中药连翘色谱法检测

中药连翘色谱法检测

连翘，临床常用中药。来源于木犀科植物连翘Forsythia suspensa（Thunb.）Vahl的干燥果实。

功能与主治：清热解毒，消肿散结，疏散风热。用于痈疽，瘰疬，乳痈，丹毒，风热感冒，温病初起，温热入营，高热烦渴，神昏发斑，热淋涩痛。

单位购进两个产地连翘，标号为1号连翘、2号连翘，见下图。

用薄层色谱法、高效液相色谱法鉴别其真伪优劣。

薄层色谱法检测

分别取1号连翘、2号连翘粉末1g，各加石油醚（30～60℃）20ml，密塞，超声处理15分钟，滤过，弃去石油醚液，残渣挥干石油醚，加甲醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取连翘对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述四种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（8：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。见下图。

结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。1号连翘、2号连翘均为真品。

高效液相色谱法检测

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（25：75）为流动相；检测波长为277nm。

对照品溶液的制备取连翘苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml 含0.27mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备分别取1号连翘、2号连翘细粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇15ml，称定重量，浸渍过夜，超声处理（功率250W，频率40kHz）25分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，蒸至近干，加中性氧化铝0.5g拌匀，加在中性氧化铝柱

（100～120目，1g，内径为1～1.5cm）上，用70%乙醇80ml冼脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣用50%甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

▲连翘苷对照品色谱图和峰表

▲1号连翘色谱图和峰表

▲2号连翘色谱图和峰表

连翘苷含量

1号连翘0.66%

2号连翘0.40%

标准要求不得少于0.15%

结果：1号连翘、2号连翘均为优质品。

思考：连翘有两个规格，未成熟的果实习称“青翘”；成熟的果实习称“老翘”。由于连翘是野生药用资源，近年来连翘价格攀升，导致了争夺野生资源的“枪青”现象。现在市场上已经难得见到“老翘”了。以上1号连翘和2号连翘均为“青翘”。