干化学技术简介.

140／105.211＊100＝133.0 mmol/L
• 直接法没有电解质排斥效应
性能优势
• 一次性电极 • 没有基质效应
• 没有电解质排斥效应
• 没有繁琐的日长保养
免疫速率法干片
竞争性与非竞争性免疫速率反应模式 需要液体反应底物 地高辛、苯妥因、苯巴比妥、CRP、 卡马西平
免疫速率法干片
茶碱干片（THEO)
速率法（多点法）
应用速率法进行测试的项目
谷丙转氨酶干片（ALT)
谷草转氨酶干片（AST)
碱性磷酸酶干片（ALKP)
肌酸激酶干片（CK)
肌酸激酶同工酶干片（CK-MB) 谷氨酰转肽酶干片（GGT) 乳酸脱氢酶干片（LDH) 胆碱酯酶干片（CHE)
比色/速率法干片
扩散层
试剂层
指示剂层
干片法（直接法）
独立电极 / 测试 一次性Tip头 无 无管道 定标周期长、环保 没有
ISE间接法电解质排斥效应
• 标本10微升，非水相5％，水相9.5微升 • 稀释100倍，加入稀释液990微升，水相999.5微升 • 实际稀释倍数＝999.5／9.5＝105.211 • 如果标本中含K 3.50 mmol/L; Na 140 mmol/L • 间接法实测值为：3.50／105.211＊100＝3.33 mmol/L
终点法
应用终点法进行测试的项目 白蛋白干片（ALB） 血氨干片（AMON)
钙离子干片（Ca)
葡萄糖干片（GLU) 镁离子干片（Mg) 总蛋白干片（TP)
胆固醇干片（CHOL)
高密度脂蛋白胆固醇干（HDLC) 磷离子干片（PHOS) 甘油三酯干片（TRIG)
尿素氮干片（BUN/UREA) 尿酸干片（URIC)
透射与反射
湿化学 ： 采用透射光度法 遵循朗勃比尔定律
反射光 吸光度
浓度
干化学 ： 采用反射光度法 遵循Williams Clapper定律
浓度
透射与反射
检测
检测
光线经过干扰物质 受影响 光线不经过干扰物质 不受影响
干化学与湿化学比较
湿化学 ： 仪器相对开放，试剂选购方便,但是质量控制是隐患 由使用者监控仪器状态作量大 干化学 ： 仪器相对封闭，采用固定的试剂及耗材来保证结果 长期稳定的定标曲线，大大减少了日常工作量
选择性半透膜 增强结果特异性；去除干扰物 以尿素氮干片为例
扩散层 试剂层 半透膜
尿素酶 缓冲液 pH7.8
H2 NCONH2 + H2O NH3 + 氨指示剂
2NH3 + CO2 呈色
指示剂层
支持层
氨指示剂
VITROS 干化学技术特点
多层涂膜干片技术
优异的抗干扰能力
稳定的定标曲线
所有元素尽在其中
具有突出优势
去除干扰的干片原理 I
清道夫层 使用氧化酶或特异性结合物去除干扰物 以镁离子干片为例
扩散层 试剂层
表面活性剂
Mg+2+ Ca +2 Mg +2 + Ca +2 – 螯合剂 复合物 Mg +2 – 染料复合物
钙螯合剂
缓冲液 蜡染料衍生物
Mg+2 + 甲蜡染料衍生物
指示剂层
支持层
去除干扰的干片原理 II
支持层
扩散层
• 均匀分布标本
扩散层 试剂层 指示剂层 支持层
• 过滤大分子
• 标本预处理
• 提供反射测定的背景
试剂层
扩散层 试剂层 指示剂层 支持层
• 包含干性试剂
• 多层试剂，控制反应顺序
指示剂层
扩散层 试剂层
•包含染料以产生显色复合物
指示剂层 支持层
•驱使反应完成
支持层
扩散层 试剂层 指示剂层 支持层
第四节 干化学技术简介
干片技术
VITROS MicroSlide (干片)技术
• 介绍三种干片 • 定义干片 分层, 功能, 和测量技术
• 叙述 VITROS 干片 在操作中与常规方法相 比的优势
干片的历史
1970 年：化学干片技术起源于1970年的伊斯特 曼-柯达公司
1971年：借鉴普通临床生化反应序列 生产出葡萄 糖分析干片
扩散层 受体层 胶乳层 聚酯支持层
胶乳试 剂
酶
抗体
酶标抗原
免疫速率法干片
病人标本
酶标抗原 抗体
胶乳试剂
免疫速率法干片
酶标抗原 ＋ 标本中抗原 抗体
胶乳试剂
免疫速率法干片
竞争法结合
结合抗原 + 游离抗原
免疫速率法干片
加入液体反应底物洗去未结合物质
免疫速率法干片
竞争法结果
高浓度
低浓度
VITROS 干化学技术在 抗干扰方面
电极法干片
离子选择电极技术 直接法测定两电极间电势不同
K、Na、Cl
ISE干片结构
电极法干片–测量技术
干片在接触点被穿透 测量电压读数 通过电压读数计算出分析 物的浓度
离子选择电极(ISE)
V 盐桥
常规
S2
aI 已知浓度液体(参比液)
aI
S1
ar 待测液体(标本) arr a 盐桥 离子载体膜
1976年：干片获得专利
1978年：推出专利的干片生化技术 1980年：FDA批准五个分析产品可以进入市场 1995年：推出一些免疫产品
干片分类
CM/RT 比色/速率法干片
PM 电极法干片
IR 免疫-速率法干片
比色/速率法干片
通过测定干片颜色变化来确定化合物浓度 终点法、双波长 测定法，固定时间法、 速率法
双波长 测定法
应用双波长 测定法进行测试的项目
总胆红素（TBIL) 消除可形成的光谱干扰 非结合胆红素和结合胆红素（BUBC) 摩尔吸收值相近 两不同波长处的读数可以用 来确定BU和BC的浓度
固定时间法（两点法）
应用固定时间法进行测试的项目 淀粉酶干片（AMYL) 脂肪酶干片（LIPA) 肌酐干片（CREA) 铁离子干片（FE)
• 提供反应支持基垫
• 允许光路自由通过
均匀分布标本
均匀分布标本
标本进入扩散层
均匀分布标本
标本迅速向四周扩散
均匀分布标本
标本均匀向下层渗透
均匀分布标本
标本与试剂反应
均匀分布标本
反应物在指示剂层被固定
反射光的测定
干扰物质
反光背景 指示剂层
滤光片
光源 生成纯净的反射光
接收器
透射与反射
低浓度 高浓度
M+ Cl
S3
S4
离子载体膜
干片
M+ Cl AgCl Ag
AgCl Ag V
VITROS干化学检测电解质与常规方法比较
常规法（间接法）
•电极与电极膜重复使用 •单一采样针、进样通道 •大量蠕动泵、电磁阀 • 众多管道、多种液体 • 频繁定标与冲洗保养 •电解质排斥效应 稳定性差 交叉污染 维修保养复杂 易腐蚀、老化 耗时、不环保 有