原料中羟脯氨酸含量的测定
高效液相色谱法检测酱油中羟脯氨酸的含量
摘要 ： 实验建立 了柱前衍 生高效液相 色谱 分析 酱 油 中羟 脯氨 酸 （ ｙ ｒ ｘ ｐ ｏｉｅ Ｈｙ ） 量 的方 法 。样 ｈ ｄ ｏ ｙ ｒｌ ， ｐ 含 ｎ 品经 乙醇提取 ， ２ ４二硝基 氟苯 为衍 生试剂 ， 以 ，一 采用 Ｇ ｍｉｉ １ （． ×２ ０ｍｍ， ｍ） ｅ ｎ Ｃ ８ ４ ６ ５ ５ 色谱 柱 分 离， 检 测波长 为 ３ ０ｎ ６ ｍ。Ｈｙ ｐ质量 浓度 与其峰 面积 在 ｉ ￣３ ０ｍｇ Ｌ范围 内具有 良好 的线 性 关 系， 关 系数 ０ ２ ／ 相 为 ０ ９ ９ 。回收率为 ９ ． ９ ． ９２ ７ １ ％～１ Ｏ １ ， 出限为 ２ ５ｍｇ Ｌ。对 实际样品 中相 对 Ｈｙ １． ８ 检 ． ／ ｐ含 量 （ 示 为 表 每 克氨 态氮 中所含羟 脯氨酸 的毫克数） 进行 检 测发现 ， 纯酿 造酱 油在０ ６ ～１ ９ ／ ． ７ ． ３ｍｇ ｇ之 间， 酸水 解植
能区分酱 油 中是否 添加 酸水 解蛋 白液 。 关键词 ： 脯氨 酸 ； 油 ； 解动 物蛋 白； 羟 酱 水 高效液相 色谱 ； 测 检
中图分类 号 ： ２ ７ ３ ＴＳ ０ ． 文献标识码 ： Ｂ 文章 编号 ：ｏ Ｏ ９ ３ ２ １ ） ４ １ ６ ４ １ ０ 一９ ７ （Ｏ Ｏ ０ 一Ｏ Ｏ —０
ｒｖ ｔｚ ｄ ｗ ｔ ４ ｄ ｎｔｏ ｕ ｒ ｂｅ ｚ ｎ ．Ｃｈ ｏ ｔ ｇ ａ ｉｃ ｓｐａ ａｉｎ ｗａ ｅ ｏ ｍｅ ｔ ｍｉ ｉＣ１ ｏ ｕ ｉａ ｉｅ ｈ ２， － ｉ ｉｒ ｆ ｏ ｏ ｎ ｅ ｅ ｉ ｌ ｒ ｍ ｏ ｒｐｈ ｅ ｒ ｔｏ ｓ ｐ ｒ ｒ ｄ ｗ ｈ Ｇｅ ｎ ８ ｃ ｌ ｍｎ ａ ｆ ｉ
ＨＵ ｕ Ｈ ａ”，ＬＶ ｎ Ｄｉｇ ，ＤＵ ｎ Ｈ ＡＮＧ ｅ— ｕ ｎ 。 Ｑｉｇ ，Ｚ Ｗ ｉ ａ ｇ ，ＺＨＵ ｎ － ｏ ｇ ｇ Ｙｏ ｇ ｈ ｎ “ （ ． ｏ ｇ ｉｇＡｃ ｄ ｍ ｙｏ ｅｒ ｌｇ ｎ ａｉ ｎ ｐ ｃｉｎ，Ｎａｉｎ ｌ ｎ ｅ ｆＱｕ ｌ ｙＳ ｐ ｒ ｉｉｎ １ Ｃｈ ｎ ｑｎ ａ ｅ ｆＭ ｔｏｏ ｙ ａ ｄ Ｑｕ ｌ ｙ Ｉ ｓ ｅ ｔｏ ｔ ｔｏ ａ Ｃｅ ｔｒｏ ａｉ ｕ ｅｖ ｓ ｔ ｏ ＆ Ｉ ｓ ｅｔｏ ｒｃ ｌｕ ａ ｒ ｃ ｓ ｅ ｒ ｄ ｃｓａ ｄＣｏ ｄｍｅ ｔ ，Ｃｈ ｎ ｑｎ ０ ０ ０， ｉａ ｎ ｐ ｃｉｎ ＯｎＡｇ ｉｕ ｔ ｒ ｌ ｏ ｅ ｓ ｄ Ｐ ｏ ｕ ｔ ｎ ｎ ｉ ｎ ｓ Ｐ ｏ ｇ ｉｇ ４ ０ ２ Ｃｈｎ ；
4种鱼肉羟脯氨酸含量的测定-论文
４种鱼 肌 肉样 品的 羟脯 氨酸含 量测 定 方法参 照 Ｇ Ｂ ／ Ｔ ９ ６ ９ ５ ． ２ ３ ２ ０ Ｏ ８ ／ Ｉ Ｓ ０ ３ ４ ９ ６ ：１ ９ ９ ４ ［ 略作 修 改 。
１ ． ３ ． １ 标 准 曲 线 制 作
４种 鱼 肉羟 脯 氨 酸 含 量 的 测 定
张 延 华 ，马 国红 ，王爱 英 ，王 秉 利 ，许 鹏 （ 山东省淡水水产研究所， 山东 济南２ ５ ０ １ １ ７ ）
［ 摘 要］ 采 用 比色 法 对 草 鱼 （ Ｃ ｔ ｅ ｎ ｃ ｐ ｈ ａ ｒ ｙ ｎ ｇ ｏ ｄ ｏ ｎ ｉ ｄ ｅ ｌ ｌ ｕ ｓ ） 、鲤 鱼 （ Ｃ ｙ ｐ ｒ ｉ ｎ ｕ ｓ ｃ ａ ｒ ｐ ｉ ｏ ） 、鳙 鱼 （ Ａｒ ｉ ｓ ｔ ｉ ｃ ｈ ｔ ｈ ｙ ｓ
下 式计 算 ：
Ｘ 一 ６ ． ２５ ｃ （ ／ Ｔ ／ × Ｖ）
式 中 ：Ｘ 为试 样 中羟脯 氨酸 的含 量 ， ；ｃ为 由标 准 曲线得 到的试 样溶 液 中羟脯 氨酸 的浓 度 ，￣ ｇ ／ ｍｌ ；ｍ
为试样 质量 ，ｇ ；Ｖ 为从 ２ ５ ０ ｍｌ 容 量瓶 中 吸取滤液 的体 积 ，ｍｌ 。
１ ０ ｍｌ 硫 酸溶 液分 ３次洗 涤 烧瓶 和滤 纸 ，合并 至上 述容量 瓶 中 。用水定 容 ，摇匀 。
用移液 管 移 取 一 定 体 积 （ Ｖ） 的 水 解 产 物 至 ２ ５ ０ ｍｉ 容 量 瓶 中 ，定 容 后 羟 脯 氨 酸 的 浓 度 在 ０ ． ５ ～
２ ￣ ， ｇ ／ ｍｌ 之 间 。移 取 ４ ． ０ ０ ｍｌ 上 述 溶 液 于 比 色 管 中 ，加 入 ２ ． ０ ０ ｍｌ氯 胺 试 剂 ， 混 合 后 于 室 温 下 放 置
过氧化氢氧化法测定羟脯氨酸含量的研究
关 键词 ： 脯氨 酸 ； 原蛋 白； 氧化 氢 ； 化 羟 胶 过 优
中图分 类号 ：Ｓ １ Ｔ ５２
文献 标识 码 ： Ａ
文章 编号 ：６ １ １ ０ （ ０ ８ ０ － ０ ３ ０ １７ — ６ ２ ２ ０ ）８ ０ ４ － ４
Ｓ ｕｄ ｎ Ａｎａ ｙ ｉ ｆＨｙ ０ ｙ ０ ｉ ｅ ｗｉｈ ｈ ｏ ｏ ｅ Ｍ ｅ ｈｏ ｔ ｙｏ ｌ ｓｓｏ ｄｒ ｘ ｐｒ ｌｎ ｔ ｔ ｅ Ｄｉ ｘ ｇ ｎ ｔ ｄ
比色法是 一种 传统 Ｈｙ ｐ含量测 定法 ， 的操 作方 它
法简单 ， 对实验条件要求不高 ， 因此作为一种有效简
便 的方法 广泛 地被 实验 室 和临 床采 用 。 而在 比色法 中
４ ３
维普资讯
西 部 皮 革
第３ ０卷
常用 的是氯 胺一 Ｔ氧化法 ， 法存 在 以下 缺 点 ： 该 氧化 剂
通讯联系人引言羟脯氨酸是胶原蛋白所特有的氨基酸在胶原蛋白中含量约为定量测定胶原水解后的含量不仅可以分析组织和纯化样品中的胶原蛋白含量而且还可以用于监测胶原的临床代谢情况
维普资讯
３ ０卷 第 ｌ．１ ０ １ 期 ２０ ０ ８年 ９ 月
西
部
皮
革
Ｖｏ ＿０ Ｎｏ．０． ｌ３ １ １１
氧 化 剂 的 比 色法测 定 羟脯 氨 酸含 量 ， 广泛 使 用 的氯 胺 一 与 Ｔ氧化 法相 比更 为 简便 。对 显 色反 应 时 间 、 显 色反 应 温度 、 氧 化 氢 浓度 、 二 甲基 氨 基 苯 甲醛 浓度 等条 件 进 行 了优 化 ， 绘 制 了优 化 后 的标 过 对 且
品 中的胶原 蛋 白含 量 ， 而且 还 可 以用 于监测 胶 原 的临
乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定——L(-)-羟脯氨酸含量测定法
乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定法—L(-)-羟脯氨酸含量测定羟脯氨酸含量测定法1主题内容与适用范围本方法规定了乳与乳制品制品中L(-)-羟脯氨酸含量的测定方法。
本方法适用于乳与乳制品中L(-)-羟脯氨酸含量的测定。
本方法通过对L(-)-羟脯氨酸含量的测定，可判定是否为动物水解蛋白。
2 引用标准) --羟脯氨酸含量测定L(--)GB9695.23-90 肉与肉制品L(3 原理试样经酸水解,释放出羟脯氨酸。
经氯胺T氧化,生成含有吡咯环的氧化物。
用高氯酸破坏过量的氯胺T。
羟脯氨酸氧化物与对二甲氨基苯甲醛反应生成红色化合物,在波长558nm处进行比色测定。
4 试剂所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水或同等纯度的水。
4.1 氯化亚锡(GB638):0.75％溶液。
将氯化亚锡7.5g溶于500mL水中,再加入500ml浓盐酸(GB 622)。
4.2 盐酸(GB622):6mol/L溶液。
4.3 氢氧化钠(GB629);1mol/L、10mol/L溶液。
4.4 缓冲液:将50g柠檬酸,26.3g氢氧化钠和146.1g结晶乙酸钠(GB694)溶于水,稀至1L,此溶液与200mL水和300mL正丙醇混合。
4.5 氯胺T(HG3-972)溶液:将1.41g氯胺T,溶于10mL水中,依次加入10mL正丙醇和80mL缓冲溶液(用时现配)。
4.6 显色剂:称取10g对二甲氨基苯甲醛,用35mL高氯酸(GB623)溶解,缓慢加入65mL异丙醇。
4.7 L(-)-羟脯氨酸(C5H9NO3)标准溶液。
4.7.1 标准储备液500μg/mL:称取50.0mg/L(-)-羟脯氨酸用少量水溶解,加一滴6mol/L盐酸,定容至100mL容量瓶中。
4.7.2 标准工作液5μg/mL:吸取标准储备液5.00mL于500mL容量瓶中,定容。
5 仪器和设备5.1 实验室常规设备。
5.2 配有冷凝管的三角瓶:250mL。
5.3 恒温水浴。
猪皮中羟脯氨酸含量的测定
我 国是世界 肉类 生产 和消费大 国， ０４年全 国 肉 ２０ 类产 量 占世界总量 ２， ０万吨 的 ２． ５５ ７ ８１ ％，其 中当年猪 肉产量 占世界 １， ９万吨 的 ４ ． ００ ３ ６８ ％，居各种 肉类 产量 的第一位Ｌ。然而 ，猪 肉在 生产过程 中会 伴随产 生大 １ Ｊ
ｈｇ ｉｌｎ ｔ Ｔ ｅ ｖｒｇ ｃｖｒ ｔ ｏ Ｈ ｐｉ８ ． ％， ｄ ｅ ｖ ｒ ｅ ｏｔ ｔ ｆ ｙ ｉ ｓｉ ｉ２ ． ｍ￣ｇ Ｈ ｐｐｇ ｋｎ． ｉ ｙｅ ｉｇ ａ ． ｅ ｅｅｏ ｅ ｒ ｅ ｆ ｙ ５ ７ ａ ｅ ｇ ｎｅ Ｈ ｐｉｐｇ ｋｎ ｓ ３１ ｈ ｄ ｒ ｅｈ ａ ａ ｒ ｙ ａ ｓ ９ ｎ ｔ ａ ａ ｃ ｎｏ ｈ ｎ ８ （ ｙ ／ ｉ） ｉｓ
量猪 皮 。一 般猪 皮约 占胴体重 的 １％左右 ，对 于一个 ０
改善皮肤环境 ， 达到美容 的 目的。东汉名医张仲景在 《 伤
寒 论》中 曾详细记载 了猪皮具有“ 和气血 、润肌肤 、可美 容” 的功效 。猪 皮经 济实惠 ，制作简单 ，美容 效果明显，
故深 受人们欢迎 ，也正 因为猪 皮胶原蛋 白或 其分解物对 美容所起 的作 用，因此测定 其胶 原蛋 白的含 量和变化对 研 究猪皮 的功 能性具有重 要意义 。
（ ． ｈ ｎ ｈ ｉ ｏ ｄＲｅｅ ｒｈＩｓｉ ｔ， ｈ ｎ ｈ ｉ ０ ２ ５ Ｃ ｉａ ２ Ｓ ａ ｇ ａ ｏ ｓａｃ ｔｕｅ Ｓ ａ ｇ ａ ２ ０ ３ 。 ｈｎ ） Ｆ ｎ ｔ
Ａｂ ｔａ ｔ Ｃｏ ｌ ｅ ｉｈｉ ｉ ｉ ， ｉｈｉ ｄ ｌ ｓ ｄｉ ｏ ， ｄ ｃｎ ｎ ｏ ｍｅｉ ｄ ｓｒ ｒｉ ｎ ｑ ｅｓ ｕ ｔ ｒ ｄｂ ｏｏ ｉａ ｓｒ ｃ ： ｌ ｇ ｎｉ ｒ ｐｇ ｓ ｎ ｗｈｃ ｗｉ ｅｙｕ ｅ ｆ ｄ ｍｅ ｉｉ ｅ ｄｃ ｓ ｔ ｉ ｕ ｔ ｆ ｓ ｉ ｕ ｔ ｃｕ ｅ ａ ｓ ｃ ｎ ｋ ｓ ｎｏ ａ ｃｎ ｙ ｏ ｔｕ ｒ ｎ ａ ｉ ｌｇ ｃ ｌ
纯牛奶中动物水解蛋白L-羟脯氨酸含量测定
国
结 晶 乙 酸 钠 溶 于 水 ，稀释 至 １ Ｌ ，此 溶 液 与 ２ ０ ０ ｍＬ 水 和 光度 ； Ｐ为标准 曲线查得试样 吸光度对应浓度 （ｕ ｇ ／ ３ ０ ０ ｍＬ 正 丙醇 混 合 。
ｍＬ）；Ｍ为标准曲线斜率 ；Ｘ 为样品中Ｌ 一 羟脯氨酸的百
氯胺Ｔ 溶 液 ：将 １ ． ４ １ ｇ 氯胺Ｔ ，溶于 １ ０ ｍＬ 水 中 ，依 分含 量 （ ｍｇ ／ ｋ ｇ） ；Ｖ 为 水解 后定 容体 积 （ ｍＬ）；Ｖ ２ 为
含量是衡量动物胶原水解蛋白含量 的一个重要指标 】 。 本试验之所 以设计 为检测纯牛奶 中是否含有Ｌ 一 羟脯氨
１ ． ２ 试 剂 结 晶 乙酸 钠 、苯 酚 、柠 檬酸 、对 二 甲基苯 甲醛 、氯
国药 集 团化 学 试 剂 有 限公 司 ）；正 丙 醇 （ 永 大 化 酸 ，是 因其 为动 物胶 原 蛋 白中特 有成 分 ，而不 存在 于 乳 胺 Ｔ （ 金 鹿 化 工 有限 公 司 ）；盐 酪 蛋 白中 ，所 以一 旦 检 出 ，则可 认 为纯 牛奶 中含 有皮 革 学试 剂 有 限公 司 ）；高氯 酸 （
摘
要 ：为 建立一种 测定 纯牛奶 中Ｌ 一 羟脯氨 酸 的紫外分 光光度 法 ，本研 究首先优化 前 处理条件 ，然后 通过
紫外 分光光度 计选 出Ｌ 一 羟脯氨 酸 的最佳吸 收波 长 ，测 定其含 量 ，并进 行精 密度和加 标 回收率试 验 。结果显 示 ，待测组分线性 关 系良好 ，最低检 出限为０ ． ２ ｍｇ ／ ｋ ｇ 。相对标 准４ ＆￣ＲＳ Ｄ． ｇ Ｊ ０ ． ４ ８ ％￣ ０ ． ７ ７ ％，加标 回收率基本在 ９ ３ ． １ ３ ￣ ／ ｏ ＂ １ ０ ０ ． ５ ７ ％。本 方法灵敏 、准确 ，重复性好 ，样 品处理 简便 易行 ，Ｔｉ ｆ于纯牛奶 ｅ ｅ Ｌ 一 羟脯氨酸含 量测定。
羟脯氨酸含量检测试剂盒说明书
羟脯氨酸（HYP ）含量检测试剂盒说明书微量法货号：BC0255规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体200 mL×1瓶（自备）常温保存试剂一液体8 mL×1瓶4℃保存试剂二液体8 mL×1瓶4℃保存标准品液体0.5 mL×1支4℃保存溶液的配制：1.提取液：自备6 mol/L 盐酸，提供一个125mL 空瓶。
6 mol/L 盐酸的配制：浓盐酸（37%）和H 2O 的体积比是1：1。
2.标准品：0.5 mg/mL 羟脯氨酸标准品。
产品说明：HYP 是机体胶原蛋白主要成分之一，胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等，因此HYP 含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。
样本经水解产生游离的HYP ，进一步被氯胺T 氧化，氧化产物与对二甲氨基苯甲醛反应，产生红色化合物，在560nm 处有特征吸收峰。
通过测定样本水解液560nm 吸光值，可计算HYP 含量。
技术指标：最低检出限：0.057 μg/mL 线性范围：0.117-30 μg/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：天平、玻璃管、离心机、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、6mol/L 盐酸和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织：称取约0.2g 样本于玻璃管，将组织尽量剪碎以便消化，盖子稍松不密闭。
加入2mL 的提取液，煮沸或110℃烘箱2至6小时消化至没有可见大的团块，冷却后用10mol/L NaOH （约1mL ）调节pH 值至6-8范围内（不可过酸或过碱），再蒸馏水定容至4mL 。
最后16000rpm ，25℃，离心20min（若离心后仍有杂质，可通过过滤去除），取上清待测。
羟脯氨酸含量的测定方法优化
羟脯氨酸含量的测定方法优化
魏东;陈文慧
【期刊名称】《现代中西医结合杂志》
【年(卷),期】2005(014)018
【摘要】羟脯氨酸（hydroxyprolinc，HYP）是胶原蛋白所持有的氨基酸，测定HYP含量可明确胶原总体水平，评定纤维化病变程度。
氯胺T法是传统的经典HYP测定方法，其基本原理是：先把含有HYP多呔的组织或血清、腹水、尿液等水解成游离的HYP，游离的HYP再被氧化，与对-二甲氨基苯甲醛（PDAB）在一定温度下发生反应成红色的吡咯化合物，最后通过分光光度计比色，或其他的方法检测出水解液中HYP的含量。
【总页数】2页(P2479-2480)
【作者】魏东;陈文慧
【作者单位】云南中医学院,云南,昆明,650200;云南中医学院,云南,昆明,650200【正文语种】中文
【中图分类】R446
【相关文献】
1.UPLC-MS/MS法测定乳品中L-羟脯氨酸的含量 [J], 黄蓓蓓
2.柱前衍生化-HPLC法测定市售3种胶类药材中L-羟脯氨酸和胶原蛋白的含量[J], 王旭波;徐利丽;郑洁;李楠;沈玉萍;王智;韦波;杨欢
3.市售蔬菜亚硝酸盐含量的测定方法优化和在不同温度储存过程中亚硝酸盐含量的变化 [J], 温睿
4.小鼠肺组织羟脯氨酸含量测定的实验方法优化 [J], 陈以文; 盛春瑞; 刘珊珊; 宗晨钟; 董瑞娟; 葛东宇; 王淑艳; 李丽娜
5.生乳中L-羟脯氨酸含量测定的不确定度评定 [J], 李均;卢琳;魏磊
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羟脯氨酸含量国标 明胶含量
羟脯氨酸含量国标明胶含量一、引言羟脯氨酸和明胶是食品中常见的成分之一，其含量对于产品的质量和营养价值具有重要的影响。
本文将深入探讨羟脯氨酸含量国标和明胶含量的相关内容。
二、羟脯氨酸含量国标羟脯氨酸是一种非必需氨基酸，它在人体内具有重要的生理功能。
羟脯氨酸广泛存在于食物中，尤其是富含蛋白质的食物。
为了保证食品质量和消费者的健康，国家制定了羟脯氨酸含量的标准。
2.1 国标的制定羟脯氨酸含量国标是由相关的食品安全和标准化机构制定的。
制定国标的过程包括以下几个步骤： - 收集和分析相关的科学研究成果，了解羟脯氨酸在食品中的含量分布情况； - 根据营养需求和人体对羟脯氨酸的摄入量建立相应的指标； - 结合国内外相关标准，制定适用于国内食品的羟脯氨酸含量国标； - 定期进行检测和修订，以适应食品市场的发展和消费者需求的变化。
2.2 国标的重要性羟脯氨酸含量国标的制定对于食品行业具有重要的意义： 1. 保护消费者权益：国标可以确保食品中羟脯氨酸的合理含量，避免因过多或过少的摄入对消费者健康造成潜在风险。
2. 维护市场秩序：国标的制定可以规范食品行业的竞争环境，减少虚假宣传和欺诈行为，促进行业的健康发展。
3. 促进科学研究：国标的制定需要依据科学研究成果，推动相关领域的发展和创新，促进食品科学的进步。
三、明胶含量明胶是一种常见的食品添加剂，广泛应用于食品加工和制备过程中。
其含量对于制品的质地和口感具有重要影响。
3.1 明胶的来源明胶主要来源于动物的骨骼、皮肤、软组织等部位。
常见的明胶原料包括猪皮、牛骨、鱼鳞等。
在制备过程中，明胶会经过酸碱水解、脱色、过滤等步骤，得到纯净的明胶。
3.2 明胶的含量确定确定明胶含量的方法包括化学分析和物理测定两种。
化学分析方法主要是通过测定明胶中特定的成分含量来计算明胶的含量。
物理测定方法则是利用光散射、胶凝特性等原理进行测定。
3.3 明胶含量的影响因素明胶含量受多种因素的影响，包括原料的品质、加工工艺的不同等。
羟脯氨酸的测定方法
1羟脯氨酸含量测定2羟脯氨酸标准曲线绘制3试剂的配制【6-7】[6] 李秋营,姚汝琳.细胞中羟脯氨酸的测定.山西医科大学学报.2001,32(6):558-559[7] David J Etherington, Trevor J Sims. Detection and Estimation of Collagen[J]. J Sci Food Agric, 1981,32:539-546柠檬酸缓冲液：柠檬酸钠120g、冰醋酸12mL、柠檬酸46g、氢氧化钠34g 溶解于蒸馏水中，调整pH 值至6.0，然后定容至1000mL。
0.05mol/L 氯胺T 溶液：称取氯胺T 7.05g，溶解于100mL 蒸馏水中，然后加入乙二醇独甲醚150mL，再加入250mL 柠檬酸缓冲液混合均匀。
对二甲基氨基苯甲醛: 试剂 A：取无水乙醇20mL，慢慢加入浓硫酸2.74mL；试剂B：取对二甲基氨基苯甲醛12.0g，慢慢加入无水乙醇40mL，水浴加热使其完全溶解并冷却至室温，然后将A 液慢慢加入B，混合均匀。
3.5mol/L 高氯酸溶液：取27mL 高氯酸，以蒸馏水定容到100mL。
羟脯氨酸标准曲线的绘制羟脯氨酸标准储存液：准确称取L-羟基脯氨酸标准品50mg，加入0.01mol/L 盐酸中溶解，稀释并定容到100mL，在冰箱中保存。
羟脯氨酸标准工作液：吸取羟脯氨酸标准储存液10mL到50mL 容量瓶中，用蒸馏水定容到50mL(临用前配)，浓度为100μg/mL。
4标准曲线绘制分别吸取羟脯氨酸标准工作液1.0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5mL，用蒸馏水定容到50mL容量瓶中。
以蒸馏水为空白，分别吸取上述标准液1mL，加入1mL 柠檬酸缓冲液和1mL 0.05mol/L 氯胺T 溶液，室温(25 ℃) 氧化10min 后，加入高氯酸1mL(3.5mol/L)，放置10min，加入对二甲基氨基苯甲醛试剂1mL，在65℃水浴显色10min，冷却后在560nm处测吸光度。
羟脯氨酸的测定方法
1羟脯氨酸含量测定2羟脯氨酸标准曲线绘制3试剂的配制【6-7】[6] 李秋营,姚汝琳.细胞中羟脯氨酸的测定.山西医科大学学报.2001,32(6):558-559[7] David J Etherington, Trevor J Sims. Detection and Estimation of Collagen[J]. J Sci Food Agric, 1981,32:539-546柠檬酸缓冲液：柠檬酸钠120g、冰醋酸12mL、柠檬酸46g、氢氧化钠34g 溶解于蒸馏水中，调整pH 值至6.0，然后定容至1000mL。
0.05mol/L 氯胺T 溶液：称取氯胺T 7.05g，溶解于100mL 蒸馏水中，然后加入乙二醇独甲醚150mL，再加入250mL 柠檬酸缓冲液混合均匀。
对二甲基氨基苯甲醛: 试剂 A：取无水乙醇20mL，慢慢加入浓硫酸2.74mL；试剂B：取对二甲基氨基苯甲醛12.0g，慢慢加入无水乙醇40mL，水浴加热使其完全溶解并冷却至室温，然后将A 液慢慢加入B，混合均匀。
3.5mol/L 高氯酸溶液：取27mL 高氯酸，以蒸馏水定容到100mL。
羟脯氨酸标准曲线的绘制羟脯氨酸标准储存液：准确称取L-羟基脯氨酸标准品50mg，加入0.01mol/L 盐酸中溶解，稀释并定容到100mL，在冰箱中保存。
羟脯氨酸标准工作液：吸取羟脯氨酸标准储存液10mL到50mL 容量瓶中，用蒸馏水定容到50mL(临用前配)，浓度为100μg/mL。
4标准曲线绘制分别吸取羟脯氨酸标准工作液1.0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5mL，用蒸馏水定容到50mL容量瓶中。
以蒸馏水为空白，分别吸取上述标准液1mL，加入1mL 柠檬酸缓冲液和1mL 0.05mol/L 氯胺T 溶液，室温(25 ℃) 氧化10min 后，加入高氯酸1mL(3.5mol/L)，放置10min，加入对二甲基氨基苯甲醛试剂1mL，在65℃水浴显色10min，冷却后在560nm处测吸光度。
高效液相色谱法测定奶粉中羟脯氨酸含量
白列入《 品 中可 能 违法 添 加 的非 食用 物质 和 易 滥 食
用 的食 品添 加剂 品种名 单 》 第二 批 ） （ 。
等 。其 中邻 苯二 甲醛 只能 与 一 级氨 基 酸 反应 ， 甲 氯 酸芴 甲酯和 丹酰氯 均存 在个 别氨 基酸衍 生产 物不 稳
定 问题 ， 硫 氰 酸 苯 酯 胱 氨 酸 线 性 不 好 ， 量 不 准 异 定 确 ， 量衍生 试剂 会缩 短 色谱 柱 寿命 。２ ４ 二 硝 基 过 ，一 氟苯 具有衍 生产 物稳 定 ， 量结 果准确 ， 谱柱 寿命 定 色 长等 优点 ， 其不 足之处 是毒 性较 大 ， 验过 程 中需 特 试
确 等优点 已经 广泛用 于 羟脯氨 酸 的分析 。 目前 常用 氨基 酸衍 生试剂 有 ２ ４ 二 硝基 氟苯 、 ，一 邻 苯二 甲醛 、 甲酸 芴 甲酯 、 氯 异硫 氰 酸 苯 酯 、 酰 氯 丹
废 料 加 以水 解 ， 经 过粗 加 工 制 成 。 由于 皮革 制 作 再
工艺 复杂 ， 生产 过程 中会 引人大 量有 害物 质 ， 色过 染
羟 脯 氨 酸 含 量 测 定 的 要 求 ， 以作 为 判 断 奶 粉 中是 否 违 禁 添 加 皮 革 水 解 蛋 白 的依 据 。 可
关键词 羟脯氨酸
皮革水解蛋 白 柱前衍生 高效液相色谱
近 几年 ， 内有 些乳 制 品生 产企 业 违 禁 向乳 及 国 乳 制 品 中添加 皮革 水解 蛋 白 ， 以提高蛋 白质 含量 ， 引
２ ６
分 析 仪 器
２１ 年第２ ０２ 期
乳和乳制品中动物水解蛋白鉴定——比色法测定L(-)-羟脯氨酸含量
ｈ ｄ ｏｙ ｅ ｔ 一）ｈ ｏ ｙ ｒ ｌ ｅａｔｒ６ｈｏ ｙ ｏｙ ｉ ａ ｙ ｌｚ ｄｉ ｏＬ（ 一ｒ ｘ ｐ ｏｉ ｆｅ ｆ ｄ ｌｓｓｔ １ ０℃． ｈ ｔｂ ｌｙ ｒｐ ｏ ｕ ｉｉｔ ｄ ｓ ｉｅｒｃ ｖ ｒ ｆ ｅ ｒ ｎ ｎ ｈｒ １ Ｔ ｅｓａ ｉｔ ， ｅ ｒ ｄ ｃｂｌ ｙａ ｐｋ ｅ ｏ ｅｙｏ ｉ ｉ ｎ ｈ ｔ
ｈ ｄ ｏｙ ｅ ｎｍａ ｒ ｔｉ ｒ ｓｎ ｌ ｎ ｌ ｒ ｄ ｃｓ Ｍｅｈ ｄ ： 一） ｏ ｙ ｒ ｌ ｅｗａ ｌａｅ ｏ ｓｍｐｅ ｅｔｄ ｙ ｒｌｚ ｄａ ｉ ｌ ｏｅｎｉ ｐｅ ｅ ｔｎｍｉ ａ ｄｍｉ ｐ ｏ ｕ ｔ． ｔｏ ｓ ｐ ｓ ｉ ｋ ｋ （ 一 ｘ ｐ ｏｉ ｓ ｅｅ ｓ ｄｆ ｍ ａ ｌｓ ｒａｅ Ｈｒ ｎ ｒ ｒ ｔ
（． 苏省产 品质量监督检验研究 院，江苏 南京 １ 江 摘
比色 法
２ ０ ２ ；２宿迁市产品质量监督检验所，江苏 宿迁 １０９ ．
２３ ０） ２ ８ ０
要 ： 目的：研究乳和乳制 品中动物 水解 蛋 白的鉴定方法 。通 过对 Ｌ 一 一 （ ） 羟脯氨酸 的检测来鉴定是否含有动物 水
解 蛋 白。方法 ：样 品经酸水 解 ，释放 出羟脯 氨酸 。经 氯胺 Ｔ氧 化 ，生成含 有吡 咯环 的氧 化物 。用 高氯酸破 坏过 量 的氯胺 Ｔ。羟脯 氨酸氧化物 与对 二 甲氨基苯 甲醛反应 生成 红色化合 物 ，在波 长 ５ ８ ｍ 处进 行 比色测定 。结果 ： ５ｎ 动物水解 蛋 白在 １ ＯＣ条件下水解 ６ Ｉ￣ ｈ后，能够充分水解 为 Ｌ 一 ． 脯氨酸 。以Ｌ 一 一 （ ）羟 （ ） 羟脯氨酸 为标样 ，比色 法测 定 乳制 品中 Ｌ 一 ． （ ） 羟脯氨酸含量 。该方法 的加 标回收率为 ９ ．％～ １ ４６ ９６ ０ ．％，满足分光光度法 分析方法 的实验需求 。 关键 词 ：动物 水解 蛋 白；Ｌ 一 一 脯氨 酸 ；水解 ； 比色 （ ）羟
羟脯氨酸测定原理
羟脯氨酸测定原理羟脯氨酸（Hydroxyproline）是一种非常重要的氨基酸，在胶原蛋白中占有重要地位。
羟脯氨酸的含量可以作为评估胶原蛋白合成和降解的指标，因此，羟脯氨酸的测定具有重要的临床意义。
本文将介绍羟脯氨酸测定的原理及其应用。
羟脯氨酸的测定原理主要基于其与酚类物质反应生成紫色化合物的特性。
一般情况下，羟脯氨酸的测定方法主要有两种：色素法和高效液相色谱法。
色素法是羟脯氨酸测定的常用方法之一。
其原理是在碱性条件下，羟脯氨酸与酚类试剂发生缩合反应，生成有色产物。
这种反应是一种氧化还原反应，需要存在氧化剂的存在，常用的氧化剂有次氯酸钠和过氧化氢。
在碱性条件下，羟脯氨酸与酚类试剂发生缩合反应，生成的产物可以通过分光光度计测定其吸光度，从而计算出羟脯氨酸的含量。
高效液相色谱法是羟脯氨酸测定的另一种常用方法。
该方法利用高效液相色谱仪对样品进行分析。
在该方法中，首先将样品中的羟脯氨酸与特定的试剂进行反应，生成具有荧光的产物。
然后，将反应产物注入高效液相色谱仪中进行分离和检测。
通过测定峰面积或峰高的方式，可以计算出羟脯氨酸的含量。
羟脯氨酸的测定方法在临床和科研领域有着广泛的应用。
在临床上，羟脯氨酸的测定可以用于评估胶原蛋白合成的情况，对于一些与胶原蛋白代谢相关的疾病的诊断和治疗具有重要意义。
此外，羟脯氨酸的测定方法还可以用于评估食物中胶原蛋白的含量，对于食品安全和质量控制也有一定的应用价值。
在科研领域，羟脯氨酸的测定方法可以用于胶原蛋白的合成和降解研究。
通过测定羟脯氨酸的含量，可以评估胶原蛋白的合成速率和降解速率，进而研究胶原蛋白的代谢机制。
此外，羟脯氨酸的测定方法还可以用于评估某些药物对胶原蛋白合成和降解的影响，为新药的研发提供参考依据。
总结起来，羟脯氨酸是一种重要的氨基酸，在胶原蛋白代谢中起着关键作用。
羟脯氨酸的测定可以通过色素法和高效液相色谱法等方法进行。
这些方法不仅在临床上有着重要的应用价值，还在科研领域中发挥着关键作用。
乳制品中L-羟脯氨酸的测定
乳制品中L-羟脯氨酸的测定1 引言皮革水解蛋白是由皮革废料或动物皮毛、脏器等水解生成的一种蛋白粉，将其掺入牛奶或奶粉中可提高蛋白质的含量。
对于乳与乳制品中皮革水解蛋白的鉴定，主要是通过对L-羟脯氨酸含量的测定。
L-羟脯氨酸是胶原蛋白（皮革水解蛋白）特有的氨基酸，在乳酷蛋白中则没有，所以一旦检出，则可认为含有皮革水解蛋白，即为“皮革奶”。
本实验提供两种L-羟脯氨酸衍生方法，利用氨基酸分析柱，对L-羟脯氨酸进行分析检测，可根据实际情况进行选择。
2 仪器与试剂2.1 仪器、器皿2.1.1 HPLC+紫外检测器2.1.2 Diamonsil AAA氨基酸分析柱（CAT#: 99751）。
2.1.3 11 mL水解瓶（CAT#: 55354）2.1.4 1.5 mL塑料离心管。
2.1.5 20 mL玻璃具塞刻度试管。
2.1.6 5 mL玻璃具塞刻度试管。
2.1.7 0.22 μm针式过滤器（CAT#:37177）。
2.1.8 2 mL样品瓶（瓶：CAT#:5323，盖CAT#:5325）2.2 试剂2.2.1 甲醇（CAT#:50102）。
2.2.2 乙腈（CAT#:50101）2.2.3 正己烷（CAT#:50115）2.2.3 三乙胺（CAT#:50131）2.2.4 冰醋酸（CAT#:50132）2.2.5 三乙胺（CAT#:50131）2.2.6 磷酸氢二钠（CAT#:50158）2.2.7 磷酸二氢钠（CAT#:50157）2.2.8 L-羟脯氨酸（CAT#:46587）2.2.9 蛋白水解试剂：称取0.1 g苯酚置于100 mL容量瓶，加入50 mL浓盐酸（36%-38%，摩尔浓度约为12 mol/L），然后加水定容至100 mL。
2.2.10 0.1 mol/L HCl水溶液：量取8.3 mL浓盐酸，然后用纯水定容至1000 mL。
2.2.11 衍生剂PITC溶液：将250 μL异硫氰酸苯酯（PITC）用乙腈定容至10 mL。
人工养殖鲟鱼皮中羟脯氨酸含量的测定
作者简介 ： 户业丽 （９ ３ ， 汉 ） 副教 授 ， １６ 一）女（ ， 硕士 ， 主要从 事医药 中 间体的合成 、 中草药活性 成分的分 离、 纯化等工作 。
◆ ● ● ● ● ｉ◆ ｉ ● ● ｉ● Ｉ ｉ◆ ｉ ● ｉ ｌ◆ ● ◆ ● ｔ● ● ● ● ◆ ● ◆ ● － ●
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羟脯氨酸(HYP)检测
羟脯氨酸（HYP）检测
羟脯氨酸（Hydroxyproline，HYP）是亚氨基酸之一，是一种非必需氨基酸，是胶原组织的主要成分之一，且为胶原中特有的氨基酸。
利用羟脯氨酸在胶原蛋
白中含量最高这一特点，通过血液和尿液对羟脯氨酸的测定，可了解体内胶原
蛋白分解代谢情况，即可作为结缔组织分解情况指标。
此外，测定羟脯氨酸也
是了解骨吸收、骨代谢情况的指标。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和液质联用(LC-MS)法，可高效、精准的检测羟脯氨酸的含量变化。
此外，我们还提供其他氨基酸及其代谢物检测服务，以满足您的不同需求。
HPLC和LC-MS测定羟脯氨酸样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报
告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 羟脯氨酸含量信息
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
LC-MS氨基酸测定项目样本报告，点击查看>。
MM FS CNG 肉 肉制品 羟脯氨酸
将 １．４１ｇ 氯胺 Ｔ 溶于 １０ ｍＬ 水中 依次加入 １０ ｍＬ 正丙醇和 ８０ ｍＬ 缓冲溶液（用 时现配） ３．１．６ 显色剂
ｍ—称取试样的质量 ｇ
Ｖ１—从 ２００ｍＬ 容量瓶中吸取滤液的体积 ｍＬ
ｇ
结果精确到 ０．０１
６ 允许差
同一分析者同时或相继进行的两次测定结果之差不得超过平均值的 ５
７ 来源
中国国家标准 ＧＢ ９６９５．２３ ９０
国际标准 ＩＳＯ ３４９６ １９７８ 肉和肉制品中 Ｌ（ ）－羟脯氨酸含量的测定
取不同浓度的上述溶液 ４．００ｍＬ 分别加入 ２０ ｍＬ 具塞试管中 加氯胺 Ｔ 溶液 ２ｍＬ
摇匀后于室温放置 ２０ｍｉｎ 加入显色剂 ２ｍＬ 摇匀 塞上塞子于 ６０ 试管加热器（或
恒温水浴）中保温 ２０ｍｉｎ 后取出 迅速冷却 在波长 ５５８ 试样测定
称取试样 ５ｇ（精确至 ０．００１ｇ）放入 ２５０ｍＬ 磨口三角瓶中 注意不要使样品粘在壁 上 加几粒沸石 加入氯化亚锡溶液 １００ｍＬ 置于水浴上加热回流 １６ ｈ 趁热将水
解溶液过滤于 ２００ｍＬ 容量瓶中 用 ６ｍｏｌ／Ｌ 热盐酸 １０ｍＬ 反复三次冲洗三角瓶和滤纸
冷却 用水定容到刻度 混匀 吸取 ５ ２５ｍＬ（Ｖ１）水解液于 １００ｍＬ 烧杯中 用 １０ｍｏｌ／Ｌ １ｍｏｌ／Ｌ 氢氧化钠溶液调节 ｐＨ 为 ８ ０．２ 过滤于 ２５０ｍＬ 容量瓶中 用 ３０ｍＬ 水冲洗烧
称取１０ｇ对二甲氨基苯甲醛 用３５ ｍＬ 高氯酸溶解 缓慢加入６５ ｍＬ异丙醇 ３．１．７ Ｌ（ ）－羟脯氨酸（Ｃ５Ｈ９ＮＯ３）标准溶液 ３．１．７．１ 标准储备液 ５００ ｇ／ｍＬ
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原料中羟脯氨酸含量的测定
1.材料和试剂
1.1材料
秦宝雪花牛牛蹄筋：陕西秦宝牧业有限责任公司。
秦宝普通育肥牛、雪花牛肺：陕西秦宝牧业有限责任公司。
秦宝雪花牛棒骨：陕西秦宝牧业有限责任公司。
1.2试剂
所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或去离子水，或相同浓度的水。
1.2.1硫酸溶液[c(H2SO4)≈3mol/L]
量取750mL水于2L的容量瓶中，在搅拌下缓慢加入320mL浓硫酸（ρ20=1.84g/mL）。
冷却至室温后用水定容。
1.2.3缓冲溶液（PH=6.8）
包括下列组分：
a）26.0g一水柠檬酸（C6H8O7·H2O）；
b）14.0g氢氧化钠；
c）78.0g无水乙酸钠[Na(CH3CO2)]。
用500mL水溶解上述试剂并转入1L的容量瓶中，加入250mL 正丙醇，用水定容。
该溶液于4℃暗处可稳定保存几周。
1.2.4氯胺T溶液
称取1.41g三水·N-氯-对甲苯磺酰胺钠盐（氯胺T），用100mL 缓冲溶液溶解。
临用前配制。
1.2.5显色剂
称取10.0g对甲氨基苯甲醛，用30mL高氯酸溶液[70%（质量分数）]溶解，缓慢加入65mL异丙醇。
临用前配制。
1.3羟脯氨酸标准溶液
1.3.1标准储备液
称取50mg4-羟基-α-吡咯甲酸（羟脯氨酸）于100mL容量瓶中，用水溶解，加一滴硫酸溶液（1.2.1），用水定容。
该溶液于4℃下可稳定存放1个月。
1.3.2标准工作液
移取5.00mL上述标准储备液至500mL容量瓶中，用水定容。
分
别吸取该溶液10.00mL、20.00mL、30.00mL、40.00mL于100mL容量瓶中，用水定容，所得标准工作液浓度一次为0.5µg/mL、1.0µg/mL、
1.5µg/mL、
2.0µg/mL。
临用前配制。
2.仪器和设备
3.试样制备
用刀将原料在冷冻时（0℃以下）切成小块（约0.5cm3，边长约为8mm）。
将切好的试样装入密封样品盒中，或用耐热塑料袋真空包装，70℃以上保温30min后，冷却。
用绞肉机将试样均质。
将试样装入密封的容器里，防止变质和成分变化。
试样应在均质化后24h内尽快分析。
4.分析步骤
4.1试样
称取4g试样（精确至0.001g）于烧杯中，避免试样粘在烧杯壁上。
4.2水解
4.2.1量取30mL±1mL硫酸溶液，加入烧杯中，用培养皿盖住，于105℃干燥箱内恒温16h。
4.2.2趁热将水解产物转移至250mL容量瓶中。
用10mL硫酸溶液分三次洗涤烧杯，合并至上述容量瓶中。
用水定容，摇匀。
然后将其过滤至三角瓶中。
4.3测定
4.3.1用移液管移取5mL的上述滤液至250mL容量瓶中。
4.3.2移取4.00mL上述溶液于比色管中，加入2.00mL氯胺T试剂，混合后于室温下放置20min±1min。
4.3.3加入2.00mL显色剂于比色管中，充分混合，用塞子将比色管封
口。
4.3.4将比色管迅速放入60℃水浴中，加热20min。
4.3.5取出比色管，用流动水冷却比色管至少3min，在室温下放置30min。
4.3.6空白测试
用水代替稀释溶液，重复4.3.2至4.3.5的操作。
后于558nm±2nm 处用分光光度计测定吸光度值。
4.3.7从4.4所得标准曲线查得水解产物中羟脯氨酸的含量。
4.4标准曲线
4.4.1用4.00mL羟脯氨酸标准工作液一次代替稀释后的水解产物，进行4.3.2至4.3.6的操作。
4.4.2以标准工作液的吸光度为纵坐标，以相应的浓度为横坐标，绘制标准曲线。
管号0 1 2 3 4 标品L羟脯氨酸含量（ug/ml）0 0.5 1.0 1.5 2.0
0.457
吸光度值（A）0 0.121 0.232 0.232
试样中羟脯氨酸的含量按下式计算：
X=6.25c/（m×V）
式中：
X —试样中羟脯氨酸的含量，%；
c —由标准曲线得到的试样溶液中羟脯氨酸的浓度，单位为微克每毫升（µg/mL ）；
m —试样质量，单位为克（g ）；
V —从250mL 容量瓶中吸取滤液的体积，单位为毫升（mL ）； 计算结果保留至小数点后两位。
6.实验结果
试验 羟脯氨酸含量（%）
范围（%） 1肺11625 0.3102
0.2911～0.3860
2肺11626 0.3373 1肺5865 0.3860 2肺5866 0.3334 1肺5840 0.2911 2肺5840 0.3406
0.2920～0.4293 1肺9804 0.2922 2肺9804 0.3700 1肺9828 0.2989 2肺9828 0.3308 1肺9836 0.3162 2肺9836 0.3831 1肺7953 0.4285 2肺7953 0.4293 1肺7975 0.3405 2肺7975 0.2920 1肝脏9836 0.0518
0.0518~0.0642 2肝脏9836 0.0642 1蹄筋 1.3146
1.3146~1.3627
2蹄筋 1.3627 棒骨
1.3577
1.3577 7.讨论
原料胶原蛋白的含量
猪皮[2]荣昌成猪74.12%±0.99 荣昌乳猪66.78%±0.36
鸡肉[3]农家饲养的土鸡0.22%市场购买后再于农家饲养0.15%鱼皮[5]鱿鱼皮0.823% 狗鲑鱼皮2.247%
牛皮[1]26%
林蛙皮[4]26%
猪肺[6] 3.08%±0.12
原料羟脯氨酸的含量
猪皮[7]23.18mg/g
8.参考文献
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[2] 刁雪洋, 2010. 猪皮胶原蛋白提取及理化特性的研究. 西南大学硕士学位论文.
[3] 罗凤莲,夏延斌,欧阳建勋,王燕,夏晓凤.分光光度法测定鸡肉中的羟脯氨酸含量.食品科技,2010, 35(1): 122-124.
[4] 郑淼,周亚丹,赵敏.东北林蛙皮中胶原蛋白含量的测定及提取工艺.东北林业大学学报,2008,36(7): 81-83.
[5] 郭恒斌,曾庆祝,闫磊,王毳. 分光光度法测定鱼皮中的羟脯氨酸含量.现代食品科技,2007,23(7):81-83.
[6] 李小勇, 2007. 猪肺中胶原蛋白的提取及理化特性研究. 西南大学硕士学位论文.
[7] 蓝蔚青,王川,李燕,方欣,王庆红,周培根.猪皮中羟脯氨酸含量的测定.中国食物与营养,2006, (10)：38-40.。