小新月菱形藻藻种培养
小新月菱形藻生长条件及半连续培养条件研究
小新月菱形藻生长条件及半连续培养条件研究李炳乾;刘颖芬;刘洪岩;辛乃宏;尹卫强【期刊名称】《水产科技情报》【年(卷),期】2012(39)2【摘要】为研究温度、光照和营养盐对小新月菱形藻生长的影响,设计了5个温度,3个光照度,各种营养盐各4个浓度以及6个更新率,进行了小新月菱形藻的培养试验.结果表明:小新月菱形藻的最佳生长温度为15～20℃,最佳光照度为5000 lx,氮、磷、硅、铁的最佳浓度依次为300、15、120、1.575 mg/L；当温度高于30℃或者光照度大于10000 lx时,小新月菱形藻均不能生长.对小新月菱形藻进行半连续培养条件的研究发现,小新月菱形藻在6个不同的更新率(25％、30％、35％、40％、45％和50％)条件下均能完成半连续培养.根据不同更新率下的细胞密度和实际生产中的培养密度,建议采收率在40％～45％.【总页数】4页(P55-58)【作者】李炳乾;刘颖芬;刘洪岩;辛乃宏;尹卫强【作者单位】中盐制盐工程技术研究院,天津300450;天津滨海索尔特生物技术中心,天津300450;中盐制盐工程技术研究院,天津300450;天津滨海索尔特生物技术中心,天津300450;中盐制盐工程技术研究院,天津300450;中盐制盐工程技术研究院,天津300450;天津滨海索尔特生物技术中心,天津300450;中盐制盐工程技术研究院,天津300450【正文语种】中文【相关文献】1.中肋骨条藻和新月菱形藻对营养盐的吸收速率及环境因素影响的研究 [J], 李铁;史致丽;仇赤斌;王巧玲2.新月菱形藻的光生物反应器半连续培养 [J], 孙利芹;任莉红;王长海3.2种培养方式对小新月菱形藻生长及菌群结构的影响研究 [J], 唐亚鹏; 王瑞旋; 黄建华; 杨丽诗; 江世贵; 林黑着; 王国福4.密封袋半连续培养新月菱形藻 [J], 王彩理;任建国5.长菱形藻(Nitzschia longissima)和新月细柱藻(Cylindrotheca closterium)分子分类研究 [J], 李海涛;杨官品;石媛嫄;吴岁寒;孙颖因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
新月菱形藻（Nitzschia closterium）增殖速度与培养密度关系的初步研究
新月菱形藻（Nitzschia closterium）增殖速度与培养密度
关系的初步研究
张胜利
【期刊名称】《水产科学》
【年(卷),期】1994(13)4
【摘要】本文对新月菱形藻（Ｎｉｔｚｓｃｈｉａｃｌｏｓｔｅｒｉｕｍ）不同
培养规模（一、二、三级）、周期（３、５、６、７天）、生态条件（瘟度、光照、ＰＨ值）下，不同培养密度与增殖速度进行了实验测试及归纳总结，得出如下结论：在培养规模、周期及生态条件相同情况下，在一定密度范围内，新月菱形藻的增殖速度──相对生长常数（Ｋ１）值随培养密度的提高而降低，即呈负相关性。
【总页数】3页(P15-17)
【关键词】新月菱形藻;培养密度;相对生长常数
【作者】张胜利
【作者单位】辽宁省海洋水产研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S968.4
【相关文献】
1.小新月菱形藻固定化培养初步研究 [J], 陈书秀;王虎
2.新月菱形藻增殖速度与培养密度关系的初步研究 [J], 张胜利
3.土壤浸出液、维生素B12及钴对新月尼氏藻 Nitzschia Closterium W.Smith生长繁殖的影响 [J], 朱树屏;刘卓;向葆卿;王绍然
4.新月菱形藻(Nitzschia closterium)制备参数对藻球性质及去氮磷效果的影响 [J], 黄晨; 蒋霞敏; 韩庆喜; 彭瑞冰; 周爽男
5.长菱形藻(Nitzschia longissima)和新月细柱藻(Cylindrotheca closterium)分子分类研究 [J], 李海涛;杨官品;石媛嫄;吴岁寒;孙颖
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新月菱形藻的紫外诱变及优化培养
图 1 新月菱形藻的细胞数
长速度，比生长速率均保持在 0． 1 d － 1 以上，第 6 d 时可获得最
与 OD 值之间的标准曲线
高比生长速率 0． 1127 d － 1 ，此后仍能以较快速度生长，到第 10 d Fig． 1 The standard curve between cell population
根据获得的新月菱形藻的最佳培养条件，以 f /2 培养基为基础，以 NaNO3 为氮源，分别测定不同浓度的 NaNO3 和 NaCl 对新月菱形藻的影响。其中 NaNO3 含量分别为 0，45，74． 8，105，120 mg / L； NaCl 含量分别为 0，10，23． 4，27，30 g / L。上述各组，每组分设 2 个平行组。 1． 2． 4 吸光值的测定
取对数生长期的新月菱形藻置于培养皿中（ 直径 9 cm） ，使藻体在平皿底部铺为薄层，用 30 W 的紫外灯 于 15 cm 处照射 8 min。避光培养 24 h 后将各处理组藻液转移到 100 mL 三角瓶中置于正常条件下培养。 以藻株的比生长速率和油脂含量为指标，筛选出较出发藻株更优良的突变体。 1． 2． 3 培养条件优化 1． 2． 3． 1 理化条件
小新月菱形藻的生产性培养技术
的营养需求及摄食 习性 ，研制 出适 口性 、营养性 、消 化性 、稳定性和诱食性 良好 的系列 高效环保 型配 合饲 料 ，以推进河蟹养殖 的集约化 、规模化和产业化 ，确 保河蟹健康养殖的持续发展 。
表 ２ 两种 饲 料具体 收 益对 比 雌 蟹 雄蟹 虾 囱 ５． １５ ５２ ．
海 参 的 良好生物 饵 料 ，能促进 幼体 和 亲体 的生 长发
此介绍一些培养技术要点供参考 。
～、培养设施 来自１ 藻种 的培 养 ．
藻种的培养应在专用的光照培养
箱或保种室 内进行 ，为避免夏冬季温差的影响，应在 保种 室 内配 置空 调 。保 种用容 器可用 ｉ０ ０ 毫升 、２ ０ ５
具体投 入明细 见表 １ ：
表 １ 两种 饲 料具体 投 入明细 元 项目 塘租 料 隆 鱼苗 苗 电费及其 他 饵 虾 水 合计 全 程投 喂配 合饲料 ０ ２ ４ ５ ０ ０ ３ ６ ０ １ ２ ６ ３ 。 ０ ｌ０ ７ ２ １ ６４ 全 程投 喂天 然饵 料 ０ ９ ０ ５ ０ ３ ３ ６０ ５ ６ ０ ０ １Ｏ ７ ２４ ３（
Ｉ 衄 旦 ｉ 旦 塑旦 豆 拦 夔
小 新 月菱形 藻 （ ｔｓ ｈ ａ ｃ ｏ ｔｒ ｕ ｍ ｎ — 胧 ｚ ｃ ｉ ｌ ｓ ｅ ｉｍ ｉ ｕ ｔｓ ｉ ａ 是 新 月 菱 形 藻 的 一 个 类 型 ，俗 称 “ 硅 ｉ ｓｍ ） 小 藻” 。在 分类上 属于硅藻 门，羽纹纲 ，双菱 形 目，菱 形藻 科 ，菱形 藻属 。细 胞似 月牙 形 ，体积 小 、耐低 温、繁殖速度快且对环境有较强的适应力 。小新 月菱 形藻细胞 内富含蛋 白质、脂肪酸 ，特别是不饱和脂肪 酸 （Ｐ ） 量较高 ，是水产经 济动物鱼 、虾 、贝类和 ＥＡ含
小新月菱形藻培养基优化研究
高，其中胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶的活性达 到最高，到 Z4时蛋白酶和淀粉酶的活性继续上升并 达到最高，其他酶的活性均开始下降，到了 Z5所有 酶的活性降至最低。
3.通过对室内青蟹与室外青蟹的消化酶活力 进行比较发现，在相同的生长阶段(Z1)，室外青蟹 的胰蛋白酶、蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性要高 于室内青蟹，其中胰蛋白酶表现显著(P＜0.05)， 而糜蛋白酶的活性则是室内青蟹高于室外青蟹。 虽然室内和室外青蟹生存的环境不同，两者之间 的消化酶活性也存在一定的差异，但它们生存的 水环境各环境因子(温度、溶解氧、pH、盐度)的 值相差不大。
四、结论 1.通过测定青蟹幼体不同发育期 5 种消化酶的 活性发现，在整个生长阶段，青蟹幼体不同发育 期的蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶、淀 粉酶的活性均存在显著差异(P＜0.05)，其中，蛋 白酶、糜蛋白酶、淀粉酶活性较强，而胰蛋白 酶、脂肪酶活性相对较弱。 2.从 Z1到 Z2，蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶的活 性变化趋势为降低，而胰蛋白酶、淀粉酶的活性 则呈上升趋势，到 Z3所有酶的活性都有了显著的升
产者，生物多样性高，生物量巨大，占海洋初级 磷 (P) 浓 度 、 硅 (Si) 浓 度 的 培 养 实 验 。 实 验 在
生产量的 40%左右，是天然活性产物的潜在来源。 250 毫升三角瓶中进行，不充气，连续光照，温度
在海洋硅藻中，小新月菱形藻的研究较为广泛， 为(22±1)℃。浓度梯度设置如下：
料，能促进幼体和亲体的生长发育，增强幼体的
1.氮浓度对小新月菱形藻生长及理影响
月菱形藻培养技术的研究。笔者根据几年来的微
小新月菱形藻的最适生长氮浓度为 880 微摩
性。而刘永士等在研究盐度对哈氏仿对虾消化酶 活性的影响时发现，盐度的变化对消化酶活性的 影响显著。
小新月菱形藻中继培养
小新月菱形藻中继培养中继培养的目的在于培养大量的高密度纯种藻液，供应生产性培养接种使用。
中继培养根据需要可以分为一级中继培养和二级中继培养。
一级中继培养的容器可为10升的大口玻璃瓶、10-20升的细口瓶或育苗袋，根据需要，一般以封闭式不通气培养为主。
一级中继培养的容器为10升的大口玻璃缸、10-20升的细口瓶或鱼苗袋，以封闭式不通气培养为主。
二级中继培养的容器为0.2-0.4立方米的水族箱、0.5-1立方米的玻璃钢水槽或小型水泥池，以开放式通气一次性培养为主，利用塑料大袋进行二级培养也是新兴的、有效的好办法。
1．培养设施的处理:主要采取化学消毒法。
消毒海水：消毒海水时可根据培养的目的和方式选用以下方法之一。
1）热消毒法2）滤除菌法把经沉淀的海水先经砂滤，把大型生物和非生物杂质去除，再用陶瓷过滤罐过滤，除去微小生物。
3）次氯酸钠消毒法按每立方米海水20毫克有效氯的量加入次氯酸钠溶液，充气10分钟后停气，经6~7小时消毒后，按每立方米水体25克的量加入硫代硫酸钠，强充气4~6小时，用硫酸-碘化钾-淀粉溶液测试，若无余氯即可使用。
4）紫外线消毒有成型的紫外线消毒器可供选用。
但此法不易杀灭较大的浮游动物。
最好和过滤法结合使用。
2．接种：选择无污染、生长旺盛、颜色正常、藻液中无沉淀、细胞无附壁的藻种进行接种。
藻种液和新培养液的比例为1:2~1:9。
接种的时间最好在上午的8~10时。
3．日常培养管理:1）注意卫生，定时打扫；2）观察生长；3）定期镜检；4）控制温度。
5）充气或摇瓶。
6) 调节光强。
7）调节pH 值，如果pH值过高，可用1N HCl调节，如果pH过低，用1N NaOH 调节。
小新月菱形藻的常压室温等离子体诱变及高产岩藻黄素藻株的筛选
硫酸铈铵是一 种 稀 土 诱 导 子$朱 帅 旗 等("")通 过 研 究不同浓度硫酸铈铵对三角褐指藻生长和岩藻黄素含 量的影响发 现$较 低 浓 度 的 硫 酸 铈 铵 能 显 著 促 进 藻 细 胞岩藻黄素 的 积 累$但 会 抑 制 藻 细 胞 的 生 长% 由 此 可 见$较低浓度 的 硫 酸 铈 铵 对 于 岩 藻 黄 素 来 说 起 诱 导 作 用$但对于生长起胁迫作用$可将其作为生长的筛选压 力$选择在添 加 了 硫 酸 铈 铵 的 培 养 液 中 生 长 指 标 仍 较 好的突变株作为优良突变株$从而使突变株的生长+光 合作用+岩 藻 黄 素 含 量 同 步 提 升% 本 文 以 小 新 月 菱 形 藻 Z">Y为研究对象$通过 ,'3%技术对其进行诱变$ 获得大量突变株$筛选出生长+光合活性及岩藻黄素含 量均高于出 发 株 的 优 良 突 变 株$为 高 产 岩 藻 黄 素 小 新 月菱形藻株系开发提供了技术路线和优良株系%
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贝类育苗中单细胞藻类培养技术_邹琰
2010.4我国贝类资源丰富。
近几年，随着自然海区环境的恶化，贝类野生资源不断遭到破坏，人工养殖规模不断扩大，对苗种的需求更是有增无减。
作为贝类幼体的优质适口饵料，单胞藻饵料的好坏直接关系到贝类育苗的产量和质量。
下面根据工作经验，简述一下贝类育苗中单细胞藻类培养中应注意的问题。
一、适宜藻种的选择藻种的选择是育苗的基础。
贝类育苗常用的单细胞藻类有：金藻、角毛藻、小新月菱形藻、扁藻等。
金藻没有细胞壁，且个体微小、营养丰富，适于幼体摄食和消化，是贝类育苗中优质的开口饵料。
而角毛藻耐高温，可养时间长，与扁藻一样具易于大规模培养的特点，使其可作为贝类育苗的中后期饵料。
在购买藻种时要选择生长旺盛、色泽鲜艳（硅藻类为黄褐色、绿藻类为鲜绿色）、无沉淀及无明显附壁的藻种。
二、培育设施贝类育苗一般处在高温季节，饵料极易被污染，饵料培养车间应经常消毒，可用稀释漂白液冲洗走廊，用喷壶对顶棚进行消毒，以消灭寄生的原生动物孢子。
１．培育用水 单胞藻培育用水消毒彻底与否与受敌害生物污染程度关系密切。
作为一级藻种培养用水，必须经过沉淀、砂滤和煮沸灭菌。
二、三级藻类培养用水可用化学方法来消毒，如次氯酸钠消毒法等。
２．培养器具 各级培养用的玻璃器皿、工具都需煮沸或酒精消毒。
三级池可用高锰酸钾溶液由池壁顶部淋洒、泼洒池底、用刷子刷净的方法进行消毒，然后用消毒过的海水冲洗干净方可使用。
三、日常管理１．接种比例 因贝类育苗大部分为高温期，饵料车间培育温度较高，不利于培养藻类的生长。
可通过增大接种比例、常换水的方法来降低养殖池温度，促进单胞藻类的生长，同时也提高了浓度，抑制了敌害生物的繁殖。
２．搅拌和充气 在单胞藻培养过程中，搅拌或充气必不可少。
它不仅可以增加水与空气的接触面，补充培养液中的二氧化碳，还可帮助下沉的藻体上浮获得光照，同时防止水面产生菌膜。
搅拌时应注意不要用力太猛，以防藻液溅出，相互污染。
３．光照 饵料生产上培养一般利用太阳光源，而太阳光源具有易变的特点，因此要根据天气情况随时进行调整。
2种培养方式对小新月菱形藻生长及菌群结构的影响研究
2种培养方式对小新月菱形藻生长及菌群结构的影响研究唐亚鹏; 王瑞旋; 黄建华; 杨丽诗; 江世贵; 林黑着; 王国福【期刊名称】《《南方水产科学》》【年(卷),期】2019(015)005【总页数】8页(P55-62)【关键词】小新月菱形藻; 培养方式; pH; 溶解氧; 菌落结构; 负压光生物反应器【作者】唐亚鹏; 王瑞旋; 黄建华; 杨丽诗; 江世贵; 林黑着; 王国福【作者单位】中国水产科学研究院南海水产研究所农业农村部南海渔业资源开发利用重点实验室广东广州510300; 天津农学院水产学院天津300384; 中国水产科学研究院南海水产研究所深圳试验基地广东深圳518121; 海南省海洋与渔业科学院海南海口571126【正文语种】中文【中图分类】S963.21+3小新月菱形藻(Nitzschia closterium f. minutissima)属于硅藻门、羽纹纲、双菱形目、菱形藻科、菱形藻属，其体积小、繁殖速度快，对环境有较强的适应力，细胞内富含多不饱和脂肪酸，是水产经济动物良好的生物饵料，拥有庞大的市场需求[1]。
小新月菱形藻的规模化培养是其开发和应用的关键，常见的微藻培养系统可分为开放式和封闭式。
传统饵料微藻培养主要采用开放式培养，这种培养方式构建简单、成本低廉且操作简便，但存在易受污染、培养条件不稳定、水分蒸发较快等缺点。
封闭式培养具有条件容易控制、不易污染、光能和二氧化碳(CO2)利用率较高等突出优点，利于进行微藻高密度培养，主要可分为管道式、平板式、柱式、搅拌式及浮式薄膜袋等[2-4]。
微藻大规模培养的藻种都是采用一级或二级培养的藻液，在微藻培养环境中会有大量细菌存在，这些细菌参与藻际环境中的物质循环，促进有机物质转化，改善藻类培养水环境[5-6]，同时细菌也会对藻类生长及物质积累产生影响，进而影响藻类培养效果[7-10]。
管式光反应器培养系统具有光照表面积大，结构可调节性强以及CO2 吸收路径长等特点，广泛应用于微藻产率和光合效率的提高，以及生物活性物质的积累等方面[11-15]，但在微藻培养过程中对藻际菌落的变化关注较少。
小新月菱形藻藻种培养
小新月菱形藻藻种培养1．藻种培养设施：藻种的培养要在保种室中进行，保种室要求通风条件好，光线条件好，温度可控性好，保种室要配有空调、冰箱、具有人工光源的培养架等。
培养中常用培养仪器有显微镜、解剖镜等，容器有三角烧瓶、广口玻璃瓶等。
保种室要严格消毒，防止病菌的侵入。
2．容器、工具的消毒：进行单细胞藻类的纯培养，容器、工具、培养基都要进行严格灭菌，但一般生产性的单种培养，则只须达到消毒目的就可以了。
常用的消毒方法有高温消毒法和化学药品消毒法。
高温消毒法是利用高温杀死微生物的方法。
不耐高温的容器接种环、镊子等金属小工具，试管口、瓶口等可以直接在酒精灯火焰上短暂灼烧消毒。
载玻片、小刀等则最好先蘸酒精，然后在酒精灯火焰上点燃，等器具上的酒精烧完，也就完成了灭菌操作。
b、煮沸消毒把容器、工具放入锅中，加水煮沸消毒，一般煮沸10-20 分钟。
大型锥形瓶消毒，可在瓶形瓶内加少量淡水，置电炉上加热煮沸5-10 分钟，可使整个瓶壁消毒。
消毒完毕即用消毒的纸或消毒的纱布包扎瓶口。
如塑料和橡胶制品等不能利用高温法消毒。
a、直接灼烧消毒此法适合消毒小型的容器工具。
C、烘箱干燥消毒将玻璃容器、金属工具用清水洗干净后，放入烘箱。
关闭烘箱门，打开通气孔，接通电源加热。
当温度上升到 120 C 时，关闭通 气孔，停止加热。
如果进行纯培养，容器必须灭菌，当温度上升到105 C 时，关闭通气孔，继续加热至 160 C,保持温 度，恒温 2 小时，然后停止加热。
必须要等到温度下降到 60C 不能超过180 C,以免烘焦。
化学药品消毒主要用于生产性大量培养中， 大型容器、 工具、 水泥池等常用化学药剂消毒。
a 、漂白粉消毒 工业用漂白粉般含有效氯 25%~35% ，消毒时按万分之 1-3 的含量配成水 溶液，把容器、工具在溶液中浸泡半小时，再用消毒水冲洗3~4 次即可。
b 、 酒精消毒 酒精消毒常用于中小形容器和 工具，方法是用纱布蘸 70%酒精在容器、工具的表面涂抹即可。
小新月菱形藻固定化培养初步研究
小新月菱形藻固定化培养初步研究陈书秀;王虎【摘要】用褐藻酸钙对小新月菱形藻进行固定化培养实验,测定不同胶粒大小、胶珠密度、CaCl2浓度及不同接种量对该藻的影响,比较了自由化生长与固定化细胞的生长曲线。
小新月菱形藻在褐藻酸钙凝胶中仍具有呼吸和光合作用的能力。
球径为3.5mm,CaCl2浓度为2%时,细胞生长快,每50mL培养液中加入200个胶珠时细胞生长量大,接种量不能低于104个细胞/mL。
与游离的小新月菱形藻相比,固定化小新月菱形藻生长慢,但生长周期长。
%Nitzschia closterium f.minutissima was immobilized in alginate beads. The effects of different immobilized conditons on the growth of the algae were tested.Among the immobilized conditions including the bead size, density, the concentration of CaCl2 and initial incoculation,the optimal immlbilized conditions for facilitating the growth of Nitzschia closterium f.minutissima were detemined. The growth curves of free living cells and immobilized cells were compared. The results showed that immobilized cells still had the ability of photosynthesis and respiration. The cells growth was largest when the cell density of microalga was more than 1×104cells/mL, the concentration of CaCl2 2%, the heads’diameter was 3.5 mm and 200 beads were added to 50 mL liquid culture medium. Compared with the free Nitzschia closteriumf.minutissima, the immlbilized Nitzschia closterium f.minutissima had slower growth rate, but longer growth period.【期刊名称】《生命科学仪器》【年(卷),期】2011(009)004【总页数】3页(P36-38)【关键词】小新月菱形藻;固定化;生长【作者】陈书秀;王虎【作者单位】山东东方海洋集团有限公司,山东烟台264003;烟台海融生物技术有限公司,山东烟台265600【正文语种】中文【中图分类】Q943.1小新月菱形藻(Nitzschia closterium f.minutissima)俗称“小硅藻”，是我国较早培养和应用的单胞藻饵料，其个体小，繁殖快，脂肪含量高，环境适应能力强，可作为理想的保健食品，在海水养殖业中占有重要地位。
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小新月菱形藻藻种培养
1．藻种培养设施：藻种的培养要在保种室中进行，保种室要求通风条件好，光线条件好，温度可控性好，保种室要配有空调、冰箱、具有人工光源的培养架等。
培养中常用培养仪器有显微镜、解剖镜等，容器有三角烧瓶、广口玻璃瓶等。
保种室要严格消毒，防止病菌的侵入。
2．容器、工具的消毒：进行单细胞藻类的纯培养，容器、工具、培养基都要进行严格灭菌，但一般生产性的单种培养，则只须达到消毒目的就可以了。
常用的消毒方法有高温消毒法和化学药品消毒法。
高温消毒法是利用高温杀死微生物的方法。
不耐高温的容器如塑料和橡胶制品等不能利用高温法消毒。
a、直接灼烧消毒
接种环、镊子等金属小工具，试管口、瓶口等可以直接在酒精灯火焰上短暂灼烧消毒。
载玻片、小刀等则最好先蘸酒精，然后在酒精灯火焰上点燃，等器具上的酒精烧完，也就完成了灭菌操作。
b、煮沸消毒把容器、工具放入锅中，加水煮沸消毒，一般煮沸10-20 分钟。
大型锥形瓶消毒，可在瓶口上放一普通的玻璃漏斗，再在漏斗上放一称量瓶盖，在锥形瓶内加少量淡水，置电炉上加热煮沸5-10 分钟，可使整个瓶壁消毒。
消毒完毕即用消毒的纸或消毒的纱布包扎瓶口。
此法适合消毒小型的容器工具。
c、烘箱干燥消毒将玻璃容器、金属工具用清水洗干净后，放入烘箱。
关闭烘箱门，打
开通气孔，接通电源加热。
当温度上升到120 C时，关闭通
气孔，停止加热。
如果进行纯培养，容器必须灭菌，当温度上升到105 C时，关闭通气孔，继续加热至160 C,保持温
度，恒温2小时，然后停止加热。
必须要等到温度下降到60 C 以下，才能打开烘箱门。
有棉塞和纸包扎的容器、工具灭菌，不能超过180 C,以免烘焦。
化学药品消毒主要用于生产性大量培养中，大型容器、工具、水泥池等常用化学药剂消毒。
a、漂白粉消毒工业用漂白粉
一般含有效氯25%~35%，消毒时按万分之1-3 的含量配成水溶液，把容器、工具在溶液中浸泡半小时，再用消毒水冲洗3~4 次即可。
b、酒精消毒酒精消毒常用于中小形容器和工具，方法是用纱布蘸70%酒精在容器、工具的表面涂抹即可。
c、高锰酸钾消毒以百分之五的比例配成溶液把要消毒
的容器、工具浸泡5 分钟，然后取出用消毒水冲洗2~3 次，便可达到消毒目的。
如果是对玻璃钢水槽、水泥池等消毒，可以用高锰酸钾溶液拨在池壁上，拨洒几遍后刷洗池底，10 分钟后再用消毒水冲洗干净。
d 石炭酸石炭酸消毒按3%~5%的比例配成消毒液，把要消毒的容器和工具放在其中浸泡半小时，再用消毒水冲洗2~3 次。
小新月菱形藻常用培养液配方：
NaNO3 0.08g 维生素
B1 200 微克
K2HPO4 0.008g 维生
素B12 200 纳克
FeC6HO7(1%) 0.2ml 人尿
1.5ml
NaSiO3 0.02g 海水1000ml
微藻的培养液是在消毒的海水或淡水中加入各种营养盐配制而成。
培养液的配制，首先按配方先后称量各种营养物质，可逐一溶解，也可以同时溶解。
遇到难溶的含金属的物质可以加热或与NaEDTA 一起溶解，配方中的维生素一般等水温降至60 C后再加。
生产上为了方便可以将营养盐配方浓缩1000-2000 倍配成母液，使用时可以根据培养水体多少量取母液的体积即可。
3．培养液的制备和消毒：保种培养液的消毒一般采用加热消毒法，经沉淀、过滤的海水，一般加温至90 C左右维持5 分钟或达到沸腾即可。
由于海水中的一些对藻类生长有促进作用的有机物在高温时易遭破坏，所以加温时间不宜太长。
4．接种：接种就是把作为藻种的藻液接入新配好的培养液中，进行丰
富培养。
选择无污染、生长旺盛、颜色正常、藻液中无沉淀、细胞无附壁的藻种进行接种。
一般来说藻种液和新培养液的比例为1:2 。
接种的时间最好在上午的8~10 时，这个时间是藻类细胞代谢最旺盛的时候。
培养条件:保种的条件最好保证在藻种的最适生长条件，要保证藻种不受污染。
5．日常培养管理: 1）注意保种室的卫生，定时打扫，谢绝无关人员的进入等；2）外观检查。
检查藻液颜色是否不再浅变浓，或是出现浑浊或沉降等反映藻体生长不正常，处于老化时期受到病虫侵染的现象。
3）镜检检查是否发生污染，是否老化，以确保试验的顺利进行。
4）控制温度。
通过暖气控温装置控制温度，使试验藻细胞在
15-20 C的环境中。
5）摇瓶。
在培养过程中每天摇瓶1-3 次,使藻均匀分布。
6）调节光强。
保持合适的光强，白天避免阳光直射。
6．藻种保藏方法：存藻种时可以根据保种目的和保种条件的不同分别采取不同的保种方法。
1）固体培养基保存法。
保种用的固体培养基的营养浓度应比正常的液体培养液的高，一般增加一倍。
琼脂量为1-1.5% 。
固体培养基分装灭菌后，冷却待用。
将无污染的藻种用喷雾法或划线法接种到固体培养基上。
常用固体培养基保种方法有两种，一种通常把藻种接种在固体培养基上，在弱光低温条件下慢慢培养保存，接种一次可以保存半年到一年。
另一种方法，接种后首先放在光线充足的地方（防止直射光照射），使藻类细胞较快速地繁殖起
来，直到培养基上出现颜色，即可放入冰箱或冷库中，一般在5C左右的低温下保存。
每天给藻种几个小时的弱光照。
此法保存的时间可长达2至3年。
2）液体培养基保存法。
低温、弱光下培养。
一般两个月更换一次培养液。