氧化应激

5、病理生理学。黄宁、李著华主编；2013.08
6、赵克然、杨毅军、曹道俊。氧自由基与临床。1999.11
研究内容
氧化应激模型的建立
Sulfiredoxin-1通过Nrf2-ARE通路发挥抗氧化应激的机制
实验方案
1、建模
H2O2属于活性氧自由基，是引起氧化应激的一个中介物。用不同
浓度（60uM,100uM,140uM,180uM,200uM,240uM）的H2O2处理大 鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12 cells)，通过MTT和LDH测定从中筛 选出最适H2O2浓度。
Sulfiredoxin-1通过Nrf2-ARE信号 通路发挥抗氧化应激的机制
报告提纲
立论依据
研究内容
参考文献
实验方案
研究意义
立论依据
脑缺血再灌注损伤使机体产生氧化应激，体内高活性分子 如活性氧自由基 (ROS ）和活性氮自由基（ RNS ）产生过 多，氧化程度超出氧化物的清除，造成氧化系统和抗氧化 系统失衡，从而导致组织损伤。引起包括癌症、心血管疾 病、糖尿病、风湿性关节炎、感染等多种疾病。
阴性对照组+H2O2
实验方案
MTT和LDH 测定
SOD和GSH测 定
Western blot方法
Real-time PCR
细胞存活率
氧化应激程度
Nrf2表达
抗氧化基因 HO-1,NQO-1
研究意义
心血管 疾病 神经系 统疾病
癌症
氧化应 激Leabharlann 泌尿系 统疾病糖尿病
THE END
够抵抗细胞的氧化应激损伤，对多种疾病具有抗氧化的保 护作用。然而， Srxn1在氧化应激中的作用机制还未被深 入研究。
参考文献
1、坚哲.Nrf2-ARE信号通路在白癜风氧化应激发病中的作用和机制研 究.第四军医大学.R758.41 2、赵晶晶，张农。核因子相关因子 2在氧化应激性纤维化疾病中的最 新研究进展。复旦大学上海医学院。 3、李琼。 Sulfiredoxin-1对双氧水诱导的 PC12细胞氧化应激损伤的 保护作用研究。重庆医科大学。 4、邹颜阳。Sulfiredoxin-1经Nrf2/ARE通路保护PC12细胞氧化损伤 的机制研究。重庆医科大学
MTT和LDH测定
180uM的H2O2处理PC12细胞24小 时来建立氧化应激模型
实验方案
24h后，H2O2损失12h，各设立其对照组
对照组：正常PC12 细胞 Srxn1干扰组：给PC12细胞 转染Srxn1干扰质粒载体 阴性对照组：给PC12细 胞转染阴性质粒载体 对照组+H2O2
实验 分组
Srxn1干扰组+H2O2
立论依据 Nrf2-ARE通路：Nrf2是细胞中与氧化应激反应密切相关
的一种因子，它可与胞核内的抗氧化反应元件（ARE）的 DNA序列结合，调控下游抗氧化基因的表达，基因包括血 红素氧合酶 -1 （ HO-1 ）、 NADP （ H ）醌氧化还原酶 1 （NQO1），对抗氧化应激作用。
立论依据 Sulfiredoxin-1(Srxn1)是一种内源性抗氧化蛋白，能
立论依据
活性氧的化学性质非常活泼，
1、能够攻击生物膜磷脂中的多聚不饱和脂肪酸，引发脂 质过氧化作用，使细胞膜、细胞器膜等膜结构受损、功能 障碍； 2 、在活性氧的作用下，脂质和膜蛋白以及某些酶发生交 联、聚合或肽链的断裂，造成蛋白质结构改变，使其失去 活性，功能丧失。 3、活性氧可作用于 DNA，与碱基发生反应，从而使碱基 发生修饰、断裂和交联，引起基因突变。