第03章药物的鉴别实验详解

得的聚苯乙烯薄膜光谱图与药典收录的聚苯乙
烯薄膜光谱图加以比较。
⑦ 《中国药典》红外光谱图的波数范围： 4000 ～
400cm-1
3. 近红外光谱鉴别法
• 通过测定被测物质在近红外谱区 750～2500nm的 特征光谱并利用适宜的化学计量学方法提取相 关信息后，对被测物质进行定性、定量。
• 近红外光谱特点：快速、准确、不破坏样品、 既可离线检测，也可在线检测。
内容
第一节
第二节
鉴别实验的项目
鉴别方法
第三节
鉴别实验的条件
第一节
鉴别实验的项目
一、药物的性状
药物的性状（ description ）反应药物的特有 物理性质，包括：外观、溶解度和物理常数等。 1. 外观
指药品的外表感观和色泽，包括：药品的集聚 状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。
例：维生素 B1 ：“本品为白色结晶或结晶性粉 末；有微弱的特臭，味苦；干燥品在空气中迅 即吸收约4%的水分”
3. 物理常数
物理常数是评价药物质量的主要指标之一。其 测定结果对药品具有鉴别意义，也反映该药品 的纯度。 《中国药典》收载的物理常数：相对密度、熔 点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、吸 收系数等。 ① 熔点

固体熔化成液体的温度、熔融同时分解的 温度或在熔化时自初熔至全熔的一段温度。

要求报告“初熔”（供试品在毛细管内开始 局部液化出现明显液滴时的温度）和“全熔” （供试品全部液化时的温度）。 例1
R
4.
托烷生物碱类
① 方法： 供试品约10mg 加发烟硝酸5滴 置水浴上蒸干， 得到黄色残渣 加固体KOH一小 粒，显深紫色 加乙醇2～3滴润湿
② 原理：
HO RO O 水解 HOOC HO
托烷类
HO NO 2 HOOC
莨菪酸
HO NO 2 HOOC KOH
O
O2N
N
（C2H5OH）
O2N
NO2
加茜素氟蓝 试液0.5ml
② 原理
有机氟化物经氧瓶燃烧法破坏，被碱性溶液吸 收成为无机氟化物，与茜素氟蓝、硝酸亚铈在 pH4.3溶液中形成蓝紫色络合物。
O OH OH CH2COOH
F-
+
O
CH2N
+
Ce3+
pH4.3
CH2COOH
茜素氟蓝
O
OH O CH2COOH CH2COOH
CH2N O
Ce

结晶物质的鉴别可通过比较供试品与已知物质的 X 射线粉末衍射图谱来完成。 各衍射线的衍射角（ 2θ）、相对强度、和面间距 是进行鉴别的依据。

谷氨酸两种晶型的X射线衍射光谱
-form
β-form
四、色谱鉴别法

利用不同物质在不同的色谱条件下，产生各自的特 征色谱行为（比移值Rf值或保留时间）进行鉴别。 采用与对照品在相同的条件下进行色谱分离，并进 行比较，根据两者的保留行为和检测结果是否一致 来验证药品的真伪。
第三章 药物的鉴别实验
• 药物的鉴别实验是根据药物的分子结构、理化性质、 采用化学、物理化学或生物学方法来判断药物的真 伪，是药品质量检验工作中的首项任务。 • 药典所收载的药物鉴别实验方法，均为用来证实贮 藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物， 而不是对未知物进行定性分析。 • 这些方法虽有一定的专属性，但不足以确证其结构， 因此不能赖以鉴别未知物。
移δ和耦合常数进行药物的鉴别。
三、X射线粉末衍射法

化合物的晶体都有其特定的 X 射线衍射图谱。衍射 极大点（或线）间的距离及其相对强度可用以进行 结晶物质的定性或定量分析。
2d hkl sin θ n (n 1, 2, 3, （布拉格方程） )
dhkl：面间距；θ：掠射角；λ：X射线波长
② 采用压片法时，盐酸盐样品需使用KCl基质。 ③ 傅立叶变化红外光谱仪系单光束型仪器，测定 时需采用干燥的氮气吹扫来消除二氧化碳和水 汽的干扰。 ④ 本法对多组分药物或存在多晶现象的药物不适 用。 ⑤ 制剂的鉴别一般需采取提取分离后压片测试。
⑥ 仪器间的分辨率的差异及操作条件的不同可能
影响药品光谱图，应将测定药品用的仪器上获
原理：
钠的火焰光谱主要谱线：589.0nm、589.6nm；
钾的火焰光谱主要谱线：766.49nm、769.90nm；
钙的火焰光谱主要谱线： 622nm 、 554nm 、 442.67nm 与602nm。
② 铵盐 鉴别方法： 取供试品，加过量 NaOH 试液后，加热，即分 解，发生氨臭；遇湿润的红色石蕊试纸，能 使之变蓝色，并能使硝酸亚汞试液湿润的滤 纸显黑色。 原理： NH4+ + OHNH3 + H2O
F
OH
蓝紫色
2.
有机酸的鉴别
① 水杨酸盐
鉴别方法一：
取供试品的稀溶液，加三氯化铁1滴，溶液显紫 色。 原理：
本品在中性或弱酸性下，与FeCl3生成配位化合 物，中性时呈红色，弱酸性时呈紫色。
COOH OH 6 + 4FeCl3
COOOFe Fe + 12HCl 2
水杨酸
鉴别方法二：
取供试品的溶液，加稀盐酸，即析出白色水杨 酸沉淀，沉淀在醋酸铵试液中溶解。


吸收系数不仅可用于考察原料药的质量， 同时可作为该药物制剂应用紫外分光光度 法测定含量时的依据。
二、一般鉴别实验
• 无机药物的鉴别：根据其组成的阴离子和阳 离子的特殊反应。
• 有机药物的鉴别：采用典型官能团反应。
• 鉴别实验只能证实是某一类药物，不能证实 是哪一种药物。 • 鉴别实验仅供确认药物质量标准中单一的化 学药物，不适用于混合物或有干扰物质存在 的情况。


例：维生素C的比旋度为+20.5˚～+21.5˚。
③ 吸收系数

在给定的波长、溶剂和温度下，吸光物质 在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称 为吸收系数。
《中国药典》收载的吸收系数为百分吸收 系数：在一定波长下，溶液浓度为 1% 1%(W/V) ，厚度为 1cm 时的吸光度，用E1cm 表 示。
据各种药物化学结构的差异及其所引起的物理化 学特性不同，来鉴别药物，以区别同类药物或具 有相同化学结构部分的各个药物单体，达到最终 确证药物真伪的目的。
以后各章详解
第二节
鉴别方法
药物的鉴别方法的要求：
专属性强 操作简便
再现性好 快速
灵敏度高、
•常用鉴别方法：
化学法 色谱法 光谱法 生物学法
一、化学鉴别法
• 近红外光谱鉴别法步骤：
（1）建立参考谱库
（2）数据预处理
（3）数据评估 （4）数据库的验证（专属性和耐用性）
4. 原子吸收法
• 利用原子蒸汽可以吸收该元素作为空心阴极灯
发出的特征谱线的特征，根据供试品溶液的最
大吸收和特征谱线的强度减弱程度进行定性、
定量分析。
5. 核磁共振法
• 通过测定供试品指定基团上的质子峰的化学位
③ 规定吸收波长和吸收系数法；
④ 规定吸收波长和吸光度比值法；
⑤ 经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特 性。
示例：地蒽酚的鉴别实验
取含量测定下的供试品溶液，于 240 ～ 400nm 范围 内测定吸光度，在257nm、289nm与356nm处有最大 吸 收 。 在 257nm 与 289nm 处 的 吸 光 度 比 值 应 为 1.06 ～ 1.10 ；在 356nm 与 289nm 处的吸光度比值应 为0.90～0.94。
雌二醇：“本品的熔点为175～180˚C”。


例2
醋酸地塞米松：“本品的熔点为 223 ～ 233˚C， 熔融时同时分解”。
② 比旋度

在一定波长与温度下，偏振光透过长 1dm 且每 1ml 中含有旋光性物质 1g 溶液时测得 的旋光度称为比旋光度。 比旋光度是反映手性药物特性及其纯度的 主要指标，可用以区别药品、检查纯度或 测定制剂的含量。
Rf 从基线至展开斑点中心距离 从基线至展开剂前沿距离

1. 薄层色谱鉴别法（Thin-layer Chromatography）
① 与同浓度对照品溶液，在同一薄层板上点样、展开与检 视，供试品溶液所显主斑点的颜色与位置应与对照品的 主斑点一致，且主斑点的大小和颜色深浅也应大致相同。
② 采用供试品溶液与对照品溶液等体积混合，应显示单一、 紧密的斑点。 ③ 选用与供试品化学结构相似的药物对照品溶液与供试品 溶液的主斑点比较，两者比移值应不同。 ④ 将③项下两种溶液等体积混合，应显示两个清晰分离的 斑点。
供试品 约50mg
加稀盐酸1ml，缓缓 煮沸使溶解，放冷
加0.1mol/L亚硝 酸钠溶液数滴
生成橙黄色到猩红色 沉淀（视供试品不同）
加碱性β-萘 酚试液数滴
② 原理：
NH2
N Cl
+ NaNO2 + 2HCl
2
-
+ NaCl + 2H2O
R
R
N Cl
2
-
+
OH
+ NaOH
R
N=N–
OH
+ NaCl + H2O
取供试品溶液，加硫酸与铜丝加热，即发生 红棕色的蒸气（NO2）。 鉴别三：
取供试品溶液，滴加KMnO4试液，紫色不应褪 去（与亚硝酸钠区别）。
三、专属鉴别实验
一般鉴别实验是以某些类别药物的共同化学结构
为依据，根据其相同的物理化学性质进行药物真 伪的鉴别，以区别不同类的药物
药物的专属实验：在一般鉴别实验的基础上，根
要求：
反应迅速、现象明显；反应是否完全则不重要。