昆虫线虫学

王丽芳等人采用以上两种培养方法繁殖异小杆线虫， 测定和计算不同方法得到的线虫产量、质量和效率。 结果，液体培养中接种单菌线虫是非单菌线虫产量的2. 1 倍，效率是其3. 5 倍。固体培养线虫的产量和效率 是其液体培养的3. 7 倍。经调查，固体培养的线虫致 病力和存活率稍高于液体培养。
四、昆虫寄生线虫在生防中的应用
昆虫病原线虫的感染期幼虫(infective juvenile , IJ ) 是其一生中唯一具有侵染能力和可自由 生活于寄主体外的虫态,一般滞育不取食,体外包裹着已 经蜕去的第2 龄幼虫的表皮,对外界不良环境的耐受能 力强,又称为耐受态幼虫(dauer juvenile , DJ ) 。
当线虫借助水膜运动，寻找到寄主昆虫，通过昆虫 自然孔口或表皮进入寄主血腔后，释放共生菌，菌在 昆虫体内增殖，并产生毒素，一般在常温下24-48 h内 可致死寄主。
3、温湿度
线虫对温湿度有一定的要求，否则其 生长、发育、侵染、繁殖乃至生存都将受到制约。 研究证实载体的温度与线虫的存活力呈正相关，昆 虫寄生线虫可生活在0℃-40℃ 之间，但各种不同的线 虫对温度的要求不同。温度不仅影响线虫的发育和繁 殖，而且还影响其对寄主的侵染。
湿度是影响昆虫寄生线虫存活的最重要环境因子之 一。增大湿度对提高线虫防治害虫有重大影响，一般 认为，相对湿度超过80％较为适宜。在有雨、雾和露 的情况下，线虫的寄生率高，反之，寄生率低。
中国农科院专家在麦地和玉米地撒 放中华卵索线虫防治粘虫，已取得显著成效。其实 在自然界，这类线虫对一些农作物主要害虫的侵染率 相当高。如线虫对水稻头号害虫褐飞虱的侵染率一般 也有５０％～７０％，最高可达９０％以上。正是由 于这类线虫的有力制约，才使得这种水稻毁灭性害虫 自然种群数量不易增殖成灾。
2、斯氏线虫和异小杆线虫
二、影响昆虫寄生线虫生物防治的 因素
1、线虫品系 2、天敌
3、温湿度
4、辐射
5、寄主的免疫反应
6、其他
1、线虫品系
在生物防治中,害虫及其生防因子的
正确鉴定是首要的,直接影响到生物防治的成功与否。 昆虫病原线虫的寄主特异性较高,不同的种、甚至不同 的线虫品系会对相同的目标昆虫产生不同的防治效果, 相同的种或品系对不同的害虫防效也不同。
我国研究最多的用于生物防治的昆虫寄生性线 虫有索科线虫及昆虫病原线虫斯氏线虫和异小杆 线虫两大类群。
1、索科线虫
索科线虫通过昆虫自然孔道或体壁进入寄主体腔， 在其中生长发育至成熟前脱出寄主进入环境，造成昆虫 死亡，寄生率即等于害虫的死亡率。并且可在自然界中 再循环, 有后续的防治作用。
保护利用索科线虫的自然控制作用，可以不用或减 少使用农药，因而具有巨大的生防潜力和广阔的应用前 景。因此，国内外农业科学家竞相研究这类线虫。
1、对土栖性害虫的防治 2、对果树和林业害虫的防治
3、对蔬菜害虫的防治
4、对储粮害虫的防治
5、对卫生害虫的防治
参考文献：
1、杨怀文,陈松笔.昆虫寄生线虫与林业害虫的防 治[J].林业科学,1999,35（6） 2、丘雪红,韩日畴.昆虫病原线虫资源概况和分类技术进展[J].昆 虫学报，2007,50(3) 3、胡样,刘南欣.我国昆虫寄生性线虫的研究与应用[J].广东农业 科,1995,33（5） 4、丘雪红,曹莉,韩日畴.昆虫病原线虫共生细菌共生性的分子生 物学研究进展[J].昆虫知识,2010,47(5) 5、李新伟, 张群枝.线虫保存技术研究进展[J].中国病原生物学杂 志,2007,2（6）
昆虫寄生线虫生物防治的 研究进展
一、线虫相关概述
二、影响昆虫寄生线虫生物防治的因素
三、实际操作中所遇问题的解决办法
四、昆虫寄生线虫在生防中的应用
一、概述
能寄生昆虫的线虫统称为昆虫寄生性线虫，用于生 物防治潜力的种类主要有5个科：索科、新垫刃科、滑 刃科、斯氏线虫科和异小杆科等。 其中斯氏线虫科和异小杆科线虫的浸染期幼虫携有 共生细菌, 会引发昆虫败血症。为了区别于其他昆虫寄 生性线虫，特称之为昆虫病原线虫。
1、线虫保存技术研究进展
在自然状态下,土壤的温度高、湿度大,线虫活跃, 体内养分消耗快,存活时间较短;在低温条件下,线虫 存活时间较长。实验室传统保存方法遵循低温原理, 尽可能降低保存环境的温度,延长线虫生存时间。
（1）冷藏保存
实验室传统保存方法是将线虫置于 4～8 ℃冰箱中保存。在自然条件下,病 原线虫抵抗干燥的能力较弱,因此在实验室多将昆虫病 原线虫置于高湿条件下保存。 例如,将所采集的或培养的索科线虫雌雄分开,放入 盛有湿沙的培养皿中,模拟自然环境通风保存,这样可以 防止线虫自然交配,延长线虫生存时间。但是,在常温下 沙子容易干燥、线虫容易发霉,因此管理起来花费大量 人力。若将线虫存放在潮湿的沙子中低温密闭保存,则 可以较长时间保持环境湿润、降低线虫的代谢速度,同 时省却了很多人力、物力。
4、辐射
太阳辐射对昆虫病原线虫有很强的杀伤力。 在紫外线直接照射时，只需几分钟，线虫就会死亡。 若在较高湿度下，或借助一些光保护剂(如4一氨 基苯甲酸等)，线虫抗辐射力能得到一定程度的增 强。
5、寄主的免疫反应
昆虫寄生线虫有很广的寄主范围，然 而由于各种昆虫对线虫的敏感程度不同，导致线虫致 死寄主的结果差别很大，甚至不同龄期及不同年龄组 的昆虫对线虫的敏感性也不相同，寄主的免疫反应是 造成敏感性差别的原因之一。
三、实际操作中所遇问题的 解决办法
为使线虫能成为一种上市的生物杀虫剂，国际、国 内正开展研究试图通过脱水技术使线虫进入休眠，能在 常温下保存和运输。也有学者开展保湿剂型研究。希望 能找到线虫叶面喷施的剂型，以此拓宽线虫杀虫应用范 围。线虫的生产经历了从活体培养到离体培养的过程。 在离体培养中,又从无菌培养到单菌培养，均为了节减 培养成本和保持线虫的感染活性，使线虫在生物防治中 发挥更大的作用。
根据培养条件及培养过程的不同,线虫培养可分 为固相培养和液相培养。人工培养多采用固相培养 法, 液相培养法是近年来发展的新技术, 具有易于扩 大、生产效率高、培养参数易于控制等优点, 但对 不同的培养基采用固相和液相培养不同线虫, 对线 虫产量和质量有着不同的影响。
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站丽莉等人采用以上两种培养方法繁殖斯氏线虫, 试图筛选较理想的培养基和培养方法。结果, 固体培养 线虫的产量和效率是液体培养的3.7 倍。调查两种培养 方法得到的线虫, 固体培养线虫的致病力明显高于液体 培养, 存活率差异不显著( P < 0.05)。
2、离体繁殖培养
昆虫病原线虫能够成功地大面积防 治多种害虫主要归功于线虫离体繁殖技术的发展，降 低了成本和减少了劳动力。 目前离体繁殖均采用单菌培养，单菌培养的开始得 益于线虫肠道中携带共生菌的发现，共生菌可以刺激 侵染期线虫脱鞘，加快线虫发育速度，有利于缩短线 虫培养时间，从而提高效率。同时共生菌可抑制杂菌 生长，为线虫繁殖提供稳定的环境。这种繁殖方法所 繁殖的线虫产量和生产效率高，具有参数易于控制和 易于扩大生产等优点。
不同的昆虫病原线虫共生菌菌株对供试昆虫和病菌 的杀虫抑菌活性均会有所变化, 不同线虫品系共生菌的 杀虫抑菌活性不尽相同；即使是同一品系的共生菌菌株, 其杀虫抑菌活性也有一定差异。在昆虫病原线虫的应用 中,最适宜线虫种类或品系的选择是获得成功防治的关 键。
2、天敌
昆虫寄生线虫的天敌分为捕食类、
寄生类和病原体。这些天敌会影响线虫防治害虫的效 果。在捕食类中常见的类群有真菌和螨类，尤其是巨 螫螨属的种类。全世界报道的捕食线虫真菌约100余种， 在所有发表的文献中均未见有斯氏线虫的寄生性天敌。 侵染无脊椎动物的许多原生动物类群中，只有一部分 侵染斯氏线虫。
一些昆虫对侵入的斯氏线虫会出现包囊作用，以防 御线虫的侵害。另外，昆虫可以通过它们的习性、行 为、表皮构造、消化道特殊机能来避开或者逃脱线虫 的侵染。
6、其他
• 线虫本身生物学特性的局限，不象化学农药能常温保 存和运输 • 不具备内吸作用，不能叶面喷施
• 土壤的结构和作物的密度等对线虫的迁移有很大影响 • 运用线虫的时间对生物防治的效果也有很大影响。
（3）胁迫脱水保存
原理是在外界干燥压力作用下线虫 失去体内部分水分,随之调整进入休眠状态,与此同时,各 种代谢活动降低,耗氧量降低。
脱水休眠是脱水诱导的一种可逆的生理暂停的休眠 状态,是昆虫病原线虫在干燥条件下的一种重要生存策 略。昆虫病原线虫感染期幼虫在缺水的条件下能够进 入脱水休眠状态,在这种状态下可以存活很长时间,直到 重新水化后再继续保持代谢活性。脱水休眠后恢复的 线虫其活动力及感染力不受影响。
6、颜王旬,韩日畴.昆虫病原线虫的脱水休眠[J]. 中国生物防治,2010,26 (1) 7、站丽莉,李春杰,许艳丽.斯氏线虫离体繁殖技术研究[J].农 业系统科学与综合研究,2008, 24（4） 8、王丽芳,李春杰,许艳丽,等.异小杆线虫离体繁殖技术研究 [J].农业系统科学与综合研究,2010,26（1） 9、王欢,丛斌,刘彦群.昆虫病原线虫共生菌对甜菜夜蛾和辣椒 炭疽病菌的生物活性测定[J].中国蔬菜,2009,12 10、谢钦铭,张选辉.昆虫病原线虫在害虫防治中应用的研究 进展[J].江西科学,2002,20（4）
现商业生产的昆虫病原线虫中重要的有:
Steinernema carpocapsae , S. feltiae , S . Glaseri , S . riobravis , S .scapterisci , S . kushidai ， H. megidis 等
昆虫病原线虫区别于昆虫寄生线虫的 特点是它们的侵染期线虫消化道内携带 有与之共生的嗜线虫杆菌。昆虫病原线虫共生菌是一 类特殊的革兰氏阴性细菌, 其代谢产物有杀虫、抑菌活 性,作为一种新的生物防治因子除具有安全性高、杀虫 效果好、杀虫谱广等优点外, 还有杀虫抑菌的双重活性。 共生菌还能分解昆虫组织，提供线虫生长发育所需 的营养，并产生抑菌作用，使虫尸不腐败，线虫可在 虫体内繁殖，成为新一代侵染期线虫，进入生境，再 侵染其它健虫。