血清胆红素测定
血清总胆红素及结合胆红素测定PPT优秀课件
【试剂】
1．0.1mol/LTris-HCl缓冲液(pH8.2) 称取三羟甲基氨基甲烷 (Tris)1.211g，胆酸钠172.3mg,十二烷基硫酸钠(SDS)432.6mg， 溶于去离子水90ml中，在室温(25～30℃)用1mol/L盐酸调节pH至 8.2(约用6ml)，再加蒸馏水至100ml，置冰箱保存，此液含 4mmol/L胆酸钠、15mmol/L SDS。
4．总胆红素标准液(342μmol/L) 按胆红素测定J-G法中方法配制，或 市售合乎要求的标准液。
5．结合胆红素标准液 将DTB配于胆红素浓度可忽略不计的人血清中， 或用冻干品按说明书要求重建。配制后分装于聚丙烯管内，－70℃保 存，可稳定6个月。冻干品未重建前置低温中，至少稳定1年。
【操作步骤】
• (3) 新生儿溶血症 血清胆红素有助于了解疾病严重程度。
• (4) 再生障碍性贫血及数种继发性贫血(主要见于癌或慢性 肾炎引起)，血清总胆红素减少。
【临床意义】
2．血清结合胆红素测定的意义 结合胆红素 与总胆红素的比值可用于鉴别黄疸类型。
• (1) 比值＜20% 溶血性黄疸，阵发性血红 蛋白尿，恶性贫血，红细胞增多症等。
2．0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH4.5)。
3．BOD溶液 如系冻干品，按说明书要求复溶，但复溶后冰箱保存不宜 过长(约可保存1周)，如系液体(可能含有甘油)，置4℃冰箱可保存较 长时间，BOD贮存溶液的酶活性一般在数千至1万～2万U/L，BOD 工作液酶活性可按反应液中BOD终浓度达0.3～1.0U/ml计算。
•
【操作步骤】 1.样品的测定 取3支试管，按下表程序操作.
混匀后，波长600nm，对照管调零，读取吸 光度，在标准曲线上查出相应的胆红素浓度。
血清总胆红素和结合胆红素测定
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病理因素
肝病
肝炎、肝硬化等肝病可能导致血 清总胆红素水平升高。
胆道疾病
胆结石、胆囊炎等胆道疾病可能导 致血清总胆红素水平升高。
其他疾病
如溶血性贫血、急性胰腺炎等也可 能导致血清总胆红素水平升高。
药物因素
抗生素
长期使用某些抗生素如红霉素、 氯霉素等可能导致血清总胆红素
水平升高。
抗结核药
抗结核药物如利福平、异烟肼等 可能导致血清总胆红素水平升高。
抗肿瘤药
抗肿瘤药物如顺铂、阿霉素等可 能导致血清总胆红素水平升高。
05
血清总胆红素和结合胆红 素测定的注意事项
标本采集注意事项
空腹采集
为避免食物中色素对血清总胆红素和 结合胆红素测定的干扰，采集标本前 应确保受检者空腹至少8小时。
避免溶血
避免使用止血带
使用止血带会阻断静脉回流，导致血 液浓缩，影响测定结果。
正常值范围
成人
0-6.8μmol/L（0-0.3mg/dl）
新生儿
2.5-10μmol/L（0.1-0.4mg/dl）
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血清总胆红素和结合胆红 素测定的临床意义
鉴别黄疸的类型
鉴别黄疸类型
血清总胆红素和结合胆红素测定可以 鉴别黄疸的类型，如溶血性黄疸、肝 细胞性黄疸和梗阻性黄疸。
判断黄疸程度
通过测定血清总胆红素和结合胆红素 水平，可以判断黄疸的严重程度，为 后续治疗提供依据。
采血时应避免采血部位发生溶血，因 为红细胞中的胆红素会干扰测定结果。
测定过程中的注意事项
仪器校准
为确保测定结果的准确性，应定期对测定仪器进 行校准。
避免试剂污染
在操作过程中，应避免试剂被污染，以免影响测 定结果。
血清直接胆红素测定实验设计
血清直接胆红素的测定病人准备：要求病人处于安静状态，生活状态处于日常状态，避免过度空腹、饮食、饮酒吸烟标本采集，处理，保存和要求：收集无溶血，无黄疸，无脂浊的新鲜血清或肝素血清，避光保存。
混合，必要时可用过滤器过滤。
实验原理：血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成偶氮胆红素。
醋酸钠缓冲液保持反应的pH，反应完全后加入终止试剂（叠氮钠）以破坏重氮试剂，最后加入碱性酒石酸钠溶液，使颜色不稳定的紫红色偶氮胆红素在咖啡因存在下转化为稳定的黄色偶氮胆红素，在600nm波长比色，从标准曲线找直接胆红素含量。
实验仪器设备及试剂：咖啡因试剂碱性酒石酸钠溶液5g/L亚硝酸钠溶液5g/L 对氨基苯磺酸溶液5g/L叠氮钠溶液胆红素标准溶液加样枪分光光度计（或半自动生化仪）实验操作：一。
取两支试管，按表1操作表1 改良J—G发测定血清直接胆红素操作表加入物 (ml) 直接胆红素空白管血清0.2 0.2咖啡因苯甲酸钠试剂— 1.6对甲基苯磺酸—0.4重氮试剂0.4 —混匀，准确1分钟重氮钠0.05 —咖啡因甲苯酸钠试剂 1.55 —室温10分钟碱性酒石酸钠 1.2 1.2混匀，600nm波长比色，以空白管调0，读取各管吸光度。
从标准曲线上查出直接胆红素浓度。
二．标准曲线的制作表2 胆红素标准曲线的制作表加入物 (ml) 对照管 1 2 3 4 5胆红素标准贮存液— 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0稀释血清 2.0 1.6 1.2 0.8 0.4 —相当于胆红素浓度 0 34.2 68.4 103 137 171（u mol/L)混匀（不可产生气泡),按直接胆红素的测定方法操作。
每一浓度做2个平行管，用对照管调零，读取各管吸光度，以各管吸光度的均值为纵坐标，以相应胆红素浓度为横坐标，绘制标准曲线。
参考范围：血清结合胆红素0~6.8umol/L(0~0.4mg/dl）注意事项：1.本法在10 —37℃范围内测定，不受温度变化的影响，两小时内显色非常稳定且灵敏度高，轻度溶血对本法无影响。
血清总胆红素测定原理
血清总胆红素测定原理
血清总胆红素测定是一种常用的临床实验室检查方法，主要用于评估肝脏功能和诊断与胆红素代谢相关的疾病。
其原理基于血清中的胆红素可以与二硫苏糖酸钠反应生成带有特征性颜色的离子化合物。
具体实验步骤如下：首先，将样本血清与二硫苏糖酸钠溶液混合，通过化学反应使胆红素与二硫苏糖酸钠结合。
然后，使用比色法通过测量生成离子化合物的颜色强度来确定血清中的胆红素浓度。
常用的检测方法包括分光光度法、比色滴定法和高效液相色谱法等。
在测定中，胆红素与二硫苏糖酸钠发生反应，形成红色或紫色的离子化合物。
生成的离子化合物的颜色强度与样本中的胆红素浓度呈正相关关系。
通过测量离子化合物的光吸收值，并通过与已知浓度的标准溶液比较，可以计算出样本中总胆红素的浓度。
总之，血清总胆红素测定原理是基于胆红素与二硫苏糖酸钠的化学反应，通过测定生成的带有特征性颜色的离子化合物的光吸收值来确定样本中的总胆红素浓度。
这种方法简便、快速，并且具有较高的准确性和灵敏度，在临床诊断中得到了广泛应用。
胆红素测定方法
胆红素测定方法胆红素是人体内一种重要的生化物质，它是红细胞分解代谢产物，对人体健康有着重要的影响。
因此，准确测定胆红素的水平对于临床诊断和治疗具有重要意义。
在临床实践中，有多种方法可以用来测定胆红素的水平，本文将介绍几种常用的胆红素测定方法。
一、尿胆红素试验。
尿胆红素试验是一种简单、快速的方法，通常用于初步筛查患者是否存在胆红素增高的情况。
该方法适用于常规体检或临床初步诊断，但其准确性相对较低，不适用于精确测定胆红素水平。
二、血清胆红素测定。
血清胆红素测定是目前临床上常用的一种方法，通过采集患者的血清样本，利用化学方法或光度法测定其中胆红素的浓度。
这种方法准确性较高，可以精确测定胆红素水平，是临床诊断中常用的方法之一。
三、高效液相色谱法。
高效液相色谱法是一种高灵敏度、高分辨率的胆红素测定方法，通过将样本中的胆红素与色谱柱分离，再通过检测器测定其浓度。
该方法准确性高，适用于胆红素水平较低的情况。
四、光谱法。
光谱法是一种通过测定物质在特定波长下的吸光度来测定其浓度的方法。
对于胆红素的测定，可以利用其在特定波长下的吸光度特性来进行测定。
这种方法准确性较高，但需要专业的设备和操作技能。
五、尿胆红素比色法。
尿胆红素比色法是一种通过比色法测定尿液中胆红素的浓度的方法。
该方法简单易行，适用于临床初步筛查，但准确性相对较低，不适用于精确测定胆红素水平。
综上所述，胆红素的测定方法有多种，每种方法都有其适用的场合和特点。
在临床实践中，应根据实际情况选择合适的方法进行测定，以确保结果的准确性和可靠性。
同时，对于不同方法的操作要求和结果解读也需要进行充分的了解和培训，以避免误判和错误诊断的发生。
希望本文对胆红素测定方法有所帮助。
干化学法与湿化学测定血清胆红素的比较
长 期 以来 ， 人 们 将 人体 血 清 胆红 素描 述 为 “ 总 胆红 素 ” ， “ 直 胆红 素 藉血 液 巾 白蛋 白运输 至 肝 Ｉ ｌ 庄 时 ，此 时 的 红 素 和 白蛋 白 接胆 红 素 ” 和“ 间 接胆 红 素 ” 。但 随着 检测 技 术 的不 断 发展 ， 我 们 的结 合 是松 散 的 ， 这 些结 合 物 不是 ８ 胆 红素 ： 在 健 康人 的 血清 中 和糖 化 血红 蛋 白 的形 成相 似 ， 在 阻笨 性 高朋 对 胆红 素 的 认 识也 发 生 了 不 少 的变 化 ， 通过 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ （ 高 压 液 相色 检测 不 出 ８胆红 素 。 谱技术） 法则 将胆 红 素 分 为“ 总 胆红 素 ” 、 “ 结 合 胆红 素 ” 、 “ 未 结合 红 素血 症 的患者 血 液 中 ， 胆道 堵 寨 ， 造 成胆 管 排 出经 肝 脏处 理 胆红 素 ” 和“ ６胆红 素 ” ， ｌ １ 并认为， 总胆 红 素＝ 结 合 胆红 素 一 未结 合 的结 合 胆红 素大 量 堆积 。 血液 的 白蛋 白浸润 在 高鹏 红 素血 液 叶 １ ，
胆 红素 ＋ ８ 胆 红 素， 传 统 湿 化学 用重 氮法 测 总胆 红 素 和直 接 胆红 白蛋 白较葡 萄糖 醛 酸对 胆红 素 的亲 和作 用 更 强烈 ， 闶此， 白蛋 白 素， 两者 相减 得 到 间接 胆红 素 ， 利用 结合 胆 红素 具 有 较高 的 亲水 取 代 了葡 萄糖醛 酸 ， 形成 了 白蛋 白胭红 素 共价 结 合 的 复合 物 ， 称 性， 救无 需 促 溶剂 便 可 以“ 直接” 与重 氮 试剂 反应 ， 所得 结 果 称为 为 ８胆红 素 。一般 的结 合 胆 红素 排 泄 很快 ， 但是 ， 和 白蛋 白结 合 “ 直接 （ 反应 ） 胆红 素 ” Ｉ ３ １ 。国 内长 期 来 ， 误 认 为结 合 胆 红 素 参与 的 ８胆 红素 半衰 期 和 白蛋 白相 同 ， 约 ｌ ８天 。如 果 能检 ｝ ！ ！ ！ ｌ 出８ Ｈ ｕ 反 应 非常 快 ， 整 个 反应 只要 １ 分钟 其实 ， 任何 反 应 都需 要 充分 红 素 ， 可 以 指示 ： 目前 患 者 处 于 高胆 红 素 血 癖 、 或 住 检 测前 的丰 【 ］
三种黄疸实验室检查鉴别要点
三种黄疸实验室检查鉴别要点一、血清胆红素测定血清胆红素是一种重要的生化指标，可以帮助医生鉴别黄疸的病因。
血液中的胆红素主要是由红细胞在脾脏和肝脏内分解产生的，正常情况下，血清胆红素的含量很低。
当肝脏出现问题，导致胆红素无法正常排泄时，血清胆红素的含量就会升高，从而导致黄疸的出现。
对于血清胆红素测定的鉴别要点包括：1. 总胆红素和直接胆红素的含量：总胆红素是指血液中的胆红素总量，包括游离的（非结合的）和结合的，而直接胆红素仅指结合的胆红素。
通过测定总胆红素和直接胆红素的含量，可以帮助医生判断黄疸是由肝脏疾病还是胆道疾病导致的。
如果直接胆红素升高，则提示胆道疾病可能性大；而如果总胆红素和直接胆红素均升高，则更可能是肝脏疾病引起的黄疸。
2. 非结合胆红素的含量：非结合胆红素是指血液中的游离胆红素，通常由于溶血性贫血或肝脏疾病引起。
如果非结合胆红素升高，则提示可能是由溶血性贫血导致的黄疸。
3. 肝脏功能检查：在进行血清胆红素测定时，医生通常还会检查肝功能相关指标，如丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）等。
通过分析这些指标的含量，可以帮助医生判断黄疸是否是由于肝脏疾病引起的。
二、尿胆红素测定尿胆红素是一种常用的黄疸鉴别检查指标，通过检测尿液中的胆红素含量，可以帮助医生鉴别黄疸的病因。
尿液中的胆红素通常是由于血液中的胆红素无法被肝脏正常排泄而导致的。
对于尿胆红素测定的鉴别要点包括：1. 尿胆红素的含量：正常情况下，尿液中是不应该含有胆红素的，因此如果尿液中检测到胆红素，则提示有肝脏疾病或胆道疾病导致的黄疸可能性大。
2. 尿胆红素/尿胆原比值：尿胆红素/尿胆原比值的测定可以帮助医生鉴别肝内和肝外黄疸。
肝脏疾病所致的黄疸通常引起尿胆红素/尿胆原比值的升高，而胆道梗阻引起的黄疸则通常不会引起这个比值升高。
3. 尿液颜色：通过观察患者的尿液颜色，也可以初步判断黄疸的病因。
如果患者的尿液呈现深色，可能由于尿液中含有大量的胆红素，提示可能是肝脏疾病所致的黄疸。
血清结合胆红素测定标准操作规程
血清结合胆红素测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清结合胆红素测定(缩写DBIL)；组合项目申请：血生化中肝功能测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间：血液胆红素见光易分解，标本注意避光保存。
室温（15～25℃）下可稳定2h，普通冰箱中（2～8℃）稳定12h。
-15～-25℃度可以稳定3～4个月。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密℃闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
2.3.2不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。
3 方法原理钒酸盐胆红素胆绿素pH 3.0测定钒酸盐作用前后吸光度差异，可求得样品中的直接胆红素的浓度4 试剂及其他用品4.1试剂：结合胆红素试剂盒（货号476856）。
由北京利德曼生化技术有限公司出品。
4.2试剂盒保存：保存于2～8℃，试剂未启封情况下可以稳定至失效期。
启封试剂在仪器的试剂仓冰箱中至少稳定14天。
胆红素测定方法
胆红素测定方法胆红素是一种由肝脏产生的黄色物质，它在人体内起着重要的代谢作用。
胆红素的测定可以帮助医生判断肝功能和胆道疾病的情况，以及监测患者的治疗效果。
因此，准确测定胆红素水平对于临床诊断和治疗具有重要意义。
目前，常用的胆红素测定方法主要有血清胆红素测定法、尿胆红素测定法和组织胆红素测定法。
下面将分别介绍这三种方法的原理和操作步骤。
血清胆红素测定法是通过分析血液中的胆红素水平来判断肝功能和胆道疾病的情况。
操作步骤如下，首先，取一定量的患者血清标本，加入试剂混匀；然后，使用分光光度计测定混合液的吸光度，根据吸光度值计算出血清中的胆红素浓度。
这种方法操作简单，结果准确，是临床上常用的胆红素测定方法之一。
尿胆红素测定法是通过分析尿液中的胆红素水平来判断胆道疾病的情况。
操作步骤如下，首先，取一定量的患者尿液标本，加入试剂混匀；然后，使用分光光度计测定混合液的吸光度，根据吸光度值计算出尿液中的胆红素浓度。
这种方法简便快捷，适用于临床快速筛查。
组织胆红素测定法是通过分析组织样本中的胆红素水平来判断肝功能和胆道疾病的情况。
操作步骤如下，首先，取一定量的患者组织样本，加入试剂混匀；然后，使用分光光度计测定混合液的吸光度，根据吸光度值计算出组织中的胆红素浓度。
这种方法需要临床实验室条件支持，操作相对复杂，但结果准确可靠。
除了上述常用的胆红素测定方法外，近年来还出现了一些新的胆红素测定技术，比如高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS/MS）、蛋白质质谱技术等。
这些新技术能够更加准确地测定胆红素水平，为临床诊断和治疗提供更可靠的依据。
总的来说，胆红素测定是临床诊断和治疗中不可或缺的一部分，不同的测定方法各有特点，医生可以根据具体情况选择合适的方法进行检测。
随着医学技术的不断发展，相信胆红素测定方法也会不断完善，为临床诊断和治疗提供更多的选择和便利。
血清总胆红素测定原理
血清总胆红素测定原理
血清总胆红素测定是一种常见的临床实验室检测，主要用于评估肝脏功能和胆道系统的健康状况。
该测定的主要原理基于胆红素在血液中的化学特性和其与特定试剂的反应。
首先，我们要了解胆红素的基本性质。
胆红素是血红蛋白分解的终产物之一，它在血液中主要以结合（直接）胆红素和未结合（间接）胆红素两种形式存在。
这两种形式的胆红素在450nm波长处有吸收峰，因此，我们可以通过测量该波长下的吸光度来间接测定血清中胆红素的浓度。
在化学法中，我们通常使用一种或多种特定的试剂与血清中的胆红素发生反应。
这些试剂与胆红素反应后，会生成带有颜色的化合物，这种化合物的颜色深浅与胆红素的浓度成正比。
因此，我们可以通过比色法或光谱法测量这种颜色变化的程度，从而推算出血清中胆红素的浓度。
在实际操作中，我们需要注意一些可能影响测定结果的因素。
例如，样本的保存条件、测定时的温度、试剂的质量和有效期等。
此外，由于胆红素在光照下可能会分解，因此，我们在处理样本和进行测定时，应尽量避免长时间的暴露于光线下。
总的来说，血清总胆红素测定的原理主要基于胆红素在特定波长下的吸收特性和其与特定试剂的反应。
通过精确控制实验条件，我们可以得到准确可靠的测定结果，从而为临床诊断和治疗提供重要参考。
胆红素测定方法
胆红素测定方法胆红素是一种重要的生化指标，它对人体健康具有重要的影响。
因此，准确测定胆红素水平对于临床诊断和治疗具有重要意义。
本文将介绍几种常见的胆红素测定方法，帮助读者更好地了解这一领域的知识。
首先，最常见的胆红素测定方法之一是血清胆红素测定。
这种方法通过采集患者的血清标本，利用化学分析或光度法来测定血清中的胆红素水平。
这种方法简单、快捷，广泛应用于临床实践中。
但是，需要注意的是，血清胆红素测定受到很多因素的影响，如血清样本的保存和处理，以及化学试剂的质量等，因此在进行测定时需要严格控制这些因素。
其次，尿胆红素测定也是一种常见的方法。
尿液中的胆红素来自于肝脏排泄的胆红素，因此通过测定尿液中的胆红素水平可以间接反映肝脏的功能状况。
尿胆红素测定方法简单易行，常用于一些肝功能检测中。
但是，需要注意的是，尿液样本的采集和保存也会对测定结果产生影响，因此在进行测定时需要严格按照操作规程进行操作。
此外，还有一种比较新颖的胆红素测定方法是基于光学技术的无创测定。
这种方法通过光学传感器等设备，可以在不需要采集血液或尿液样本的情况下，通过皮肤表面的光学信号来测定胆红素水平。
这种方法无创、方便，可以有效减少患者的痛苦，因此在临床应用中具有广阔的前景。
但是，需要注意的是，这种方法目前还处于研究阶段，其准确性和稳定性还需要进一步验证。
总的来说，胆红素测定方法多种多样，每种方法都有其特点和适用范围。
在临床实践中，需要根据具体情况选择合适的胆红素测定方法，并严格按照操作规程进行操作，以确保测定结果的准确性和可靠性。
同时，随着科学技术的不断发展，相信在未来会有更多更准确、更方便的胆红素测定方法出现，为临床诊断和治疗带来更多的便利和效益。
生化测试胆红素的原理是啥
生化测试胆红素的原理是啥生化测试胆红素的原理主要是通过测定血液中的胆红素含量来评估肝脏功能以及溶血反应程度。
胆红素是红细胞代谢产物，正常情况下大部分由肝脏处理和排泄。
然而，在某些情况下，胆红素的代谢和排泄过程会受到干扰，导致血液中胆红素含量升高。
胆红素的生物合成发生在肝脏中。
当红细胞老化或遭受损伤时，血红蛋白会被分解为血红素。
然后血红素经过一系列化学反应被转化为间接胆红素（非结合胆红素）。
间接胆红素无法溶于水，通过结合血浆蛋白转运至肝脏，进入肝细胞内。
在肝细胞内，间接胆红素通过肝细胞内的细胞器质网经过一系列化学反应被转化为直接胆红素（结合胆红素）。
然后直接胆红素进一步结合胆酸形成胆汁，经过肝管系进入小肠，最终通过粪便排出体外。
生化测试胆红素的原理基于胆红素对特定化学试剂的反应。
一种常用的测定方法是通过使用van den Bergh试剂（苏丹三杂质试剂）。
这种试剂含有一些化学物质，能够与胆红素发生特定的化学反应。
当这种试剂与血液中的间接胆红素反应时，生成一种蓝色或紫色的产物。
这个反应称为间接胆红素试验。
这是因为间接胆红素无法溶于水，在体内主要结合血浆蛋白。
所以测定血液中的间接胆红素可以评估红细胞破坏或溶血反应的程度。
直接胆红素则是溶于水的，可以通过肝细胞转化形成胆汁排出体外。
当van den Bergh试剂与血液中的胆红素结合时，产生一种红色的产物，这个反应称为直接胆红素试验。
通过测定血液中的直接胆红素，可以评估肝脏功能和胆汁排泄情况。
生化测试还可以分别测量血液中的总胆红素、游离胆红素和结合胆红素的含量。
总胆红素是间接胆红素和直接胆红素的总和，可以评估红细胞破坏和肝脏功能。
游离胆红素是血液中的非结合胆红素，可以反映红细胞破坏程度。
结合胆红素是血液中的直接胆红素，可以评估肝脏功能和胆汁的产生和排泄。
在实际生化测试中，血样通常通过离心分离血浆或血清，然后与相应的化学试剂反应。
反应产物可以通过光密度的测定，使用分光光度计或其他光谱仪器来测量。
实验十八 血清胆红素测定(改良J-G法)
实验十六血清胆红素测定（改良J-G法）【目的】1.熟悉血清胆红素测定的原理和方法；２.掌握胆红素测定的正常参考范围及临床意义。
【原理】血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成偶氮胆红素；未结合胆红素需要在加速剂（咖啡因-苯甲酸钠）作用下，分子内氢键破坏后，才能与重氮试剂反应生成偶氮胆红素。
醋酸钠缓冲液保持反应的pH，反应完成后加入终止试剂（叠氮钠）以破坏重氮试剂，最后加入碱性酒石酸钠溶液，使颜色不稳定的紫红色偶氮胆红素在咖啡因存在下转化为稳定的蓝色偶氮胆红素，在600nm波长比色，从标准曲线查找总胆红素和结合胆红素含量。
【器材】试管及试管架、吸管、恒温水浴箱、分光光度计、秒表。
【试剂】1．咖啡因试剂称取无水水醋酸钠41.0g，苯甲酸钠38.0g，乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）0.5g，溶于约500ml去离子水中，再加入咖啡因25.0g，搅拌使溶解（加入咖啡因后不能加热溶解），用去离子水补足至1L，混匀。
过滤后置棕色瓶，室温保存。
2．碱性酒石酸钠溶液称取氢氧化钠75.0g，酒石酸钠（Na2C4H4O6·2H2O）263.0g，用去离子水溶解并补足至1L，混匀。
置塑料瓶中，室温保存。
3．5g/L亚硝酸钠溶液称取亚硝酸钠0.5g，用去离子水溶解并定容至100ml，混匀，置棕色瓶，冰箱保存，稳定期不少于2周。
若发现溶液呈淡黄色，应废弃重配。
4．5g/L 对氨基苯磺酸溶液称取对氨基苯磺酸（NH2C6H4SO3H·H2O）5.0g，溶于800ml去离子水中，加入浓盐酸15ml，用去离子水补足至1L。
5．重氮试剂临用前取上述亚硝酸钠溶液0.5ml和对氨基苯磺酸溶液20ml，混匀即成。
6．5.g/L叠氮钠溶液7．胆红素标准液（1）目前一般用未结合胆红素配制标准液，此标准品须用含白蛋白的溶剂配制，常用人混合血清，对此血清的要求如下：收集无溶血、无黄疸、无脂浊的新鲜血清，混合，必要时可用过滤器过滤。
血清总胆红素测定化学法-概述说明以及解释
血清总胆红素测定化学法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述在文章的引言部分，我们将对血清总胆红素测定化学法进行概述。
血清总胆红素是评估肝功能和胆汁排泄功能的一个重要指标。
通过测定血清中胆红素的浓度，可以获得有关患者肝功能和胆红素代谢状态的信息。
血清总胆红素测定化学法是一种常用的测定方法，它基于血液中胆红素的化学反应原理。
这种方法的主要原理是利用特定的试剂与血清中的胆红素发生反应，形成带有颜色的化合物，并利用光谱法或比色法测定其吸光度，从而计算出血清中总胆红素的浓度。
在测定过程中，我们使用了一系列化学试剂，并根据反应原理和步骤进行相应的操作。
通常情况下，测定血清总胆红素的化学方法需要经过样本处理、试剂添加、反应、数据测量及结果计算等多个步骤。
这些步骤的设计和操作对于测定的准确性和可靠性至关重要。
化学法测定血清总胆红素具有许多优势。
首先，它是一种简单、快速、经济的测定方法，适用于大规模样本的处理。
其次，它对于血清中胆红素的测定范围较宽，可以满足不同浓度范围内的测定需求。
此外，该方法的可重复性和稳定性较高，能够提供较为准确的测定结果。
然而，化学法测定血清总胆红素也存在一些局限性。
首先，可能会受到其他血液成分的干扰，如血红蛋白和脂质等。
其次，该方法对于某些特殊类型的胆红素可能不够敏感，导致测定结果的偏差。
此外，部分化学试剂可能对环境和人体健康有一定的危害，需要注意操作的安全性。
尽管存在一些局限性，但血清总胆红素测定化学法在临床实验室中仍然得到广泛应用。
未来的研究和发展将致力于改进该方法的准确性和特异性，以满足临床医学对于胆红素测定的更高要求。
总的来说，血清总胆红素测定化学法在评估肝功能和胆红素代谢方面具有重要的应用价值。
1.2 文章结构文章结构部分的内容如下:文章结构部分旨在简要介绍整篇文章的结构和组织方式，为读者提供一个整体的概览。
本篇文章共分为引言、正文和结论三大部分。
在引言部分，我们将对本文的主题进行概述，并介绍文章的结构和目的。
急性冠脉综合征患者血清胆红素测定的临床意义
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天津医药 ２ １ ０ ０年 ６月 第 ３ ８卷第 ６期
４３ ７
急性冠脉综合征患者血清胆红素测定的临床意义
赵 丽丽 李 杨 秦 勤
摘要 目的： 探讨急性冠脉综合征（ Ｃ ） Ａ Ｓ 患者血清总胆红素（ ｂｌ测定的临床意义 以及 Ｔ ｉ与冠状动脉粥样硬化 Ｔｉ ） ｂ ｌ
严重程度之间的关系。方 法： 收集住院并行 冠脉造影检查 的患者 ２ ２例 ， 造影结果及 Ａ Ｓ ３ 据 Ｃ 诊断标准分为对照组 ７ ２
素， 发生 Ａ 时 ，ｂｌ Ｍ１ Ｔ ｉ可能将反馈性 升高 ， 到对缺血冠脉的保护作用。 起
关键词 急性冠状动脉综合征 心肌梗死
模 型
心绞痛 ， 不稳定型
冠状血管造影术 胆红素 危险 因素
Ｌｇｓｃ ｏｉ ｉ ｔ
Ｃｌ ｉａ ｇ ｉｃ ｎ ｅ ｏ ｒ ｍ ｌｕ ｉ ｉ ａ ｉｎｓｗｉ ｕ ｅＣｏ ｏ ａ ｙＳｙ ｄ ｏ ｉ ｃ ｌ ｎｆ ａ ｃ ｆ ｎ Ｓｉ ｉ Ｓｅ ｕ Ｂｉｒ ｂｎ ｎ Ｐ ｔ ｔ ｔ Ａｃ ｔ ｒ ｎ ｒ ｎ ｒ ｍｅ ｉ ｅ ｈ Ｚ ＯＬｌ Ｌ ａｇ ＱＮ Ｑｎ ＨＡ ｉ ，Ｉ ｎ ， Ｉ ｉ ｉ Ｙ Ｇ ａｕｔ Ｓｈ ｏｏ ｉ ｊｎ ｄｃ ｅＵ ｉ ｒｉ ，ｉ ｊ ０ ０ ０ Ｃ ｉａ ｒｄ ａ ｃｏｌｆＴ ｎｉ Ｍｅｉｉ ｎ ｅｓｙ Ｔａ ｉ ０ ７ ，ｈｎ ｅ ａ ｎ ｖ ｔ ｎ ｎ３ Ａ ｓｒｃ Ｏｂ ｃｉ ： ｏ ｔ ｙ ｈ ｉｉａｓ ｎｆ ａｃ ｔｌｅ ｍｂｌｕ ｉ Ｔ ｉ ｉ ｐｔ ｎｓ ｉ ｕｅ ｏｏａｙ ｙ— ｂｔ ｔ ａ ｊ ｔ ｅ Ｔ ｕ ｅ ｌ ｃｌｉ ｉｃｎｅ ｆｏａｓｒ ｉｒｂｎ（ｂｌ ｎ ａｉ ｔｗｔ ａ ｔｃｒｎｒ ｎ ｅ ｖ ｓ ｄ ｔ ｃ ｎ ｇ ｉ ｏｔ ｕ ｉ ） ｅ ｈｃ ｓ
血清间接胆红素测定违规收费依据
血清间接胆红素测定违规收费依据在医疗行业中，血清间接胆红素测定是一项非常重要的检测项目，用于评估肝功能和诊断相关疾病。
然而，近年来，一些医疗机构和个别医生存在对血清间接胆红素测定进行违规收费的现象，给患者造成了不必要的经济负担。
本文将从多个角度对血清间接胆红素测定违规收费的依据进行深入探讨，并提出个人观点和理解。
一、血清间接胆红素测定的重要性1. 血清间接胆红素是一种由体内代谢产生的溶血产物，对人体健康具有重要影响。
2. 血清间接胆红素测定可用于诊断和监测溶血性贫血、肝功能异常、胆道梗阻等疾病，具有重要的临床诊断价值。
二、血清间接胆红素测定的收费标准1. 根据国家相关规定，医疗机构对血清间接胆红素测定的收费应当以费用实际发生为依据，不得随意提高价格。
2. 医院应当制定科学合理的收费标准，并在收费公示中明确列出血清间接胆红素测定的收费项目和标准。
三、违规收费的依据分析1. 对血清间接胆红素测定进行违规收费的行为，违反了医疗机构的诚信经营原则，损害了患者的合法权益。
2. 一些医疗机构和个别医生可能通过提高血清间接胆红素测定的收费价格，获取不正当利益，对患者进行不合理收费。
四、对血清间接胆红素测定违规收费的个人观点和建议1. 作为医疗从业者，应当遵守医德和职业道德，严格按照相关规定进行收费，保障患者合法权益。
2. 患者在接受血清间接胆红素测定时，有权要求医疗机构提供详细的收费明细，并保留抗辩的权利。
3. 监管部门应当加大对医疗机构收费行为的监督和管理力度，加强对违规收费的查处和惩处。
通过对血清间接胆红素测定违规收费的依据进行全面评估和探讨，我们可以更加深入地理解这一问题的严重性和影响。
在日常生活中，我们应当注意保护自身权益，同时也要关注医疗行业的规范发展，共同维护良好的医患关系和社会秩序。
总结回顾：在医疗行业中，血清间接胆红素测定的违规收费现象给患者带来了不少困扰。
对此，我们需要从多个角度加强对这一问题的关注和研究，共同维护医患关系的和谐和社会秩序的稳定。
血清直接胆红素测定标准操作规程
血清直接胆红素测定标准操作规程1.检验原理：（钒酸盐法）pH 值接近3时，在钒酸盐和表面活性剂的作用下，胆红素被氧化成胆绿素。
此时，胆红素特有的黄色减少，在波长450nm 处通过测定钒酸作用前后的吸光度的差可以求得样品中直接胆红素的浓度。
胆红素−−−−−→−表面活性剂钒酸盐/胆绿素 2.试剂主要组成成分3.样本要求 新鲜无溶血血清，勿使用肝素抗凝血浆。
22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法：仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6.检验结果的解释6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V ）的氯化钠溶液稀释样本。
通常稀释2倍，当样本浓度较大时提高稀释倍数。
6.2单位换算：mg/dL=umol/L ×0.05857检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊或以水空白在450nm 处吸光度大于0.500时不能使用。
8.产品性能指标8.1线性范围：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，本世纪线性范围可达0-320umol/L 。
8.2试剂空白吸光度：在450nm 处，光径1cm 时，空白吸光度A ≤0.500，△A空白/分钟≤0.002.8.3准确度：相对偏差≤10%。
8.4精密度8.4.1批内精密度CV≤3%8.4.2批间精密度：R≤10%8.5分析灵敏度：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，1umol/L的直接胆红素对应的△A不低于1.5×3108.6干扰试验无明显干扰：添加干扰物后的测定值与初始测定值的相对偏差处于±10%以内。
8.7方法比较：本试剂盒与商品化试剂盒测定40个样本测定结果相关性如下：y=1.052x-1.254；r=0.998。
9.临床意义：在肝细胞内质网中，胆红素结合成水溶性的胆红素双葡糖醛酸酯，能和重氮试剂直接反应，故称直接胆红素。
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血清胆红素测定
病人准备：
病人准备除了特殊检验有专门规定外，一般要求病人处于安静状态，生活饮食处于日常状态，目前已公认过度空腹、饮食、饮酒、吸烟及姿势体位等可影响某些检验结果，现分述如下：1. 运动：
肌肉活动的影响可分短暂性的和持续性的两类，短暂性影响为血浆脂肪酸含量，可因运动而暂时减少，而后渐渐增加而恢复。
丙氨酸可因运动暂时增加达180%，受到持续性影响主要是一些与肌肉有关的酶，如肌酸激酶、乳酸脱氢酶等，据称一场60min的手球训练赛后11h，肌酸激酶活性比赛前仍增加达125%，长期坚持体育锻炼还会提高性激素水平，因此采血前宜安静，不作过大的活动。
2. 食物：
进餐后血浆脂肪、蛋白质、糖类有所增加。
有人研究于高脂餐后2-4h采血，多数人碱性磷酸酶含量增高，主要来自肠源性同工酶，且与血型有密切关系，O型或B型兼为Le+分泌型者增高更明显。
一般认为高蛋白质餐使血浆尿素增加，但不影响肌酐含量，高比例不饱和脂肪酸食物，可减低胆固醇含量；食物如含有动物血液，可引起粪隐血假阳性。
故在做相应检验时，应对食物有一定的控制。
3. 过度空腹：
一般血液生化检验要求病人晚餐后禁食，至次日晨采血，空腹约8-12h。
但过度空腹，某些检验会有异常结果。
例如血清胆红素可因空腹48h而增加240%；血糖可因空腹过长而减少为低血糖；血脂空腹过度，甘油三酯、游离脂肪酸反有增加，故空腹并非越长越好。
4. 饮酒：
饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐增加。
长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高，平均红细胞体积增加，甚至可以将这项作为嗜酒者的筛选检查。
5. 吸烟：
瘾烟者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%，而不吸烟者含量在1%以下。
血液学方面亦有变化，白细胞数增加，嗜酸粒细胞减少，中性粒细胞及单核细胞增多，血红蛋白偏高，平均红细胞体积偏高。
6. 药物：
药物对检验的影响非常复杂，15000多种药物对检验有干扰作用。
众所周知，抗生素、磺胺类药物，对肝功能有大小不一的影响，甚至几片常用药物可以引起严重的药物反应，故在采样检查之前，暂停各种药物是为上策，如不可停用，则应了解可能对检验结果产生的影响。
7. 体位：
体位影响血液循环，由于血浆和组织间液因体位不同而平衡改变，则细胞成分和大分子物质的改变较为明显，例如由卧位改为站位，血浆白蛋白可因此而浓度增大，总蛋白、酶、钙、胆红素、胆固醇及甘油三酯等亦因站位而浓度增加；血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数亦于站位时增加。
8. 其他：
病人准备还应考虑病人的生物钟规律，因此复查以在大体相同的时间采样为好。
采血时止血带结扎过久，也是一种误差因素，如以结扎1min的样品结果为基数，则结扎3min，可使血浆总蛋白增加5%，胆固醇增加5%，铁增加6%，胆红素增加8%。
血气和PH值测定的血液以动脉血为原则，且不可漏气。
细菌培养的样品要采用无菌技术，防止污染。
检验前处理：静脉血2毫升，2h内离心，取上层血清处理。
检验后处理：血液冷冻保存一周，或者应该做安全处理（具体参考实验室管理）。
改良J-G法
原理：血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成偶氮胆红素；未结合胆红素需要在加速剂(咖啡因-苯甲酸钠)作用下，分子内氢键破坏后，才能与重氮试剂生成偶氮胆红素。
醋酸钠缓冲液保持反应的PH，反应后加入终止剂以破坏重氮试剂，最后加入碱性酒石酸钠溶液，使颜色不稳定的紫红色偶氮胆红素在咖啡因存在下转化为稳定的蓝色偶氮胆红素，在600nm波长比色，通过计算，得出总胆红素和结合胆红素含量。
试剂：.咖啡因试剂，碱性酒石酸钠溶液，5g/L亚硝酸钠溶液，5g/L对氨基苯磺酸溶液，重氮试剂，5g/L叠氮钠溶液，待测血清
操作步骤：取试管3支，按表操作：
加入物（ml）总胆红素管结合胆红素管空白管
血清0.2 0.2 0.2
咖啡因苯甲酸钠试剂 1.6 — 1.6
对氨基苯磺酸——0.4
重氮试剂0.4 0.4 —
混匀，准备一分钟
叠氮钠—0.05 —
咖啡因苯甲酸钠试剂— 1.55 —
室温10分钟
碱性酒石酸钠 1.2 1.2 1.2
混匀，在37C水浴5分钟，600nm波长比色，以空白管调零，读取各管吸光度。
从标准浓度对照得出待测浓度值。
计算：样品的C=（Au-AuB）*C标准
参考范围：血清总胆红素5.1——17.1mmol/l
血清结合胆红素0——6umol/l
影响因素：1.本法在0-37C范围内测定，不受温度变化的影响，两小时内呈色非常稳定，灵敏度高。
2.轻度溶血对本法无影响。
3.叠氮钠能破坏偶氮试剂，终止偶氮反应，凡用叠氮钠作为防腐剂的质控血清，
可引起叠氮反应不完全，甚至不显色。