2.2.1 动物细胞培养

一、动物细胞培养
结合图2-16，阅读P44最后一段至P46第一段结束。
1、找出关键词并理解它们的含义。
细胞悬液 细胞贴壁 细胞的接触抑制 原代培养 传代培养
2、叙述动物细胞培养的过程。 3、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样
最终培养成新个体？
不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多。 动物细胞培养的目的是获得细胞或细胞产品。
三、动物细胞培养技术的应用
1.生产蛋白生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗 体等
2.基因工程技术中的受体细胞。 3.用于检测有毒物质。 4.培养正常或病变的细胞，用于生理、病理、药理等
方面的研究。可用于健康细胞的培养，如获得大 量自身的皮肤细胞，用于植皮；用于筛选抗癌药 物等，为治疗和预防疾病提供理论依据
植物细胞和动物细胞培养的比较
比较项目 原理
培养基性质
植物组织培养 细胞的全能性 固体培养基
培养基特有成分 蔗糖、植物激素
动物细胞培养 细胞增殖
液体培养基 葡萄糖、动物血清
培养结果 培养目的
植物体或组织
快速繁殖、培育 无病毒植株等
细胞株、细胞系
获得细胞 或细胞产物
学后巩固
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞（A ） A．细胞系 B．细胞株 C．原代细胞 D．传代细胞
二、动物细胞培养条件
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1、无菌、无毒的环境
培养液和所有培养用具进行无菌处理 措施：培养液中加一定量的抗生素。
2、营养
葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子（维 生素、激素等）和 动物血清
3、温度和PH 温度36.5+0.5度，pH7.2～7.4 4、气体环境 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
程和应用前景。 教学重点 • 动物细胞培养的过程及条件。 • 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 教学难点 • 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
资料：烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人 的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤 病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想 如何来治疗该病人？
取该患者的皮肤进 行细胞培养,获得足量 的细胞后再移植。
分化程度低,分裂和增殖旺盛，易培养
5、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？
成块组织不利于培养，分散了并制成细胞悬浊液，利于 细胞与培养液充分接触，利于培养。
6、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培 养成新个体？
不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多。 动物细胞培养的目的是获得细胞或细胞产品。
癌细胞 可无限增殖。
加培养液
细胞悬浮液（原代细胞）
10代细胞 细胞株
原代培养
40~50代细胞 传代培养 细胞系
无限增殖
寻根问底
1.进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说 明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？
细胞间的成分主要是蛋白质。 不行，胃蛋白酶适宜的PH约为2，当PH>6时，胃蛋白酶就会失去 活性，而胰蛋白酶适宜PH为7.2---8.4，多数动物细胞培养的适宜 PH为7.2---7.4。胃蛋白酶在此环境中没有活性，胰蛋白酶在此环 境中活性较高，因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。
专题2.2动物细胞工程
动物细胞工程
动物细胞培养
动物细胞工程 动物细胞核移植 常用的技术手段 动物细胞融合
生产单克隆抗体
其中，动物细胞培养技术是其他动物细 胞工程技术的基础。
2.2.1动物细胞培养和核移植技术
教学目标
新课标要求 • 简述动物细胞培养的过程、条件及应用。 • 简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过
一、动物细胞培养
1.概念：动物细胞培养就是从动
物机体内取出相关的组织，将它 分散成单个细胞，然后，放在适 宜的培养基中，让这些细胞生长 和增殖。 原理：细胞增殖 目的：获得细胞或细胞产品。
2.过程：
动物胚胎或 幼龄动物的 组织、器官
剪碎组织
胰蛋白酶或 分散成单 胶原蛋白酶 个细胞
培养液
10~50 代细胞
较植物组织培养基，动物细胞培养液的独特之处？ ①液体培养基 ②成分中有动物血清等
维持培养液的PH
想一想
为什么对动物细胞进行培养时要添加血清？
血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋 白质为白蛋白和球蛋白；氨基酸有多种，是细胞合成蛋 白质的基本成分，有些动物细胞不能合成，必须由培养 液提供；激素有胰岛素、生长激素等促进细胞的生长、 增殖、贴附，还有很多未知的促细胞生长因子等其他活 性物质。因此，细胞培养要保证细胞能顺利生长和繁殖 ，一般要添加10%----20%的血清。
过程点拨：
动物胚胎或幼龄动物 的组织、器官
原代培养：第1代细胞传至10 代左右
剪碎 胰蛋白酶 单个细胞
传代培养：将原代细胞从培 养瓶中取出，分装 到两个或两个以上 的培养瓶中继续培 养。
细胞株：10到40、50代的细 胞，遗传物质没发 生改变。
细胞系：超过50代的细胞，
等同于
遗传物质发生改变 ，失去接触抑制，
2.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？
细胞膜成分：磷脂和蛋白质 长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用。 因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。
3.目前使用的或冷冻保存的正常细胞为几代以内的？
10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。
思考
4、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动 物细胞培养材料？
2、动物细胞工程技术的基础是 ----- （ D ）
A.动物细胞融合 B.单克隆抗体
C.胚胎移植
D.动物细胞培养
3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于----（ A ） A.培养基不同； B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培 养成植株。
作业
• 请预习课本47页以后的内容 • 完成练习册相关练习
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1、有时候读书是一种巧妙地避开思考 的方法 。20.1 2.1020. 12.10Thursday, December 10, 2020
传代培养 原代培养
细胞悬液
（第1代细胞到第10代细胞）
继续传代培养
不死性 细胞
发生癌变 无限传代
细胞的生长特性
●细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附 在瓶壁上，称为细胞贴壁。
要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易 于贴附。
●细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到 表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖 ，这种现象称为细胞的接触抑制。