技能实验报告(谷丙转氨酶)

当肝脏发生严重坏死或破坏时,才能引起谷草转 氨酶的显著升高。通常,体检中主要检查的转氨 酶是谷丙转氨酶(ALT)。1%的肝脏细胞损害, 可以使血中ALT的浓度增加1倍。因此,ALT水 平可以比较敏感地监测到肝脏是否受到损害。 然而转氨酶高是个很常见的情况,并不一定是肝 脏出了问题。因为转氨酶非常敏感,很多因素会 引起转氨酶正常值的上下波动,健康人在一天之 内的不同时间检查,转氨酶测量结果都可能不一 样。转氨酶水平在0—40之间是正常的。
实验器材：
设备：移液抢，替补头，酶标仪，显色板 试剂：谷丙转氨酶试剂盒(谷丙转氨酶基质液， 2，4-二硝基苯肼液，4mol/L氢氧化钠液)， 血清
实验前准备
药物对小鼠急性肝损伤的 保护作用：
1、将健康60只ICR小鼠随机 分成六组：正常对照组、模型 组（CCl4）、联苯双酯阳性 对照组、药物高、中、低（ 400、200、100mg/kg） 组，每组10只。 2、高、中、低剂量给药组分 别400、200、100mg/kg 灌胃，1次/d，0.2ml/只， 连续6天，于末次给药后1小 时，将CCl4溶于精制的花生 油中，配成0.35%的CCl4花 生油溶液，按0.1ml/10g的 剂量灌胃建立急性肝损伤模型 。正常对照组灌胃等量生理盐 水，禁食不禁水，24h后：a摘眼球取血， 分离血清3000r/min，离心10min， 分成两份，4℃保存备用；b取肝脏分成 两份。一部分放在10%福尔马林固定， 另一部分做成肝匀浆，取0.5g肝组织， 剪碎、放入玻璃匀浆器中，将预冷的9倍 体积的0.9%生理盐水匀浆， 3000r/min，离心10min，上清液分 成两份4℃保存备用。
实Biblioteka Baidu步骤
1、4mol/l氢氧化钠与蒸馏水按1:9的比例稀释配成0.4mol/L 的氢氧化钠液 2、 测定管 对照管
血清（µl） 基质液（µl） 5 25 25 25 5
混匀后，37℃，水浴30min
2，4-二硝基苯肼 25 液（µl） 血清（µl） 混匀后，37℃，水浴20min 0.4mol/L氢氧 化钠液（µl） 250 250
0.499
0.351
空白
0.044
0.041
1、数据统计 实验数据采用SPSS（版本11.5）软件的 Independent-Samples T test 算法 进行统计，以x±SD表示，模型对照组与其 他各组血清酶的差异显著性水平设为0.05
2、预期结果
3、实验结果
通过查标准曲线，得到谷丙转氨酶活力单位
谷丙转氨酶评价肝功能
成员：黄黎黎，黄立焘，蒋孟青，雷萌， 林秋惠，李浩，刘婷，刘秋红，隆晓元
前言
损伤是多种致病因素所造成的 肝脏病理过程的一部分，是肝 纤维化和肝硬化的起始动因。 近年来随着新药的大量涌现， 由药物引起的肝脏损害也屡见 不鲜。因此对肝脏疾病的防治 己为全世界所关注。目前尚无 更多的特效药可以明显地减轻 肝脏的损伤和促进肝细胞的
实验数据
高剂量组 测定组 0.616 0.349 0.403 0.758 0.821 0.424 0.613 0.342
中剂量组
低剂量组
正常组
模版组
联苯双酯组
对照组 测定组 对照组 测定组 对照组 测定组 对照组 测定组 对照组 测定组 对照组 0.27 0.261 0.316 0.325 0.344 0.325 0.272 0.283 0.432 0.409 0.411 0.442 0.326 0.374 0.407 0.631 0.346 0.35 0.354 0.36 0.28 0.293 0.303 0.374 0.37 0.587 0.398 0.665 0.414 0.755 0.397 0.55 0.263 0.291 0.297 0.349 0.34 0.357 0.25 0.292 0.438 0.604 0.424 0.458 0.397 0.336 0.383 0.623 0.31 0.33 0.372 0.346 0.34 0.384 0.356 0.321 1.602 1.374 1.252 0.865 1.168 0.754 1.135 1.271 1.256 1.151 1.197 0.992 0.47 0.494 0.478 0.389 0.373 0.391 0.757 0.425 0.336 0.339 0.279 0.261 0.329 0.357 0.348 0.35
高剂量组 中剂量组 低剂量组 正常组 活力单位 模版组 联苯双脂组
实验分析
实验结论
参考文献
1、王金胜、龚 雁、方文富 蜂王浆对肝损伤的 保护作用的研究进展（福建农林大学蜂学学院， 福州金山 350002）
再生，如何预防及治疗各类肝脏疾病己引起国内外有关学 者的广泛重视，因此了解肝损伤及其发生机制，对寻找防 治药物的研究意义重大。
国内研究课题
1、蜂王浆对肝损伤的保护作用 2、鹿茸对肝损伤的保护作用 3、琥珀酸钠对肝损伤的保护作用 4、夏枯草对肝损伤的保护作用
实验原理
转氨酶是人体代谢过程中必不可少的“催化剂”， 主要存在与肝细胞内。肝功检查中最基本，最重 要的指标就是转氨酶,通常包括血清谷丙转氨酶 （ALT）和谷草转氨酶（AST）两项。谷丙转氨 酶主要存在于肝细胞原浆的可溶部分,肝细胞发生 炎症病变,引起细胞肿胀,坏死或肝细胞膜通透性 增高等,均可使谷丙转氨酶释放于血液循环中,而 使血清谷丙转氨酶增高。谷草转氨酶主要存在于 肝细胞线粒体内,