丙烯酰胺降解菌的筛选及优势菌株降解条件优化

鉴 定 主要包 括革 兰 氏染色 法 、芽孢染 色法 、荚
膜染 色 、接 触酶 试验 、 甲基 红试 验 、Ｖ Ｐ 实验 、明 －
１ ． 选择培 养基 配方如下： ２Ｐ ４． ， Ｓ ４ ．２ ２ ＫＨ Ｏ ０ ｇ ＭｇＯ ・ １０
７ ０ ． ０ ｇ， Ｃ１０． ，Ｃａ ２０ １ ，Ｆｅ ３ ０１ ｇ Ｈ２ ０ ５ Ｎａ ３０ ｇ ＣＩ ． ０ ｇ Ｃ１０． ，
计 上进行 扫描 ， 定 丙烯酰 胺 的吸收波长 为 ２ ０ｎ 确 ６ ｍ． 以下实验 中均 采用 ２ ０ｎ 的波 长． ６ ｍ
１ 菌株 生理 生化 性质测 定 ． ６
１２ 培养基 ． １ ． 富集培养基 ．１ ２
采用最基础 的细菌培养基——牛
肉膏 蛋 白胨 液体 培养基 ．
、 、
、
ｌ ｌ １ — ０一 、 ０一 、 ０ ９
９个梯 度 ， 个梯 度取 ０１ｍＬ涂 布在 ３个 重复 的选 每 ． 择性 固体 培养 基平板 上，于 ３ ０℃培养 ３ ，分离 、 ｄ 纯 化 出 ＡＭ． 、 ３ ＡＭ一 、 ４ ＡＭ一 ５的单菌落 ，转至斜 面试 管 上 编号保 存 ．
文 章编号 ： ０ ０５ ６ （０ ２０ ０ ５０ １０ —８ ２２ １） １０ ３ —５
丙烯 酰胺 降解 菌 的筛选及 优势 菌株 降解条 件优化
李俊 叶，王筱 兰 ，邹峥嵘
（ 西 师 范 大 学生 命 科 学 学 院 ， 江 西 南 昌 ３ ０ ２ ） 江 ３０ ２
摘要 ：通过富集培养和选择培养分离， 从江西昌九农科化工有限公司厌氧池废水中筛选分离到能够降解丙
收 稿 日期 ：２ １ －５２ ０ １０ ．８
基 金项 目：江西 省科技 支撑 计划（０ ９Ｘ ０ ６） 助项 目． ２ ０Ｊ ０ ５４资
作 者简 介：王筱 ￣（９ ５） ， １６ 一 ，女 江西 景德镇 人，教授 ， 士，主要从 事微生 物工 程方 面的研究 博
３ ６
１ 菌株培 养基及 生长条 件优 化 ． ７
江 西 师 范 大学 学 报 （ 自然科 学 版 ）
２０１ ２
果都 低 于单 株 菌 的丙 烯酰 胺 降解 效果 ；菌株 ＡＭ． ３ 与 菌株 ＡＭ． 组 合 后 的丙 烯 酰 胺 降 解 效 果 与菌 株 ４
１ 菌株 降解 丙烯 酰胺 的测定 方法 【 ． ５ ５ 】
１ 材 料 与 方 法
１１ 分 离菌种 的样品 采集 ．
为 了确定 丙 烯酰 胺 的吸 收波 长 ，配制 了不 同浓
样 品采 自江 西省 昌九农 科化 工有 限公 司厌 氧池
活性 污泥 ．
度 丙烯 酰胺溶 液，在 ＵＮ Ｃ Ｖ２ Ｏ 紫外 分光光 度 Ｉ ＯＵ －１０
废水 中的污 染 物是 目前 最 常用 的废 水 处理方 法 ，也 是 比较 重要 和有 发展前 途 的一 种处 理方法 口． 】
养 基 中 培 养 ，分 别 取 培 养 液 进 行 梯 度 稀 释 ，制 成
ｌ １ ２ ｌ一 、 ｌ— ０一 、 ０— ０ ０ ４ １一 、１ — ０ ０６
能对 周 围神经 系统 和 中枢 神经 系统 产生 毒性 ，因此 ， 常人 每天允 许接 触 的最 大量不 超过 Ｏ５ ｌ ／ｇ 】 ． ｘ ｋ ［．现 ｇ ￣
将 菌株 Ａ ３ Ｍ． 、ＡＭ． 选择性 液体培 Ｍ一、Ａ ４ ５在
代化 工 、 医药等 行 业废 水 中常 含有 丙烯 酰胺 ，对 环 境 造成 污 染 ， 接危 害人 类 健 康 ．利用 微 生 物处 理 直
制成 平板 ．（ 注：丙烯酰胺过滤除菌，该培养基 以丙烯酰
０ 引 言
丙烯 酰胺（ ｒｌ ｄ ，简 称 ＡＭ） 一种元 气味 Ａｃ ａ ｅ ｙ ｍｉ 是
胺作 为菌种 生长 的唯 一碳源 和氮源 ． ）
１ 微 生物 菌种 的筛选 ［ ． ３ ３ 】
பைடு நூலகம்
水样接 入 富集 培养 基， ０℃摇床 培养 ２ｄ ３ ，将富 集 培养基 中的培养液 １ ｍ Ｌ接人 ３ ０ ｍＬ选 择性液 体 培养 基 中， ０℃ １０ｒ ｎ 床培养 ３ｄ 培养液进 ３ ０ ｍｉ摇 ／ ，取 行 梯度 稀 释后 平 板划 线培 养 ，根 据菌 落形 态 挑选 出 现频 率较 高 的菌株 Ａ ３ Ｍ．、ＡＭ一 、ＡＭ．． ４ ５
第３ 卷第 １ ６ 期
２１ ０ ２年 １ 月
江西师范大学学报（ 自然科学版）
Ｊｕ ａｏ ａｇｉ ｏ ａ Ｕ ｉｅ ｉ （ ａ ｒｌ ｃ ｎｅ ｏｒ ｌ ｆｉ ｘ Ｎ ｒ ｌ ｎｖｒ ｔ Ｎ ｔ ａ Ｓｉ ｃ） ｎ Ｊｎ ｍ ｓｙ ｕ ｅ
Ｖ０１ ３ ． ６Ｎｏ． １ Ｊ ｎ．２ ２ ａ ０１
１４ 微 生物菌 种的 分离 、纯化 ［ ． ４ １
的 白色 晶体 ，在 工 业 上 主 要 用 于 合 成 聚 丙 烯 酰 胺 （Ａ ．ＡＭ 由于具有 特殊 的物理化 学性 质，因而广 Ｐ Ｍ）Ｐ
泛应用 于石 油开采 、污 水处理 、造 纸 、矿产 、医药 、
农业 、 纺织等 行业，享 有“ 百业 助剂” 之称 ．丙烯 酰胺
胶 液 化 、葡 萄糖 氧化 发酵 实 验 ． 体操 作 方法 参考 具
丙烯 酰胺 ０５ ，水 １０ ０ｍＬ ｐ ． ｇ ０ ０ ， Ｈ值 为 ７０ 选 择性 ．．
《 简明第八版伯杰细菌鉴定手册 》［ 《 ６ 】 常见细菌 及
系统鉴 定手册 》【． １
固体 培养 基：向上述 培养基 中加入 １～ ０ ｇ琼脂 粉， ５ ２
烯 酰胺 单体 的菌 株， 菌株 的培 养基 配方 及 降解 工 艺条 件进 行优化 ． 定菌 株对 丙烯 酰胺 的 降解性 能，得到 对 测
一
株降 解效果 较好 的菌株 Ａ ４ Ｍ．，通过 生理生 化特 性初 步鉴定 其属 于葡 萄球菌 属．
关键词 ：丙烯酰胺；降解； 菌株； 筛选；鉴定 中图分 类号 ： ３ Ｑ９ ６ 文献标 志码 ： Ａ