常用染料特征

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常用抗体标记荧光染料的特性及其应用
1、FITC:激发波长488nm,最大发射波长525nm。

1)其标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪;
2)在流式细胞仪的FL1通道检测;
3)可用于荧光显微镜技术
4)荧光强度易受PH值影响,PH值降低时其荧光强度减弱。

2、Alexa Fluor 488:激发波长488nm,最大发射波长519nm。

1)其标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪;
2)在流式细胞仪的FL1通道检测;
3)具有超乎寻常的光稳定性,非常适用于荧光显微镜技术;
4)在较宽的PH值范围内保持稳定(PH4~10)。

3、Cy3:激发波长488nm,最大发射波长570nm。

1)其标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪;
2)在流式细胞仪的FL2通道检测;
3)适用于荧光显微镜技术;
4)为小分子染料,非常适合需小分子染料的流式细胞术,荧光强度低于PE。

4、Cy5:激发波长633/635nm,最大发射波长670nm。

1)其标记的抗体适用于所有配备633nm氩离子激光器的流式细胞仪;
2)在流式细胞仪的FL4通道检测;
3)适用于荧光显微镜技术;
4)同样为小分子染料,非常适合需小分子染料的流式细胞术,荧光强度低于APC。

5)与单核和粒细胞非特异性结合多,易出现假阳性结果。

5、PE:激发波长488nm,最大发射波长575nm。

1)其标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪;
2)在流式细胞仪的FL2通道检测;
3)其荧光泯灭性强,不适用于传统的荧光显微镜技术,但适用于激光共聚焦显微镜技术。

6、PE-TR:激发波长488nm,最大发射波长615nm。

1)在Beckman Coulter流式细胞仪的FL3通道检测;
2)可适用于小功率激光器的流式细胞仪,也可使用于大功率激光器的大流式细胞仪。

7、PE-Alexa Fluor 610:激发波长488nm,最大发射波长628nm。

1)在Beckman Coulter流式细胞仪的FL3通道检测;
2)荧光强度高;
3)可适用于小功率激光器的流式细胞仪,也可使用于大功率激光器的大流式细胞仪。

8、PE-Alexa Fluor 647:激发波长488nm,最大发射波长668nm。

1)在Beckman Coulter流式细胞仪的FL4通道检测,BD细胞仪FL3通道检测;2)不易湮灭;
3)可适用于小功率激光器的流式细胞仪,也可使用于大功率激光器的大流式细胞仪。

9、PE-Cy5:激发波长488nm,最大发射波长670nm。

1)在Beckman Coulter流式细胞仪的FL4通道检测,BD细胞仪FL3通道检测;
2)可适用于大、小功率的流式细胞仪;
3)淬灭性强,不适用于传统的荧光显微镜技术;
4)可与FITC、PE搭配,荧光干扰小、补偿小,但不宜与APC搭配。

5)与单核细胞和粒细胞非特异性结合多。

10、PE-Cy5.5:激发波长488nm,最大发射波长694nm。

1)在Beckman Coulter流式细胞仪的FL4通道检测,BD细胞仪FL3通道检测;
2)可适用于大、小功率的流式细胞仪;
3)淬灭性强,不适用于传统的荧光显微镜技术;
4)可与FITC、PE、APC搭配,荧光干扰小、补偿小,是APC比较理想的搭配。

11、PE-Alexa Fluor 700:激发波长488nm,最大发射波长723nm。

1)在Beckman Coulter流式细胞仪的FL4通道检测,BD细胞仪FL3通道检测;2)光淬灭性很强,要绝对避光。

12、PE-Cy7:激发波长488nm,最大发射波长767nm。

1)在Beckman Coulter流式细胞仪的FL4通道检测,BD细胞仪FL3通道检测;
2)可适用于大、小功率的流式细胞仪;
3)光淬灭性很强,要绝对避光;
4)可与FITC、PE搭配,与FITC无光谱重叠,与APC搭配荧光干扰小,补偿小,是比较理想的搭配。

13、TR:激发波长595nm,最大发射波长615nm。

1)其标记的抗体适用于配备Texas Red激光器的流式细胞仪;
2)荧光不易淬灭,可用于荧光显微镜。

14、APC:激发波长633/635nm,最大发射波长660nm。

1)其标记的抗体适用于所有配备氦氖激光器的流式细胞仪;
2)在BD细胞仪的FL4通道检测,在Beckman Coulter细胞仪只有配备双激光器的FC500才能检测到。

15、APC-Cy5.5:激发波长633/635nm,最大发射波长668nm。

1)其标记的抗体适用于所有配备氦氖激光器的流式细胞仪;
2)主要用于四色以上的流式细胞术。

16:PerCP:激发波长488nm,最大发射波长677nm。

1)在Beckman Coulter流式细胞仪的FL4通道检测,BD细胞仪FL3通道检测;
2)可于FITC、PE搭配,荧光光谱重叠少,对随细胞的特异性结合少,但量子产量较低,适用于较高表达物的检测。

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