃 酸的含量 。以萘普 生为 内标物 ， 采 用 内标 法进行 定量 。结果 ： 在１ — １ ０ ０ ｇ ・ ｍ Ｌ 范围呈 良好 的线性关 系， ４ 种马兜铃酸 中的相关 系数 （ ｒ ２ ） 均 大于 ０ ． ９ ９ ９ ０ 。在马兜铃 药材样品基
科 疾病 以及肺 炎等 疾病 ［ ２ ］ ， 但 实验研 究 发现 马兜 铃 酸具有强烈 的致癌性 ［ ３ 】 。 在２ ０世纪 ９ ０ 年代 ， 比利 时
收 稿 日期 ：２ ０ １ ２ — ０ ５ — ２ ８
修 回 日期 ：２ ０ １ ２ — ０ ７ — １ ６
是， 鉴 于马兜铃 属植物 中含有 大量 的其他 马兜铃 酸
［ Ｗ ｏ ｒ ｌ ｄ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ￣ Ｍ ｏ ｄ ｅ ｒ ｎ ｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆＴ ｒ ａ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｅ ｎ ａ ｎ ｄ Ｍ ｔ ａ ｅ ｎ ａ Ｍ ｅ ｄ ｗ ａ ］ １ ３ １
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马兜铃 酸 （ Ａ ｒ ｉ ｓ ｔ ｏ ｌ ｏ ｃ ｈ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ｓ ）是一种从马兜 铃
发 现大 约 １ ０ ０例 因 服 用 含 有 马 兜 铃 酸 的 减 肥 药 而
在德 国 、 法 国、 西班牙 、 英国、 日本 、 中国等 国家 均有 报道 。 关 于药材 中马兜铃 酸 Ｉ 、 Ｉ Ｉ 的检测分析 方法 ， 已 经有 很多研 究报道 ， 主要采用 反相高效 液相色谱 法 （ Ｒ Ｐ Ｌ Ｃ） 【 】 和高效液相 串联质谱法 （ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ — Ｍ Ｓ ） ［ ６ １ 。但
负责人 ： 梁鑫 淼 ； 中 国科 学 院分 离分析 化 学 重 点 实验 室 开放 基金 ： 食 品 添加 剂 的 高效 分 离和检 测研 究 ， 负责人 ： 章飞芳。 ★★ 通讯作者 ： 章飞芳， 博士 ， 副研究员， 主要研究方向： 复杂样品分离分析 ； 顾江萍， 博士， 副教授， 主要研究方向： 中药药理和中药分析。
导致 肾病 ， 这种 肾病也 被称为 马兜铃 酸 肾 ， 甚 至 导 致 死 亡 ，超 过 半 数 的 患 者 需 要 接 受 肾 脏 移 植 手
术 。随 后 马 兜 铃 酸 肾 病 以及 马 兜 铃 酸 引起 的上 皮 癌
兜 铃酸 的药材广泛用 于治疗肿 瘤 、 蛇 咬伤 、 风湿 、 妇
科植 物 中提取 的硝基菲类化合物（ 图１ ） 。 ２ ０ １ ０版《 中 国药典 》 （ 一部 ）规定 ，马兜铃为马兜铃科植物北 马
兜铃 （ Ａｒ ｉ ｓ ｔ ｏ ｌ ｏ ｃ ｈ ｉ ａ ｃ ｏ ｎ ｔ ｏ ｒ ａ Ｂ ｇ ｅ ． ）或 马兜 铃 （ Ａ ｒ 一
ｔ ｏ ｌ ｏ ｃ ｈ ｉ ａ ｄ ｅ ｂ ｉ ｌ ｉ ｓ Ｓ ｉ ｅ ｂ ． ｅ ｔ Ｚ ｕ ｃ ｃ ） 的干燥成熟果实【 ｌ １ 。 含 马
质低 、 中、 高 ３个加 标 水 平条 件 下 ， Ａ Ａ Ｉ的 回 收 率 为 ９ ７ ． ２ ％～ １ ２ ０ ． ６ ％， Ａ Ａ Ｉ Ｉ的 回 收 率 为 ５ ８ ＿ ３ ％～ ９ ８ ． ０ ％， Ａ Ａ Ｉ Ｉ Ｉ ａ的 回 收 率 为 ７ ３ ． ６ ％～ ８ ６ ． ０ ％， Ａ Ａ Ｉ Ｖ ａ的 回 收 率 为 ８ ２ ． ５ ％～ １ １ １ ． ４ ％，相 对 标 准偏 差 为 ０ ． １ ６ ％～
★
国 家 自然科 学基金 项 目（ ２ １ １ ７ ７ ０ ４ ０ ） ： 基 于 分子 印 迹聚 合 物 固相 微 萃 取一 亲 水液 相 色谱 分 离的氨 基 糖 苷 类 抗 生 素残 留快 速 筛查 技 术
研 究， 负责人 ： 章飞芳 ； 科 学技 术部 国 家“ 十一 五 ” 科技 支撑 计 划 （ ２ ０ ０ ９ Ｂ Ａ Ｄ Ｂ ９ Ｂ ０ ２ ） ：食 品 主要 化 学 性 有 害 物控 制技 术研 究与 开 发 ，
６ ． ７ ８ ％。 ４ 种马兜铃 酸的 日内相对标 准偏差在 ０ ． １ ９ ％～ ４ ． ０ ４ ％之间 ， 日间相 对标准偏 差在 ０ ． ２ ３ ％一 ５ ． ４ １ ％之
间 。 结论 ： 该 方 法的 准确 性 、 灵敏 度 和 精 密 度 均符 合 药物 中马兜 铃 酸含 量 的检 测要 求 。 关键词 ： 高效 液相 色谱 马 兜铃 酸 中药材
２ ０ １ ３ 第十五卷
第一期
Ｖ ｏ １ ． １ ５ Ｎ ｏ ． １
Hale Waihona Puke Ｈａ马 兜 铃 酸 １ ＝ ０ Ｈ ， Ｒ Ｈ ， Ｒ ３ ＝ Ｈ ； 。 ｈ 。 ‘ ｊ Ⅳ ａ Ｒ ｌ ＝ ０ Ｈ ， Ｒ ｚ ＝ ｏ ｃ Ｈ ｓ ， Ｒ ， Ｈ 哪 厶 ｜ Ｊ 目 １ ｒ １ 剥 生 蠹 个 ｒ Ｉ 幺 钉 １ 斤 ， ， 口 １ ： ～ … “ “
…
璺 ｕ ｈ Ｒ
ＲＩ ＝Ｈ ， Ｒ２ ＝ ＯＣＨ３ ， Ｒ３ ＝Ｈ Ｒ２ ＝ｎ ＝ Ｈ ＲＩ ＝Ｈ ，
摘 要 ： 目的 ： 建 立 同时检 查 Ａ Ａ Ｉ 、 Ａ Ａ Ｉ Ｉ 、 Ａ Ａ Ｉ ｌ ｉ ａ 、 Ａ Ａ Ｉ Ｖ ａ ４种 马兜 铃 酸 的 方 法 。 方 法 ： 药材 经 甲
醇一 水（ ７ ０ ： ３ ０ ， ｖ ／ ｖ ） 溶解 ， 超 声提取 １ ｈ ， 经 离心取上 清液后 ， 采用 高效液相 色谱 法测定药材 中 Ａ Ａ Ｉ 、 Ａ Ａ Ｉ Ｉ 、 Ａ Ａ Ｉ Ｉ Ｉ ａ 、 Ａ Ａ Ｉ Ｖ ａ ４种马兜铃 酸的含量 。以萘普 生为 内标物 ， 采 用 内标 法进行 定量 。结果 ： 在１ — １ ０ ０ ｇ ・ ｍ Ｌ 范围呈 良好 的线性关 系， ４ 种马兜铃酸 中的相关 系数 （ ｒ ２ ） 均 大于 ０ ． ９ ９ ９ ０ 。在马兜铃 药材样品基
科 疾病 以及肺 炎等 疾病 ［ ２ ］ ， 但 实验研 究 发现 马兜 铃 酸具有强烈 的致癌性 ［ ３ 】 。 在２ ０世纪 ９ ０ 年代 ， 比利 时
收 稿 日期 ：２ ０ １ ２ — ０ ５ — ２ ８
修 回 日期 ：２ ０ １ ２ — ０ ７ — １ ６
是， 鉴 于马兜铃 属植物 中含有 大量 的其他 马兜铃 酸
［ Ｗ ｏ ｒ ｌ ｄ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ￣ Ｍ ｏ ｄ ｅ ｒ ｎ ｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆＴ ｒ ａ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｅ ｎ ａ ｎ ｄ Ｍ ｔ ａ ｅ ｎ ａ Ｍ ｅ ｄ ｗ ａ ］ １ ３ １
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ￣ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ４ — ３ ８ ４ ９ ． ２ ０ １ ３ ． ０ １ ． ０ ２ ５
马兜铃 酸 （ Ａ ｒ ｉ ｓ ｔ ｏ ｌ ｏ ｃ ｈ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ｓ ）是一种从马兜 铃
发 现大 约 １ ０ ０例 因 服 用 含 有 马 兜 铃 酸 的 减 肥 药 而
在德 国 、 法 国、 西班牙 、 英国、 日本 、 中国等 国家 均有 报道 。 关 于药材 中马兜铃 酸 Ｉ 、 Ｉ Ｉ 的检测分析 方法 ， 已 经有 很多研 究报道 ， 主要采用 反相高效 液相色谱 法 （ Ｒ Ｐ Ｌ Ｃ） 【 】 和高效液相 串联质谱法 （ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ — Ｍ Ｓ ） ［ ６ １ 。但
负责人 ： 梁鑫 淼 ； 中 国科 学 院分 离分析 化 学 重 点 实验 室 开放 基金 ： 食 品 添加 剂 的 高效 分 离和检 测研 究 ， 负责人 ： 章飞芳。 ★★ 通讯作者 ： 章飞芳， 博士 ， 副研究员， 主要研究方向： 复杂样品分离分析 ； 顾江萍， 博士， 副教授， 主要研究方向： 中药药理和中药分析。
导致 肾病 ， 这种 肾病也 被称为 马兜铃 酸 肾 ， 甚 至 导 致 死 亡 ，超 过 半 数 的 患 者 需 要 接 受 肾 脏 移 植 手
术 。随 后 马 兜 铃 酸 肾 病 以及 马 兜 铃 酸 引起 的上 皮 癌
兜 铃酸 的药材广泛用 于治疗肿 瘤 、 蛇 咬伤 、 风湿 、 妇
科植 物 中提取 的硝基菲类化合物（ 图１ ） 。 ２ ０ １ ０版《 中 国药典 》 （ 一部 ）规定 ，马兜铃为马兜铃科植物北 马
兜铃 （ Ａｒ ｉ ｓ ｔ ｏ ｌ ｏ ｃ ｈ ｉ ａ ｃ ｏ ｎ ｔ ｏ ｒ ａ Ｂ ｇ ｅ ． ）或 马兜 铃 （ Ａ ｒ 一
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质低 、 中、 高 ３个加 标 水 平条 件 下 ， Ａ Ａ Ｉ的 回 收 率 为 ９ ７ ． ２ ％～ １ ２ ０ ． ６ ％， Ａ Ａ Ｉ Ｉ的 回 收 率 为 ５ ８ ＿ ３ ％～ ９ ８ ． ０ ％， Ａ Ａ Ｉ Ｉ Ｉ ａ的 回 收 率 为 ７ ３ ． ６ ％～ ８ ６ ． ０ ％， Ａ Ａ Ｉ Ｖ ａ的 回 收 率 为 ８ ２ ． ５ ％～ １ １ １ ． ４ ％，相 对 标 准偏 差 为 ０ ． １ ６ ％～
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国 家 自然科 学基金 项 目（ ２ １ １ ７ ７ ０ ４ ０ ） ： 基 于 分子 印 迹聚 合 物 固相 微 萃 取一 亲 水液 相 色谱 分 离的氨 基 糖 苷 类 抗 生 素残 留快 速 筛查 技 术
研 究， 负责人 ： 章飞芳 ； 科 学技 术部 国 家“ 十一 五 ” 科技 支撑 计 划 （ ２ ０ ０ ９ Ｂ Ａ Ｄ Ｂ ９ Ｂ ０ ２ ） ：食 品 主要 化 学 性 有 害 物控 制技 术研 究与 开 发 ，
６ ． ７ ８ ％。 ４ 种马兜铃 酸的 日内相对标 准偏差在 ０ ． １ ９ ％～ ４ ． ０ ４ ％之间 ， 日间相 对标准偏 差在 ０ ． ２ ３ ％一 ５ ． ４ １ ％之
间 。 结论 ： 该 方 法的 准确 性 、 灵敏 度 和 精 密 度 均符 合 药物 中马兜 铃 酸含 量 的检 测要 求 。 关键词 ： 高效 液相 色谱 马 兜铃 酸 中药材
２ ０ １ ３ 第十五卷
第一期
Ｖ ｏ １ ． １ ５ Ｎ ｏ ． １
Hale Waihona Puke Ｈａ马 兜 铃 酸 １ ＝ ０ Ｈ ， Ｒ Ｈ ， Ｒ ３ ＝ Ｈ ； 。 ｈ 。 ‘ ｊ Ⅳ ａ Ｒ ｌ ＝ ０ Ｈ ， Ｒ ｚ ＝ ｏ ｃ Ｈ ｓ ， Ｒ ， Ｈ 哪 厶 ｜ Ｊ 目 １ ｒ １ 剥 生 蠹 个 ｒ Ｉ 幺 钉 １ 斤 ， ， 口 １ ： ～ … “ “
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