人工培养云南冬虫夏草菌粉的抗炎效果的动物实验研究

昆明医学院学报2009，（2）：36~39

Journal of Kunming Medical University

CN 53-1049/R

论

著

人工培养云南冬虫夏草菌粉的抗炎效果的动物实验研究

王峰1），王玲2），张才军2），李冰雪1

）

（1）云南医学高等专科学校免疫与病原生物学教研室，云南昆明650031；2）昆明医学院免疫与病原

微生物教研室，云南昆明650031）

［摘要］目的研究人工培养云南本土冬虫夏草菌粉（YNCS ）在ICR 小鼠体内的抗炎效果．方法ICR 小

鼠随机分组，每日用不同剂量的YNCS 灌胃，观察YNCS 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响和对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响，以判断YNCS 的抗炎效果．结果YNCS 低、中、高剂量对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀有显

著抑制作用（

P ＜0.05），但对小鼠腹腔毛细血管通透性影响不明显．结论YNCS 具有一定抑制肿胀的抗炎效

果．

［关键词］冬虫夏草；抗炎；ICR 小鼠；云南

［中图分类号］R285.5［

文献标识码］A ［文章编号］1003－4706（2009）02－0036－04Ant i-inflammat ion Effect s of Yunnan Cor dyceps Sinensison

WANG Feng 1），WANG Ling 2），ZHANG Cai-Jun 2），LI Bing-Xue 1

）

（1）Dept.of Microbiology and Immunology of Yunnan Medical College ，Yunnan Kunming 650031；2）Dept.of Microbiology and Immunology ，Kunming Medical University ，Kunming Yunnan 650031，China ）

［Abstract ］Objective To study the anti-inflammatory effects of cultured Yunnan Cordyceps sinensis （YNCS ）in ICR mice ．Methods Different dosages of YNCS were intragastriced to ICR mice every day which were randomly divided into several groups ．The YNCS effect were observed in swelling of mouse pinnea caused by dimethylbenzene and capillary vessel penetrating experiment ，in order to study YNCS anti-inflammatory effects ．Results Various doses of YNCS inhibited the swelling of mouse pinnea degree of ICR mice （P ＜0.05），but YNCS had no significant effect on capillary vessel penetrating ．Conclusion YNCS has anti-inflammation effects to some extent.

［Key words ］Cordyceps Sinensison ；Anti-inflammation ；ICR mouse ；Yunnan ［基金项目］云南省教育厅基金资助项目（07C41064）

［作者简介］王峰（

1978～），女，云南文山州人，硕士，讲师，主要从事医学免疫学和病原生物学教学和科研工作．冬虫夏草系麦角菌科冬虫夏草寄生在蝙蝠娥科昆虫幼虫的子座及幼虫尸体的复合物，主要产于海拔4000～5000m 的高山中，是一种名贵中药材．我国传统中医认为：冬虫夏草性味甘、平，入肺经，功能益肺肾，止咳嗽，补虚损、益精气，是一味滋补强壮的常用中药材[1]．现代医药学研究表明，冬虫夏草化学成分复杂：含有虫草多糖

（cordyceps polysacchride ，CP ）、氨基酸、甘露醇

及多种微量元素等成分[2]，能发挥抗肿瘤、抗衰老、降血糖、降血压、抗炎、免疫调节等多种功能．但由于天然虫草产地特殊，加之掠夺性开采，导致天然虫草产量有限，价格昂贵．目前人工开发冬虫夏草有效成分的主要途径是液态发酵法，经人工培养虫草菌丝易于得到，价格低廉，其有

效成分及药效接近于天然虫草[3]．近年来，大量实验研究证实，人工培养冬虫夏草对机体免疫功能有剂量依赖性的免疫调节作用．在中药药理学研究中发现，对免疫反应具有抑制或增强等调节作用的一类药物对炎症反应有抑制作用，中药抗炎对抗与免疫密切相关的炎症反应过程，是其抗炎免疫活性药理作用的表现．国内学者的实验研究也有报道人工培养冬虫夏草具有一定的抗炎作用．不同产地的天然冬虫夏草菌株，所发酵生产的虫草菌丝有效成分各不一样，导致其所发挥药效也各不一样．为了解人工培养云南虫草菌粉对小鼠的抗炎作用，本研究选取云南大学微生物研究所云微科贸公司研发培养的云南本土蝙蝠蛾拟青霉菌株冬虫夏草菌粉（yunnan cordyceps sinensis，YNCS）进行抗炎实验研究，通过观察YNCS对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响和对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响，了解YNCS的抗炎效果．

1材料与方法

1.1实验动物

健康ICR小鼠，体重（20±2）g，购自昆明医学院云南省天然药物药理重点实验室，随机分3组：生理盐水对照组；YNCS组：分高剂量3.0g/ (kg.d)、中剂量1.5g/(kg.d)和低剂量0.75g/(kg.d)；地塞米松组1.5g/(kg.d)．给药期间每组均正常饮食及给水．

1.2主要药品及试剂

云南虫草菌粉（yunnan cordyceps sinensis，YNCS），由云南大学微生物研究所云微科贸公司提供，药物为粉状，以生理盐水溶解配成高剂量组（1.2g/mL）、中剂量组（0.6g/mL）、低剂量组（0.3g/mL），均为现配现用．地塞米松磷酸钠注射液（dexa me thasone sodium phosphate Injection），浙江仙琚制药股份有限公司产品，国药准字H33020827，5mg×10支，产品批号: 050308．生理盐水（NS），昆明南疆制药有限公司产品；二甲苯，重庆南方化学试剂厂产品；伊文思蓝（Evans blue），中国医药公司北京采购供应站提供；醋酸，广东汕头新宁化工厂产品．

1.3主要试验仪器

岛津公司产电子天平；722型光栅分光光度计（上海第三分析仪器厂出品，Q/YXLH4-92型）；8mm口径金属打孔器．

1.4试验方法

1.4.1YNCS对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响ICR小鼠60只，雄性，体重（20±2）g，随机分成上述5组，每组12只．将各组所需药物用NS 稀释，每日0.5mL灌胃（ig）给药每天1次，连续给药5d，最后1次给药45min后用微量吸样器吸取100%二甲苯（50μL/只），均匀涂于小鼠右耳双面，15min后脱颈处死．立即用直径8mm 的打孔器沿左右耳廓相同部位打孔取下圆形耳片，电子天平分别称重，以两耳片重量差值作为肿胀程度指标[4]．

1.4.2YNCS对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响

ICR小鼠60只，雌雄各半，体重（20±2）g，随机分成上述5组，每组12只，雌雄各6只．将各组所需药物用NS稀释，每日0.5mL灌胃1次，连续给药5d，最后1次给药后45min，尾静脉注射0.5%伊文思蓝0.2mL/只（0.1mL/10g）后及时腹腔注射0.7%醋酸0.2mL/只，15min后脱颈处死动物，腹腔注射NS5mL，轻揉后抽取腹腔液离心，上清液于722型分光光度计测定（OD610nm）[5]．

1.5统计学处理

实验数据以均数±标准差（x±s）表示，采用SPSS统计软件进行单因素方差分析，各组间两两比较采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义．

2结果

2.1YNCS对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响

结果显示：地塞米松组和YNCS低、中、高剂量组小鼠耳廓肿胀度低于NS对照组小鼠（P＜0.05），YNCS低、中、高剂量组间的抑制肿胀程度无明显差异，见表1．

2.2YNCS对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响

结果显示：地塞米松组有显著抑制小鼠腹腔毛细血管通透性作用（P＜0.01）．但YNCS用药组与NS组相比无显著差异性，说明YNCS对小鼠腹腔毛细血管通透性影响不明显，见表2．

人工培养云南冬虫夏草菌粉的抗炎效果的动物实验研究37第2期