皮肤组织病理石蜡切片技术

病理标本取材的方法、原则及注意事项及石蜡切片染色技术

病理标本取材的方法、原则及注意事项及石蜡切片染色技术临床医学医学信息 2013 年 7 月第 26 卷 2中 Medical Information. Jul. 2013. Vol. 26患有尿毒症老年人的静脉留置针的护理体会熊蔚方( 广西贵港市人民医院肾内老年科 , 广西贵港 537000 ) 我国已进入老龄化社会,老年人日渐增多,他们疾病复杂,慢性疾病多发, 进针速度要慢, 以免刺破血管, 采用边退针芯边置入外套管法, 见回血后沿血特别是患有尿毒症老年人的患者,病情变化快,危急,经常需要静脉输液治疗。

管平行置入外套管针直至外套管针尖端全部进入血管, 左手固定针柄, 右手取为了保护好患有尿毒症老年人的血管及有利于配合抢救,又能快速给药,减少出针芯, 并松开止血带, 无菌透明贴固定, 并注明穿刺日期及时间。

禁食、创伤、反复穿刺给患者带来的痛苦,静脉留置针的使用能减少反复静脉穿刺而造成失血、疼痛、环境温度低、个体循环不良等造成外周血管充盈不佳的情况下 , 可的痛苦及对打针的恐惧感,血管难找及血透破坏血管的弹性及增加他们的穿采用先选择好穿刺部位后热敷, 待血管充盈后再行穿刺 ;也可采用穿刺前扎止刺难度,减轻患有尿毒症老年人的焦躁情绪,便于临床用药,急、危重患者的抢血带,用手轻轻摩擦穿刺部位皮肤后,放松止血带片刻再扎止血带。

救用药,减轻护士的工作量,减少疼痛,因而静脉留置针在临床广泛应用,面对 3.2封管方法封管是留置成功的关键, 方法得当, 可延长置管时间, 防止置管患有尿毒症老年人这一特殊群体,静脉留置针留置时间的长短和患有尿毒症并发症的发生;封管时采用双重正压封管法,就是输液完毕后夹闭输液器, 将老年人的舒适成为护士及家属最为关注的问题。

头皮针斜面撤于肝素冒腔内 ,反折头皮针乳头, 与夹闭的输液器断开 , 连接含1 穿刺前的评估肝素盐水溶液的 5ml 注射器均匀推注肝素盐水溶液 3ml , 右手将留置针延长先对穿刺部位的评估,若把握不大,不能一次穿刺成功的就放弃,重新选管抬高 30°后, 将其延长管上的小夹将延长管夹闭,再推注肝素盐水溶液0.5择穿刺部位;对护士自身心理状态的评估,护士自身是否镇静,情绪是否稳定, lm 封管, 分离退出以再次呈正压的头皮针 ;封管后再次输液时套管内肝素溶若不就做深呼吸休息片刻再行穿刺;作为一名职业护士不但要有良好的心理液相对呈高压状态,使液体通畅的流入体内。

大鼠皮肤石蜡切片的制作技巧与质量控制

毒理学及药效分析的前提和基础，然而皮肤结构复杂，层次丰富，且各层次之间的组织致密度不同，给病理制片增加一定难度，皮肤组织一般均带有皮下脂肪，在制片过程中，若按常规的脱水程序处理所制取的包埋块，切片时则会出现切片不顺利，易破碎、挤压或切片不完整等现象。因此，在皮肤制片过程中应根据其自身的组织结构特点，采用不同的处理程序。本文着重介绍大鼠皮肤石蜡切片的制作技巧与质量控制，现报道如下。
ｐＰａｔｈｏｌ２０１５Ｎｏｖ；３１（１１）
・１３０７・
网络出版时间：２０１５—１１ — ２３０８：４９网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０７３．Ｒ．２０１５１１２３０８４９．０２９．ｈｔｍｌ
１材料与方法
１．１材料
ｍ，在生物组织摊片机４８℃去离子水中进行展片，组织舒展
平整时将其捞在洁净的载玻片上，然后将切片置于６Ｏ℃温箱
清洁级健康成年雌性ＳＤ大鼠６只，体重
石蜡组织切片机（ＬｅｉｃａＲＭ２２３５），
１．１．２主要仪器设备
一
蒸馏水，Ｈａｒｒｉｓ苏木精染核８ｍｉｎ，水洗去浮色，１％盐酸乙醇分色１ — ２Ｓ，自来水返蓝１５～２０ｍｉｎ，０．５％伊红水溶液染胞质

石蜡切片的具体步骤与做法

石蜡切片的具体步骤与做法？石蜡切片法即用石蜡作为支持剂进行切片的方法。

石蜡切片法是一般组织学、病理学等常规制片方法，因此用得最多，它有很多优点：比较省时间，容易操作，可切成极薄的切片（4um以下），能制作连续切片，组织块可包埋在石蜡中永久保存。

缺点是只能用于较小的组织块，较大的组织块不易切好，容易破碎，组织在脱水透明过程中产生收缩并易变脆。

制片时间太长。

石蜡切片的制作过程（一）材料与用具1．材料：鱼皮肤、性腺、肠、肝胰脏等。

2．用具：溶蜡箱、蜡杯、不同熔点的石蜡、酒精灯等。

（二）实验内容与步骤1．取材及固定取动物体上的小块组织成为组织块。

组织块的大小以不超过0.5立方厘米为宜。

切去组织块时动作要轻，切忌用力牵引或挟持，以免组织内部发生变化。

组织块取下后，先用先用0.85％的生理盐水漂洗以戏曲血液与污渍，如果是管状组织则必须把管腔中污物洗净，可用注射器自一端向管腔中注射生理盐水数次，使其管腔冲洗干净，切忌不可用刀或其他器具刮之。

由动物身上切取的组织必须是新鲜的，材料越新鲜越好，一般不应超过死后24小时。

如果是管状器官或是其中有分泌之消化液，则死后应迅速采取，以免组织自溶或上皮剥落。

材料由动物体取下后应当迅速固定，固定的目的是尽快使固定液渗入组织内部，将组织固定，以保持其原有的结构。

不同的组织应选用适当的固定液。

固定液的用量与组织块体积之比一般在20：1。

不应使组织块贴于容器壁上，应记录固定液的名称，材料的种类，动物品种及开始固定的时间。

2．冲洗固定后的组织块在进行脱水前必须用流水洗去固定液。

组织块应用纱布包好，注名，放金属水洗网中用流水冲洗，甲醛固定液固定的组织一般水洗24小时，Bouins固定液固定的组织水洗24小时。

AFA固定液则不需要水洗。

3．脱水和硬化经过固定后的组织在水洗后要进行脱水，脱水的目的将组织内的水分用酒精或其他溶剂置换出来，使组织逐渐变硬，便于油类或其他透明及浸入，为熔化的石蜡浸渗到组织中创造条件。

石蜡切片、冰冻切片实验技术服务

石蜡切片、冰冻切片实验技术服务
石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。

冰冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷冻到一定的硬度，然后进行切片的一种方法。

制作过程较石蜡切片快捷、简便，因而多应用于手术中的快速病理诊断。

【技术原理】
组织经固定后，含有大量水分，使用乙醇从低浓度到高浓度将组织内的水分逐渐置换出来，以利于透明剂和石蜡的进入，这个过程称为脱水。

组织脱水后，必须经过一种既能与乙醇相结合，又能溶解石蜡的溶剂，通过这种溶剂的媒介作用使石蜡浸入组织，这种溶剂使组织呈现出不同程度的透明状态，这个过程称为透明。

组织经过脱水、透明后用石蜡作为支持剂浸入组织内，使组织变硬并将组织包裹在内，有利于切片，这个过程称为浸蜡。

浸蜡后的组织块用石蜡包成块，使组织达到一定的硬度和韧度有利于切片。

【实验流程】
案例展示
技术总结
【常见问题】
1、切片上卷或皱起
切片刀角度过大或过小，调整角度以5°为宜。

2、切片有空洞及破碎不齐
切片时慢一点，轻削组织。

3、切片有褶皱
切片时对准蜡块表面轻轻哈气。

【注意事项】
1、组织硬度较大，容易发生切片碎裂，需经软化或脱钙；
2、摊片时间过长，组织中心易开裂；
3、摊片时间过短，组织有褶皱，影响后续染色拍照；
4、特殊组织的切片，在后续染色过程中容易出现掉片的情况，比如皮肤、脑组织；
5、切片太厚，容易导致染色程度过深。

组织切片制作方法

组织切片制作方法
组织切片是制备病理学标本的主要方法之一，以下是其制作步骤：
1. 收集组织样本，并在一定时间内将其放入固定液中进行固定。

2. 将组织样本从水中逐渐转移到酒精中进行脱水。

3. 将样本置于包埋剂中，使其逐渐转移到蜡块中。

4. 用切片机将蜡块切割成极薄的切片，并用染色剂染色，以便在显微镜下进行观察和分析。

5. 将切片封入载玻片中。

此外，为了确保切片的质量，需要注意以下几点：
1. 载玻片应干净无油，如有云雾斑点，则不能使用。

2. 切片制作过程中，应将预冷的蜡块固定在石蜡切片机上，使蜡块的切面与刀口成平行方向。

刀的倾斜度通常为15℃，转动轮转推进器，调节切片厚度为6μm，切成厚度均匀的切片。

3. 切片贴附后，放在空气中稍晾干，然后进行烤片。

烤片的温度以蜡溶解为准，也可以放置60℃烘箱内烘烤过夜。

血块组织、皮肤组织须及时烤片，但脑组织、脂肪组织待完全晾干后才能进行，这样可防止产生气泡而影响染色。

以上信息仅供参考，建议咨询专业人士获取更准确的信息。

病理组织切片制作技术

------------------------------------------ 最新资料推荐------------------------------------病理组织切片制作技术病理组织切片制作技术病理组织切片常用的制作方法有三种。

即石蜡切片法，冰冻切片法和火棉胶切片法。

以石蜡切片法为代表，切片的基本制作过程是：组织取材固定冲洗脱水透明浸蜡组织包埋组织切片展片附贴切片脱蜡染色脱水染片透明封固。

以上基本过程是互相联系的，任何一环节出现问题，都将使整个切片制作归于失败。

因此应细致、耐心、认真负责，并事先做好计划安排。

一、取材采取病料，要刀剪锐利，剪切时不可挤压，扯拉病料，以防人为损伤。

切取的工具要清洁。

采取病料越新鲜越好，一般不超过死后24小时。

应选择病变部与可疑病变部切取，切取时要由表及里，有浅入深并包括周围正常组织一部分。

特殊病料应根据器官的结构特点切取。

管状，囊状和皮肤组织应注意垂直切取（横切）。

带有薄膜的组织，要防止切时薄膜分离和脱落。

切取组织块大小，以1.51.50.3厘米为宜，最厚不宜超过0.5厘米。

组织块病变一面应平整光滑，另一面可不平整，以便包埋时辨认。

切取后，放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中，并做好标记。

二、固定固定的目的是迅速将组织细胞杀死，使细胞中的蛋白质，糖，脂肪等凝固，从而保持与活组织相似的结构状态。

材料取下后，应迅速固定。

固定液数量应为病理组织块的5到20倍。

由于一般把组织块浸入固定液后数小时，固定液渗入组织液的深度只达2至IJ 3厘米。

因此，可以放置冰箱内固定，使组织内酶失去作用，细菌也能停止滋生。

最常用的固定液是10%的福尔马林溶液：使用时，用40%的甲醛饱和水溶液10毫升，加水90毫升配成。

三、冲洗固定后的组织块，应将固定液洗去。

一般均用流水（自来水）冲洗12到24小时左右。

及时冲洗尚有停止固定的作用，防止固定过度，有利于制片染色。

冲洗时如不方便用流水冲洗，也可用较大容器盛装水浸洗，每隔相当时间换水一次。

皮肤病理石蜡切片

省二院：
厂地：上海懿洋仪器有限公司
伊红（曙红Y） EosinY
配制伊红，有许多种方法，根据各单位的情况，使用不同种类的伊红。市售的伊红有两种：一是水溶性伊红，二是醇溶性伊红，在我们的实践中，水溶性伊红用低浓度的酒精来配制，只要配制得当，其效果非常好。伊红 1g 70-75%酒精 100ml 先将伊红用蒸馏水(少许)调成浆糊状，再加入酒精，边加边搅拌，直到彻底溶解，此时试剂有些混浊，取少许冰醋酸，加入到试剂中去，试剂逐渐转变为清亮，呈鲜红色，染出切片，效果很好。
目的，否则不易染色！（石蜡不与染液结合）
脱苯（水）→蒸馏水
无水乙醇 95%乙醇 80%乙醇 2min 2min 数秒
70%乙醇
流水冲过
反酒精梯度
比较：
我们没有反酒精梯度脱水，只用了95%乙醇进行脱苯1min。
功能：脱去组织上多余的苯，使组织梯度进水水，进而染色。注意：如果组织进入95%乙醇中有云雾状现象，说明二甲苯没有脱彻底或乙醇
3-4h
①我们95%乙醇采用两步脱水，以减小收缩力。
无水乙醇Ⅰ ≧1.5h 无水乙醇Ⅱ ≧1.5h
功能：
②无水乙醇的脱水时间不超过 2h，与此相比较，相差将近2倍。
脱去组织中的水分，以便石蜡浸入。
注意：①水和石蜡不相容，需脱水彻底，以便制备出好的切片。
②无水乙醇同样具有使组织收缩变硬的影响，故不能时间过长。议：无水乙醇脱水3-4h皮肤组织会不会变硬？
透明
二甲苯Ⅰ 20min
比较：
20min
透明时间都相同，但我们用的是松节油进行组织透明。
二甲苯Ⅱ
功能:
二甲苯是酒精和石蜡的共同溶剂（媒剂）目的是为石蜡的浸入作媒介。

一种针对人体皮肤组织快速、低毒的石蜡切片新方法

道吸收，其蒸气可引起眼、鼻、喉的刺激，高浓度时可致严重的呼吸困难，甚至死亡。此外，吸入高浓度的二甲苯可使食欲丧
失、恶心、呕吐和腹痛，有时可引起肝肾可逆性损伤。长期接触
片，晾晒１ｈ（通风橱内）。
上无明显区别。
４参考文献
［１】中华人民共和国卫生部．工业企业设计卫生标准【Ｍ】．北京：人民卫生出版社，１９７９：ｌ１１２．
注：除浸蜡的ｉ个步骤设定温度为６２ ℃外，其他试剂均为室温
下降、发育迟缓和吸收胎增加，但未见致畸性］。
综上所述，本实验室采用真空负压脱水机替代手动操作，减少了石蜡切片实验需要的时间。采用甲级环己烷替代二甲苯，降低了实验对人员的毒性，且制作出的石蜡切片与传统方法在质量
［６】王韶艳，李莉，李艳．药物安伞．胜评价中病理技术人员个人防护
［Ｊ］．齐鲁药事，２０１０，２９（１）：４．
个工作班，当天）完成，同时获得ＨＥ切片的结果。而传统方法
整个制片过程长达８３ｈ，需要几天时间来完成。这样可以大大节
【８】吕丹瑜，刘雅琼，刘宁，等．二甲苯对妊娠小鼠及胚胎发育的毒性
作用［Ｊ】．解剖学报，２００６，３７（３）：３５５．

石蜡切片技术

石蜡切片技术病理诊断是所有其他诊断(包括临床诊断、影像诊断、实验室检查诊断乃至分子诊断)的金标准。

因此学习相关病理诊断技术具有重要意义。

病理技术不仅可以作为临床诊断的金标准，还可以帮助临床查明死因，对我们研究生来说还可以提供教学、科研的资料。

病理学科是一门基础与临床之间起着桥梁作用的重要学科，病理研究方法在技术工作上又是多方面的，有尸体解剖，大体标本的制作、制片技术（石蜡切片、冰冻切片、火棉胶切片、半薄切片、超薄切片）组织化学方法，免疫酶标技术、荧光技术、摄影技术等。

第一节组织制片的概述组织制片技术的应用，从1665年由HOOk发现细胞开始，已有300多年的历史。

最早应用冰冻切片；随后又进一步利用石蜡的硬度，以石蜡包埋组织，制成石腊切片；后来又利用明胶、火棉胶、碳蜡和塑料等物质的韧性，以其包埋组织而制作切片。

第二节制片的种类1、组织切片法任何组织切片必须依靠切片机将组织切成薄片（厚度以μm计），再进行染色而得到结果。

在切成薄片以前必须设发使组织内部渗入足够的支持物质，使组织保持一定的硬度，然后使用切片机进行切片。

渗透到组织中的支持剂（物质）有多种，如石腊、明胶、火棉胶、碳蜡和塑料等。

冰冻组织切片发是直接利用快速冷冻法进行切片。

2、组织非切片法不用切片机，不经过切片手续而制成组织切片的方法，包括整体封藏法、浮片法、压碎法和组织直接印片法。

这些方法操作简单而快，可根据制片的需要进行选择使用。

石蜡切片技术石蜡切片法组织切片的主要程序：取材→组织固定→固定后处理→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→粘片→脱蜡→水化→水洗→常规或特殊染色→脱水→透明→树胶封片。

一、取材取材(DrawMaterials)是根据实验目的及临床活检、尸解组织的病变程度而合理取得组织材料。

为了制作优质的切片，取材时组织愈新鲜愈好，并应及时固定。

（一）病理标本的来源分类：有临床活检、尸体解剖、实验动物、培养细胞主要病理标本大致可分类如下：1、手术标本2、内镜取材标本3、穿刺取材标本4、细胞学标本可分为：痰、尿、阴道分泌物、胸水腹水、穿刺细胞学标本、内镜刷取标本、其它如脑脊液、关节液、前列腺挤排物、十二指肠引流物、胆汁等。

皮肤病理石蜡切片PPT课件

观察细胞的大小、形态、染色深浅等特征，判断细胞的良恶性。
鉴别病变性质
根据切片的病理表现，鉴别皮肤疾病的性质，如炎症、肿瘤等。
02
皮肤病理石蜡切片在诊断中的应用
常见皮肤疾病的病理表现
皮肤肿瘤
良性和恶性皮肤肿瘤在石蜡切片中呈现出不同的病理特征，如细胞形态、组织结构、生长方式等。
感染性疾病
THANKS
感谢观看
皮肤病理石蜡切片ppt课件
• 皮肤病理石蜡切片基础知识 • 皮肤病理石蜡切片在诊断中的应用 • 皮肤病理石蜡切片的临床意义 • 皮肤病理石蜡切片的未来发展 • 皮肤病理石蜡切片相关问题解答
01
皮肤病理石蜡切片基础知识
定义与重要性
定义
皮肤病理石蜡切片是指将皮肤组织经过一系列处理后，用石蜡包埋、切片，再进行染色得到的病理组织学图片。
皮肤病理石蜡切片的操作过程是怎样的？
皮肤病理石蜡切片的操作过程包括取材、固定、脱水、包埋、切片、染色等步骤，最后在显微镜下观察并做出病理诊断。
注意事项
01
取材时需要注意什么？
取材时应该选取病变组织中具有代表性的部分，避免取材过度或不足，
影响诊断结果。
02 03
如何保证切片质量？
在制作石蜡切片过程中，需要保证脱水、包埋、切片等步骤的质量，以确保切片平整、无气泡、无破损，从而提高显微镜下观察的准确性和可靠性。
将固定后的组织进行石蜡包埋、切片和染色。
观察与诊断
病理医生通过显微镜观察切片，根据病变特征做出诊断。
病例分析
病例一
病例三
患者皮肤出现红色斑块，病理表现为血管增生和炎症细胞浸润，诊断为银屑病。
患者皮肤出现水疱和糜烂，病理表现为病毒感染引起的细胞病变，诊断为单纯疱疹。

石蜡的切片实验报告

一、实验目的1. 熟悉石蜡切片的制作过程。

2. 掌握石蜡切片的染色技术。

3. 了解石蜡切片在组织学研究和病理诊断中的应用。

二、实验原理石蜡切片技术是一种常用的组织学制片方法，其原理是将组织标本进行脱水、浸渍、浸蜡等处理，使其在石蜡中充分浸渍，然后用微型切片机将其切成薄片，最终制成组织学切片。

石蜡切片具有切片厚薄均匀、染色效果好、保存时间长等优点，是组织学研究和病理诊断的重要工具。

三、实验材料1. 实验动物：小白鼠2. 实验器材：石蜡切片机、显微镜、载玻片、盖玻片、染色缸、酒精灯、剪刀、镊子等3. 实验试剂：卡诺氏固定液、FAA固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、埃利希苏木精染液、1%伊红酒精溶液、1%盐酸酒精溶液等四、实验步骤1. 取材：取小白鼠肝脏组织，用剪刀剪成小块。

2. 固定：将剪好的组织块放入卡诺氏固定液中固定24小时。

3. 脱水：将固定好的组织块依次放入70%、80%、90%、95%、100%酒精溶液中，每级酒精溶液浸泡1小时，使组织逐渐脱水。

4. 透明：将脱水的组织块依次放入三个二甲苯溶液中，每缸浸泡1小时，使组织逐渐透明。

5. 浸蜡：将透明的组织块依次放入三个石蜡溶液中，每缸浸泡1小时，使组织完全浸渍在石蜡中。

6. 包埋：将浸好蜡的组织块放入熔蜡中，待石蜡凝固后取出，用剪刀修整蜡块。

7. 切片：将修整好的蜡块固定在石蜡切片机上，调整切片厚度为4微米，制成石蜡切片。

8. 展片：将切好的石蜡切片展平在载玻片上。

9. 脱蜡：将展平的石蜡切片依次放入二甲苯、无水乙醇中，使切片脱蜡。

10. 染色：将脱蜡后的切片放入苏木精染液中染色5-10分钟，然后放入1%盐酸酒精溶液中分化，最后放入伊红染液中复染30秒。

11. 封片：将染好的切片放入封片液中封片。

五、实验结果制作完成的石蜡切片在显微镜下观察，可见到肝脏组织的细胞结构，如细胞核、细胞质、血管等。

六、实验讨论1. 石蜡切片技术是组织学研究和病理诊断的重要工具，具有切片厚薄均匀、染色效果好、保存时间长等优点。

石蜡组织切片技术简介

石蜡切片制作过程
二、固定
1、单纯固定液：、单纯固定液： 1.8：铬酸（三氧化铬）：：铬酸（三氧化铬）：为强氧化剂。慢，硬化中等，收缩明显。组织块固定后要避光保存，充分冲洗。收缩明显。组织块固定后要避光保存，充分冲洗。 1.9：丙酮：穿透力强，能使组织强烈收缩，对核染色差，穿透力强，能使组织强烈收缩，对核染色差，与酒精的作用基本相同。用基本相同。 1.9：三氯醋酸：与醋酸的作用相似，也可以膨胀组织块，很少单独使用，与醋酸的作用相似，也可以膨胀组织块，很少单独使用，还是一种优良的脱钙剂。是一种优良的脱钙剂。
石蜡切片制作过程
二、固定
1、单纯固定液：、单纯固定液： 1.3：升汞（氯化汞）：：升汞（氯化汞）：是一种剧毒白色粉末。常用饱和水溶液，可以固定蛋白质，是一种剧毒白色粉末。常用饱和水溶液，可以固定蛋白质，但不能固定类脂、碳水化合物。但不能固定类脂、碳水化合物。升汞的渗透力强，固定均匀，有一定的收缩，大多与醋酸、升汞的渗透力强，固定均匀，有一定的收缩，大多与醋酸、铬酸盐及甲醛等混合使用。对核的染色较好，胞质染色也较好。铬酸盐及甲醛等混合使用。对核的染色较好，胞质染色也较好。用升汞固定的组织需要脱汞处理，否则影响染色。用升汞固定的组织需要脱汞处理，否则影响染色。脱汞处理可以组织块脱汞法、切片脱汞法。脱汞处理可以组织块脱汞法、切片脱汞法。
石蜡切片制作过程
二、固定
1、单纯固定液：、单纯固定液： 1.5：苦味酸（三硝基苯酚）：：苦味酸（三硝基苯酚）：姜黄色结晶，干燥时极易燃烧，剧烈震动可能爆炸。一般姜黄色结晶，干燥时极易燃烧，剧烈震动可能爆炸。以饱和水溶液保存。可以和许多固定剂混合。以饱和水溶液保存。可以和许多固定剂混合。除固定外还可用作染色剂。染色剂。可以固定蛋白质，但不能固定脂肪、类脂。可以固定蛋白质，但不能固定脂肪、类脂。苦味酸的渗透力很弱，一般不单独使用，固定后可以使组苦味酸的渗透力很弱，一般不单独使用，织明显收缩，同时可以使组织块软化。常用于皮肤和肌腱的固定。织明显收缩，同时可以使组织块软化。常用于皮肤和肌腱的固定。苦味酸固定组织块不宜超过24小时，否则对苏木精染色不苦味酸固定组织块不宜超过小时，小时有时需要用酒精脱去其黄色。利。有时需要用酒精脱去其黄色。

皮肤组织病理切片技术

H E染色（苏木素伊红染色法）
染色方法：二甲苯 I 二甲苯 II 95%酒精 95%酒精 80%酒精水洗苏木素水洗 1%盐酸酒精 20分钟 20分钟二浸次二浸次二浸次 10~15分钟 1~2分钟
水洗后浸伊红水洗 80%酒精 95%酒精 I 95%酒精 II 100%酒精 I 100%酒精II 二甲苯 I 二甲苯 II 中性树胶封固
结果：细胞核呈蓝色，细胞浆及其他组织呈红色。
特殊染色
组织切片经 HE 染色法染色，其基本形态、组织变化及组织产物都可显示出来。而组织中有些特殊结构，如胶元纤维、弹力纤维、糖、脂肪、真菌孢子、神经等，在HE染色下不能明显区别，需通过不同的特殊染色方法，显示其特有的结构和色彩加以区别，特殊染色对病理诊断有极其重要的意义。现介绍皮肤组织常用的几种特殊染色方法：
透明
切片染色
切片质量标准（100分）
切片完整没有刀痕厚薄均匀附贴适量平坦无褶 10分 5分 10分（一层细胞） 5分 10分
树胶适量染色鲜艳对比清晰透明度好片内无污染无“人工”现象玻片整洁标签端正
5分 10分 10分 10分 10分 5分 5分 5分
常规染色
染料是一类有色的有机化合物，不但要有鲜艳的色彩，而且对于纤维或组织必须具有亲和力。
按染料来源分为：
1、天然染料；主要有苏木素、胭脂红等。
2、人工染料；主要有苦味酸、甲苯胺蓝、伊红Y、等。
按染料用途分为：
1、细胞核染料；常为碱性，如苏木素、
结晶紫、甲苯胺蓝等。
2 、细胞浆染料：常为酸性，如伊红 Y 、
投入透明剂，能使组织透明，又可使组织收缩和硬化，故透明时间不宜过长。二甲苯常为30分钟至2小时。

羊皮肤组织切片观察实验报告

羊皮肤组织切片观察实验报告背景羊皮肤是由多层组织构成的，其中包括表皮、真皮和皮下组织。

通过对羊皮肤组织切片的观察，我们可以了解皮肤的结构和功能，从而对皮肤疾病的诊断和治疗提供基础数据。

实验目的1.观察羊皮肤组织的结构组成；2.分析不同组织结构的功能；3.探讨皮肤疾病相关因素。

实验方法1.实验材料：–一块新鲜的羊皮肤–10％缓冲福尔马林–石蜡切片机–显微镜–静电膜–染色剂（如伊红染色剂和伊红酸性染色剂）–蒸馏水2.实验步骤：1.将取得的羊皮肤切成适当大小的薄片；2.用10％缓冲福尔马林固定样本20分钟；3.将固定的样本置于石蜡切片机中并切制成5μm的切片；4.将切片放入温水中浸泡，以去除石蜡；5.用染色剂对切片进行染色，如伊红染色剂；6.将切片搁置于静电膜上并用蒸馏水冲洗；7.将切片用显微镜观察并记录观察结果。

实验结果组织切片观察结果如下：1.表皮层（Epidermis）：具有五层，从外到内分别为角质层、透明层、颗粒层、锥层和基底层。

角质层主要由死亡的角质细胞构成，起到保护皮肤的作用。

透明层含有色素细胞，负责皮肤色素的生成。

颗粒层富含角质颗粒细胞，参与保湿和防护功能。

锥层为角质细胞的前体细胞，参与皮肤的更新。

基底层是最底层，负责新的皮肤细胞的生成。

2.真皮层（Dermis）：真皮层是皮肤最厚的部分，由结缔组织构成。

结缔组织中含有大量的胶原蛋白和弹性纤维，赋予皮肤弹性和韧性。

真皮层还包含血管、淋巴管、神经末梢、毛囊和汗腺等结构。

3.皮下组织（Subcutaneous tissue）：位于真皮层下方，主要由脂肪组织构成。

皮下组织起到保护和储存能量的作用，还能调节体温。

分析羊皮肤组织切片观察结果表明皮肤是一个复杂的结构，由表皮、真皮和皮下组织组成。

每一层组织都具有不同的结构和功能。

表皮层是皮肤的最外层，主要起到保护皮肤的作用。

角质层形成了一个防护屏障，防止外界物质和微生物的侵入，同时保持湿润。

透明层和颗粒层则参与皮肤色素的生成和调节。

病理科石蜡切片制作常见问题分析及处理

或石蜡的熔点过高；组织块冷冻时间过长。处理方法： ①减少组织块冷冻时间；②切片时可以先将毛巾用漂片水浸湿后，
适当热敷于包埋组织表面，或者采用“ 哈气” 的方法处理组织
相应的固定、脱水、透明和浸蜡的操作步骤和时间； ③同时，可将组织块放在空气中自然风干１～２ｄ后再切片；④把锯条或
等）处理方法：更换合适的刀片，并调整刀片的角度，一般以３０＿５￣为宜＿ｌｌ。活体检查组织切片方法改进。
４切片被压缩或起皱褶
病理诊断的准确性。但石蜡切片的制作会受到很多因素的影响。笔者通过多年的实践工作经验，并结合复习文献，现将石蜡切片中遇到的常见问题分析总结如下。
软。处理方法：延长蜡块冷冻时间。 ④切片刀过钝。处理方法：
打磨或更换切片刀。
２切片不完整２．１切片中间密布小孔：常见原因为组织包埋时包埋盒底部
４．４组织浸蜡和包埋用的石蜡硬度不一致：处理方法：检查
和更换石蜡。
面，然后再切片； ③对于肌瘤等富含纤维的致密组织，修切组
６切片撕裂、散碎、不成片
６．１常见原因： ①组织取材厚度过厚； ②组织处理步骤处理
不当； ③ 脱脂不彻底，组织含脂肪过多。６．２处理方法： ①组织取材一般为２ａｍ；ｒ ② 不同的组织采取
３．３组织块过硬：可能的原因：组织浸蜡、包埋的时间过长，

石蜡切片的原理

石蜡切片的原理
石蜡切片是组织学中常用的一种制备技术，用于观察和研究生物组织的微观结构。

其原理可以分为以下几个步骤：
1. 组织采集：首先，需要将待观察的生物组织（例如动物、植物的器官或细胞等）进行采集和收集。

采集可以通过活体取材或者组织固定的方式进行。

2. 组织固定：为了保持组织的形态和结构不受损失，采集到的生物组织需要进行固定处理。

常用的固定方法包括用福尔马林（formalin）进行固定、液氮冷冻等。

3. 组织处理：固定后的生物组织需要进行一系列的处理步骤，以便使其能够被切割成薄片。

处理步骤包括去水化、透明化和浸渍。

4. 包埋：将处理后的组织用石蜡进行包埋，即将其浸入熔化的石蜡中。

石蜡可以提供支持和保护组织的结构，使得组织在切割过程中不会受损。

5. 切片：经过包埋的生物组织在石蜡硬化后，需要使用显微切片机进行切割。

切片机能够将包埋的生物组织切割成极薄的切片，常见的厚度约为4-6微米。

6. 染色：切片完成后，需要进行染色以增强对组织结构的观察。

常用的染色方法包括常规染色（如血液染色）和免疫组织化学染色等。

7. 观察和分析：最后，将染色后的切片放置在显微镜下观察，并使用显微镜和其他相关设备进行分析和研究。

通过石蜡切片技术，可以观察和研究生物组织的细胞结构、组织类型、细胞分化、病理变化等重要信息，对于医学诊断、疾病研究和药物开发等领域具有重要意义。

病理组织切片制作技术

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------病理组织切片制作技术病理组织切片制作技术病理组织切片常用的制作方法有三种。

即石蜡切片法，冰冻切片法和火棉胶切片法。

以石蜡切片法为代表，切片的基本制作过程是：组织取材固定冲洗脱水透明浸蜡组织包埋组织切片展片附贴切片脱蜡染色脱水染片透明封固。

以上基本过程是互相联系的，任何一环节出现问题，都将使整个切片制作归于失败。

因此应细致、耐心、认真负责，并事先做好计划安排。

一、取材采取病料，要刀剪锐利，剪切时不可挤压，扯拉病料，以防人为损伤。

切取的工具要清洁。

采取病料越新鲜越好，一般不超过死后 24 小时。

应选择病变部与可疑病变部切取，切取时要由表及里，有浅入深并包括周围正常组织一部分。

特殊病料应根据器官的结构特点切取。

管状，囊状和皮肤组织应注意垂直切取（横切）。

带有薄膜的组织，要防止切时薄膜分离和脱落。

切取组织块大小，以 1.51.50.3 厘米为宜，最厚不宜超过0.5 厘米。

组织块病变一面应平整光滑，另一面可不平整，以便包埋时1/ 7辨认。

切取后，放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中，并做好标记。

二、固定固定的目的是迅速将组织细胞杀死，使细胞中的蛋白质，糖，脂肪等凝固，从而保持与活组织相似的结构状态。

材料取下后，应迅速固定。

固定液数量应为病理组织块的 5 到 20 倍。

由于一般把组织块浸入固定液后数小时，固定液渗入组织液的深度只达 2 到 3 厘米。

因此，可以放置冰箱内固定，使组织内酶失去作用，细菌也能停止滋生。

最常用的固定液是 10%的福尔马林溶液：使用时，用 40%的甲醛饱和水溶液 10 毫升，加水 90 毫升配成。

三、冲洗固定后的组织块，应将固定液洗去。

骨骼肌组织石蜡切片注意事项

骨骼肌组织石蜡切片注意事项骨骼肌组织石蜡切片是一种常用的组织学研究方法，可以用于观察组织结构和细胞形态。

在进行骨骼肌组织石蜡切片时，需要注意以下几个方面：1.标本固定：首先，骨骼肌标本需要进行合适的固定，常用的固定方法有10%中性缓冲福尔马林（10%NBF）。

固定时间一般为2448小时，固定完后可进行去水化处理。

2.组织处理：进行骨骼肌组织石蜡切片前，需要对标本进行脱水和清除蜡处理。

脱水通常使用浓度递增的乙醇溶液，然后使用透明剂（如醋酸酯）将样本包埋在石蜡中。

3.块状切片：将固定好的骨骼肌标本从石蜡块中剥离出来，制作成适当大小的切片块。

切片块应尽量与肌肉纤维的走向垂直，以便观察纤维的纵横排列。

4.切片机械：使用尖锐刀片或者切片机械将标本制作成厚度约为46μm的切片。

切片机械的设置需要根据标本的硬度和组织的需求来进行调整。

5.干燥处理：将切片放置在温度适宜的烘箱中，使其迅速干燥。

切片完全干燥后，可进行染色和封片操作。

6.切片染色：根据需要，可以选择不同的染色方法对切片进行染色。

常用的方法包括范氏染色、血红蛋白染色和细胞核染色等。

7.质量检测：切片完成后，需要进行质量检测，如切片的完整性和染色效果等。

8.切片保存：完成质量检测后，将切片用透明胶带粘贴在载玻片上，然后使用适当的封片剂进行封片。

封片后的切片可以在常温下保存，并且应该储存在干燥、阴凉的地方。

总结起来，进行骨骼肌组织石蜡切片需要注意标本的固定、处理和染色等步骤，并且在整个过程中要保持标本的完整性和切片的质量。

只有这样才能获得准确可靠的骨骼肌组织切片，为后续的组织学研究提供可靠的基础。