胶体金试纸条检测技术

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测定
过剩的免疫金复合物继续前行， 至参照区与固相抗小鼠IgG结合 （免疫金复合物中的单克隆抗 体为小鼠IgG），而显出红色质 控线条（R）。
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测定
阴性标本则无反应线条，而仅显示质控线条。
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胶体金快速诊断技术的特点
简捷快速：操作简单，一般只要5-10min 就会出结 果，而其它方法如ELISA需要1-2h，PCR 需要时间 更长。
结果易于判定：阴、阳性呈色很明显，肉眼很容易 判断。
特异性好：因为该技术大多用单克隆抗体标记，这 决定了它具有很好的特异性。
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胶体金快速诊断技术的应用
病毒性疾病：传染性法氏囊病、禽流感、新城疫、 犬细小病毒、猪瘟等。
寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛虫病、囊虫病、恙 虫病。
细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻疽。
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➢基础金核
➢双离子 内层负离子（AuC12－） zeta电位
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外层离子层
H+分散在
z胶et体a电间的位溶可液以中使胶体金颗粒之间相互排斥，以维持
胶体金的稳定状态。
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胶体金颗粒对蛋白质有很强的吸 附功能，而不被坏其生物活性，可以与蛋 白质等（葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白） 等非共价结合，形成胶体金标记物。
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H5 亚 型 AIV 尿 囊液阳性结果
阴性对照
H5ＡIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
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2019
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二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的毛 细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一 端渗移，通过抗原抗体结合，并利用胶体金呈现 颜色（红色）反应，检测抗原/抗体。有三种反应 模式：夹心法，间接法，竞争抑制法。
最常用的是双抗夹心法检测抗原
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胶体金试纸条示意图
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➢胶体金的质量判定标准 ✓质量好的胶体金：溶液呈红色，胶体金颗粒为球
形，大小均一，无棱角。 ✓质量差的胶体金：溶液呈紫色，大小不一，形状
各异。
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胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带 负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应 用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
样品垫
连接垫 （胶体金垫）
质检线
吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
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测定
测定时将试纸条下端浸入液体 标本中，下端吸水材料即吸取 液体向上端移动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物复溶， 并带动其向膜条渗移。
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测定
若 标 本 中 有 待 测 特 异 抗 原 ， 即 可与免疫金复合物中的抗体结 合，此抗原抗体复合物流至测 试区即被固相抗体捕获，在膜 上显出红色反应线条（T）。
胶体金试纸条诊断技术
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一、简 介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层 析技术研制而成，该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免 疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激 素（HCG）的测定和乙型肝炎病毒表面抗原 （HBsAg）等检测。
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胶 体 金 （ Colloidal gold） 是 氯 金 酸 （HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的作 用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于静 电作用成为一种稳定的胶体状态。