胶体金试纸条检测技术

➢胶体金的质量判 ✓定质标量准好的胶体金：溶液呈红色，胶
体金颗粒为球形，大小均一，无棱 角。
✓质量差的胶体金：溶液呈紫色，大 小不一，形状各异。
胶体金标记的原理：胶体金在碱 性条件下带负电荷，与蛋白质分 子的正电荷基团藉静电吸引而形 成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示 踪标记物应用于抗原抗体反应的
➢基础金核 ➢双离子 内层负离子（AuC12－） zeta电位 z排 体et斥 间a电， 的位以 溶可液维以中持外使胶层胶体离金体子的金层稳颗定粒H状+之分态间散。相在互胶
胶体金颗粒对蛋白质有
很强的吸附功能，而不被坏其 生物活性，可以与蛋白质等 （葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋 白）等非共价结合，形成胶体 金标记物。
结果易于判定：阴、阳性呈色很 明显，肉眼很容易判断。
特异性好：因为该技术大多用单 克隆抗体标记，这决定了它具有
胶体金快速诊断技术的 应用
病毒性疾病：传染性法氏囊病 、禽流感、新城疫、犬细小病 毒、猪瘟等。
寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛 虫病、囊虫病、恙虫病。
细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻 疽。
H5 亚 型 AIV 尿 囊 液阳性结 果
二、胶体金试纸条诊断技术 的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微 孔膜的毛细血管作用，滴加在膜条一 端的液体慢慢向另一端渗移，通过抗 原抗体结合，并利用胶体金呈现颜色 （红色）反应，检测抗原/抗体。有 三种反应模式：夹心法，间接法，竞 争抑制法。
胶体金试纸条示意 图
样品垫
连接垫
（胶体金垫） 质检线
阴性对 照
H5ＡIV 细胞毒 阳性结 果 阴性对 照
胶体金试纸条诊断技术
一、简 介
胶体金试纸条诊断是采用胶体 金免疫层析技术研制而成，该技 术是90年代初在免疫渗滤技术 的基础上建立的一种简易快速的 免疫学检测技术，最先用于人绒 毛 膜 促 性 腺 激 素 （ HCG） 的 测 定和乙型肝炎病毒表面抗原 （HBsAg）等检测。
胶体金（Colloidal gold）是氯 金酸（HAuCl4）的水溶胶，氯 金酸在还原剂的作用下，聚合成 特定大小的金颗粒，并由于静电 作用成为一种稳定的胶体状态。
测定
过 剩 的 免 疫 金 复 合 物 继续前行，至参照区 与固相抗小鼠IgG结合 （免疫金复合物中的 单克隆抗体为小鼠 IgG），而显出红色质 控线条（R）。
测定
阴性标本则无反应线条，而仅显 示质控线条。
胶体金快速诊断技术的 特点
简捷快速：操作简单，一般只要 5-10min 就会出结果，而其它 方 法 如 ELISA 需 要 1 -2h ， PCR 需要时间更长。
吸收垫
背衬 （底板）
检测线 硝酸纤维素膜
测定
测定时将试纸条下端浸 入液体标本中，下端吸 水材料即吸取液体向上 端Fra Baidu bibliotek动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物 复溶，并带动其向膜条 渗移。
测定
若标本中有待测特异抗 原，即可与免疫金复合 物中的抗体结合，此抗 原抗体复合物流至测试 区即被固相抗体捕获， 在膜上显出红色反应线 条（T）。