柱色谱和薄层色谱实验

由于吸附剂对不同组分有不同的 吸附能力，流动相也有不同的解吸能 力，因此，在流动相向前移动的过程 中，不同的组分移动不同的距离而形 成了互相分离的斑点。
三、实验步骤及注意事项：
（观看录像）
1、铺板：
2、点样：
在离薄板底边约1cm处，用铅笔轻轻 地划一条线，并划上A，B两点，用毛细 管蘸取样品点于点上（A为苏丹Ⅲ溶液，B 为苏丹Ⅲ-偶氮苯混合液），风干，样点扩 散直径不得超过2~3mm。
3、展开与显谱：
先将以环己烷：乙酸乙酯=6：1为展开 剂倒入方形染色缸中，加盖饱和5min，使 缸内充满展开剂蒸气。
然后迅速将薄板点样一端浸入展开剂 中，但样品点不可浸入，封盖。
约跑30min后，展开剂的前沿跑到薄板 的3/4时，将薄板取出，并用铅笔划出前沿， 晾干。确定斑点中心，测量，计算三个Rf 值。
实验 柱色谱
一、目的与要求：
1、了解柱色谱的基本原理及其一般 的操作技术。
2、学习用吸附柱色谱法分离色素混 合物。
二、基本原理：
柱色谱可分为分配柱色谱和吸 附柱色谱，本实验采用吸附柱色谱 分离混合色素。
柱内装有固定相（氧化铝）， 将少量样品溶液放在顶部，然后让 流动相（洗脱剂）通过柱，移动的 液相带着混合物的组分下移。
1、装柱（干法）：
先将少量脱脂棉装入柱的底部， 轻轻压紧，然后把氧化铝慢慢地倒入 柱内，并不断地用吸尔球敲打柱身， 让氧化铝填充均匀，适度紧密，装柱 约为2/3体积。
2、加样：
把柱固定于抽滤瓶上后，先用 95%乙醇润湿氧化铝，当乙醇液面下 降到与上层棉花面相平时，迅速滴入 0.5mL（约10滴）甲基橙-亚甲基蓝溶 液。
薄层色谱 计算三个Rf值
注意事项：
1、因比色管中溶液为易挥发的苯，在点 完样后需把盖子盖上。点完样后，毛细 管应放回原试管中，不可放错。 2、点样时不可留下较深的洞穴。 3、一个方形染色缸中只可放入一块薄板。
3、洗脱、收集与显谱：
当液面下降到与上层棉花面相平时， 用乙醇冲洗，并打开真空泵减压抽至蓝色 的亚甲基蓝全部被洗脱流下抽滤瓶后，待 乙醇液接近棉花面时，关闭减压活塞，把 滤液倒置一锥形瓶收集。并更换蒸馏水继 续抽洗，并加入1~2滴5%氢氧化钠，把甲 基橙也全部洗脱抽下，并用另一锥形瓶收 集。
注意：柱色谱实验做完后，氧化铝回收
实验十八 薄层色谱
一、目的与要求： 1、了解薄层色谱的基本原理及其一 般的操作技术。 2、学习用吸附薄层色谱法分离染料 混合物。
二、基本原理
薄层色谱可分为分配色谱和吸附色谱 本实验采用（固－液）吸附色谱。
固体吸附剂是在玻璃板上铺成均匀的 薄层，用毛细管将样品Leabharlann Baidu在板的一端，把 板放在合适的流动相（展开剂）里，流动 相带着混合物组分以不同的速率沿板移动， 即组分被吸附剂不断地吸附，又被流动相 不断地解吸而向前移动。
各组份在两相间连续不断地发生吸附、 脱附、再吸附、再脱附的过程，由于不同 的物质与固定相的吸附能力不同，各组分 将以不同的速率沿柱下移。
极性大的化合物吸附性强，吸附力较 小的化合物比吸附力较大的化合物下移得 快些。不同的组分移动不同的距离而形成 了互相分离的层带。
三、实验步骤及注意事项：
（观看录像）