生物药物分析汇总

三、生物药物常用的定量分析方法
1、酶法
1）酶活力测定法：测定酶的含量或活性 2）酶分析法：以酶为分析工具测定待测物质
2、电泳法 3、理化测定法 4、生物检定法：利用药物对生物体的作用来测
定效价或生物活性的方法。 1）药物的效价测定 2）微量生理活性物质的测定 3）某些有害杂质的限度检查
生物药物分析信息的获取 一、常用参考书 二、各国药典 三、常用期刊 四、数据库资源
（一）测定酶反应的速率
1、连续监测法：每隔一段时间读取 一下数据，求出酶反应的速率
2、固定时间法：在反应途中加入终 止剂终止反应，求出这段时间内反 应的速率。
主要用于测定酶活力
（二）测浓度
1、终点法：反应完全结束后测定 底物或者产物的浓度
2、固定时间法：在固定的反应时 间终止反应，测定反应物或者产物 浓度。
四、生物药物的性质
五、生物药物的特点
1、相对分子质量的测定 2、生物活性检查 3、安全性检查 4、效价测定 5、生化法确证结构
第四节 生物药物的科学管理 一、药品质量标准制定原则 （一）药品质量标准制定原则 （二）药典的内容 1、国家药典 2、部颁药品标准和副药典 3、地方药品标准
二、生物制品的标准化 （一）生物制品规程
生物药物分析学概述
第一节 药物分析的性质和任务 一、药物分析的性质 二、药物分析的任务
第二节 药物的质量标准
一、药物质量的评价 二、药物的质量标准 三、药典与分析方法 四、药物分析与生物药物分析的关系
第三节 生物药物概述 一、生物药物的范围 1、生化药物 2、生物技术药物 3、生物制品 二、生物药物的研制发展过程 第一代 第二代 第三代
第二章 酶分析法在生物药物分析中 的应用
一、以酶为分析对象，通过底物或者产 物浓度的改变来测定生物样品中所含的 酶量或者酶活力的测定，称为酶分析法
二、以酶为分析试剂，测定需要检测的 物质，称为酶法分析。
酶法分析的优点：
1、专一性强 2、效率高 3、反应温和 4、方法简便
第一节 酶法分析的原理 一、酶的定义和性质: 1 、蛋白质 2、专一性的催化功能 3、活性受到多种因素的影响
5、其它测定项目 （1）水分含量测定 （2）氢氧化铝与磷酸铝含量测定 （3）磷含量测定
（二）生物制品的安全检定 1、一般安全性检查 2、杀菌、灭活和脱毒情况的检查 3、外源性污染检查 4、过敏性物质检查
（三）生物制品的效力鉴定 1、动物保护力试验 2、活疫苗的效力测定 3、抗毒素和类毒素的单位测定 4、血清学试验
一、应用终点法的条件
（一）有作用于待测物质的酶和酶制 剂
（二）能够确定使酶反应接近进行完 全的条件
（三）反应中底物的减少，产物的增 加可用某种检测方法进行测定。
二、终点法的种类 （一）单酶反应测定法 1、利用底物量的减少进行测定 2、利用产物量的增加进行测定 3、辅酶变化量进行测定
（二）多酶耦联测定
商品化酶测定试剂盒
二、酶反应的动力学
米氏曲线：低浓度时，产物浓度随底物
浓度的增加而增加；高浓度时，酶和底物 结合饱和，产物浓度保持不变。
米氏常数
米氏方程
第二节 酶试剂的动力学原理
一、酶试剂的主要类型
1、单酶法：Leabharlann Baidu用单一酶测定底物 2、多酶法：需要两个或者两个以上 的酶耦联起来测定
二、酶法分析的测定方法
三、生物药物的分类
（一）按生物药物的化学本质和化学性 质来分类 1、氨基酸及其衍生物类药物类 2、有机酸、醇酮类 3、维生素 4、酶及辅酶类 5、酯类
6、多肽和蛋白质类 7、核酸及其降解物和衍生物 8、糖类 9、生物技术药物类 10、生物制品类
（二）按生物药物的用途分类
1、治疗药物 2、预防药物 3、诊断药物 4、用作其它生物医药用品
主要用于测定底物
第三节 酶法分析的检测方法
酶反应中底物的减少，产物的增加 量必须借助一定的检测方法进行检 测。
一、紫外－可见分光光度法
酶反应中，当底物或产物在紫外－ 可见光区有吸收峰时，可应用此法 进行检测。紫外－可见分光图谱中， 吸收峰的峰值与浓度成正比。
二、荧光光度法
酶反应中，当底物或者产物有荧光吸 收时，可用此法进行检测。
（二）生物制品的国家标准品和国家参 考品 三、生物药物的科学管理
第五节 生物药物的分析检验 一、生物药物质量检验的程序与方法 1、药物的取样 2、药物的鉴别试验 3、药物的杂质检查 4、药物的安全性检查 5、药物的含量（效价）测定 6、检验报告的书写
二、生物制品的质量检定 （一）生物制品的理化检定 1、物理性状检查 （1）外观检查 （2）真空度及溶解时间 2、蛋白质含量测定 3、防腐剂含量测定 4、纯度检查
缺点：
1、工具酶的用量为普通酶法的10 倍，费用较高。
2、酶循环法中所需的试剂价格较 高。
3、体液中某些微量物质的测定缺 少合适的工具酶。
第七节 生物传感器与酶传感器
一、生物传感器
1、概述
当被分析的底物或者反应产物没有易 于检测的方法时，可以借助加入另一 种酶，使之产生易于检测的产物或者 底物。
被耦联的酶起指示剂的作用，称为指 示酶。
第五节 反应速率法
测定反应的初速率，从而计算被 测物质的浓度。
一般此种方法很少用。
第六节 酶循环放大分析法
用于测定体液中的微量物质。
酶循环法是利用酶的底物特异性来 放大靶物质（被测物质）的测定方 法。此法循环靶物质，增加了靶物 质的量，利于测定，减少干扰。
固定化酶的优点：
1、可以反复使用 2、比较稳定 3、利于产物提纯
五、放射性同位素测定
酶反应过程中对底物、产物或者酶 进行放射性同位素标记。通过测定 同位素的含量来测定底物浓度。
有污染性。
第四节 终点测定法
酶法分析是以酶作为试剂分析非酶类 物质。
反应使底物完全转化为产物，通过测 定底物的减少量，产物的增加量来定 量待测物的方法称为终点测定法。
检测灵敏度较高，专一性强。
三、氧电极法
酶反应过程中，产物有二氧化碳和 氧气时，可以通过这些气体的改变 量来进行检测。
灵敏度较高。
四、固定化酶和酶电极法
固定化酶＋电极（有传感功能）＝酶 电极
酶反应过程中产生的离子含量（如氢 离子）的变化导致电流量的改变。
通过酶电极显示的电流量的改变测定 底物的浓度。