邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁实验指导

实验二 邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁 一一标准曲线法

一、 实验目的：

1. 掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法； 2 •学会标准曲线的绘制方法及其使用。 二、 原理：

1•定量分析依据：A= K be 2•有关反应：

4Fe +2NH 2OH ・HCI=4Fe +N 2O f +4H +2H 2O+2CI

3. 显色条件

pH 值控制：

显色时间： 显色温度：室温

显色剂及用量：邻二氮菲 2.00mL

4•测量条件

入 max=510nm 参比溶液：试剂空白 吸光度范围：0.2-0.8 三、 仪器：

可见分光光度计，1cm 比色皿、100mL 容量瓶1个，20mL 移液管1支，50mL 容量瓶10 个，10mL 吸量管1支，1mL 吸量管（或移液管） 1支，5mL 移液管1支，2mL 移液 管1支。 四、 试剂：

① 铁贮备液（100卩g/mL ）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH 4） 2Fe （SO 4） 2 6H 2O] 于100毫升烧怀中（或0.8640g 分析纯的

NH 4Fe （SO 4）2 12H 2O ，其摩尔质量为

482.18g/mol ）,加50毫升1+1 H 2SO 4,完全溶解后，移入 1000ml 的容量瓶中，并用水稀

释到刻度，摇匀，此溶液中

Fe 的质量浓度为100.0卩g/mLo （实验室准备好）

② 铁标准溶液（20.00 yg mL — 1） 移取100.0卩g ・mL — 1铁标准溶液 20.00mL 于100mL 容量瓶中，并用蒸馏水稀释至标线，摇匀。 （学生自行配制） ③ 10%盐酸羟胺水溶液：（用时配制）。

④ 0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至 所需体积。（临用时配制）或（避光保存，两周内有效）

。

⑤ HAc-NaAc 缓冲溶液（pH 〜5.0）:称取40克纯醋酸铵加到 50毫升冰醋酸中，加水溶解后 稀释至100毫升。

Fe 2+

+3

橙红色配合物

pH ~ 5.0o

15mi n ■ ?e

3

五、测定步骤：

1、标准曲线的绘制：

（1 ）分别吸取铁的标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml 于7 支50ml 容

量瓶中，加水至刻度；

（2）依次分别加入10%盐酸羟胺溶液1ml，混匀，加入5ml pH〜5.0缓冲溶液，摇匀，加入0.5%邻菲罗啉溶液2ml，摇匀，

（3）放置15分钟后，在510nm波长处，用1cm比色皿，以试剂空白作为参比，测定各溶液的吸光度。

附721型分光光度计操作过程：

1. 检查仪器各调

节钮的起始位置是否正确，选择波长，并将灵敏度档置第1档

2. 接通电源，打开开关

3盖上比色皿暗盒盖，用调100%”调节器使电表指针处于透过率100%”位，打开比

色皿暗盒盖，用调0”调节器使电表指针处于透过率0”位；预热20min

4. 放入参比溶液及试样溶液

5. 校准：

拉动吸收池拉杆，使参比溶液置于光路中，打开比色皿暗盒盖，用调0”调

节器使电表指针处于透过率0”位；盖上比色皿暗盒盖，用调100%”调节器使电表指

针处于透过率100%”位。重复校正至稳定

6. 若调100% ”调节器不能使电表指针处于

透过率100%”位，打开比色皿暗盒盖，则应放大灵敏度，重新调整直至稳定

7. 盖上样品盖，拉动吸收池拉杆，依次将待测溶液推入光路，读出吸光度值A。连

续读数后，立即打开比色皿暗盒盖，取出吸收池，参比溶液不取出。

8. 再放入其他浓度待测溶液，继续调0”及”100%”，按

前面的“校准”步骤重新调整

直至稳定，再测量其他浓度待测溶液的吸光度A。

9. 测量完毕，取出吸收池，各旋钮置于原来位置，电源开关置于关”，拔下电源插头。

10. 比色皿用纯水洗净后倒置于滤纸上晾干。

（4）以吸光度为纵坐标，铁含量（卩g, 50ml）为横坐标，用软件（excel或origin ）绘制出标准曲线。

取3只洁净的50mL容量瓶，分别加入适量（以吸光度落在工作曲线中部为宜）含铁未知试液

5.00mL ,按步骤（前面步骤1标准曲线的绘制）显色，测量吸光度并记录，由线性回应方程式求出相应的铁含量。（记录格式参考下表）。

六.注意事项

(1)显色过程中，每加入一种试剂均要摇匀。

(2 )试样和工作曲线测定的实验条件应保持一致，所以最好两者同时显色同时测定。七•思考题

1)T与A两者关系如何？分光光度测定时，一般读取A值，该值在标尺上什么范围好?

为什么？如何控制被测溶液的A值在此范围内？