柱色谱和薄层色谱实验

3、展开与显谱：
先将以环己烷：乙酸乙酯=6：1为展开 剂倒入方形染色缸中，加盖饱和5min，使 缸内充满展开剂蒸气。
然后迅速将薄板点样一端浸入展开剂 中，但样品点不可浸入，封盖。
约跑30min后，展开剂的前沿跑到薄板 的3/4时，将薄板取出，并用铅笔划出前沿， 晾干。确定斑点中心，测量，计算三个Rf 值。
由于吸附剂对不同组分有不同的 吸附能力，流动相也有不同的解吸能 力，因此，在流动相向前移动的过程 中，不同的组分移动不同的距离而形 成了互相分离的斑点。
三、实验步骤及注意事项：
（观看录像）
1、铺பைடு நூலகம்：
2、点样：
在离薄板底边约1cm处，用铅笔轻轻 地划一条线，并划上A，B两点，用毛细 管蘸取样品点于点上（A为苏丹Ⅲ溶液，B 为苏丹Ⅲ-偶氮苯混合液），风干，样点扩 散直径不得超过2~3mm。
实验十八 薄层色谱
一、目的与要求： 1、了解薄层色谱的基本原理及其一 般的操作技术。 2、学习用吸附薄层色谱法分离染料 混合物。
二、基本原理
薄层色谱可分为分配色谱和吸附色谱 本实验采用（固－液）吸附色谱。
固体吸附剂是在玻璃板上铺成均匀的 薄层，用毛细管将样品点在板的一端，把 板放在合适的流动相（展开剂）里，流动 相带着混合物组分以不同的速率沿板移动， 即组分被吸附剂不断地吸附，又被流动相 不断地解吸而向前移动。
薄层色谱 计算三个Rf值
注意事项：
1、因比色管中溶液为易挥发的苯，在点 完样后需把盖子盖上。点完样后，毛细 管应放回原试管中，不可放错。 2、点样时不可留下较深的洞穴。 3、一个方形染色缸中只可放入一块薄板。
实验 柱色谱
一、目的与要求：
1、了解柱色谱的基本原理及其一般 的操作技术。
2、学习用吸附柱色谱法分离色素混 合物。
二、基本原理：
柱色谱可分为分配柱色谱和吸 附柱色谱，本实验采用吸附柱色谱 分离混合色素。
柱内装有固定相（氧化铝）， 将少量样品溶液放在顶部，然后让 流动相（洗脱剂）通过柱，移动的 液相带着混合物的组分下移。
各组份在两相间连续不断地发生吸附、 脱附、再吸附、再脱附的过程，由于不同 的物质与固定相的吸附能力不同，各组分 将以不同的速率沿柱下移。
极性大的化合物吸附性强，吸附力较 小的化合物比吸附力较大的化合物下移得 快些。不同的组分移动不同的距离而形成 了互相分离的层带。
三、实验步骤及注意事项：
（观看录像）
1、装柱（干法）：
先将少量脱脂棉装入柱的底部， 轻轻压紧，然后把氧化铝慢慢地倒入 柱内，并不断地用吸尔球敲打柱身， 让氧化铝填充均匀，适度紧密，装柱 约为2/3体积。
2、加样：
把柱固定于抽滤瓶上后，先用 95%乙醇润湿氧化铝，当乙醇液面下 降到与上层棉花面相平时，迅速滴入 0.5mL（约10滴）甲基橙-亚甲基蓝溶 液。
3、洗脱、收集与显谱：
当液面下降到与上层棉花面相平时， 用乙醇冲洗，并打开真空泵减压抽至蓝色 的亚甲基蓝全部被洗脱流下抽滤瓶后，待 乙醇液接近棉花面时，关闭减压活塞，把 滤液倒置一锥形瓶收集。并更换蒸馏水继 续抽洗，并加入1~2滴5%氢氧化钠，把甲 基橙也全部洗脱抽下，并用另一锥形瓶收 集。
注意：柱色谱实验做完后，氧化铝回收