中药连翘色谱法检测

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介绍一种连翘的薄层色谱鉴别法

介绍一种连翘的薄层色谱鉴别法
连翘的薄层色谱鉴别法是通过薄层色谱技术来进行连翘的化学成分鉴别和定量分析的方法。

薄层色谱是一种简便、快速、经济且有效的分离和鉴别化学物质的方法。

连翘的薄层色谱鉴别法通常包括以下步骤：
1. 样品的制备：将连翘草药粉碎并浸泡在适当的溶剂中，如甲醇、乙醇等，制备成待测样品溶液。

2. 薄层色谱板的准备：选择一张合适的薄层色谱板，并在板上画上样品点。

通常使用硅胶或者含有金属薄层的板。

3. 样品的上样：在样品点上，用细管或微量注射器将待测样品溶液均匀的滴在样品点上。

4. 色谱板的开发：将上述准备好的薄层色谱板放入一个闭合的容器中，使之与薄层色谱板上方的蒸汽接触，在静置条件下，进行开发，用于组分的迁移和分离。

5. 开发后的显色：观察薄层色谱板开发后的显色结果，可以使用各种显色试剂来使化合物进行着色，用于鉴定和区分。

6. 总结与鉴定：通过比较样品与已知药物标准品的色谱图，分析并鉴定出样品中不同成分的相对含量。

连翘的薄层色谱鉴别法可以通过检测不同草药中的化学成分，进行定性和定量的分析。

常用的显色试剂如硫酸铁试剂、柠檬酸铁试剂等可以使化合物具有特征的色带。

此外，还可以利用紫外可见光谱检测和比对标准品的色谱图谱来确定某些特定物质的存在。

通过这种薄层色谱鉴别法，可以准确鉴别连翘中的化学成分，并具备轻便、快速等特点。

但需要注意的是，由于连翘药材中的化学成分非常复杂，因此在鉴别中可能需要结合其他的分析手段，如高效液相色谱、质谱等方法，来增加准确性和可靠性。

高效液相色谱法测定六味五灵片中连翘苷的含量

２７ｎｍｎｄｅｃｌｎｅｐｒｔｅｗａ７ａｈｔｏｕｍｔｍｅａｕｒｓ４０ ℃ ．ｓｌｈｅｃｌａｏｃｖｓｏｒｙｈｎｓｏＲｅｕｔＴａｉｓｂｒｔｎｕｒｅｆｏｓｔｉｈｗｅｈｔｔｅｉｆｄｔａｈｉｆａｉｗａｏｐｅｅｙｃｅｔｂｅｂｅｗｅｎ０．２～５０ｇＴｈｉａｉｑｔｏｎｅｒｔｙｓｃｍｌｔｌａｃｐａｌｔｅ１６９．７６．ｅｌｎｅｒｔｅｕａｉｎｗａｓＹ＝６８１Ｘ＋ｙ３８７
ｍｏｉｈｓｆｃｔｎｔｉ — ｔｒｆ３：７ａｈｏｒｔｆ１０ｍＬｍｉＴｅｄｔｃｖｖｌｎｔｓｂｌｐａｅｏｅｏｉｌｗａｅｅａｒｅ２７）ｔｅｆｗａｅｏ．／ｎ．ｈｅｅｔｅｗａｅｅｇｈｗａｔｌｉ
六昧五灵片是根据中医学理论，由五味予、女贞子、连翘、莪术、苣荬菜、灵芝孢子粉加工而成的纯中药制剂，具有滋肾养肝、活血解毒的作用，于治疗慢性乙型肝炎氨基转移酶升用
高，中医辨证属于肝肾不足、邪毒瘀热互结。连翘是方中君药，具有清热解毒、消肿散结的作用 “。连翘的主要成分之一连翘苷具有抗病原微生物、抗炎、解热、利尿强心、抗肝损伤和抗
・ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
４８
ＣｎｅｓＪｕｒａ１ｆｎｆｒｈｉｅｏｎＯＩｏｍａｔｏｏＴＭｎｎＣｉ
Ｎｏｖ２００１Ｖｏ１ｏ１．１Ｎ．１７
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高效液相色谱法测定保济胶囊中连翘苷含量

（０ｎ４６ｍ５ｍ）ｗｓｕｅ．ｈｏｉｈｓａａｅｎｒｅｗｔ（４：６．ｈｅｃｏａｅｎｔｗｓａ２７ｎ．ｅｕｔ２０ｎｎ× ．ｍ，ａｓｄＴｅｍｂｌｐａｅｗｓｃｔｉｉ — ａｒ２７）Ｔｅｄｔｔｎｗｖｌｇｈａｔ７ｍＲｓｌｅｏｔｌｅｅｉｅｓ
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ｆｅａｔｎｏｈｒａｙａｉｇＨｓｉｌｏｈｒｌａｙＭｅｉｌＵｉｒｔ，Ｃｏｇｉｇｈｎ４０４ｐｒｔｆＰａｍｃ，ＤｐｎｏｔＴｉＭｉｔｒｄｃｎｖｓｙｈｎｑｎ，Ｃｉａ００２ＤｍｅｐａｆｄｉａｅｉＪ
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１００，０５２１００，０６２１００）０５１１００，０６１１００，０６３。２方法与结果
保济胶囊是由连翘、山楂、神曲、夏、芽等提取制成的中六半麦药制剂，有消食积、脾胃功效，床用于治疗宿食不消、膈痞具和临胸满、气吞酸、思饮食等症，效较好。有效控制产品质量，噫不疗为笔者采用高效液相色谱法测定本制剂中连翘苷的含量，现报道如下。

高效液相色谱法测定黄连上清片中连翘苷含量

Ａｂｔｃ：ｊｃｖｏｅｔｌｈａｍｔｏｏｈｅｒｉａｏｆｐｉｙｉｉｕｎｌｎｈｎｑｇＴｂｔＭｅｏｓＴｅａａｔａｃｌｓｒｔ０ｂｅｔｅＴｓｂｉｅｄｆｔｅｄｔｍｎｔｎｏｈｌｒｎＨａｇｉｓａｇｉａｌｓｔｄｈｎｌｉｌｏｍｎａｉａｓｈｒｅｉｌｎａｎｅ．ｈｙｃｕ
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高效液相色谱法测定双黄连口服液有效部位中连翘苷含量

高效液相色谱法测定双黄连口服液有效部位中连翘苷含量目的建立双黄连口服液有效部位中连翘苷的含量测定方法。

方法采用大连依利特Hypersil ODS2 C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 ?m），流动相为甲醇-0.05%磷酸水（35∶65），流速1.0 mL/min，检测波长278 nm。

结果连翘苷在0.143 6～1.436 ?g范围内呈良好的线性关系，平均回收率为99.91%，RSD=2.95%。

结论所建立的方法简便、准确，可作为双黄连口服液有效部位的质量控制方法。

标签：双黄连口服液；连翘苷；高效液相色谱法；含量测定双黄连口服液由金银花、黄芩、连翘配伍组成，具有疏风解表、清热解毒之功效。

适用于外感风热引起的头痛身痛、恶寒发热、喉痛咳嗽诸症[1]。

我们为了纯化该复方的有效部位，提供工艺优化的依据，采用AB-8大孔树脂对复方中金银花和连翘的有效成分吸附性能及影响吸附性能的因素进行了研究，并结合药效学试验筛选出双黄连有效部位。

且根据复方有效部位及其主要化学成分的研究分析，确定以复方有效部位中主要有效成分连翘苷的含量，来控制双黄连口服液有效部位的内在质量。

本试验参考文献[2-3]，建立了双黄连口服液有效部位中连翘苷反相高效液相色谱（RP-HPLC）含量测定方法，并对3批样品进行含量测定。

1 仪器与试药LC-2010A高效液相色谱仪（日本岛津），SPD-ML0Avp二极管阵列检测器（日本岛津）。

甲醇为色谱纯，乙醇为分析纯，磷酸为分析纯，水为重蒸水。

连翘苷对照品（批号110821-200508）购自中国药品生物制品检定所；连翘和黄芩药材购自河南省医药公司，金银花药材采自河南封丘金银花规范化种植基地，经河南中医学院生药学科陈随清教授鉴定，连翘为木樨科连翘属植物连翘（Forsythiae Suspense Thunb.Vahl）的干燥果实，金银花为忍冬科植物忍冬（Lonicera Japonica Thunb.）干燥花蕾或带初开的花，黄芩为唇形科植物黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）的干燥根。

高效液相色谱法测定人血浆中连翘苷含量

高效液相色谱法测定人血浆中连翘苷含量【摘要】目的建立高效液相色谱法，用于测定人血浆中连翘苷的质量浓度。

方法采用内标法，以ThermoC18柱（4.6mm×250mm，5μm）为固定相，以乙腈-水-冰醋酸(17：83：0.4 ) 为流动相，流速为1mL／min，检测波长为277nm。

结果血浆中连翘苷质量浓度在0.10～4.00μg／ml范围内与峰面积比值线性关系良好(R2= 0.999) ，最低检测浓度为0.05μg／ml，回收率达90％以上。

结论该方法具有较高的准确度，线性范围宽，方法灵敏，专一性好，操作简便，适用于连翘苷血药浓度的测定及临床药代动力学研究。

【关键词】高效液相色谱法；连翘苷；血药浓度HPLC determination Of Phillyrin in Human PlasmaQIN Ying-pu1，MO Wu-ming21.Guangxi Wuzhou People’s Hospital, Wuzhou 543000, China;2.Guangxi Wuzhou Sanjian Pharmaceutical Co., Ltd，Wuzhou 543001, China;【Abstract】Objective To determine the concentration of Phillyrin in human plasma by HPLC with ultraviolet detetion．Methods The internal standard method was used．The evaluation of Phillyrin was car ried out by ThermoC18 colum (4.6mm×250mm，5μm)w ith the mobile phase ofAcetonitrile - water - acetic acid (17：83：0.4 ) and the detection wavelength was 277nm．The flowrate was 1 mL／min．Results The calibration curve for plasma Phillyrin in range of 0.10～4.00μg／ml (R2= 0.999)．The detection limit of Phillyr in was 0.05μg／ml．The recovery was more than 90%．Conclusion This method is accurate，sensitive，specific and convenient，which could be used in the determination of plasma Phillyrin and its pharmacokinetic study in clinic．【Key words】HPLC；Phillyrin；blood drug concentration连翘，又名旱莲子(《药性论》)、大翘子(《新修本草》) ，为木犀科植物连翘Forsythia suspense(ThunbVah1)的干燥果实。

高效液相色谱法测定金银花连翘提取物(注射用)中连翘苷的含量

良好；密度试验表明精密度高。所以此含量测定方法可精靠，能够准确测定鼻通宁滴剂中桉油精的含量，好的控制更
产品的质量。
收稿日期：０释至刻度，匀，摇即得。精密吸取上述溶液各１，于上述色谱条件下，注入气相色谱仪，录色谱图，记以浓度比
在不同时间，含量测定方法进行测定；果见表２按结。表２桉油精中间精密度试验
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结论：同分析人员和不同时间的ＲＤ分别为０５％不Ｓ．７和０２％，明此方法的中间精密度良好。．１说
ｅｔｃ（ｎｃｏｓ）ＭｅｏｓＤａｎｉＣ８ｉｅｏａｃｑｉｃｒｔｒｐｙｃｌｍｎ（５ｍ × ．ｍ５ｘｘａｔＩｅｔｎＵｅ．ｔｄ：ｉｒｓｊｉｈｍｏｓｌｈｇｐｒｒｎｅｌｕｈｍａｇｈｏｌｈｆｍｉｄｏｏａｕ２０ｍ４６ｍ，ｌｍ）
系列稀释，精密吸取各稀释液１，注入气相色谱仪，以信噪
比２１：为检测限，测得桉油精的检测限为３４ｎ。．３ｇ２２４中间精密度试验取同一批鼻通宁滴剂样品，同一．．在个实验室，不同时间由不同的分析人员，以及同一分析人员
ｐｏｕｅｙｉｍｃｎｌｉａｕｅ．ｈｏｉｈｅｃｎｉｅｆｔｙａｏｏ — ａｒｌａｉｃｔｃ（０８：ｒｄｃｄｂｋａｔｈｏｇｓｓｓｄＴｅｂｌｐａｏｓｔｏｈｌｌｈｌｗｔ — ｇｃｌｅｉａｉ２：０ＤｅｏｅｗｍｅｓｓｄＭｅｃｅｌａａｃｄ１，ｎｅｆｗｒｔｗｓ１０ｌｍｎＴｅｄｔｔｎｗｖｌｎｔａ２ｎ．ｅｕｔ：ｈｌｉｏｅｓｋｅａｄＦｒｔｉ）ａｄｔｏａａ．ｍ／ｉｈｅｃｏａｅｇＷ３４ｍＲｓｌＰｉｙｎｉＨｎｙｕｌｎｏｓｈａｈｌｅ．ｅｉｅｈｓｓｌｒｎｙ

高效液相色谱法测定独角莲膏中连翘苷的含量

ｎｎｔ。结果连翘苷进样量在０１２ｇ０７２．４４～．１
２１。结论．６
时线性良好（＝０９９８，均回收率为９．２，Ｓｒ．９９）平９２ＲＤ为
该方法准确、简便、重现性好、专属性强，可用于该产品中连翘苷含量的测定。
［ｓａｔ０ｊｃｉｅＡｂｔｃｒ］ｂｅｔＴｏｅｔｂｉｔｏｅｅｍｉｅｈｏｔｎｆｈｌｒｆｊｏｉｇｏｖｓａｌｈａｍｅｈｄｔｄｔｒｎｅｎｅｔｉｙｉｏｉｌｎａｓＯｔｃｏｐｌｎＤｕａａ
ｂｖＨＰＬＣ．ＭｅｈｄＴｈｏｕｓｄｉｈｎｌｓｓｗａｐｒｏｓｅｃｌｍｎｕｅｎｔｅａａｙｉｓＨｙｅｓｌ２５０Ｘ０ａｗｉｈｔｅ
ｔｍｐｒｔｒｆ３ ℃ ａｄｄｔｃｅｔ２７ｍ，ｔｈｂｌｈｓｆａｅｏｉｒｌｎｔｒ２：ｅｅａｕｅｏ０ｎｅｅｔｄａ２ｎｗｉｔｅｍｏｉｐａｅｏｃｔｎｔｉａｄｗａｅ（４ｈｅｅ
７）Ｔｈｏｒｔｆｈｂｌｐａｅｗｓ１０／ｎ６．ｅｆｗａｅｏｅｍｏｉｈｓａ．ｍｌｍｉ．ＲｅｕｔＴｈｎａａｇｆｐｉｙｉｗｓｌｔｅｓｌｓｅｌｅｒｎｅｏｈｌｒａｉｒｌｎ
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中药连翘色谱法检测
连翘，临床常用中药。

来源于木犀科植物连翘Forsythia suspensa（Thunb.）Vahl的干燥果实。

功能与主治：清热解毒，消肿散结，疏散风热。

用于痈疽，瘰疬，乳痈，丹毒，风热感冒，温病初起，温热入营，高热烦渴，神昏发斑，热淋涩痛。

单位购进两个产地连翘，标号为1号连翘、2号连翘，见下图。

用薄层色谱法、高效液相色谱法鉴别其真伪优劣。

薄层色谱法检测
分别取1号连翘、2号连翘粉末1g，各加石油醚（30～60℃）20ml，密塞，超声处理15分钟，滤过，弃去石油醚液，残渣挥干石油醚，加甲醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。

另取连翘对照药材1g，同法制成对照药材溶液。

再取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。

吸取上述四种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（8：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。

见下图。

结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

1号连翘、2号连翘均为真品。

高效液相色谱法检测
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（25：75）为流动相；检测波长为277nm。

对照品溶液的制备取连翘苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml 含0.27mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备分别取1号连翘、2号连翘细粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇15ml，称定重量，浸渍过夜，超声处理（功率250W，频率40kHz）25分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，蒸至近干，加中性氧化铝0.5g拌匀，加在中性氧化铝柱
（100～120目，1g，内径为1～1.5cm）上，用70%乙醇80ml冼脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣用50%甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

▲连翘苷对照品色谱图和峰表
▲1号连翘色谱图和峰表
▲2号连翘色谱图和峰表
连翘苷含量
1号连翘0.66%
2号连翘0.40%
标准要求不得少于0.15%
结果：1号连翘、2号连翘均为优质品。

思考：连翘有两个规格，未成熟的果实习称“青翘”；成熟的果实习称“老翘”。

由于连翘是野生药用资源，近年来连翘价格攀升，导致了争夺野生资源的“枪青”现象。

现在市场上已经难得见到“老翘”了。

以上1号连翘和2号连翘均为“青翘”。