植物组织培养试题与答案(集合版)
植物组织培养复习题答案

植物组织培养复习题答案植物组织培养是一种生物技术,它涉及将植物的一小部分组织(如叶片、茎尖或根尖)在无菌条件下培养在特定的营养培养基上,以诱导其生长和分化成新的植物体。
以下是植物组织培养复习题的答案:一、选择题1. 植物组织培养的基本原理是什么?A. 植物细胞的全能性B. 植物细胞的分裂性C. 植物细胞的分化性D. 植物细胞的再生性答案:A2. 植物组织培养中常用的培养基是什么?A. MS培养基B. LB培养基C. 酵母提取物培养基D. 血浆培养基答案:A3. 在植物组织培养中,以下哪个因素不是影响培养成功的关键因素?A. 无菌操作B. 培养基成分C. 光照条件D. 培养基的pH值答案:C二、填空题1. 植物组织培养技术主要包括_______、_______和_______三个阶段。
答案:外植体的消毒、诱导分化、生根与移栽2. 植物组织培养中常用的生长调节剂包括_______、_______和_______。
答案:生长素、细胞分裂素、赤霉素三、简答题1. 简述植物组织培养的优点。
答案:植物组织培养具有快速繁殖、遗传稳定性、避免病毒传播、节约空间和成本等优点。
2. 描述植物组织培养的基本步骤。
答案:植物组织培养的基本步骤包括:选择适当的外植体,进行严格的消毒处理,将外植体转移到含有适宜营养成分和激素的培养基中,提供适宜的温度和光照条件,观察并记录生长情况,最后进行生根和移栽。
四、论述题1. 论述植物组织培养在现代农业生产中的应用及其重要性。
答案:植物组织培养在现代农业生产中具有重要作用,它不仅能够快速繁殖优良品种,提高生产效率,还能通过基因工程等手段改良植物品种,增强植物的抗病、抗虫和抗逆性。
此外,植物组织培养技术在植物保护、药用植物生产以及植物资源的保护和利用等方面也发挥着重要作用。
五、实验操作题1. 设计一个简单的植物组织培养实验方案。
答案:实验方案应包括实验目的、实验材料、实验设备、实验步骤、预期结果和注意事项。
植物组织培养试题

选择题
植物组织培养中,常用于诱导愈伤组织形成的植物激素是?
A. 乙烯
B. 赤霉素
C. 生长素
D. 细胞分裂素(正确答案)
下列哪项不是植物组织培养的基本过程?
A. 外植体的选择与处理
B. 愈伤组织的诱导与分化
C. 直接种植于土壤中
D. 生根与移栽
(正确答案C)
在植物组织培养中,为了促进细胞伸长,通常使用的植物激素是?
A. 脱落酸
B. 细胞分裂素
C. 赤霉素(正确答案)
D. 乙烯
植物组织培养中,无菌操作的主要目的是?
A. 促进细胞分裂
B. 防止微生物污染(正确答案)
C. 提高生根率
D. 加速愈伤组织形成
下列哪种材料最适合作为植物组织培养的外植体?
A. 老化的叶片
B. 成熟的种子
C. 幼嫩的分生组织(正确答案)
D. 枯死的茎干
植物组织培养中,光照条件对哪一阶段尤为重要?
A. 愈伤组织诱导
B. 生根培养
C. 分化培养(正确答案)
D. 继代培养
下列哪项不是影响植物组织培养成功率的因素?
A. 培养基的pH值
B. 培养室内的湿度
C. 外植体的基因型
D. 培养基中的糖分种类(正确答案)
植物组织培养中,用于脱分化的培养基通常含有较高浓度的?
A. 生长素和乙烯
B. 赤霉素和脱落酸
C. 细胞分裂素和生长素(正确答案)
D. 乙烯和脱落酸
在进行植物组织培养时,为了保持细胞的正常生理功能,培养基中通常需要添加?
A. 大量元素和微量元素(正确答案)
B. 仅大量元素
C. 仅微量元素
D. 无需添加任何元素。
植物组织培养试卷及答案6套

《植物组织培养》试题(一)一、填空题(每空0.5分,共10分)1.植物组织培养按培养基的物理状态分为___________培养和___________培养。
2.在组织培养中,IAA等植物激素必须用__________法灭菌,而接种室空间可采用__________或__________法灭菌。
3.植物的胚胎培养,包括________________、________________、________________以及________________等四个内容。
4.1960年,英国学者Cocking用__________分离原生质体成功,从而开创原生质体培养技术。
5.对植物材料进行表面灭菌时,常采用的灭菌药剂为__________、__________、__________。
6.器官培养时,其营养器官的培养有__________、__________、__________三种方式。
7.大多数植物组织培养的适宜温度范围是_______℃,培养基的pH值范围是_______。
8.用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_________℃的温度范围内,而若用它高温干燥灭菌则需在_________℃的温度下1~3小时。
二、单项选择题(每题2分,共10分)1. 下列不属于生长素类的植物激素是_________。
A 6-BA;B IAA;C NAA;D IBA2. 在原生质体的培养中,渗透稳定剂的作用是_________。
A 稳定原生质体的形态而不使其被破坏;B 支持作用;C 提供营养;D 调节PH 值3. MS培养基中,下列不属于大量元素的盐是_________。
A NH4NO3;B KNO3;C ZnSO4.7H2O;D MgSO4.7H2O4. 下列实验中可能获得单倍体植株的是_________。
A 小麦的茎尖培养;B番茄花柱培养;C玉米胚乳培养;D玉米花粉培养5.同一植株下列_________部位病毒的含量最低。
植物组织培养试题(综合)

植物组织培养综合测试题(一)一、填空题(每空0.5分,共10分)1. 植物组织培养按培养对象分为_______、_________、_________、__________、__________等几种类型。
2. 在分离原生质体的酶溶液内,需要加入一定量的_______其作用是保持原生质体膜的稳定,避免破裂。
3. 1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物_______的理论概念;1943年White提出植物细胞“_________”学说,并出版了《植物组织培养手册》,从而使植物组织培养成为一门新兴的学科。
4. 用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_________℃的温度范围内,而若用它高温干燥灭菌则需在_________℃的温度下1-3小时;烘干植物材料的温度是_________℃。
5. 细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的__________和__________的能力。
6. 1962年,Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了__________培养基,其特点是__________浓度较高,且为较稳定的__________。
7. 7.6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向,比值低时促进__________的生长,这时__________占主导地位;比值高促进__________的生长,这时__________占主导地位。
二、不定项选择题(每题2分,共10分)1. 培养室里的度一般保持在_________A 30~40%;B 50~60%;C 70~80%;D 80~90%2. 下列不属于生长素类的植物激素是_________。
A Kt;B IAA;C NAA;3. 影响培养基凝固程度因素有_________。
A 琼脂的质量好坏;B 高压灭菌的时间;C 高压灭菌的温度;D 培养基的PH4. .活性炭在组织培养中的作用有_________。
《植物组织培养技术》试题六答案

《植物组织培养技术》试题六答案一、名词解释(每题3分,共15分)1、植物组织培养:是指在无菌条件下,将植物的离体器官、组织、细胞以及原生质体,应用人工培养基,创造适宜的培养条件,使其长成完整小植株的过程。
2、驯化:试管苗移植前可将培养瓶移到自然光照下锻炼3~10d,让试管苗接受自然光的照射,感受自然温度的昼夜温差现象,使其壮实,然后再开瓶移植,经过较低温、湿度的处理,以适应自然温、湿度条件。
3、接种:在无菌条件下,用灼烧过的镊子将外植体放到培养基上的操作过程。
4、细胞悬浮培养:是指将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。
5、脱毒苗:是指不含该种植物的主要危害病毒,即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。
二、填空题(每空1分,共20分)1、植物组织培养的发展分为三个阶段:萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和应用阶段。
2、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝固剂和支持物,一般用量为6-10g/L 之间。
3、常用的化学灭菌剂有酒精、氯化汞、次氯酸钠等。
4、愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式、和胚状体方式。
5、茎尖培养根据培养目的和取材大小分为茎尖分生组织培养和普通茎尖培养两种类型。
前者主要是对茎尖长度不超过0.1mm,最小只有几十微米的茎尖进行培养,目的是获得无病毒植株;后者是对几毫米乃至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养,目的是加快繁殖速度。
6、分子生物学鉴定脱毒苗的主要方法:①双链RNA法(dsRNA)和②互补DNA(cDNA)检测法。
7、花药培养前的预处理:低温冷藏是最常用的方法。
8、原生质体的纯化方法有:离心沉淀法、漂浮法和界面法。
三、选择题(每题1分,共10分)1、植物组织培养实验室不包括( D )。
A、准备室B、无菌操作室C、培养室D、显微实验室2、离体叶培养中,消毒后的叶片应整理切割成( C )大小。
A、3×3mmB、4×4mmC、5×5mmD、6×6mm3、( D )是植物离体培养常用的主要糖类。
植物组培自测题与参考标准答案简

第1章复习测试题二、填空题1.根据外植体地不同,一般可以将植物组织培养分为:植株培养、胚胎培养、一器官培养、组织培养、,细胞培养和原生质体培养.2.在植物组织培养中,外植体脱分化后,再分化形成完整植株地途径有两条:一是器官发生途径,二是胚状体途径3.通过器官发生再生植株地方式有三种:第一种最普遍地方式是先分化芽,再分化根;第二种是先分化根.再分化芽,这种方式中芽地分化难度比较大;第三种是在愈伤组织块地不同部位上分化出根或芽,再通过维管组织地联系形成完整植株.4.体细胞胚发生地途径可分为间接途径和直接途径.5.植物组织培养地整个历史可以追溯到19世纪末和20世纪初.一个多世纪来,植物组织培养地发展大致可以分为探索、奠基和迅速发展三个阶段.6.在Schleiden和Schwann所发展起来地细胞学说推动下,1902年德国植物生理学家G. Haberlandt提出了细胞全能性地设想,并成为用人性培养基对分离地植物细胞进行培养地第一人.7. White、Gautheret和Nobecourt在1939年确立地植物组织培养地基本方法,成为以后各种植物组织培养地技术基础,他们三人被誉为植物组织培养地奠基人.8.1958年英国人Steward等将胡萝卜髓细胞培养成为一个完整植株,首次通过实验证明了植物细胞地全能性,成为植物组织培养研究历史中地一个里程碑.9. 1960年Cocking等人用酶分离原生质体获得成功,开创了植物原生质体培养和体细胞杂交工作.同年Morel培养兰花地茎尖,获得了快速繁殖地脱毒兰花.其后,国际上相继把组织培养技术应用到兰花地快速繁殖上,建立了“兰花工业”.10.花药培养在20世纪70年代得到了迅速发展,获得成功地物种数目不断增加,其中包括很多种重要地栽培物种.,烟草、水稻和小麦等地花培育种在我国取得了一系列举世瞩目地成就.三、是非题(X ) 1.从理论上说,所有地植物细胞与组织材料都能培养成功,其培养地难易程度基本相同.(J ) 2.愈伤组织是一种最常见地培养类型因为除了茎尖分生组织培养和少数器官培养外,其它培养类型都要经历愈伤组织阶段才能产生再生植株(J ) 3.在组织培养中可采用愈伤组织诱变、花粉培养诱变等方法来进行植物育种等(X ) 4.单倍体育种已成为改良植物抗病、抗虫、抗草、抗逆性、品质等特性地新地重要手段.(J ) 5.利用植物组织或细胞大规模培养,可以从中提取所需地天然有机物,如蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱、天然色素以及其它活性物质.四、选择题1.在 A 中培养物生长过程中排出地有害物质容易积累,由此造成自我毒害,所以1/ 8必须及时转移.A.固体培养基B.液体培养基C.初代培养基D.继代培养基2.用C 技术可以克服杂交不亲合地障碍,使杂种胚顺利生长,获得远缘杂种.A.体细胞杂交B.基因工程C.胚培养D.单倍体育种3. A 是打破物种间生殖隔离,实现其有益基因交流,改良植物品种,以致创造植物新类型地有效途径.A.体细胞杂交B.基因工程C.人工种子D.单倍体育种4. D 方法不仅可以快速获得纯系,而且还能缩短育种年限、提高选择效率.A.胚培养B.基因工程C.人工种子D.单倍体育种5. B 是指将植物离体培养产生地体细胞胚包埋在含有营养成分和保护功能地物质中,在适宜条件下能发芽出苗地颗粒体.A.胚培养B.人工种子C.基因工程D.单倍体育种1.植物组织培养是一项技术性较强地工作.为确保培养成功,植物组织培养地全过程要求严格地无菌条件和无菌操作,在专门地植物组织培养实验室内进行.2.一个标准地植物组织培养实验室要能够满足整个组织培养工艺流程通常需要具备以下四个单元:准备室_、缓冲室、,无菌操作室—和培养室.3.植物组织培养实验室地大小、简繁可以根据组培目地而定但必须能够完成上养基配置无菌接种和培养三个基本环节.4.常见地培养器皿有试管、. 三角瓶、,广口培养瓶、和培养皿.5.植物组织培养地无菌操作需要镊子、剪刀、解剖刀、接种针等金属用具6.清洗玻璃器皿用地洗涤剂主要有肥皂、洗洁精、洗衣粉和铭酸洗涤液.7.新购置地器皿地清洗是,先用稀盐酸浸泡,然后用肥皂水洗净,清水冲洗,最后用蒸馏水冲淋1遍,干后备用三、是非题(J ) 1.无菌操作室适当位置应吊装1〜2盏紫外灯,用以经常地照射灭菌.(X ) 2.瓶口封塞可用多种方法,但要求绝对密闭,以防止培养基干燥和杂菌污染.(J ) 3.分注器地作用是把配制好地培养基按一定量注入到培养器皿中.(X ) 4.干燥箱用于干燥需保持80〜100℃;进行干热灭菌需保持120℃,达1〜3小时.(J ) 5.培养室湿度要求恒定,一般保持相对湿度70%〜80%.四、选择题1. A 用于配制培养基时添加各种母液及吸取定量植物生长调节物质溶液A.移液管B.分注器C.过滤灭菌器D.酸度计2. C也称解剖镜,用于切取很小地外植体(如茎尖分生组织、胚胎等)和解剖、观察植物地器官、组织等.A.倒置显微镜B,电子显微镜C,双目实体显微镜 D.普通生物显微镜3.离心机用于分离培养基中地细胞以及解离细胞壁内地原生质体一般选择低速离心机,每分钟C转左右即可.A. 1000B.2000C.3000D.40004.植物组织培养地振动速率可用每分钟A_次左右,摇床冲程在左右.A. 100,3cmB. 100,2cmC. 200,3cmD. 200,3cm5.培养室温度一般要求常年保持C—℃左右.A. 20B.22C.25D.281.培养基地成分主要包括无机营养、维生素、氨基酸、有机附加物、植物生长调节物质、糖类、琼脂、其它成分和水等.2.植物组织培养过程中要注意决定愈伤组织生根还是生芽地关键取决于细胞分裂素与生长素之间浓度地比率.当配制地培养基中生长素/细胞分裂素地比例_高时则有利于生根;生长素/细胞分裂素地比例_低时则有利于生芽;若两者浓度相当时,既不利于生根,也不利于生芽,而是愈伤组织地产生占优势.3.蔗糖,葡萄糖和果糖都是较好地碳源一般多用蔗糖,其浓度为2%-5% .4.在灭菌之前,培养基地pH值一般都调节到5.0〜6.0,最常用地是5. 6〜5.8 .pH值一般用1mol/L盐酸调低,用1mol/L氢氧化钠调高.5. MS培养基是1962年Murashige和Skoog为培养烟草材料而设计地.它地特点是无机盐地浓度高,具有高含量地^^、3 ,尤其硝酸盐地用量很大,同时还含有一定数量地铵盐.6. N6培养基是1974年由我国地朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计地.其特点是KNO和(NHd)SO含量高且不含钼.3 4 2 4-7.根据培养基作用地不同,培养基分为诱导培养基、增殖培养基和生根培养基三种.三、是非题(J ) 1.常用地生长素类植物生长调节物质有IAA、IBA、NAA、2,4-D等.(X ) 2.组培过程中培养物地细胞分裂停止,绿叶变黄,进而变白,这属于缺氮症.(X ) 3.维生素C是所有细胞和组织必须地基本维生素,可以全面促进植物地生长(X ) 4.在植物组织培养中,GA3、IAA、ZT、ABA、NAA、泛酸钙、植物组织提取物等不能进行高压高温灭菌,需要进行过滤灭菌.(V )5.在培养基配制时常常才印6盐单独配制把FeS04和螯合剂乙二胺四乙酸钠Na2EDTA) 先分别配成溶液再相互混合使形成螯合铁用于培养基拟防止沉淀和助其被植物吸收四、选择题1.下列不属于生长素类植物生长调节物质地是____A .A. KTB. IAAC. NAAD. IBA2.下列培养基中—C 无机盐地浓度最低.A. MS培养基;B. B5培养基;C. White培养基;D. N6培养基3.影响培养基凝固程度因素有_D.A.琼脂地质量好坏;B.高压灭菌地时间;C.高压灭菌地温度;D.培养基地pH4.活性炭在组织培养中地作用有 A B C.A.吸附有毒物质;B,减少褐变,防止玻璃化;C.创造黑暗环境,利于根地生长;D,增加培养基中地养分5.下列不属于大量元素地盐是—C.A. NH4NO3;B. KN O3;c. Zn SO4-7H2O; D. MgSOJJ。
植物组织培养试卷及答案4套

《植物组织培养》试题(一)一、填空题(每空1分,共20分,)1、一般培养室控制的温度是________,培养基常选用的pH值是________。
2、在组织培养中,培养基常用____________法灭菌,不耐热物质用_________法灭菌。
3、非洲菊的叶片_______,故没有直立的茎,在组织培养的继代过程中用________法繁殖。
4、1962年,Murashige 和Skoog为培养烟草细胞设计了____培养基,其特点是__________浓度较高,且为较稳定的_______________。
5、从单个细胞或外植体形成的愈伤组织,大致要经历 ______、____和___期。
6、6-BA / NAA 的高低决定着外植体的发育方向,其比值高时________,比值低时_______________。
7、脱毒苗培养的常用两种方法是_______和__________。
8、菊花在生产实践中常用 _______法繁殖,在组织培养可用______作为外植体进行培养。
9、草莓属于_____科植物,用微尖培养草莓主要使其____,从而提高产量和质量。
二、判断题(每题2分,共10分,)()1、对外植体材料用酒精消毒目的只是灭菌。
()2、菊花属于球根花卉,而兰花属于宿根花卉。
()3、诱导愈伤组织重新脱分化出各种不同的器官和组织,这个过程称为脱分化。
()4、MS0培养基是没有激素的培养基。
()5、受精卵和体细胞都具有全能性。
三、名词解释(每题2分,共10分)1、细胞全能性2、灭菌3、玻璃化现象4、指示植物5、驯化四、选择题(每题1分,共10分)()1、下列哪种不是原生质体分离所用的酶A 纤维素酶B 半纤维素酶C果胶酶D淀粉酶()2、下列哪种不是组织培养常用的维生素A:维生素B2 、B:维生素B1 、C:维生素B6、 D:维生素C()3、在花药培养中下列哪种不是花粉的发育过程。
A营养细胞发育途径 B 生殖细胞发育途径C 胚状体发育途径D 花粉均等分裂途径()4、下列哪种激素不属于生长素类①IAA ②IBA ③6-BA ④NAA()5、在未成熟胚胎培养中下列哪种不常见的生长方式A“胚性”生长B早熟萌发C先胚根后胚芽D先形成愈伤组织再分化()6、适于花粉培养的最佳时期是__A双核期B单核期C多核期D无核期()7、下面哪种是MS培养基大量元素所用药剂A 硫酸镁B 硫酸亚铁C硫酸锌 D 硫酸铜()8、下列哪种不是在MS培养基起作用的有机物A氨基酸 B 肌醇 C 维生素 D 琼脂()9、常见的组织培养程序包括①取材②接种③灭菌④做培养基A①②③④B①④③②C①③②④D①④②③()10、和组织培养相似的代名词是A 克隆B有性生殖C孤雌生殖 D 单性生殖五、简答题(共50分)1、6-BA在组织培养中有何作用?(6分)2、述活性炭在组织培养中有哪些作用及使用注意事项?(6分)3、什么叫花粉看护培养法?原理是什么?(6分)4、尖培养脱毒的原理是什么?接种时应注意什么?(6分)5、移栽驯化香石竹时怎样选用基质和搭配基质?(6分)6、接种室有哪些技术要求?(6分)7、用湿热法进行高压灭菌的大致步骤有哪些?(7分)8、怎样用指示植物法鉴定草莓是否含有病毒?(7分)《植物组织培养》试题 (二)一、填空题(每空1分,共20分)1、在分离原生质体酶溶液内,需加入一定_____稳定剂,其作用是_______________。
(完整版)植物组织培养试题及答案总结

(完整版)植物组织培养试题及答案总结《绪论》复习题及参考答案⼀、填空:★1、根据培养的材料,植物组织培养分:愈伤组织培养、器官培养、细胞培养、原⽣质体培养、悬浮培养等类型。
2、植物组织培养的发展分为三个阶段:萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和应⽤阶段。
3、1902年,Haberlandt提出了植物细胞“全能性”学说,1934年,White出版了《植物组织培养⼿册》从⽽使植物组织培养为⼀门新兴学科。
⼆、名词解释:★1、植物组织培养(plant tissue culture):是指通过⽆菌和⼈⼯控制的环境条件下,利⽤适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原⽣质体进⾏培养,使其再⽣细胞或完整植株的技术。
由于培养材料已脱离了母体,⼜称为植物离体培养(Plant culture in vitro)。
2、脱分化(dedifferentiation):由⾼度分化的植物器官、组织或细胞产⽣愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化。
3、再分化(redifferentiation):脱分化产⽣的愈伤组织继续进⾏培养⼜可以重新分化成根或芽等器官,这⼀过程称为植物细胞的再分化。
★4、外植体(explant):由活体(in vivo)植物体上切取下来的,⽤于组织培养的各种接种材料。
包括各种器官、组织、细胞或原⽣质体等★5、愈伤组织(callus):原指植物在受伤之后于伤⼝表⾯形成的⼀团薄壁细胞,在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分⽣能⼒的⼀团不规则的薄壁细胞,多在植物体切⾯上产⽣。
三、问答题:1、简述植物组织培养的理论依据?植物组织培养的理论依据是细胞全能性学说,即植物体的每⼀个细胞都携带有⼀套完整的基因组,并具有发育成为完整植株的潜在能⼒。
★2、植物组织培养有哪些特点?(1)培养条件可以⼈为控制(2)⽣长周期短,繁殖率⾼:(3)管理⽅便,利于⼯⼚化⽣产和⾃动化控制:★3、植物组织培养的分类?(1)根据培养对象不同:组织培养、器官培养、胚胎培养、细胞培养、原⽣质体培养等;(2)根据培养物培养过程:初代培养、继代培养;(3)根据培养基的物理状态:固体培养、液体培养。
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植物组织培养试题与答案(集合版)
植物组织培养练习题
1.植物组织培养:指要人工控制的条件下,将植物体的任何部分,或器官、或组织、或细胞,
进行离体培养,使之发育形成完整植物体。
所谓人工控制的条件,即营养条件和环境条件;
植物体的任何一部分是指根、茎、叶、花、果、实以及它们的组织切片和细胞。
2.愈伤组织培养:将外植体接种在人工培养基上,由于植物生长调节剂的存在,而使其细胞
脱分化形成愈伤组织,然后通过再分化形成再生植株。
3.外植体:植物组织培养中的各种接种材料,包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质
体等。
4.脱分化:一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈伤组织的现象。
5、接种:把经过表面灭菌后的外植体切碎或分离出器官、组织、细胞,转放到无菌培
养基上的全部操作过程。
6、褐变:外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活,使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类
物质,这种致死性的褐化物不但向外扩散使培养基逐渐变成褐色,而且还会抑制其他酶的活性,严重影响外植体的脱分化和器官分化,最后变褐而死亡的现象。
二填空
植物组织培养根据培养方式分为固体培养和液体培养。
2、植物组织培养类型分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培养。
3、组织培养的主要应用领域有快速繁殖、脱毒、体细胞无性系变异和新品种培育、单倍体育种、种质保存、遗传转化、次生代谢物的生产等几个方面。
4、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为快速繁殖和脱毒培养两种类型。
5、一般组织培养的几道工序如下:培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和高压灭菌;无菌操作——材料的表面灭菌和接种,培养;试管苗的驯化、移栽与初期管理。
6、在进行植物组织培养室设计时,其设计应包括洗涤室、准备室、灭菌室、无菌操作室、培养室、细胞学实验室、摄影室等分室,另加驯化室、温室和大棚。
7、培养基的成分主要包括无机营养、氨基酸、有机附加物、维生素、糖、琼脂、激素、活性炭、PH。
8、植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。
9、细胞全能性是指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组,并具有发育成完整植株的潜在能力。
10、玻璃化现象是指试管苗的一种生长失调症状,当植物材料进行离体繁殖时,有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状,这种现象称为玻璃化。
其苗称为玻璃化苗。
11、液体培养是将培养物方在液体培养基中培养,又称为液体震荡培养。
三、
1、简述培养基的配制、分装、包扎和灭菌。
答:
(1)确定培养基的配方。
(2)贮备液(或母液)的配制与保存配一些浓溶液,用时稀释,这种浓溶液叫贮备液或母液。
按药品种类和性质分别配制,单项、单独保存或几种混合保存。
一般应按配方顺序依次称量,分别溶解在少量蒸馏水中,最后再依次加到一起,并定容到规定体积。
贮备液配好后贴上标签,保存在冰箱中。
(3)配制培养基
●先在洁净的不锈钢锅理放入约750ml蒸馏水,加入所需要的琼脂和糖,最好能在水浴锅理将琼脂溶化,如直接加热应不停地搅拌,防止在锅底烧焦或沸腾溢出。
●按需要加入相应量的母液。
●按需要加入相应量的植物激素和其它物质。
加蒸馏水定容,●充分混合好后,用1NKOH(或NaOH)调整PH值到所需值。
(4)分装:按容器的大小和培养要求,趁热将适量培养基分注到三角瓶或试管中,并即刻用封口膜封住瓶口。
(5)灭菌:压力108kPa,温度121度,时间15—30分钟。
2、什么叫接种?简述无菌操作注意事项。
答:把经过表面灭菌后的外植体切碎或分离出器官、组织、细胞,转放到无菌培养基上的全部操作过程叫接种。
无菌操作注意事项好下:
(1)进无菌室之前,操作人员需着经灭菌的白色工作服,戴口罩。
操作人员双手必顺进行灭菌。
植物组织培养室的核心是无菌室(又叫接种室),怎样进行无菌室的灭菌?
答:
(1)常规灭菌法
●用70%酒精(或0.1%新洁尔灭)朝天花板、四周墙壁方向喷洒;
●待整个室喷洒完毕后依次用70%酒精将台子揩一遍;
●用湿拖把(70%酒精打湿),把地板拖一次;
●然后将无菌室的门关闭,开紫外灯,照射5~30分钟;
●0.5~2小时后进入室内操作,待工作完毕后,将室门打开换气。
以后每用一次灭菌一次。
(2)无菌室发现霉斑(墙上)时的灭菌
●用70%酒精擦一遍(里里外外);
●用新配70%酒精重复再擦一遍;
●甲醛蒸:方法是每立方米空间用2ml甲醛(福尔马林)加0.2克高锰酸钾的比例,蒸房间24小时(门窗密闭),然后开启房门,放走甲醛气体。
●常规灭菌法再灭菌一次。
待用。
4、什么叫污染?污染的原因有哪些?简述预防污染的措施?
污染是指在组培过程中,由于真菌、细菌等微生物的浸染,在培养器内滋生大量的菌斑,使培养材料不能正常生长和发育的现象。
污染原因有以下几种:
●培养基及各种使用器具消毒不彻底;
●外植体灭菌时不彻底,在菌残存在细胞组织中;
●操作时人为因素带入;●环境不清洁;
●超净工作区域污染。
预防污染的措施:做好器具灭菌、外植体灭菌,做好无菌操作技术,搞好组培室环境条件,正确使用和维护好超净工作台。
5、简述培养物的玻璃化现象及其预防措施。
答:玻璃化是试管苗的一种生量失调症状,当植物材料进行离体繁殖时,有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状,这种现象称为玻璃化。
其苗称为玻璃化苗。
结果是瓶内的小苗过渡生长,但有用的苗很少。
各种不同植物,玻璃化的发生频率各不相同。
大量的试验表明:玻璃幕化苗是在芽分化启动后的生长过程中,由碳水化合物、氮代谢和水分状态等发生生理性异常所引起,它由多种因素影响和控制,产生玻璃化的主要原因有:激素浓度、温度、湿度、培养基的硬度、光照时间和培养成分。
针对以上原因,可以通过降低培养基的水位;减少培养基中含氮化合物的用量;增加光照强度;调整培养温度;降低培养基中细胞分例素的用量;提高培养基的硬度等措施,来减少玻璃化现象的发生。
6、简述外植体的褐变及其预防措施。
褐变是指在组培过程中,由培养材料向培养基中释放褐色物质,致使培养基逐渐变成褐色,培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。
它的发生是由外植体中的酚类化合物与多酚氧化酶作用被氧化形成褐色的醌类化合物,醌类化合物在酪氨酸酶的作用下,与外植体组织中的蛋白质发生聚合,进一步引起其他酶系数失活,导致组织代谢紊乱,生长受阻,最终逐渐死亡。
引起褐变的原因包括外植体本身、培养基及培养条件等方面的影响。
减轻褐化现象的途径有以下:
●外植体和培养材料进行20—40天的遮光培养或暗培养;
●选择适宜的培养基,调整激素用量;
●控制温度和光照,在不影响正常生长和分化的前提下,尽量降低温度,减少光照;
●冬春季节选择年龄适宜的外植体材料进行组培,并加大接种数量;
●在培养基中加入抗氧化剂和其他抑制剂,如抗坏血酸、硫代硫酸钠、有机酸、半光氨酸及其盐酸盐、亚硫酸氢钠、氨基酸等,可以有效地抑制褐化;
●加快继代传瓶的速度,添加活性炭等吸附剂(0.5%—2.5%),是生产上常用的有效方法。
四、请设计一个组织培养室,说明规模、面积、作用、目的、各室作用,并绘出平面图。