血型与交叉配血试验(修改)
血型鉴定与交叉配血
根据红细胞膜上有无A抗原或B抗原， 将血型分为A型、B型、AB型及O型四 种。通常利用红细胞凝集试验，通过 正定型和反定型鉴定ABO血型。
正定型是用已知抗A和抗B分型血清来测 定红细胞上有无相应的A抗原或B抗原； 反定型是用已知A细胞和B细胞来测定血 清中有无相应的抗A或抗B。
血型抗原
抗B A型RBC B型RBC O型RBC
-
-+
+
-
结果 O
+
--
+
-
A
-
++
--B来自++-
-
-
AB
Rh血型鉴定
一、试剂 1、IgM抗-D试剂血清 2、待检红细胞悬液
二、操作 1、取12×75mm干净小试管1支 2、滴入IgM抗-D试剂血清1~2滴 3、滴入红细胞悬液 4、混匀后3400转/分离心15秒 5、轻轻摇动试管，观察结果 6、凝集为阳性，不凝集为阴性
红细胞血型抗原： 已确定的有29个系统、200多种抗原
其中必查血型抗原： ABO抗原和RhD抗原
血型抗体
常见的血型抗体分子大多属于IgM或IgG两类
*五类免疫球蛋白具有相似的单体结构 *两条轻链(L链)和两条重链(H链)组成的四肽 链 (H2L2)---单体结构
1、 IgG 抗体
分子较小，通常以单体形式存在。多经妊娠 或输血后免疫产生。在盐水介质中只能致敏相应 抗原的红细胞，而不能使之凝集，所以又称为不 完全抗体。必须通过特定的方法（如抗人球蛋白） 使致敏红细胞发生凝集。
2. 各加LIM溶液0.7m1 ，混合均匀后，再各加 Polybrene溶液1滴，并混合均匀，置室温1分钟。
3．普通离心机1000g离心15秒，然后把上清液 倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。
血型鉴定和交叉配血
实验耗材应严格筛选，确保质量合格，使用后应进行无害化处理。
实验室安全与防护措施
安全设施
实验室应配备必要的安全设施，如消防器材、应急喷淋装置等。
防护措施
实验室工作人员应佩戴个人防护用品，如手套、口罩、实验服等。
05
血型鉴定和交叉配血的最新研 究进展
血型鉴定技术的创新与发展
生物信息学方法的应用
研究新型输血方法和技术，降低输血并发症和不良反应的发生 率。
血液保护策略的探讨
探讨自体输血、血液回收等策略在临床的应用，降低异体输血的 需求。
公众教育及意识提升
加强公众对输血安全的认知教育型血
含有B抗原，在红细胞上表达，血清中产生 抗A抗体。
O型血
不含A抗原和B抗原，在红细胞上不表达， 血清中产生抗A和抗B抗体。
血型鉴定的原理和方法
原理
基于抗原-抗体的特异性反应，通过检测红细胞上的抗原和血清中的抗体来判 断血型。
方法
玻片法、试管法、微柱凝胶法等，其中微柱凝胶法是目前最常用的方法。
严格的质量控制
实施标准化操作，确保交叉配血结果的准确性和可靠性。
新技术的应用
运用分子生物学技术、基因测序等手段，对血液样本进行深度 分析和比对，提高交叉配血的准确性。
临床应用的拓展
将交叉配血技术应用于其他领域，如器官移植、新生儿的输血 等，扩大其应用范围。
输血安全与血液保护的研究热点
输血安全性的提升
血型鉴定和交叉配血
汇报人：xx 2023-11-04
目 录
• 血型鉴定 • 交叉配血 • 血型鉴定和交叉配血在输血中的应用 • 血型鉴定和交叉配血的实验室质量控制 • 血型鉴定和交叉配血的最新研究进展
实验7ABO血型鉴定及交叉配血实验_基础生物学实验(安徽大学研究生复试用,生物 生命科学)
实验七ABO血型鉴定及交叉配血实验一、实验目的通过鉴定实验和配血实验来学习、掌握人类ABO血型的原理和方法。
二、实验原理血型是特指血细胞膜表面抗原的类型。
ABO血型系统是一类常用的血液分型体系。
在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。
A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。
血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A 或/和B抗原。
在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型(表7-1)。
统不同，人群中Rh血型的不匹配非常罕见，尤其在黄种人中，Rh(+)型占到99.7%,而Rh(-)型还不到0.3%。
所以在医疗输血中，通常只考虑献血者和输血者之间ABO血型是否匹配。
ABO血型在人群中的分布，存在着地理环境及民族、种族的差异，在我国汉族人群中，各血型的比例由多到少依次是O(34.11%)﹥ B(28.98%)﹥A(28.29%)﹥AB(8.69%)。
交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象。
输血时，主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集，其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。
前者叫交叉配血的主侧，后者称为交叉配血的次侧。
只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”。
如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。
三、实验材料人外周血四、实验器材与试剂(一)器材采血针、尖头滴管、载玻片、1.5ml Eppendorf管、75%酒精棉球、消毒干棉球和记号笔。
(二)仪器显微镜、离心机。
(三)试剂标准A血清、标准B血清、生理盐水、碘酒。
五、实验操作（一）ABO血型鉴定1．用记号笔在载玻片两端分别作好标记A、B。
血型与交叉配血
A2型易误定血型的原因
• A2型及A2B型的抗原性较弱，如B型血清中 含抗A1多，抗A少，致使抗A血清效价低， 不能在体外与A2型，或A2B型RBC发生反应， 易误定血型，因此要求抗A效价比抗B高。
A2型易误定血型的后果
A2型常易 误定为O型
输给O型人
两型受血者的抗A 抗体均可能与输入 的A2型RBC发生
ABO血型鉴定常用方法
• 盐水凝集法
• 凝胶微柱法
1．盐水凝集法
• ABO血型抗体一般IgM，属为完全抗体
• IgM抗体分子链较长，能克服红细胞表面排
斥力，同时分子量较大，它能与相应抗原
特异性结合，在生理盐水中发生肉眼可见
的凝集现象。
• 简便，不需要特殊仪器 • ①玻片法： –操作简单，不需要离心，适于大规模血型普查 –反应时间长，易忽略较弱的凝集而导致定型错 误。不适于反定型和交叉配血。 • ②试管法： –反应时间短 –适用于急诊定型。 –可发现亚型或较弱抗原抗体反应，结果判断可 靠，为常规检查方法。
ABO血型又称为“ABH血型”。 A抗原和B抗原的合成是以H物质为前 提的,O型红细胞也有H物质但不能产 生A抗原和B抗原： 在ABO血型物质合成过程中： 基因
控制
酶
控制
合成抗原
首先是H基因控制的L一岩藻糖转移酶的合成 ，它使一个分子的岩藻糖(Fuc)加在血型前体 物质上，形成H物质(H抗原)：
天然抗体与免疫抗体的鉴别
天然抗体 免疫抗体 抗原刺激 无（一般不被察觉）有（妊娠、输血） 分子量 100万 仅16万 免疫球蛋白类型 大多为IgM 主要为IgG 与RBC反应的最适温度 4℃ －25℃ 37℃ 被血型物质中和 能 不能 耐热性 不耐热 耐热（不完全抗体） 通过胎盘 不能 能（不完全抗体） 盐水中与相应RBC 能发生凝集 不发生凝集 对酶处理过的RBC反应 变化不大 能反应 特性
交叉配血试验的方法
交叉配血试验的方法交叉配血试验是一种常用的血型鉴定方法，主要用于确定一个人的血型类型以及确定输血时的血液配型。
下面将详细介绍交叉配血试验的工作原理，步骤以及其在临床应用中的意义。
交叉配血试验是通过比较供者血液和受者血液的相容性来确定是否可以进行输血。
其基本原理是根据不同的抗原和抗体之间的反应来进行血型鉴定。
人类血液主要分为ABO系统和Rh(D)系统，其中ABO系统包括A、B、O和AB四种血型，而Rh(D)系统主要有Rh(D)阳性和Rh(D)阴性两种类型。
交叉配血试验通常分为直接试验和间接试验两种。
直接试验是将供者的红细胞与受者的血清进行混合，在特定的实验条件下观察是否出现凝集反应。
如果凝集反应出现，那么说明供者和受者之间存在抗体-抗原的反应，即不相容，不适合输血。
如果没有凝集反应，则说明两者之间相容，可以进行输血。
直接试验主要用于确定供者血型是否与受者血型相容。
间接试验则是将受者的红细胞与已知血型的抗体混合，观察是否发生凝集反应。
如果出现凝集反应，说明受者的红细胞上有与抗体相对应的抗原，即该血型。
间接试验主要用于确定受者的血型。
一般情况下，交叉配血试验的步骤如下：1. 收集供者和受者的血液样本，并严格保持样本的标识正确，以免混淆。
2. 进行直接试验。
将供者的红细胞与受者的血清混合，在适当的试剂和温度条件下观察是否出现凝集反应。
如果有凝集反应则表示不相容，不适合输血。
如果没有凝集反应，则继续进行下一步。
3. 进行间接试验。
将受者的红细胞与已知血型的抗体混合，在适当的试剂和温度条件下观察是否发生凝集反应。
如果有凝集反应，则可以确定受者的血型。
如果没有凝集反应，则继续进行下一步。
4. 如果直接试验和间接试验的结果一致，那么可以确定供者和受者的血型相容，可以进行输血。
如果结果不一致，则需要重新检查样本或采用其他血型鉴定方法。
交叉配血试验在临床应用中具有重要意义。
首先，它可以帮助确定受者的血型，从而避免输错血的风险。
血型鉴定及交叉配血
严格进行血型鉴定和交叉配血试验， 确保供、受体血型一致。
症状
寒战、高热、腰背酸痛、血红蛋白尿、 黄疸等，严重者出现血压下降、休克 和急性肾衰竭。
非溶血性输血反应
发生机制
与免疫因素有关，如过敏反应、 发热反应等。
症状
皮肤瘙痒、红斑、荨麻疹、咳嗽、 呼吸困难等，严重者出现过敏性
休克。
预防
对有过敏史的受血者进行预防性 用药，输血前仔细询问受血者过
O型血与疾病的关系
O型血人群患心血管疾病的风险 较低，但也有一定的风险。
O型血人群对某些病毒和细菌的 抵抗力较强，如流感病毒、肺炎
球菌等。
O型血人群患某些癌症的风险较 高，特别是结直肠癌和乳腺癌。
04 输血反应
CHAPTER
溶血性输血反应
发生机制
预防
由于供、受体的血型抗原不匹配，导 致红细胞在血液循环中溶解破坏。
A型血人群易感染某 些病毒和细菌，如流 感病毒、幽门螺杆菌 等。
A型血人群患癌症的 风险也相对较高，特 别是消化系统癌症。
B型血与疾病的关系
B型血人群患心血管疾病的风 险较低，但也有一定的风险。
B型血人群患某些自身免疫性 疾病的风险较高，如类风湿性 关节炎、系统性红斑狼疮等。
B型血人群易感染某些病毒和 细菌，如流感病毒、肺炎球菌 等。
敏史。
输血传播疾病
疾病种类
包括乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病、梅毒等。
传播途径
通过血液中携带病毒的微量红细胞或白细胞传播。
预防
对献血者进行严格的筛选和检测，采用病毒灭活 技术处理血液制品。
05 输血前检查
CHAPTER
输血前检查的内容
01
02
03
交叉配血试验名词解释
交叉配血试验名词解释交叉配血试验是一种用于确定献血者和受血者之间血型兼容性的检测方法。
它是通过将被测者的血清与已知血型的人群的红细胞混合，观察是否出现凝集反应或溶血现象来判断两者之间的兼容性。
在交叉配血试验中，通常会使用受试者的血清和供者的红细胞。
首先，取一定量的供者的红细胞，经过洗涤，去除其中的血浆和血小板。
然后，加入受试者的血清，进行混合反应。
观察反应管中是否出现凝集现象或溶血现象。
凝集反应是指当受试者血清中存在了与供者红细胞表面抗原相对应的抗体，就会发生抗原与抗体的凝集反应。
凝集反应可以通过肉眼直接观察到，通常呈现出红细胞团块的形式。
如果出现了凝集现象，则说明受试者的血清中存在与供者红细胞表面抗原相对应的抗体，这意味着两者之间不兼容。
溶血现象是指当受试者血清中存在了与供者红细胞表面抗原相对应的抗体时，抗体会与红细胞相结合，导致红细胞受到破坏和溶解的现象。
在交叉配血试验中，溶血现象通常使用高渗透溶血试剂（如20%的葡萄糖溶液）来加速实验结果的观察。
如果出现红细胞溶解或显著变色，则说明两者之间不兼容。
根据交叉配血试验的结果，可以确定献血者和受血者之间的血型兼容性，从而确保安全有效的输血。
如果受试者的血清中含有与供者红细胞表面抗原相对应的抗体，或者供者的红细胞与受试者的血清发生了凝集或溶血现象，就意味着两者之间不兼容，输血可能会导致不良反应。
交叉配血试验是临床血型鉴定和输血的重要手段之一。
通过该试验，可以确定受血者是否适合接受特定供者的血液，避免因输血引起的不适甚至生命威胁。
同时，交叉配血试验也可用于研究血型抗原和抗体之间的相互作用机制，为血型学研究提供重要的实验依据。
实验三血型鉴定(交叉配血)
盐水介质法
原理及目的
交叉配血试验是指受血者血清加供血者红细胞悬液;供血 者血清加受血者红细胞悬液，同时进行凝集试验。前者称 主试验，后者称副试验。其目的是验证供者与受者ABO血 型鉴定是否正确，防范引起溶血性输血反应。此外，也可 检出ABO血型系统的不规则凝集素以及发现ABO系统以外 的其他血型抗体。
3.分别混匀，低速离心约2 分钟，轻轻摇匀，观察结果。 4.结果判定： 同型配血，主测、次测均不凝集，表示无配血禁忌，可以
输血； 异型配血时，主测无凝集，次测凝集，无溶血，可以输给 少量。输异型血时，如次测不凝集，不可以输血，应重新 复查血型或追查其原因。
患 者
献 血 者
交叉配血试验
主侧配血用患者血清与供试剂和器材生理盐水 小试管、尖嘴滴管、离心机、试管架、显微镜等
操作步骤
1.取受血者和供血者血液各2ml，注入一清洁干燥试管内， 按常规方法分离血清。同时留数滴滴加于含少量生理盐水 的小试管内，制成5％的红细胞生理盐水悬液。注意要分 别标明供血者与受血者的血液管、血清管、红细胞悬液管 的姓名。 2.另取清洁试管2支，标明主测和次测。主测：受血者血清 1 滴加供血者红细胞悬液1滴。次测：供血者血清1滴加受 血者红细胞悬液1滴。
主
者红细胞进行试验
侧
次
次测配血
侧
供血者血清与患
者红细胞进行试验
交叉配血的要求
主侧配血要求：
绝对不可以有凝集或溶血
凝
现象。
集
次测配血要求：
供血者血清加受血者红细
胞在允许范围内，可以有 凝集现象，但不可以有溶
不
血。
凝
集
交叉配血试验结果图例
无溶血 无凝集
实验15 血型鉴定&交叉配血
一、 ABO血型系统鉴定
（二）玻片法
抗A标准检悬液1d 竹签混匀，静置15min，观察结果： 肉眼与显微镜下观察有无凝集
一、 ABO血型系统鉴定
结果判断： eg： 抗A标准血清+RBC悬液→凝集； 抗B标准血清+RBC悬液→不凝集 结果报告： 血型正定型为： X型
一、 ABO血型系统鉴定
【原理】 ABO血型系统天然抗体（IgM）分子量大， 能在生理盐水介质中与相应RBC抗原结合 发生凝集反应，以标准血清（抗A、抗B） 鉴定红细胞上的抗原（正定型），或用标 准红细胞鉴定被见血清的抗体（反定型）。 当出现凝集时，存在与已知抗体相应抗原 或已知抗原相应的抗体。
一、 ABO血型系统鉴定
｝A型
二、交叉配血试验
【原理】 将受血者的红细胞与血清分别同供血者的 血清与红细胞混合，观察有无凝集现象 ， 来判断受血者与供血者之间配血是否相合。
二、交叉配血试验
【操作】 1、准备：①制备受血者RBC悬液 ②制备供血者RBC悬液 ③制备受血者血清 ④制备供血者血清 2、取小试管2支，分别标记主侧、次侧 3、加血清和细胞悬液： 在主侧管中分别加②和③各1滴， 在次侧管分别加④和①悬液各1滴，混匀。 4、1 000r/min离心1 min。 5、观察结果 同ABO血型正定型试管法。
血型鉴定与交叉配血试验
ABO血型输血关系
O
AB
AB
B
B
A
A
O
3、输血原则：
输血前一定要作交叉配血，防止发生输血反应；②强调同型配血；③婴幼儿禁忌异型配血；④大量输血时，还应进行献血员间的配血试验；⑤可根据病情需要选择成分输血。
安全输血标准操作程序
01
受血者在输血前必须做输血前四项检查（乙、丙、艾、梅）
三查三对：核对输血申请单病人姓名、科别、床号与血标本写的姓名、科别、床号是否相符
（二）Rh 血型系统
Rh血型能识别的抗原共43种，常见的抗原有五种，分别是D、C、E、c、e。以 D抗原的抗原性最强，故常以其存在与否定为Rh阳性或阴性，即凡含D抗原者为Rh阳性，不含D抗原者为Rh阴性。Rh 血型系统与ABO系统不同的是很少含有天然抗体，大部分是因受免疫刺激后而产生免疫抗体。
第一次输血：
B
B
anti-A
B/B、B/O
ABLeabharlann A&B---A/B
一、ABO血型鉴定
抗A血清
抗A血清
A型血
抗B血清
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抗B血清
抗A血清 B型血 抗B血清 抗A血清 抗B血清 AB型血 B型血
红细胞凝集反应和输血： 当含有凝集原A的红细胞与含有A凝集素的血清相混合时，或含有凝集原B的红细胞和含有B凝集素的血清相混合时，红细胞即可凝集成团，即凝集反应 。通常在输血时，主要考虑供血者的红细胞不被受血者的血浆所凝集。从理论上讲O型血者的血细胞不含A、B凝集原，曾被认为是可供任何型的受血者；而AB血型则可接受任何血型者的供血。通过深入研究，发现各类血型还存在亚型，情况较复杂。故现在输血，除要求同型外，在输血前，受血者和供血者的血清和红细胞之间还必需进行交叉配血试验，两方面均不发生凝集反应时，方可输血。
血型鉴定与交叉配血
血型鉴定与交叉配血试验（1）ABO血型鉴定：正反定型标准血清+被检者红细胞标准红细胞+被检者血清被鉴定的血型抗A 血清抗B 血清抗AB血清（O型血清）A型红细胞B型红细胞O型红细胞+-+-+-A型-+++--B型+++---AB型---++-O型用标准血清及标准红细胞鉴定ABO血型结果正定型反定型（2）交叉配血试验：输血前必须进行交叉配血试验，其目的主要是进一步验证供者与受者的ABO血型鉴定是否正确，以避免血型鉴定错误导致输血后严重溶血反应。
Ø交叉配血试验常采用试管法进行Ø受血者血清加供血者红细胞悬液相配的一管称为主侧Ø供血者血清加受血者红细胞相配的一管称为次侧（一）ABO血型系统（一）ABO血型系统交叉配血的结果判断：Ø同型血 主侧管与次侧管均无凝集反应，表示配血完全相合，可以输血；不论何种原因导致主侧管有凝集时，则绝对不可输用。
Ø异型血 主侧管无凝集及溶血，而次侧管出现凝集，但凝集较弱，效价<1∶200，可以试输少量（不超过200ml）该型血液。
理论上可以，但实际上不允许这样做，并且做的临床实际价值不大。
配血方法的选择：ABO血型系统 Ø对无输血史及妊娠史者，可只作盐水介质凝集试验。
Ø对有反复输血史及妊娠史者，则应作间接抗球蛋白配血法。
Ø在48小时内输入5L或更多量的大量输血时，因需同时输入多名供血者的血液，因此除了进行受血者与各供血者的交叉配血外，还应坚持作供血者之间的交叉配血试验，只有相互交叉配合完全相合时才能输用。
（一）ABO血型系统一、红细胞血型系统受血者有输血史、妊娠史或短期内要大量输血时按规定要进行意外抗体的筛查4.ABO血型系统的临床意义（1）在输血上的意义Ø输血在临床上的应用颇为广泛，如严重失血或某些手术时，输血常是治疗和抢救的重要措施。
Ø为防止输血反应必须坚持同型输血。
ABO血型鉴定及交叉配血
（一）排除人为因素或操作失误(第一步) 复检ABO血型:
1)重新采集血样:分抗凝血和不抗凝血的2管, 排除血样采错、静脉输液处采样和血样 不规范等因素。 2)核对试剂、器材：核对试剂效期, 仔细阅读试剂说明书, 特别是操作规程和注意事 项;核对离心机转速、时间、离心力, 以及其它器材有无污染, 排除试剂、器材, 特别是 离心力不标准的干扰。
（三）临床治疗的影响 1.大量输液 患者ABO抗体被稀释, 干扰ABO反定型。 2.静脉输入高分子药物 静脉输入高分子药物，如甘露醇、右旋糖苷和羟乙基淀粉等， 可导致红细胞成钱串状，干扰结果判定。 3.近期输过异型红细胞、异型血浆 近期输过异型血的样本正定型可能呈mf, 近期输 异型血浆可能干扰ABO反定型。 4.单采血浆或血浆置换治疗 如果患者血浆被稀释,干扰ABO反定型。 5.异基因造血干细胞移植：ABO或RhD异基因造血干细胞移植, 可一度呈嵌合体。
（二）复习临床资料(第二步) 分析可能导致正、反定型不一致的原因并予以, 归纳、分类 1.患者年龄、性别 <6个月的婴儿或老年人ABO正反定型不合可能为生理性的因素, 有妊娠生育史的妇女可能产生不规则抗体干扰ABO反定型。 2.临床治疗 1)大量输液； 2)静脉输注高分子药物； 3)输异型血； 4)血浆置换治疗； 5)造血干细胞移植 。
在标记好的三支管中各加1滴对应的试剂红细胞
无凝集
无凝集 凝集
血型：A型
ABO反定型鉴定
受检者红细胞与标准血清 （正定型）
ABO血型表现型反应格局表
受检者血清（浆）与标准红细 胞（反定型）
抗-A + +
抗-B + +
Ac
Bc
Oc
-
+
血型鉴定及交叉配血
血型不符：重新核对血样和 血型鉴定结果，确保准确无 误。
溶血现象：血液中红细胞破 裂导致溶血，需重新进行交源自叉配血试验。交叉配血的注意事项
血型鉴定必须准确无误 受血者与供血者血型要匹配 交叉配血试验中应避免外界干扰因素 输血前必须进行全面检查，确保血液安全
血型鉴定和交叉配血的实 验操作
章节副标题
血型鉴定的重要性：在输血、器官移植和 新生儿溶血病诊断等方面具有重要意义。
血型鉴定的基本原理和方法
血型鉴定的定 义：通过检测 红细胞表面抗 原，确定个体 血型的过程。
血型分类：A 型、B型、AB 型和O型，每 种血型又分为 阳性和阴性两
种亚型。
血型抗原：红 细胞表面的抗 原物质，包括 AB抗原和H抗
原等。
血型抗体：存 在于血清中的 抗体，与红细 胞表面的抗原 发生特异性结
合。
血型鉴定的应用场景
输血：确保受血者血 型与供血者血型相匹 配，避免输血反应
亲子鉴定：通过血型 遗传规律，判断父母 与子女之间的亲缘关 系
法律鉴定：在刑事 案件或民事纠纷中， 通过血型鉴定来辅 助判定身份或亲子 关系
人类学研究：通过血 型分布研究人类迁徙、 种族起源等问题
实验前的准备
实验器材：试管、 注射器、抗A抗B 标准血清等
实验试剂：生理 盐水、A型血和B 型血样本
实验步骤：准备 器材和试剂，进 行交叉配血实验
注意事项：确保 器材和试剂无菌 、无污染，遵循 实验室安全规定
血型鉴定实验操作流程
准备试剂和器 材：确保所需 的试剂和器材 已经准备好， 包括抗A、抗B 血清、血型抗
记录结果：记录交叉配血试验的结果，并进行分析。如果存在凝集反应，则表明供血者和受血者之间的血液 不匹配，不能进行输血。如果未发现凝集反应，则表明供血者和受血者之间的血液匹配，可以进行输血。
试验三ABO血型鉴定与交叉配血
人体解剖学实验讲义制药与生命科学学院主编：王永录2008年9月目录实验一小白鼠、大白鼠及兔的解剖实验 (1)实验二人体解剖学实验 (2)实验三ABO血型鉴定与交叉配血 (4)实验四心音听诊 (9)实验五人体心电图的记录 (12)实验六人体动脉血压的测量 (16)实验一小白鼠、大白鼠及兔的解剖实验【目的】：掌握小白鼠、大白鼠及兔的基本解剖结构。
【实验对象】小白鼠、大白鼠、兔【实验器材和药品】乌拉坦、手术台、手术器械（止血钳、手术刀、动脉夹、手术剪、手术镊等）、注射器、手术线、纱布、脱脂棉等【实验步骤及观察项目】取实验动物，乌拉坦麻醉后固定于手术台，解剖。
观察以下组织器官，注意与人体组织结构的区别。
1.神经系统：中枢神经系统：脑：大脑、小脑、间脑、脑干。
脊髓。
2.骨骼肌：肌肉的构造和形态。
3.皮肤：表皮、真皮结构。
皮肤的附属器，汗腺、毛发、指甲、皮脂腺。
4.消化系统：口腔、咽、食道、胃、小肠、大肠、肛门，唾液腺、胰腺、肝及胆囊。
5.呼吸系统：鼻、咽、喉、气管、支气管、肺、胸膜及胸膜腔。
6.循环系统：心脏(心壁、心腔、瓣膜、乳头肌、腱索、冠状血管)。
7.泌尿系统：肾、输尿管、膀胱、尿道。
8.生殖系统：雌性生殖系统：卵巢、输卵管、子宫、阴道、雄性生殖系统：睾丸、输精管、精囊、前列腺、射精管。
【思考题】小白鼠、大白鼠及兔与人体结构的区别？实验二人体解剖学实验【目的】：1.了解人体主要系统器官的概貌。
对人体有一个全面的了解。
2.掌握人体各个系统主要器官的基本结构。
3.重点掌握循环系统及神经系统的基本结构和功能。
【实验对象】1 人体各组织器官模型标本。
2 人体实物标本。
【实验步骤及观察项目】观察以下组织器官：1.骨骼系统：骨的基本形态构造，骨连结的形式，关节的基本构造，骨骼组成，颅骨、脊柱、胸廓及骨盆的组成。
上肢骨，下肢骨。
2.骨骼肌：肌肉的构造和形态。
肌肉的连结与肌肉的作用。
头面肌群、胸腹肌群、腰背肌群、上下肢肌群。
生理实验二--ABO血型鉴定和交叉配血实验
生理实验二------ABO 血型鉴定[实验目的]1.观察红细胞凝集现象。
2.学习ABO 血型鉴定方法，掌握血型鉴定原理。
[实验原理]（一）ABO 血型的分型血型是指红细胞膜上特异性抗原的类型。
ABO 血型系统有两种不同的抗原，即A 抗原、 B 抗原。
而血清中还存在对应的两种抗体，即抗A 抗体和抗B 抗体。
ABO 血型的分型是根据红细胞膜上是否存在A 抗原和B 抗原将血液分为A 、B 、AB 和O 型四类。
A 抗原与抗A 抗体相遇或B 抗原与抗B 抗体相遇时，会发生红细胞凝集反应。
当给人输入血型不相容的血液时，可发生血管内红细胞凝集和溶血反应，严重时可危及生命。
表1 ABO 血型系统的抗原和抗体血型 红细胞膜上的抗原血清中的抗体 A 型A 抗B B 型 B 抗A AB 型 A+B 无 O 型无抗A+抗B（二）ABO 血型的鉴定---正向定型常规ABO 血型的定兴包括：正向定型和反向定型。
1.正向定型是用抗A 抗体和抗B 抗体检测未知红细胞上有无A 或B 抗原；反向定型是用已知血型的红细胞检测血清中有无抗A 或抗B 抗体。
表2 ABO 正向定型 正向定型血型 B 型血清 （抗A ）A 型血清 （抗B ）O 型血清 （抗A ，抗B ）- - - O 型 + - + A 型 - + + B 型 +++AB 型一般A 型标准血清中含有抗B 抗体，B 型标准血清中含有抗A 抗体，因此可以用标准血清中的抗体与被测者红细胞反应，以确定其血型。
（三）ABO 血型的遗传由三个等位基因控制人类ABO血型系统的遗传由9号染色体上的A、B和O三个等位基因来控制。
在一对染色体上只可能出现上述三个基因的两个，分别由父母双方各遗传给子代。
三个基因可组成六组基因型。
由于A和B基因为显性基因，O基因为隐性基因，故血型的表现型仅四种。
血型相同的人，其遗传基因型不一定相同。
见表3表3 ABO血型的基因型和表现型思考题：A型、B型的父母，子女可能的血型？利用血型遗传的规律，可推知子女可能有的血型和不可能有的血型，可从子女的血型表现型来推断亲子关系。
交叉配血试验方法和判断原则简述
交叉配血试验方法和判断原则简述交叉配血试验是一种重要的血液检验方法，用于确定一个人的血型，以及在输血或器官移植中寻找合适的供血者或受体。
交叉配血试验方法和判断原则的理解对于临床医学和输血手术的成功非常关键。
本文将简要介绍交叉配血试验的基本原理和判断方法。
首先，我们来了解交叉配血试验的基本原理。
该试验基于Rh血型系统和ABO血型系统的差异，通过将供血者的红细胞与受体的血清进行混合反应来判断血型的相容性。
在正常情况下，如果两者的血型相容，红细胞与血清的混合物将不会发生凝集或凝集的现象。
而如果两者的血型不相容，血清中的抗体将会与红细胞上的抗原结合，导致凝集的发生。
在进行交叉配血试验时，首先需要获取供血者和受体的血液样本。
接下来，将供血者的红细胞和受体的血清分别加入试管中，并进行轻轻摇晃，观察是否出现凝集或凝集的现象。
如果出现凝集，说明两者的血型不相容，不适合进行输血或器官移植手术。
如果没有凝集的现象，说明两者的血型相容，可以考虑进行输血或器官移植手术。
在判断交叉配血试验的结果时，需要考虑以下几个方面：1. ABO血型系统的相容性：根据ABO血型的特点，A型血的受体只能接受A型血或O型血的供血者；B型血的受体只能接受B型血或O 型血的供血者；AB型血的受体可以接受任何血型的供血者；而O型血的受体只能接受O型血的供血者。
因此，在进行交叉配血试验时，首先需要考虑供血者和受体的ABO血型是否相容。
2. Rh血型系统的相容性：除了ABO血型系统外，Rh血型系统也对交叉配血的结果有影响。
具体来说，Rh阳性的受体可以接受Rh阳性或Rh阴性的供血者；而Rh阴性的受体只能接受Rh阴性的供血者。
因此，在进行交叉配血试验时，还需要考虑供血者和受体的Rh血型是否相容。
3. 特殊抗体的检测：除了ABO和Rh血型系统外，还有一些特殊的抗体可能对交叉配血的结果产生影响。
在进行交叉配血试验时，需要检测受体的血清中是否存在这些特殊抗体，以评估供血者和受体的相容性。
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2、ABO血型亚型 、 血型亚型
A 亚型： A 1 、 A 2 、 A 3 、 A X 和 A M 等，其中最主要 亚型： 亚型， 的是 A 1 、 A 2 亚型，占全部 A 型血的 99.9% 。 AB 血型： A 1 B 、 A 2 B 两个亚型。 血型： 两个亚型。 亚型为主， 我国 A 、 AB 血型者中以 A 1 、 A 1 B 亚型为主， A 2 、 A 2 B 亚型在 A 与 AB 型中仅占 1% B 亚型：主要有 B 2 、 B 3 、 B M 等亚型。比 A 亚型更 亚型： 等亚型。 为少见，抗原性弱。 为少见，抗原性弱。
6、HLA检测临床意义 、 检测临床意义 HLA与移植 与移植 HLA与输血 与输血 HLA与临床：反复流产、胎儿血小板减少性紫 与临床：反复流产、 与临床 粒细胞减少症、早产、畸胎、 瘢、粒细胞减少症、早产、畸胎、子痫前期等可 能与母胎的HLA系统相容有关。 系统相容有关。 能与母胎的 系统相容有关 法医:应用 分型技术， 法医 应用HLA分型技术，排除亲子或证实亲 应用 分型技术 子关系，可靠性可达95%以上。 以上。 子关系，可靠性可达 以上
红细胞血型、白细胞血型、血小板血型等等。 红细胞血型、白细胞血型、血小板血型等等。
4、意义
医学（输血、移植）、人类学、遗传学、法医学、考古学。 医学（输血、移植）、人类学、遗传学、法医学、考古学。 ）、人类学
2
一、ABO血型系统 血型系统
1、系统组成： 系统组成：
（1）ABO血型抗原（糖蛋白） ABO血型抗原（糖蛋白） 血型抗原 H抗原、A抗原、B抗原。 抗原、 抗原、 抗原。 （2）ABO血型抗体（天然IgM，免疫IgG） ABO血型抗体（天然IgM，免疫IgG） 血型抗体 IgM IgG A抗体，B抗体 抗体， （3）ABO血型（表型和基因型） ABO血型（表型和基因型） 血型 表型： 表型：A型、B型、AB型、O型；基因型：AA，AO；BB，BO；AB；OO AB型 基因型：AA，AO；BB，BO；AB； （4）ABO血型基因 ABO血型基因 H基因：L-岩藻糖转移酶-1－半乳糖上+L-岩藻糖－H物质 基因： 岩藻糖转移酶半乳糖上+L-岩藻糖－ +L A基因：N-乙酰-D-半乳糖胺转移酶－H物质上+N-乙酰-D-半乳糖胺－A抗原 基因： 乙酰- 半乳糖胺转移酶－ 物质上+N-乙酰- 半乳糖胺－ +N B基因：D-半乳糖转移酶－H物质+D-半乳糖－B抗原 基因： 半乳糖转移酶－ 物质+D-半乳糖－ +D
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Rhesus monkey 恒河猴 属哺乳纲，灵长 属哺乳纲， 猴科， 目，猴科，猕猴 属动物。 属动物。猕猴是 猕猴属猴的总称， 猕猴属猴的总称， 共有12个种系 个种系， 共有12个种系， 其中恒河猴分布 最广。 最广。
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3、特点 （1）绝大多数为IgG抗体 绝大多数为IgG抗体 Rh阴性者接受Rh阳性血后通过免疫 Rh阴性者接受 阳性血后通过免疫 阴性者接受Rh 产生免疫性抗体。 产生免疫性抗体。 （2）抗体可通过胎盘
a) 保证输血的安全性：相合性输血，相容性输血。 保证输血的安全性：相合性输血，相容性输血。 b) 据血型遗传学特性可简单推算亲子关系 据血型遗传学特性可简单推算 简单推算亲子关系 新生儿溶血病（ABO）：第一胎 c) 新生儿溶血病（ABO-HDN）：第一胎，母亲 ）：第一胎， 胎儿为A型或B 为O型，胎儿为A型或B型。 d) 器官和组织移植：ABO血型相合合不相合移植 器官和组织移植：ABO血型相合合不相合移植 及输血。 及输血。 e) 其他：法医痕迹化验 其他：
（1）Rh阳性和 阴性输血 ） 阳性和Rh阴性输血 阳性和 （2）Rh－HDN ） － （3）中国人 ）中国人RH基因多态性 基因多态性
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三、HLA
1、概况：人类白细胞抗原（Human leukocyte antigen，HLA）： 、概况：人类白细胞抗原（ ， ）： 人类主要组织相容性抗原称为人类白细胞抗原，即人类的MHC， 人类主要组织相容性抗原称为人类白细胞抗原，即人类的 ， 位于6P 位于 21.3上，长3 500~4 000Kb，约占人类基因组的 ，约占人类基因组的0.1% ， HLA 是免疫系统中最复杂、最具多态性的分子。 是免疫系统中最复杂、最具多态性的分子。 2、分类： 、分类： HLA-Ⅰ类基因： HLA-A、B、C、E、F、G、H、 J、X等。 Ⅰ类基因： 、 、 、 、 、 、 、 、 等 HLA-Ⅱ类基因：分DR、DQ、DP三个亚区，约占 000Kb. 三个亚区， Ⅱ类基因： 、 、 三个亚区 约占1 DR:DRA、DRB1、DRB3、DRB9 、 、 、 DQ:DQA1、DQB1、DQA2、DQB2、DQB3. 、 、 、 、 DP:DPA1、DPA2、DPB1、DPB2 、 、 、 HLA－Ⅲ 类：编码补体：C2、C4A、C4B和B因子基因；其它： 编码补体： 、 因子基因； － 、 和 因子基因 其它： 21-羟化酶（CYP21）、 羟化酶（ ）、TNFΑ、 TNTΒ、HSP70、 LT等基因 羟化酶 ）、 Α Β 、 等基因 3、移植配型位点： HLA－ A、B、 DR 、移植配型位点： － 、 、
5
ABO血型系统中的抗原和抗体 ABO血型系统中的抗原和抗体
血 型 亚型 RBC抗原 RBC抗原 血清抗体
A型 B型 AB型 AB型 O型
A1 A2 A1B A 2B
A+A1 A B A+A1+B A+B 无A 无B
抗B B+抗 抗B+抗A1 抗A 无 抗A1 (25%) 抗A+ 抗B
6
3、ABO血型鉴定血型的方法： ABO血型鉴定血型的方法 血型鉴定血型的方法： 原理： 原理：
A抗原+抗A抗体 抗原+ 凝集反应 B抗原+抗B抗体 抗原+ 正定型：以标准抗A和抗 血清鉴定RBC上抗原。 和抗B血清鉴定 上抗原。 正定型：以标准抗 和抗 血清鉴定 上抗原 反定型：以已知血型的RBC鉴定血清中的抗体。 鉴定血清中的抗体。 反定型：以已知血型的 鉴定血清中的抗体
7
凝集法： 凝集法： A型血
16
4、Rh血型鉴定方法： 、 血型鉴定方法 血型鉴定方法： 盐水法：单克隆 盐水法：单克隆IgM抗D，化学结合抗 抗 ，化学结合抗D 凝聚胺法： 凝聚胺法： 抗球蛋白法：经典法， 抗球蛋白法：经典法，改良法 酶法：菠萝酶，木瓜酶。 酶法：菠萝酶，木瓜酶。 微柱凝胶法： 微柱凝胶法：
17
5、临床意义 、
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I类抗原分子 类抗原分子
II类抗原分子 类抗原分子
肽结合区： 肽结合区：结合多肽
免疫球蛋白样区： 免疫球蛋白样区： 结合CD4或CD8 或 结合
跨膜区： 跨膜区：锚定在 细胞膜上 胞内区： 胞内区：信号传递
20
4、HLA分子的功能
（1）参与对抗原的处理 ） （2）约束免疫细胞间相互作用 ） （3）参与对免疫反应的遗传控制：Ir gene ）参与对免疫反应的遗传控制： （4）诱导自身或同种淋巴细胞反应： ）诱导自身或同种淋巴细胞反应： 诱导免疫反应： 是一种同种异型抗原。 诱导免疫反应：HLA是一种同种异型抗原。 是一种同种异型抗原 参与免疫调节： 细胞的HLA-DQ激活 细胞表达 激活T细胞表达 参与免疫调节：非T细胞的 细胞的 激活 细胞表达HLA-DR，后者激 ， 活某些T细胞 细胞。 活某些 细胞。 （5）参与 细胞分化过程 ）参与T细胞分化过程 （6）某些细胞不表达 ）某些细胞不表达HLA抗原 抗原 胎儿滋养层细胞不表达HLA-ABC抗原，防止母体对胎儿排斥。 抗原， 胎儿滋养层细胞不表达 抗原 防止母体对胎儿排斥。 精液中也不表达HLA-ABC抗原，免受妇女体内免疫细胞攻击。 抗原， 精液中也不表达 抗原 免受妇女体内免疫细胞攻击。 某些肿瘤细胞不表达HLA抗原，逃逸 淋巴细胞攻击。 抗原， 淋巴细胞攻击。 某些肿瘤细胞不表达 抗原 逃逸T淋巴细胞攻击
ABO亚型检测的临床意义： 亚型检测的临床意义： 亚型检测的临床意义
检查亚型的目的是防止误定血型，避免输血反应，主要意义有： 检查亚型的目的是防止误定血型，避免输血反应，主要意义有： 间输血可引起输血反应。 ① A 1 与 A 2 间输血可引起输血反应。 血清定型外， ②亚型抗原性弱，易漏检或误定，疑为亚型时，除用抗 A 、抗 B 血清定型外， 亚型抗原性弱，易漏检或误定，疑为亚型时， 型血清（ 效价高）进行反应， 还应将其红细胞与 O 型血清（抗 A 效价比抗 B 效价高）进行反应，也可用 反向定型来加以佐证。 反向定型来加以佐证。
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二、 Rh血型系统 Rh血型系统 （Rh －Rhesus monkey的缩写） monkey的缩写 的缩写）
1、系统组成： 、系统组成： (1)抗原：RhD、RhC、Rhc、RhE、 (1)抗原：RhD、RhC、Rhc、RhE、Rhe 抗原 主要成分为多肽链 (2)抗体：抗-D、抗-C 、抗-c 、抗-E 、抗-e (2)抗体： 抗体 性质：IgG性质 性质：IgG性质 (3)基因：RHD和RHCE基因 (3)基因：RHD和RHCE基因 基因 Rh阳性：RBC上有Rh（D）抗原 Rh阳性 RBC上有 （ 阳性： 上有Rh 2、主要类型 、 Rh阴性：RBC上无Rh（D）抗原 Rh阴性 RBC上无 （ 阴性： 上无Rh
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ABO血型反定型反应格局 血型反定型反应格局
血清与已知RBC反应 反应 血清与已知 表型 O A B AB RBC上A，B抗原 上 ， 抗原 无 A B A，B ， 血清中抗体 A型RBC 型 抗-A，抗-B ， 抗-B 抗-A 无 ＋ － ＋ － B型RBC 型 ＋ ＋ － －
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4、鉴定血型的意义
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5、HLA分型：
HLA抗原检测：
1、微量巴细胞试验（MLT） 2、纯合子分型细胞分型（HTC） 3、预处理淋巴细胞分型法（PLT） 4、流式细胞仪检测法