植物组织培养实验 期末考试理论题库

植物组织培养实验期末考试理论题库

□本科 专科 2010-2011学年第一学期制药工程系紫魂孤影制作

1. A.实验室器具洗涤的工艺流程是什么？洗净的判定标准是什么？

答：浸泡→刷→冲洗→刷洗（去离子水，蒸馏水）干燥→存放

标准：净水反复冲洗至管壁，瓶壁形成均匀水膜而无成股流下

2. A.无菌室及培养室的日常维护方法。

答：启用时清扫无尘，定期不定期给紫外灯照射：84消毒液喷雾，氯乙酸消毒。

3. A.外植体消毒的一般程序（菊花、银杏、大蒜三选一）

答：菊花幼苗→摘掉叶片→自来水冲洗30分钟，接种台75%酒精浸泡10S，0.1%升汞浸泡8-10分钟，倒入回收瓶，无菌水冲洗3次，备用。

4. A.银杏愈伤组织提取黄酮的操作要点。

答：①取出愈伤组织烘干，磨成细粉。

②选用适宜的溶剂，如（甲醇）提取黄酮。

③超声水浴破碎细胞，释放内容物。

④加入适宜量的适宜浓度酸使其水解。

⑤80℃水水浴回流时间要适宜（30min）.

5. A.简述无菌操作的技术要点。

答：①接种室消毒（接种前紫外灯照射20min,以上，平时或使用前酒精等喷雾灭菌。）

②用品消毒（所用刀，剪，镊子随时用75%酒精浸泡灭菌，接种材料前在酒精灯灼烧灭菌）

③人员消毒（进入实验前用肥皂洗手，穿上灭菌的实验服，操作前操作中常用酒精棉擦手，燥作时不要讲话。）

⑤材料消毒（外植体）

6. A.简述高压灭菌锅的使用方法。

答：①首先将内层灭菌桶取出，在向外层锅加入与三脚架齐平的水。

②放回灭菌桶，并装入灭菌物品。

③加盖，并将盖上的排气软管插入内层桶的排气槽内，在以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，螺栓松紧一致，勿漏气。

④打开电源加热，待压力上升到0.5MP时打开气阀，排净锅内冷空气后，待压力降到0MPA时关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力而逐渐上升，当锅内压力上升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。

⑤灭菌所需时间到后，切断电源，让锅内温度自然下降，当压力下降到零时，打开排气阀，旋松螺木栓，打开锅盖，取出物品。

7. A.简述污染率、枯死率和诱导率的计算方法。

答：污染率＝污染数/总数；枯死率=枯死数/(总数-污染数)；诱导率=愈伤数/（总数-污染数）.

8. A.继代培养的目的是什么？

答：初代培养物经过一段时间培养后，培养基营养日渐枯竭此时切割接种于新培养基中一方面可以补充营养，另一方面可增加数量。

9. A.菊花快繁实验中，在进行生根培养时，为什么要选择1/2MS作为基本培养

基？

答：选择1/2MS作为基本培养基，降低了无机盐的浓度，从而使整个培养基的渗透压降低，提高水势，促进芽吸水，从而促进生根。

10.A.简述大蒜脱毒的方法及原理。

答：原理：①热处理：在一定范围内，用高于常温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒，而不伤害植物本身

②茎尖培养：由于病毒在植物内分布不均匀，存在于茎尖，茎尖部分病毒含量极低或无病毒，以茎尖组织作为外植体，能获得脱毒植株，供繁殖，生产使用。

方法：茎尖培养结合热处理

将适宜的母株或由块茎萌发的带芽块茎于适当的高温30℃~38℃处理数周后，切取顶芽或侧芽作为茎尖剥离材料于无菌条件下剥离茎尖接种与适宜的培养基上，诱导茎尖分化成苗，扩繁育种。

11.A.简述配方1/2MS+BA2.0+NAA0.05+蔗糖3%+琼脂0.7%+PH5.4的含义及

配1L的制备方法。

答：㈠采用1/2MS作为基本培养基，降低了无机盐的浓度，从而使整个培养基的渗透压降低，提高水势，促进芽吸水，从而促进生根。

㈡根据细胞分裂素和生长素的相互调节器官的概念为促进根的分化可选用生长素对细胞分裂素比率高的配方，此培养基是生根培养基BA是细胞分离素，NAA是细胞生长素，除去细胞分离素只有细胞生长素，以达到促进生根的目的。

(1)配母液：MSI 20x MSII-MSV 200x贮备

NAA BA 0.1mg/ml贮备

（2）配培养基：

1、取约750ml蒸馏水，琼脂7g煮沸溶解，加入30g蔗糖

2、取母液MSI 50ml，MSII-V 5ml，BA20ml，NAA2ml于小烧杯，混匀

3、将2倒入1中，蒸馏水定容1L

6、调PH值(pH=5.8)

7、分装试管，封口

8、高压灭菌121℃，20min

9、存放。

12.A.简述植物快繁的技术路线.

消毒切割茎断

答：芽段——→芽萌发——→→芽生根——→炼苗移栽

13.A.简述大蒜脱毒的工艺流程

答：选择品种和母株→获取茎段→茎段消毒→剥离茎尖接种→分化成苗→保存无菌试管苗→扩繁。

14.A.简述大蒜脱毒效果的检测方法。

答：①：指示植物鉴定法。

②；血清学检测法。

③；电子显微镜法。

15.B.简述配500mlMS+BA0.5+NAA0.2+蔗糖3%+琼脂0.7%+PH5.6的过程。答：(1)配母液：MSI 20x MSII-MSV 200x贮备

NAA BA 0.1mg/ml贮备

（2）配培养基：

1、取约350ml蒸馏水，琼脂3.5g煮沸溶解，加入15g蔗糖

2、取母液MSI25ml，MSII-V2.5ml，BA10ml，NAA1ml于小烧杯，混匀

3、将2倒入1中，蒸馏水定容500mL

6、调PH值(pH=5.8)

7、分装试管，封口

8、高压灭菌121℃，20min

9、存放

16.B.组培中外植体污染原因及预防措施。

答：污染途径：1、外植体带菌 2、培养基及接种器具灭菌不彻底 3、接种操作不规范 4.环境不清洁

预防措施：1，防止外植体带菌①：选择好外植体采摘时期和采摘部位。

②：室外或无菌条件下进行预培养。

③：外植体严格灭菌。

2，保证培养基及接种器具彻底灭菌。

3，操作人员严格遵守无菌操作规程。

4，保证接种与培养环境清洁。

17.B.菊花快繁实验中，请写出所用到的三种培养基，并用器官分化理论简单作

出分析。

答：①：诱导芽萌发MS + BA2 + NAA0.2 + SUC 30 + 琼脂7(PH=5.8)

②：诱导芽增值形成丛芽达到快繁MS+BA2+NAA0.1+SUC30+琼脂7(PH=5.8)

③：诱导芽生根1/2MS + NAA0.1 + SUC30 + 琼脂4.5(PH=5.8)

18.B.某组培公司计划扩繁非洲菊，拟用配方为：MS + BA2.0+ NAA0.1，年计划生产试管

苗12万只，请计算出拟购BA的用量（单位：g）。（注：每升培养基可以分装60只试管）

答：培养基中BA的浓度是2mg/L，那么BA的用量为：120000/60×2.0mg/L=4000mg=4g

19.B.某公司经初步实验表明：玫瑰每四周扩繁一次，增殖倍数为4。现有玫瑰试管苗200

只，试计算该公司年产玫瑰苗的数量。

答：每年玫瑰的数量：y=m·an=200×4 ¹²=3355443200

20.B.简述银杏愈伤组织提取黄酮相对于自然界叶片直接提取黄酮的优势。

答：银杏愈伤组织提取黄酮的优势①：再短时间内可获得大量愈伤组织节约成本。