凝胶色谱柱操作
凝胶色谱柱活化方法
凝胶色谱柱活化方法凝胶色谱柱活化是一种常用的生物分子分离技术，主要用于分离高分子量和相对分子量较小的化合物。
以下是凝胶色谱柱活化方法的步骤：1.平衡色谱柱在色谱柱平衡之前，首先需要确认色谱柱类型，根据不同的样品选择合适的流动相。
在确认色谱柱类型和流动相后，要检测基线稳定性，确保基线平直、无跳动。
2.选择合适的缓冲液为了更好地分离样品，需要了解样品的性质，并选择与其匹配的缓冲体系。
在选择缓冲液时，要考虑到样品的离子强度、PH值等因素，并调整缓冲液的PH值，以保证最佳的分离效果。
3.样品处理在进行凝胶色谱柱活化之前，需要对样品进行处理。
首先，要将样品溶解在适当的溶剂中，一般情况下选用水或缓冲液。
然后，需要过滤样品，以去除其中的颗粒物和大分子物质。
最后，需要根据实验要求对样品进行浓度调整，以保证样品在凝胶色谱柱上得到最佳的分离效果。
4.上样在上样之前，需要确定上样量，根据分离需求适量添加样品至色谱柱中。
然后，需要封闭色谱柱，以避免样品在分离过程中泄漏。
5.洗脱洗脱是凝胶色谱柱活化方法中的重要步骤之一。
在选择洗脱液时，一般选用缓冲液或水。
同时，可以根据需要采用梯度洗脱的方法，以更好地分离样品。
洗脱速度也是控制凝胶色谱柱分离效果的重要因素，需要根据实验要求进行控制。
6.检测在凝胶色谱柱活化方法中，检测是最后一个步骤。
需要根据实验要求选择合适的检测器，并将检测器与色谱柱相连。
然后，可以启动检测器，对洗脱液中的组分进行定性和定量分析。
7.数据处理数据处理是凝胶色谱柱活化方法中非常重要的一个步骤。
需要将收集到的数据进行整理和分析。
通过数据处理，可以获得分离物的纯度、回收率和分离效果等信息。
8.清洗和维护清洗和维护是保证凝胶色谱柱活化方法长期稳定运行的关键。
在完成每次实验后，需要对色谱柱进行清洗，以去除残留的样品和洗脱液。
同时，需要定期对色谱柱进行检查和维护，以保证其正常运转。
综上所述，凝胶色谱柱活化方法是一种常用的生物分子分离技术，在各个领域都有广泛的应用。
凝胶色谱柱长期放置须注意的细节有 色谱柱操作规程
凝胶色谱柱长期放置须注意的细节有色谱柱操作规程凝胶色谱柱的应用也越来越广泛，使用过后也要对色谱柱进行保养，这样才能使它的使用寿命更长期，在碰到什么问题时需实行相应的措施。
凝胶色谱柱是以刚性的球型凝胶色谱柱的应用也越来越广泛，使用过后也要对色谱柱进行保养，这样才能使它的使用寿命更长期，在碰到什么问题时需实行相应的措施。
凝胶色谱柱是以刚性的球型硅胶为基质，在其表面通过共价键化学键合亲水基团而成。
凝胶色谱柱的填料具有高性能尺寸排阻色谱所必需的性能，即低吸附性和良好的孔径分布；其pH适用范围为2.5—7.5，可以使用与水完全互溶的有机溶剂，如乙腈、丙酮、甲醇或乙醇等。
凝胶色谱柱适合用于分析分别蛋白质和多肽类样品。
凝胶色谱柱专为合成高分子的在高温下GPC分析而设计。
尽管高度交联的PS/DVB 粒子广泛应用于合成高分子的分析，但是这种粒子会在有机溶剂中产生膨胀，尤其在高温下膨胀更为明显。
凝胶色谱柱很好的解决了这个问题。
填料以刚性硅胶为基质，经过独特的表面化学修饰，在高不冷不热有机溶剂中可以保持极高的稳定性。
此外相对于有机聚合物填料，HTP SEC填料的刚性结构减小了分别过程中的传质，从而取得更高的辨别率和分别效率。
凝胶色谱柱特点：高柱容量、高辨别率宽的pH范围（pH范围2—8.5）使用寿命长低盐浓度洗脱，适合LC—MS分析对于生物样品无强吸附极低的非特异性吸附, 高的蛋白回收率及活性回收率解决多维色谱分析应用凝胶色谱柱的存放。
假如色谱柱短时间不用，存放时要注意以下几点：a.几天之内的短期放置，凝胶柱则用蒸馏水来冲洗，再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。
b.假如色谱柱长期不用，仅用上述方法来处理就不行了，这时应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充分色谱柱，凝胶柱则不能用水了，因柱内假如有微生物的生长则会使柱效降低，此时应用0.05%的NaNs水溶液（防腐剂）来冲洗色谱柱，再将色谱柱封严。
凝胶色谱柱长期放置时，确定要将色谱柱的两端封严，以防止由于溶剂挥发而造成的柱填料干缩现象，因这可导致柱效的严重降低。
凝胶渗透色谱柱安全操作及保养规程
凝胶渗透色谱柱安全操作及保养规程凝胶渗透色谱柱是生物分离和纯化中常用的工具。
为了确保设备的正常运转和用户的人身安全，本文将介绍凝胶渗透色谱柱的安全操作和保养规程。
一、准备工作在进行凝胶渗透色谱柱分离和纯化实验之前，需要做好以下工作：1.确认实验室内的安全防护措施是否齐全，并穿好防护衣物和手套等个人防护用品。
2.检查凝胶渗透色谱柱是否完好，特别是注意检查接口处是否有裂纹或断裂，如果有需要及时更换。
3.检查色谱柱的滤芯是否清洁，如有需要就更换滤芯。
4.将凝胶渗透色谱柱安装在色谱柱支架上，并连接好色谱柱两端的管道，确保管道连接处紧密无漏。
二、样品制备在进行凝胶渗透色谱柱分离和纯化实验前，需要对样品进行处理，一般包括以下步骤：1.样品离线浓缩：使用超滤器等离子体固定离子将样品离线浓缩。
2.样品调整：将调整剂或洗涤剂加入到样品中，以调整样品的pH值，离子强度等参数。
3.样品过滤：通过微孔过滤器将样品进行过滤，以去除悬浮粒子和杂质。
4.样品冷藏：将处理好的样品放入低温冰箱中冷藏，以方便后续实验操作。
三、凝胶渗透色谱柱的操作步骤1.开始操作前需要进行预流洗操作，在预流洗中需要使用上述处理好的样品进行洗涤，并进行管道空气排除操作，这样可以确保色谱柱和管道内都没有气泡和空隙。
2.样品进样：将经处理好的样品注入色谱柱的进样口，并进行样品的压力调节操作，确保样品在色谱柱内的流动状态符合要求。
3.分离纯化：根据实验要求，进行分离纯化等操作。
4.实验结束后，要进行终流洗操作，将色谱柱内的样品和膜材洗净。
注意，在操作过程中要对色谱柱和管道进行清洗和消毒处理，以防止实验中残留物质的影响。
四、凝胶渗透色谱柱的保养规程1.对于已经使用过的凝胶渗透色谱柱，需要进行周全的清洁和消毒处理，以消除污垢和杂质，并防止细菌生长。
2.长期闲置的凝胶渗透色谱柱需要进行密封存放，以防止附着微生物和灰尘等影响。
3.对色谱柱的使用寿命要进行控制和管理，定期进行检查和更换，避免老化和磨损等问题带来的影响。
凝胶填料凝胶色谱柱安全操作及保养规程
凝胶填料凝胶色谱柱安全操作及保养规程1. 引言凝胶填料凝胶色谱柱是一种常用的色谱柱，广泛应用于生物分离和分析领域。
本文档旨在介绍凝胶填料凝胶色谱柱的安全操作方法和保养规程，以确保实验过程的安全和凝胶柱的稳定性。
2. 安全操作2.1 实验室准备在使用凝胶填料凝胶色谱柱前，确保实验室器材完整、清洁，并检查色谱柱是否完好无损。
2.2 操作前准备在操作凝胶填料凝胶色谱柱前，采取以下预防措施：•佩戴实验室安全眼镜和手套；•确保色谱仪和其他相关设备的连接稳固；•准备好实验材料和试剂，确保其纯度和质量；•检查色谱柱是否已经充分平衡。
2.3 样品处理在样品处理时，需要注意以下事项：•遵循相关实验室操作规程，避免接触有害物质；•样品处理过程中，注意避免温度和湿度的极端变化，以免对凝胶填料产生不利影响；•样品处理后，确保液相色谱柱表面干净，没有残留物。
2.4 色谱柱装配和操作在进行色谱柱装配和操作时，需要注意以下事项：•色谱柱装配前，仔细阅读和理解相关操作手册，确保正确安装；•操作过程中，避免使用过大的压力，以免对凝胶填料造成破坏；•遵守色谱柱的使用限制，避免超过推荐的最高压力和流量。
2.5 操作后处理在操作结束后，需要进行适当的柱后处理：•柱后处理方法包括清洗、平衡和存储；•根据实验室具体情况和要求，选择合适的柱后处理方法；•柱后处理方法的选择应遵循色谱柱供应商的建议和要求。
3. 保养规程为了保持凝胶填料凝胶色谱柱的稳定性和延长使用寿命，需要定期进行保养。
3.1 柱前准备在进行保养前，需要进行柱前准备工作：•仔细查看柱后处理方法，了解柱前准备工作的具体要求；•清洗色谱柱外部表面，确保干净无尘；•根据实验室的要求，检查和更换色谱柱的连接器、垫圈等附件。
3.2 柱后处理柱后处理是保养凝胶填料凝胶色谱柱的重要步骤：•依据实验情况和需要，选择合适的柱后处理方法；•清洗色谱柱，使用适当的溶剂和方法，去除残留的样品和杂质；•均匀平衡色谱柱，以保证凝胶填料的稳定性和柱效；•注意避免对色谱柱施加过大的压力，以免导致柱损坏。
凝胶过滤色谱柱说明
rat liver microsome
Elution : (0.2mol/l sodium chloride +20%glycerol +
octaethyleneglycol dodecylether) in 50mmol/l
phosphate buffer,ph 7.0. Note : concentration
2008 -12 volume 15
Applications of TSK-GEL SW-type Gel Filtration columns
Higher resolution with 5um TSK-GEL SWXL compared with 10um TSK-GEL SW columns
Separation of membrane protein by SEC with different surfactant concentration in the eluent
Column : TSKgel G3000SW ,7.5mm ID*60cm
Sample : Membrane protein from a crude extract from
Separation of crude protein samples on TSKgel G3000SWxl.
Column : Sample:
Elution : Flow Rate ; Detection : Recovery :
TSK gel G3000SWXL,5um,7.8mm ID *30cm A. crude peroxidase from Japanese radish, 0.15mg in 0.1ml B. crude glutathione S-transferase from guinea pig liver extract ,0.7mg in 0.1ml 0.3mol/l NaCL in 0.05mol/l phosphate buffer ,ph 7 1.0ml/min
TSKgel PW系列水相分子尺寸排阻色谱柱使用说明书
水相分子尺寸排阻色谱柱TSKgel PW系列使用说明书东曹株式会社安全注意事项［注意标签］■远离火源使用易燃溶剂时，请务必小心。
否则可能会导致火灾、爆炸或中毒。
■使用环境必须通风良好如果通风不良，易燃或有毒溶剂可能会导致火灾、爆炸或中毒。
■请勿喷洒溶剂溶剂发生喷洒或泄露可能会导致火灾、触电、中毒、受伤以及腐蚀。
清除漏出的溶剂时，请佩戴合适的护具。
■请佩戴护目镜和防护手套有机溶剂和酸属于有害物质，切勿直接接触皮肤。
■请小心处理包装处理不当可能会导致产品破裂或溶剂飞溅。
■请勿将本产品用于其他目的本产品仅可用于分离和提纯，请勿用于其他用途。
■请确认化合物的安全性请确认分离和提纯后的化合物和溶剂安全可靠。
■正确废弃请根据当地法律法规正确废弃。
注请将本说明书保存在本产品附近，以便日后参阅。
目录1. 简介 (1)2. 打开包装 (1)3. 色谱柱部件 (2)4. 安装 (2)5. 维护 (3)6. 溶剂 (4)7. 流速 (6)8. 温度 (8)9. 准备样品 (8)10. 理论塔板数和不对称因子的计算方法 (9)11. 保护柱 (10)12. 故障排除 (11)13. 质量标准和质量保证 (13)1. 简介TSKgel PW系列色谱柱是东曹株式会社开发的高效液相色谱柱，主要用于水相高效凝胶过滤色谱（GFC），适用于各类水溶性物质。
该类色谱柱适用于水溶性合成聚合物、低聚物以及生物物质，如多糖、核酸、蛋白质、肽等的分析或制备。
请仔细阅读本使用说明书，确保正确、有效地使用该类色谱柱。
表1应用领域应用领域适用的色谱柱水溶性合成聚合物水溶性生物聚合物多糖G4000PW(XL)，G5000PW(XL)，G6000PW(XL)，GMPW(XL)水溶性低聚物肽G2500PW(XL)，G3000PW(XL)非离子低聚物（低聚糖）G-Oligo-PW，G2000PW核酸G-DNA-PW注：TSKgel G-Oligo-PW和G2000PW可以在较宽的pH值范围内吸附离子型样品。
凝胶色谱操作步骤
凝胶色谱操作步骤
凝胶色谱是一种常见的生物化学分离技术，用于分离和纯化生物大分子，如蛋白质、核酸等。
以下是凝胶色谱的一般操作步骤：
样品制备：将待分离的生物大分子样品溶解在适当的缓冲液中，通常要加入一些生物样品的裂解缓冲液以打破细胞结构。
样品加载：将样品加载到凝胶中，通常是通过在凝胶柱或凝胶板上形成样品孔道或者直接混合凝胶。
运行凝胶色谱：加入适当的运行缓冲液，施加电场或者离心力，让样品在凝胶中进行分离，根据分子大小、电荷、亲疏水性等特性进行分离。
收集分离物：根据需要，可以收集不同部位的凝胶，收集后的物质可以进行后续的分析或者纯化。
分析和评估：对分离得到的物质进行分析和评估，可以通过染色、质谱等方法进行鉴定和定量分析。
需要根据具体的实验要求和分离物质的特性来选择合适的凝胶材料、缓冲液和分离条件。
在操作凝胶色谱时，要注意严格控制操作条件，以确保分离的准确性和重复性。
凝胶色谱柱的使用
凝胶色谱柱的使用一、凝胶色谱柱的使用原理凝胶色谱柱的分离基于分子在柱中的扩散速率差异。
凝胶柱独特的孔隙结构可以使得较小的分子扩散速度更快，从而在柱中落后于分子较大的组分。
分离效果主要依赖于分子与凝胶孔隙的相互作用力，如尺寸排阻作用、电荷作用或亲疏水作用。
根据分子的大小、形状和性质，可以选择不同类型的凝胶色谱柱。
二、凝胶色谱柱的类型1. 托尔伯特柱（Tskgel）：是一种常见的高效凝胶色谱柱，适用于生物大分子的分离和纯化。
根据分子的大小选择不同的托尔伯特柱，包括S、M和G三个系列，具有不同的孔径和分离范围。
2. 超滤柱（Sephacryl）：适用于分子量小于2×10^7道尔顿的生物大分子的分离和纯化。
超滤柱具有较大的孔径，可以快速分离高分子量的物质。
3. 离子交换柱（DEAE Sepharose、CM Sepharose）：用于根据分子电荷选择或分离带有不同电荷的生物大分子。
正离子交换柱（DEAE Sepharose）适用于弱酸的分子，而负离子交换柱（CM Sepharose）适用于弱碱的分子。
4. 亲和层析柱（Protein A、G、L Sepharose）：利用生物大分子与固定在凝胶上的特定结合剂之间的亲和作用进行分离。
常用的亲和层析柱包括Protein A、G和L Sepharose，用于分离抗体或蛋白质。
三、凝胶色谱柱的优缺点1.分离效果好：凝胶柱的孔隙结构可以有效分离不同大小和性质的分子，保证高分离效率和纯度。
2.操作简便：凝胶柱操作相对简单，无需复杂的设备和耗时的准备工作。
3.适用广泛：凝胶柱适用于各种生物大分子的分离和纯化，如蛋白质、抗体、核酸等。
1.分离速度较慢：由于分子在凝胶柱中的扩散速率较慢，分离过程相对缓慢，需要较长的操作时间。
2.不能分离具有相似大小和性质的分子：如果要分离具有相似大小和性质的分子，凝胶柱的分离效果会较差。
四、凝胶色谱柱的实验操作步骤1.准备工作：如准备所需样品、试剂和凝胶柱。
PLgel凝胶色谱柱使用指南.
PLgel凝胶色谱柱使用指南为了尽可能延长一根凝胶色谱柱的寿命，请在使用前仔细阅读本说明。
本说明仅针对PL公司的PLGel凝胶色谱柱，如果您使用的是其它类型或其它公司的凝胶色谱柱，请注意并不是所有内容均适用。
柱子安装一般使用1/16”不锈钢管来连接柱子，0.010”内径适用于分析柱，0.020”内径适用于制备，连接管线应该尽量短来避免死体积，会造成系统性能下降。
柱连接接头应使用与Parker 兼容的1/16”锥箍和螺母，详见图1，请按照GPC柱的使用方向来连接，螺母应当在手拧紧后用扳手再拧1/4圈就足够了，过分拧紧并不会改善密封，反而会损坏螺纹造成泄漏。
图 1Compatible Connectors在图1中的X＝0.090”，约等于2.28毫米，螺母的最小长度应为0.210”，约为5.33毫米，请不要使用Waters和Rheodyne公司的产品，他们与PL的柱子并不兼容。
图 2在安装柱子时，请不要将扳手放在图2所示X处，应当放在柱未端六角处。
在与其它的柱子相连之前，建议将柱子与泵相连，用少量流动相清洗一下连接管内部和接头。
流速对于传统的7.5毫米内径的GPC柱子，1.0ml/min是一个最优化的流速，当柱子的内径增加或减少时，应当适当调整体积流速来保证等效的线速度。
表1给了大家一个推荐的流速，然而对于一些高粘度的流动相，应当适当减小或升高温度，如果要更换溶剂，流速要逐渐升高，无论如何，都不要在超过柱子的最大压力下使用柱子（详见表3）。
表 1柱型 适用流速 (ml/min) 建议流速 (ml/min)PLgel 7.5mm ID PLgel MiniMIX 4.6mm ID PLgel Prep 25mm ID 0.5 – 1.50.2 – 0.55.0 – 20.01.00.310.0样品制备及进样根据样品的分子量来优化样品浓度毫无疑问是最好的方式。
宽分布样品通常可以比窄分布样品使用更大的浓度。
凝胶色谱柱的使用
凝胶色谱柱的使用凝胶色谱柱（Gel chromatography column），又称为凝胶过滤色谱柱，是一种常用于蛋白质和多肽分离纯化的柱层析技术。
它是根据溶质在凝胶颗粒孔隙和凝胶颗粒表面之间的扩散速率不同来实现分离的。
凝胶色谱柱由内核和包覆层构成。
内核是由纤维素、琼脂糖、琼脂和聚丙烯酰胺等材料制成的颗粒，颗粒大小一般在10-300微米之间。
内核是柱层析的主要分离介质，具有一定的孔隙结构，可以根据溶质的分子量来选择孔径大小。
包覆层是一层较细的凝胶层，在内核表面涂覆各种高分子材料，通过改变包覆层的化学性质，可以调控分离过程中的选择性和分离效果。
1.样品制备：准备待分离的样品溶液，通常需要用缓冲液进行稀释和调整pH值。
如果样品中含有高浓度的盐类或有机溶剂等，需要进行脱盐或柱外固相萃取处理。
2.样品加载：将样品溶液加载到凝胶色谱柱上，可以通过重力流动或使用泵进行加样。
3.柱洗脱：用缓冲液进行柱洗脱，一般要满足样品的最佳分离条件。
可以使用单一缓冲液或梯度洗脱，根据需要选择合适的洗脱方式。
4.收集分离物：根据需要，收集分离物进行后续分析或纯化。
1.蛋白质纯化：凝胶色谱柱可以根据蛋白质的分子量进行分离，常用于蛋白质的粗提和富集。
2.多肽纯化：凝胶色谱柱可以根据多肽的大小和亲水性进行分离，常用于多肽的富集和纯化。
3.药物研发：凝胶色谱柱可以用于药物分子的纯化和分析，有助于药物研发过程中的药物筛选和性质表征。
4.生物分析：凝胶色谱柱可以用于生物样品中复杂成分的富集和纯化，有助于生物样品的分析和研究。
1.分离效果好：凝胶色谱柱可以通过调控柱层析介质的孔隙大小和分离效果，达到较好的分离效果。
2.操作简单：凝胶色谱柱的操作相对简单，不需要复杂的设备和操作流程。
3.适用范围广：凝胶色谱柱适用于不同分子量和化学性质的样品，可以满足不同的纯化需求。
1.分离速度慢：由于样品分子需要通过凝胶层的扩散来实现分离，凝胶色谱柱的分离速度较慢。
凝胶渗透色谱柱
凝胶渗透色谱柱凝胶渗透色谱柱是一种优质的分析仪器，它使用高效液相色谱技术，在连续梯度条件下，可以分离和分析固体、液体、气体和悬浮液，以及表观不溶物和超微粒等样品。
凝胶渗透色谱柱在活性材料、营养和抗生素的分析以及生物分子的精细结构解析方面应用十分普遍。
凝胶渗透色谱柱的结构基本上包括容器、色谱柱、稀释溶液和流动液。
容器用于容纳色谱柱，其中包括支架、柱支承和密封器等组件，用于定位色谱柱。
色谱柱是用于样品分离分析的主要部件，其内部空芯由一种可分离各种物质的渗透凝胶组成，填充在离心色谱柱的中心轴上，支撑色谱柱，使样品向前流动，实现分离和分析。
稀释溶液是溶质被迫从样品中分离出来的重要介质，它以水或汽油等溶剂为基础，并加入不同的添加剂以增加溶剂的特性，如电解质离子、螯合剂、增溶剂等，使系统具有良好的分离能力。
流动液是稀释溶液、色谱柱和样品之间的媒介，它以水或汽油为基础，可以用各种离子添加剂，使样品流动平稳。
凝胶渗透色谱柱的操作主要由充放液步骤、排液步骤、洗脱步骤和分离分析步骤组成。
首先加入样品，然后以一定流速加入含有抑制剂的洗脱液，使物质分为两部分，有机物和无机物，使有机物沿着稀释溶液的后流方向运行，而无机物沿着前流方向运行，实现对有机物、无机物和抗生素等物质的分离分析。
通过凝胶渗透色谱柱，可以迅速而准确地分离分析样品中的物质，特别是活性材料和抗生素，其准确性和灵敏度均得到明显提高，因此被广泛应用于各种科学研究。
凝胶渗透色谱柱的精确性好，操作简便，耗材价格低廉，而且可以用于小型研究实验室的分析仪器，这使它在分析科学中得到了广泛的应用。
在使用凝胶渗透色谱柱的过程中，需要注意以下几点：一是色谱柱的正确使用，不要折断或拉伸；二是色谱柱安装的要求，防止色谱柱滑动；三是积极排除干扰，防止杂质进入样品；四是洗脱液的使用，必须按照产品说明书操作；五是样品的操作，必须在特定温度范围内操作；六是色谱柱的存储，应采取恰当的保存措施，防止湿度的影响。
凝胶色谱仪使用操作规程
凝胶色谱仪使用操作规程一、基本理论(一)分子筛效益一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时，各分子在柱内同时进行着两种不同的运动：垂直向下的移动和无定向的扩散运动。
大分子物质由于直径较大，不易进入凝胶颗粒的微孔，而只能分布颗粒之间，所以在洗脱时向下移动的速度较快。
小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外，还可以进入凝胶颗粒的微孔中，即进入凝胶相内，在向下移动的过程中，从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒，如此不断地进入和扩散，小分子物质的下移速度落后于大分子物质，从而使样品中分子大的先流出色谱柱，中等分子的后流出，分子最小的最后流出，这种现象叫分子筛效应。
具有多孔的凝胶就是分子筛。
各种分子筛的孔隙大小分布有一定范围，有最大极限和最小极限。
分子直径比凝胶最大孔隙直径大的，就会全部被排阻在凝胶颗粒之外，这种情况叫全排阻。
两种全排阻的分子即使大小不同，也不能有分离效果。
直径比凝胶最小孔直径小的分子能进入凝胶的全部孔隙。
如果两种分子都能全部进入凝胶孔隙，即使它们的大小有差别，也不会有好的分离效果。
因此，一定的分子筛有它一定的使用范围。
综上所述，在凝胶色谱中会有三种情况，一是分子很小，能进入分子筛全部的内孔隙;二是分子很大，完全不能进入凝胶的任何内孔隙;三是分子大小适中，能进入凝胶的内孔隙中孔径大小相应的部分。
大、中、小三类分子彼此间较易分开，但每种凝胶分离范围之外的分子，在不改变凝胶种类的情况下是很难分离的。
对于分子大小不同，但同属于凝胶分离范围内各种分子，在凝胶床中的分布情况是不同的：分子较大的只能进入孔径较大的那一部分凝胶孔隙内，而分子的可进入较多的凝胶颗粒内，这样分子较大的在凝胶床内移动距离较短，分子较小的移动距离较长。
于是分子较大的先通过凝胶床而分子较小的后通过凝胶床，这样就利用分子筛可将分子量不同的物质分离。
另外，凝胶本身具有三维网状结构，大的分子在通过这种网状结构上的孔隙时阻力较大，小分子通过时阻力较小。
凝胶色谱柱操作上课讲义
凝胶色谱柱操作凝胶色谱柱操作1、溶胀商品凝胶是干燥的颗粒，通常以40~63um的使用最多。
凝胶使用前需要在洗脱液中充分溶涨一至数天，如在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温到近沸，则溶涨时间可以缩短到1~2小时。
凝胶的溶涨一定要完全，否则会导致色谱柱的不均匀。
热溶涨法还可以杀死凝胶中产生的细菌、脱掉凝胶中的气泡。
2、装柱由于凝胶的分离是靠筛分作用，所以凝胶的填充要求很高，必须要使整个填充柱非常均匀，否则必须重填。
凝胶在装柱前，可用水浮选法去除凝胶中的单体、粉末及杂质，并可用真空泵抽气排出凝胶中的气泡。
最好购买商品中的玻璃或有机玻璃的凝胶空柱，在柱的两端皆有平整的筛网或筛板。
将柱垂直固定，加入少量流动相以排除柱中底端的气泡，在加入一些流动相于柱中约1/4的高度。
柱顶部连接一个漏斗，颈直径约为柱颈的一半，然后在搅拌下、缓慢的、均匀地、连续地加入已经脱气的凝胶悬浮液，同时打开色谱柱的毛细管出口，维持适当的流速，凝胶颗粒将逐层水平式上升，在柱中均匀地沉积，直到所需高度位置。
最后拆除漏斗，用较小的滤纸片轻轻盖住凝胶床的表面，再用大量洗脱剂将凝胶床洗涤一段时间。
3、柱均匀性检查凝胶色谱的分离效果主要决定于色谱柱装填得是否均匀，在对样品进行分离之前，对色谱柱必须进行是否均匀的检查。
由于凝胶在色谱柱中是半透明的，检查方法可在柱旁放一至于柱平行的日光灯，用肉眼观察柱内是否有“纹路”或气泡。
也可向色谱柱内加入有色大分子等，加入物质的分子量应在凝胶柱的分离范围，如果观察到柱内谱带窄、均匀、平整，即说明色谱柱性能良好；如果色带出现不规则、杂乱、很宽时必须重新装填凝胶柱。
4、上样凝胶柱装好后，一定要对柱用流动相进行很好的平衡处理，才能上样。
凝胶柱的上样也是一个非常重要的因素，总的原则是要使样品柱塞尽量的窄和平整。
为了防止样品中的一些沉淀物污染色谱柱，一般在上柱前将样品过滤或离心。
样品溶液的浓度应该尽可能的大一些，但如果样品的溶解度与温度有关时，必须将样品适当稀释，并使样品温度与色谱柱的温度一致。
Waters-1515-2414-凝胶渗透色谱(GPC)操作规程
Waters 1515-2414 凝胶渗透色谱（GPC）操作规程一、溶剂和样品准备1. 选择溶剂：尝试和选择对聚合物具有良好溶解性的THF或者DMF 作为溶剂；2. 溶剂处理：采用溶剂过滤系统（真空抽滤）对色谱纯溶剂进行过滤和脱气处理；3. 样品配制：选用处理后的溶剂配置待测样品溶液，样品体积≥4mL；样品浓度根据估算的分子量确定（Mw＝103～104，浓度为1.5～2mg/mL；Mw＝104～105，浓度为1～1.5mg/mL；Mw＝105～5 x 105，浓度为0.5～1mg/mL；Mw ＝5 x 105～106，浓度为0.1～0.5mg/mL；Mw＞106，浓度为0.05～0.1mg/mL）；4. 样品溶解：提供足够时间使聚合物完全溶解（一般在室温下静止过夜）；注：可轻微摇动样品以促进溶解但不可剧烈摇动；5. 样品过滤：样品溶解后，采用一次性微孔滤膜（孔径0.22μm）对样品溶液进行过滤，保存滤液待用；注意：每个样品需要准备两个样品瓶（分别用于溶解样品和放置过滤后的溶液）和两个注射器（分别用于过滤和进样）二、仪器启动1. 将经过真空抽滤的溶剂倒入溶剂存贮瓶中；2. 依次打开稳压电源－计算机－泵－柱温箱－示差折光检测器开关；3. 启动Breeze软件，输入用户名Breeze；选择1515-2414系统，确定；4. 在Breeze软件系统中点击运行样品－点击流量图标设置泵流速0.2mL/min，注意：设置变化时间为2min，即以0.1mL/min缓慢增加流速，使色谱柱所受压力缓慢变化；5. 在示差折光检测器面板上，点击Temp ºC设置温度40 ºC（set/control）；再点击Home－Shift 1－显示Purge图标；此时示差检测器为Purge流路，冲洗示差检测器的样品池及参比池；点击平衡系统/监视基线图标－调用PS-purge方法－点击平衡/监视器，监控基线；Purge时间为10h；6. 10h后（此时基线已稳定），在运行样品界面点击设置泵流速1mL/min（设置变化时间8min，以0.1mL/min缓慢增加流速），平衡0.5h；7. 在示差折光检测器面板上，点击Shift 1，取消Purge（回到正常测样流路），平衡3～5min；再依次点击Diag－Optimize LED(16~17正常) －Enter－Home；三、样品测试1. 点击Breeze软件系统中的单进样图标－输入待测样品名－选择功能（宽分布进样）－选择方法组PS－输入进样体积（20μL）及样品测试时间（45min）－点击单进样，准备进样；此时窗口显示等待进样；2. 选用1mL注射器，安装色谱专用平头针头，采用过滤后样品溶液润洗进样注射器后，再抽取过滤后的样品溶液；将针口朝上排出气泡（注意针头不要有液珠，否则会污染进样口，必要时用镜头纸擦拭）；将进样阀门拨到Inject位置（即垂直状态），将进样注射器插入进样器内并插到底（不用过于用劲），进样；进样结束后迅速将进样阀门拨到Load位置；此时窗口显示进样正在运行；注意：进样结束后，使用抽滤后的溶剂及时清洗针头；3. 到设定的运行时间后，仪器自动停止数据采集，此时窗口显示单进样结束；20min后，按步骤1和2进下一个样品；注意：实验过程中及时观察溶剂存贮瓶中溶剂量；如需补加，必须在仪器停止数据采集时（最好在泵流速为0时）添加溶剂，且砂滤头必须在液面下。
凝胶色谱柱的使用
3应用原理
凝胶层析的分子筛原理
l 分子大小不同混合物上柱； 2 洗脱开始，小分 分子大小不同混合物上柱； 洗脱开始， 子扩散进人凝胶颗粒内， 子扩散进人凝胶颗粒内，大分子被排阻于颗粒之 大小分子分开： 大分子行程较短 大分子行程较短， 外；3 大小分子分开： 4大分子行程较短，已洗脱 出层析柱， 出层析柱，小分子尚在进行中
污染处理方法
• Sephadex LH20柱子被弄脏了，大 LH20柱子被弄脏了 柱子被弄脏了，
多数情况下是由于样品没滤, 多数情况下是由于样品没滤, 将柱头 堵住,或由于样品的死吸附( 堵住,或由于样品的死吸附(一般很少 发生),使柱子的柱头部分污染 使柱子的柱头部分污染。 发生),使柱子的柱头部分污染。 • 一般的处理是将被污染的柱头部分的 填料弃去,具体做法很简单, 填料弃去,具体做法很简单,只将被污 染的柱头部分的填料用玻棒轻轻搅起, 染的柱头部分的填料用玻棒轻轻搅起, 倒掉即可。 倒掉即可。
GPC-1：凝胶渗透色谱操作手册
6． 到 设 定 的 运 行 时 间 后 ， 仪 器 自 动 停 止 数 据 采 集 ， 窗 口 底 栏 显 示 Single inject-complete。
2． 点 Single，输入样品名，选择 inject broad samples，选择 method set（与 Project 同 名），输入进样体积及样品测试时间（THF 系统，3 根柱子，35 分钟；DMF 系统，2 根柱子，25 分钟）。
3． 在 Instrument Method 中，选择 410.instr（或 UV）。 4． 待示差检测器流路为正常测样流路时，点 Monitor 观察基线。待基线稳定后，点
niMi2 = niMi
wiMi = wi
Wi M i
W---重量分数
3． Z均分子量Mz Z均分子量是按Z量的统计平均。Z的定义为Z=wiMi。Z均分子量的定义为：一个高聚 物试样中，各分子量的Z值的分数及其相当的分子量的乘积的总和。
__
∑∑ ∑∑ ∑∑ Mz =
ZiMi = Zi
wiMi2 = wiMi
常用的高聚物的平均分子量有四种表示方法：数均分子量，重均分子量，Z 均分子 量和粘均分子量。
1． 数均分子量Mn 数均分子量被定义为在一个高聚物体系中，高聚物的总重量（以克为单位）除以高聚 物中所含各种大小分子的总摩尔数，即数均分子量是高聚物体系中各种分子量的摩尔 分数与其相应的分子量的乘积所得的总和。它是按分子数的统计平均。
2． 515 泵 流速范围在 0.00－10.00mL/min，但对于GPC柱子，流速不能超过 1.0mL/min。
凝胶过滤色谱柱 色谱柱操作规程
凝胶过滤色谱柱色谱柱操作规程凝胶过滤色谱柱用于体积排阻层析体积排阻，也叫凝胶过滤,依据物质尺寸大小的不同分别。
假如分子的尺寸大于树脂的最大孔径，这种分子就不能进入树脂颗粒内部，它所经过的有效体积最小，最早从洗脱液中流出。
凝胶过滤色谱柱用于体积排阻层析体积排阻，也叫凝胶过滤,依据物质尺寸大小的不同分别。
假如分子的尺寸大于树脂的最大孔径，这种分子就不能进入树脂颗粒内部，它所经过的有效体积最小，最早从洗脱液中流出。
而小分子能够进入树脂的孔道中，经过的有效体积比较大，从洗脱液中流出较晚，分子量越小，流出越晚。
体积排阻层析可以用于纯化的第一步，按分子量大小将产品粗分；也可以用作纯化的中心步骤来改换缓冲液或脱盐，或用于纯化的最后一步来去除杂质，精制产品。
体积排阻层析树脂有预先设定的排阻极限，排阻极限由树脂本身的最大孔径和孔径分布范围决议。
MKF有机凝胶型大孔填料规格有：7—10μm超细颗粒，具有很高的辨别率；20μm，40μm中等颗粒，用于制备型的纯化步骤；60—80μm较粗颗粒，用于经济型制备的纯化步骤；100—150μm粗颗粒，用于产物的大规模捕获。
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当色谱柱使用一段时间以后，柱内由于各种原因，滞留了一些高沸点组分或氧化物等，除柱效有所下降外，还可能显现基线波动或“鬼峰”。
为了去除污染物，使柱效和基线恢复到原来的状态，称为色谱柱的再生。
色谱柱的再生和柱老化有确定区分和不同，它是柱在使用一段时间柱性能下降，经处理后尽量恢复到原来性能的过程。
A、色谱柱在以下几种情况必需再生处理a.使一段时间，柱效明显下降；b.柱被污染，特别是在程序升温时，基线漂移和噪声超过容忍程度或显现“鬼峰”；c.柱头塌陷，柱床短路或断位（在玻璃柱中简单发觉），而显现尖峰或双重峰；d.峰形展宽，保留时间明显变化；e.待分别组分和固定相表面非特异性相互作用，引起保留时间较短的峰拖尾或显现双峰；B、毛细管柱再生的几种方法a.用载气将色谱柱污染物冲洗出来；b.将柱头截去100mm 或更长一些；c.若使用交联的色谱柱，可在仪器上反复注射溶剂进行冲洗。
凝胶渗透色谱(GPC)、凝胶色谱设备安全操作规定
凝胶渗透色谱(GPC)凝胶渗透色谱（GPC）又称凝胶色谱，是高分子化合物的分子量测定和分布分析的重要方法之一。
GPC是一种以凝胶过滤为基础的分离技术，通过溶液中高分子量化合物在凝胶柱的过滤作用下发生分离和分子量分布测定。
GPC是一种广泛使用的技术，涉及到工业、生产等多个领域，因此设备的安全操作至关重要。
下面介绍凝胶色谱设备的操作规定。
设备安全操作规定一、设备安装1.在设备安装前，应仔细阅读设备的说明书，并根据说明进行安装。
2.安装地点应选择平稳、通风、无尘、无环境振动和电磁干扰的地方。
3.在安装凝胶色谱柱时，切勿使柱子接触到有机溶剂，以免磨损和污染。
4.在连接系统管路时，要求密封性好，避免泄漏和外界污染。
二、操作前准备1.确认设备电源、水源和气源等是否正常，并根据实际需要进行调整和适当调节。
2.准备好实验所需试剂、溶剂、标准品等，并按要求进行标记和分类。
3.检查柱子封头是否紧固，柱温控制是否正常，出样口和检测器设备是否连接正常。
三、样品准备1.样品需先过滤，去掉杂质和颗粒，然后进行适当的稀释处理，以避免过高的浓度造成的毛刺。
2.样品的溶剂应与流动相相同，以避免对流动相造成干扰和影响。
3.在进行样品预处理和进样前，必须先清洗进样器和采样针，以避免样品交叉污染和干扰。
四、操作过程中的注意事项1.注意保持操作环境干净，避免灰尘、污染物等杂质进入柱子和系统中。
2.切勿突然关闭机器或脱离电源，应按照说明书要求进行操作，避免对设备和数据造成损伤和误差。
3.在操作过程中，随时监测输出信号，注意记录相关的参数和数据，便于后期的分析和处理。
4.如果设备出现异常情况，应立即停止操作，寻找问题并解决，以免对实验数据造成影响和误差。
总结凝胶渗透色谱是一种常用的高分子量分析技术，应用广泛。
在进行实验操作时，设备的安全是至关重要的。
在操作过程中，我们需要仔细阅读说明书，按要求进行设备安装和调试，准备好富有经验的工作人员，保持设备和操作环境的干净和整洁，随时注意操作中的细节注意事项。
GPC凝胶色谱操作规程
GPC凝胶色谱操作规程GPC凝胶色谱（Gel Permeation Chromatography）是一种用于分离和测定高分子聚合物分子量分布的方法。
下面是一份简要的GPC凝胶色谱操作规程，包括样品准备、仪器操作、数据处理等步骤。
一、样品准备1. 将待测样品溶解在适量的溶剂中，使其浓度达到适合测定的范围。
2. 溶液中的固体颗粒应尽量去除，可通过过滤或离心操作来完成。
二、仪器操作1. 打开仪器电源，启动GPC系统。
2. 检查仪器各个部分的连接是否紧密，确保没有泄漏。
3. 检查流动相的质量和纯度，必要时进行更换。
4. 使用适当的毛细管或注射器将样品注入到色谱柱中。
5. 设置流动相的流速和温度，一般情况下，流速根据实验需要选择，温度一般设置在室温下进行。
6. 开始运行GPC实验，记录运行开始的时间。
三、GPC实验运行1. 设定好GPC柱的温度、流速和检测器的灵敏度等参数。
2. 打开检测器的电源，选择合适的检测波长或检测器类型。
3. 开始样品分离，记录分离过程中的响应信号，并保存数据。
四、数据处理1. 使用专用的GPC数据处理软件对得到的数据进行处理。
2. 根据响应信号与时间的关系曲线，计算出不同分子量的聚合物峰面积。
3. 将样品的峰面积与标准聚合物的峰面积进行比较，计算出待测样品的分子量分布。
4. 根据实验需要，可以生成相关的分子量分布曲线或分子量平均值等结果。
五、注意事项1. 在操作过程中，应注意保持实验环境的洁净，并避免灰尘和异物的污染。
2. 使用前应检查样品是否有异常，如有溶解不完全、有颗粒物等，应予以处理或更换。
3. 注意操作时的安全性，避免与有毒或腐蚀性物质接触。
4. 操作结束后，及时将仪器清洗干净，并进行必要的维护。
以上是一份简要的GPC凝胶色谱操作规程，但实际操作中可能因仪器和实验需求的不同会有一些细微的差距，因此在操作时应根据具体情况进行调整。
另外，此规程也建议参考实验室的操作指南和相关文献，以确保操作的准确性和可重复性。
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凝胶色谱柱操作
1、溶胀商品凝胶是干燥的颗粒，通常以40~63um 的使用最多。
凝胶使用前需要在洗脱液中充分溶涨一至数天，如在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温到近沸，则溶涨时间可以缩短到1~2 小时。
凝胶的溶涨一定要完全，否则会导致色谱柱的不均匀。
热溶涨法还可以杀死凝胶中产生的细菌、脱掉凝胶中的气泡。
2、装柱由于凝胶的分离是靠筛分作用，所以凝胶的填充要求很高，必须要使整个填充柱非常均匀，否则必须重填。
凝胶在装柱前，可用水浮选法去除凝胶中的单体、粉末及杂质，并可用真空泵抽气排出凝胶中的气泡。
最好购买商品中的玻璃或有机玻璃的凝胶空柱，在柱的两端皆有平整的筛网或筛板。
将柱垂直固定，加入少量流动相以排除柱中底端的气泡，在加入一些流动相于柱中约1/4 的高度。
柱顶部连接一个漏斗，颈直径约为柱颈的一半，然后在搅拌下、缓慢的、均匀地、连续地加入已经脱气的凝胶悬浮液，同时打开色谱柱的毛细管出口，维持适当的流速，凝胶颗粒将逐层水平式上升，在柱中均匀地沉积，直到所需高度位置。
最后拆除漏斗，用较小的滤纸片轻轻盖住凝胶床的表面，再用大量洗脱剂将凝胶床洗涤一段时间。
3、柱均匀性检查凝胶色谱的分离效果主要决定于色谱柱装填得是否均匀，在对样品进行分离之前，对色谱柱必须进行是否均匀的检查。
由于凝胶在色谱柱中是半透明的，检查方法可在柱旁放一至于柱
平行的日光灯，用肉眼观察柱内是否有“纹路”或气泡。
也可向色谱柱内加入有色大分子等，加入物质的分子量应在凝胶柱的分离范围，如果观察到柱内谱带窄、均匀、平整，即说明色谱柱性能良好；如果色带出现不规则、杂乱、很宽时必须重新装填凝胶柱。
4、上样凝胶柱装好后，一定要对柱用流动相进行很好的平衡处理，才能上样。
凝胶柱的上样也是个非常重要的因素，总的原则是要使样品柱塞尽量的窄和平整。
为了防止样品中的一些沉淀物污染色谱柱，一般在上柱前将样品过滤或离心。
样品溶液的浓度应该尽可能的大一些，但如果样品的溶解度与温度有关时，必须将样品适当稀释，并使样品温度与色谱柱的温度一致。
当一切都准备好后，这时可打开色谱柱的活塞，让流动相与凝胶床刚好平行，关闭出口。
用滴管吸取样品溶液沿柱壁轻轻地加入到色谱柱中，打开流出口，使样品液渗入凝胶床内。
当样品液面恰与凝胶床表面平时，再次加入少量的洗脱剂冲洗管壁。
重复上述操作及此，每一次的关键是既要使样品恰好全部渗入凝胶床，又不致使凝胶床面干燥而发生裂缝。
随后可慢慢地逐步加大洗脱剂的量进行洗脱。
整个过程一定要仔细，避免破坏凝胶柱的床层。
5、冲洗凝胶色谱的流动相一半多采用水或缓冲溶液，少数采用水与一些极性有机溶剂的混合溶液，除此之外，还有个别比较特殊的流动相系统，这要根据溶液分子的性质来决定。
加完样品后，可将色谱床与洗脱液贮瓶及收集器相连，设置好一个适宜的流速，就可以定量地分布收集洗脱液。
然后根据溶质分子的性质选择光学、化学或生物学的方法进行定性和定量测定。
6、再生因为在凝胶色谱中凝胶与溶质分子之间原则上不会发生任何作用，因此在一次分离后用流动相稍加平衡就可以进行下一次的色谱操作。
但在实际应用中常有一定的污染物污染凝胶。
对已沉积于凝胶床表面的不溶物可把表层凝胶曲调，在适当增补一些新的溶涨胶，并进行重新平衡处理；如果整个柱有微量污染，LINaCI溶液洗脱。
在通常情况下，一根凝胶柱可使用半年之久。
凝胶柱若经多次使用后，其色泽改变，流速降低，表面有污渍等就要对凝胶进行再生处理。
凝胶的再生是指用恰当的方法除去凝胶中的污染物，使其恢复其原来的性质。
交联葡萄糖凝 胶厂用温热的L 氢氧化钠和L 的氯化钠和混合液浸泡，用水冲洗到中性；而对于聚丙烯酰胺和 琼脂糖凝胶由于遇酸碱不稳定，则常用盐溶液浸泡，然后用水冲到中性。
7、保存
经常使用的凝胶以湿态保存为主，为了避免凝胶床染菌，可加少许氯仿、苯酚或硝基苯等化
学物质，它可以使色谱柱放置几个月至一年。
凝胶的干燥应先对凝胶进行浮选，除去细小的 颗粒，并用大量水洗，除去盐和污染物，然后逐步增加一春浓度使凝胶收缩, 燥，在整个操作过程
中的蒸馏水、器皿和房间必须干净 。
琼脂糖凝胶的干燥操作比较麻烦, 并且干燥后还不容易溶张，所以一般仍以湿态保存为主。
凝胶色谱柱的使用方法 看到很多虫友问葡聚糖凝胶的使用方法，所以将自己的一点经验写下来，以作参考。
葡聚糖 凝胶柱的使用方法大体有一下步骤：
（1）预处理称取葡聚糖凝胶（有不同型号）若干克，加入洗脱剂（通常为甲醇或者水，这里以 甲醇为例）约20倍凝胶量，置室温下3h 进行溶胀，溶胀必须彻底，否则会使上柱后流速变
装柱凝胶层析柱的直径与柱长之比一般为 1:15。
柱的底部用装有细玻璃管的橡皮塞塞
用洗净的玻璃丝（约200目尼龙布）垫底或购买类似规格的商品柱。
然后将柱垂直安装 接着将溶胀好的凝胶边搅匀边缓缓连续装入， 色谱柱的出口流速m 维持在
5~10ml/min 。
（1d 为，所以要1S 两滴）
胶颗粒沉积到柱底后关紧色谱柱， 等沉降到1-2cm 时再2打开色谱柱。
直至降到满意高度为 止，等凝胶柱内的液体留的与凝胶高度差不多时，用较小的滤纸盖住凝胶床表面，再用洗脱 剂洗脱过夜。
装柱后的凝胶必须均匀，不能有气泡或明显条纹。
否则，必须到出重装。
（3）加样装好的色谱柱至少要用相当于 3倍保留体积的洗脱剂平衡，待洗脱剂流至与凝胶柱 液面相平时（不能流干，否则会带入气泡），用滴管吸取样品溶液，在高于凝胶表面约 1cm
处，沿管壁四周缓缓滴加样品液，加完后打开下面的出口，使样品渗入凝胶内。
再关闭出 口，用少量洗脱液将管壁残留的样品洗下，再打开出口，至溶液渗入柱内，再关闭出口。
可 以考虑再加一层薄薄的脱脂棉以保护柱表面(我一般不加)，然后即可进行洗脱。
(4) 洗脱与收集洗脱时， 用甲醇作洗脱剂 ，并且要连续不断地进行， 使凝胶柱上端保持一定 的液层，防止凝胶柱表面的液体流干。
一 般酸性洗脱剂中碱性物质容易洗脱，碱性洗脱剂中 酸性物质容易洗脱。
多糖类物质等极性大的物质考虑用水洗脱，常用的洗脱剂是水 - 甲醇，水
在60~80度干 慢, 凝胶断裂等。
紧, 好,
-乙醇，水-丙酮等，一般根据自己样品的性质选择洗脱液，洗脱液可一直用单一梯度。
凝胶色谱的共性是流速慢，每份一般体积较小。
(内径左右，长80cm 左右的柱子我一般每份收集液为8ml )(5) 凝胶的再生和回收凝胶柱多次使用后，若污染严重，则考虑用50 度左右的
2% 的NaOH 和LNaCl 混合液浸泡后，再用水洗净即可。