秦小舒 AgNO3对银杏胚愈伤组织诱导及分化的影响
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3 研究内容与方法
A
B
C
D
方法
培养基与激素的筛选(双因素,材料1)
培养基为MS,MT,DCR 外源激素为NAA(0.5 mg/L,1.0 mg/L), 6-BA(1.0 mg/L,2.0 mg/L)的组合
方法
AgNO3对不同时期银杏胚愈伤组织诱 导的影响
AgNO3浓度为0,0.1,0.5,1.0,3.0,5.0 mg/L
结果
10月3日的胚多为心形胚鱼雷形胚,胚较幼嫩 ,接种后容易失水死亡
平均诱导率大于60%
而培养基DCR与MS、MT差异显著,MS与 MT差异不显著(P<0.05)
选择DCR+NAA1.0 mg/L+6-BA1.0 mg/L为基 本培养基
结果
愈伤率 callus rate
AgNO3处理下的愈伤组织较对照质地坚硬, 色泽更绿,愈伤程度降低
10.16日胚10.16embryo
1.5000 1.0000
11.16日胚11.16embryo 1月2日胚 1.02embryo
0.5000
0.0000
0
1
2
3
4
5
6
AgNO3 浓度(mg/L) concentration of AgNO3
结果
常规添加AgNO3的处理,只有低浓度0.1 mg/L 出现芽点分化。浓度升高时,愈伤组织呈墨绿 色干枯状,到3 mg/L时,褐化死亡。
国内外研究进展
研究现状
总结
成苗易
97年,心形胚鱼雷 型胚,子叶胚
98年,成熟胚 体胚发育至心形胚
03年,5mm近成熟 胚不定芽未生根
05年,3mm未成熟胚 体胚成苗
11年,5wk.baidu.comm近成熟胚 不定芽未生根
成苗某一阶段 各发育阶段胚 试验方案少
材料
江苏泰州大佛指,于2013年9月采集并4℃低温保存 10月16日胚,早期心形胚至鱼雷形胚,胚长1-2.7 mm 11月16日胚,子叶伸长且闭合,稍部尖形,胚长2.5-4 mm 1月3日胚,子叶外张,胚芽发育基本成熟,胚长>3.5 mm
AgNO3对银杏胚愈伤组织诱导及分化的影响
汇 报 人: 秦小舒
汇报提纲
1
目的与意义
2
材料与方法
3
试验结果
目的与意义
AgNO3可促进外植体分化,控制褐化,抑制黄化。 Ag+与乙烯竞争受体蛋白成为乙烯释放的抑制剂,而 乙烯和多胺中的某些胺类竞争底物S-腺苷甲硫氨酸 (SAM),含量此消彼长,封闭的组培瓶中积累大量乙 烯,AgNO3能降低乙烯的含量,提高外植体中多胺的 合成,而多胺对不定芽和体胚的分化有促进作用。
隔代添加AgNO3,表现为随着浓度的升高,干 枯的愈伤组织变得水润有光泽,且出现了不同 的分化。
结果
结果
结果
暗处理中,各浓度AgNO3对愈伤的诱导率及愈伤 程度影响差异不显著(P>0.05),均在80%左右, 诱导率高于光照培养。
活性炭处理中,胚轴形成愈伤而子叶只轻微膨 大,二者差异明显
结果
方法
隔代添加AgNO3对愈伤组织分化的影响
外植体为11月16日胚, AgNO3浓度为0,0.1,0.5, 1.0,3.0 mg/L
方法
避光处理对AgNO3作用的影响
AgNO3与外植体都遮光,外植体为10月16日 胚,AgNO3浓度为0,0.1,0.3 mg/L; 添加活性炭500 mg/L,AgNO3处于避光状态 ,外植体处于光照状态,外植体为11月16日 胚,AgNO3浓度为0,0.1,0.5,1.0,3 mg/L