蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测蔬菜是我们日常生活中不可或缺的食物之一，是我们餐桌上重要的一部分。
随着农业生产的发展，农药的使用也在逐渐增加，为了提高产量和质量，农民们经常使用有机磷及氨基甲酸酯类农药来防治病虫害。
这些农药的残留问题却引起了人们的关注。
对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测成为了一个迫切需要解决的问题。
有机磷及氨基甲酸酯类农药是目前农业生产中广泛使用的一类农药，它们能够有效地抑制害虫和杂草的生长，提高作物产量。
在农药使用过程中，由于农民对农药的使用不当或者过量使用，导致蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量超标的情况屡见不鲜。
这些农药残留会对人体健康造成潜在的威胁，因此对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测显得尤为重要。
目前，关于蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速检测的方法有很多种，包括色谱法、光谱法、质谱法等。
这些方法虽然在检测有机磷及氨基甲酸酯类农药残留方面具有一定的灵敏度和准确性，但是它们需要昂贵的设备和复杂的操作流程，并且需要较长的时间才能得到结果，无法满足快速检测的需求。
研究人员正在不断寻找更加简便、快速和准确的方法来检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留。
近年来，基于生物传感技术的快速检测方法逐渐成为研究热点。
生物传感技术是一种利用生物材料的特异性反应来检测目标化合物的技术，具有操作简便、灵敏度高、结果快速等优点。
在蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测中，常用的生物传感技术包括酶传感技术、免疫传感技术和核酸传感技术等。
酶传感技术是利用酶对目标化合物的特异性反应来进行检测的技术。
在蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测中，常用的酶包括乙酰胆碱酯酶、磷酸化酶等。
当有机磷及氨基甲酸酯类农药存在时，它们会与酶发生特异性的化学反应，产生颜色变化或发光信号，从而实现对有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测。
除了传统的生物传感技术之外，近年来还出现了一些新的快速检测方法，如基于纳米材料的快速检测方法、基于光学技术的快速检测方法等。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
随着人们生活水平的提高，对于蔬菜的需求量也越来越大，这也就导致了蔬菜的生产
量和种植面积也不断增加。
而随之而来的问题就是蔬菜生产的过程中使用的农药残留问题。
农药残留问题一直备受人们关注，因为它直接关系到人们的健康。
其中有机磷及氨基甲酸
酯类农药一直是蔬菜中常见的一种农药，因此对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量
的快速检测显得尤为重要。
有机磷及氨基甲酸酯类农药是目前蔬菜中最常见的一类农药，它们在蔬菜生产过程中
被广泛使用，可以有效地防治害虫和病害，提高蔬菜产量。
有机磷及氨基甲酸酯类农药在
使用过程中也存在一定的风险，因为它们对人体健康有一定的危害，长期食用残留有机磷
及氨基甲酸酯类农药过量的蔬菜对人体健康将会产生严重的影响，甚至会引发一些严重的
疾病。
对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测变得尤为重要。
目前，常见的
有机磷及氨基甲酸酯类农药残留检测方法有气相色谱法、液相色谱法和免疫测定法等。
这
些方法可以对有机磷及氨基甲酸酯类农药残留进行比较精确的检测，但是需要花费较长的
时间和费用，无法满足蔬菜快速上市的需求。
为了解决这一问题，近年来，一些新型的有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速检测技
术开始逐渐出现。
基于光谱技术的有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速检测技术备受关注。
光谱技术是一种非破坏性的检测技术，它可以通过测量样品对光的吸收、散射、发射等特
性来分析样品的成分和性质。
这种技术具有快速、简便、高效的特点，非常适合于蔬菜中
有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测。
酶抑制率法快速检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量
·50·试 验 研 究农业开发与装备 2013年第4期于人类健康。
因此，该“液肥”系列产品对环境、土壤和人类健康的影响，是无法用增产增收效果来衡量的。
3.3 操作简单、容易掌握该“液肥”系列产品应用操作简单，使用方便、针对性强，见效快，通过四年来的推广应用，深受广大农民群众欢迎，成为在发展绿色生态农业中起着不可忽视的作用。
3.4 增强植株抗性，达到健身栽培效果明显该“液肥”系列产品应用后，作物生长健壮，减轻了自然灾害，减少农药和化肥用量，保证农产品的无公害、绿色、安全生产，促进了干旱地区的农业生产向着高产、高效、优质、绿色农产品方向发展的转变，促进了社会健康和文明发展，实现了农业的可持续发展。
摘要：介绍了采用酶抑制率法快速测定有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的技术，酶抑制率法即分光光度法，是根据在一定条件下，有机磷及氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关，进而通过抑制率来判断蔬菜中是否含有有机磷及氨基甲酸酯类农药的存在。
因其快速、简便、经济等特点，应用范围涵盖较广，保证有问题的蔬菜及时的排除。
关键词：酶抑制率法；快速检测；蔬菜；有机磷及氨基甲酸酯类；农药残留量；乙酰胆碱酯酶；分光光度法食品安全是民生工程，关系国计民生的头等大事。
农产品安全是食品安全工作中的重中之重，也是未来社会的发展趋势。
农产品质量安全是人民群众生存的基本要求，因此，农产品质量安全有保障，人民群众的身体健康和生命安全才有保障。
目前，各级政府和各级农业行政主管部门对蔬菜生产与流通环节中的监管措施和频次在不断强化。
这就需要我们开发出用时少、成本低，易操作的快速检测方法应用于蔬菜生产基地、蔬菜批发市场等地。
而传统的检测技术使用大型仪器设备，由于其检测时间长、成本高、对检测人员专业性要求高等不利因素而无法马上对有问题的农产品进行应急处理。
1 实验原理酶抑制率法是在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，使昆虫中毒致死，根据这一昆虫毒理学原理，用在对农药残留的快速检测中。
蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法
蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法(二>
NY/T 761.1-2004
第2部分蔬菜和水果中有机氯类、拟除虫菊酯类农药
多残留检测方法
o，p'-DDT、p，p'-DDT、异菌脲、五氯硝基苯、林丹、乙烯菌核利、三氯杀螨醇、三氟氯氰菊酯、氯硝胺、百菌清、三唑酮、甲氰自动进样器同时将样品注人气相色谱的两个进样口，组分经不同极性的两根毛细管柱分离，电子捕获检测器(ECD>检测。
外标法定
表1 22种有机氯农药及拟除虫菊酯类农药标准品
3.8 农药标准溶液配制
药标准储备液，贮存在－18℃以下冰箱中。
使用时根据各农药在对应检测器上的响应值，吸取适量的标准储备液，用正己烷稀释配制体积的同组别的单个农药储备液分别注入同一容量瓶中，用正己烷稀释至刻度，采用同样方法配制成3组农药混合标准储备溶液。
使
缓通人氮气或空气流，蒸发近干，加入2.0mL正己烷，盖上铝箔待检测。
面时，立即倒人样品溶液，用15mL刻度离心管接收洗脱液，用5mL丙酮十正己烷(10十90>涮洗烧杯后淋洗弗罗里矽柱，并重复一次。
析柱A获得的样品溶液峰面积与标准溶液峰面积比较定量。
样品中某组分的两组保留时间与标准中某—农药的两组保留时间相差都在±0.5min内的可认定为该农药。
～5.00mg/L三个水平添加到蔬菜和水果样品中进行方法的精密度实验，方法的添加回收率在70％～120％之间，变异系数小于20％。
附录A<资料性）
申明：
所有资料为本人收集整理，仅限个人学习使用，勿做商业用途。
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测作者：罗映月来源：《农家科技》2018年第03期摘要：农药能有效地预防病虫害，提高粮食、蔬菜的产量。
但如果使用过多的农药，就会使蔬菜中有大量的农药残留，会对食用者的身体健康造成巨大损害。
预防蔬菜病虫害的农药很多，主要以有机磷和氨基甲酸酯类农药为主。
为了检测上述农药在蔬菜中的残留物，通常会采用乙酰胆碱酶活性检测法。
这种检测方法简易快速，能够定性、定量地检测出蔬菜中有机磷、氨基甲酸酯类农药的含量。
在环境温度为10℃到40℃的时候，检测的精度最高，能将敌敌畏、辛硫磷、甲基对硫磷的检测浓度降低到0.5mg/kg，将甲胺磷的检测浓度降低到0.89mg/kg。
本文具体研究了蔬菜农药残留的检测技术，对该技术的发展前景做出了展望。
关键词：有机磷农药；氨基甲酸酯农药；酶活性检测法蔬菜中有机磷、氨基甲酸酯类农药的检测工作非常重要，是保障消费者生命安全的有效措施。
通常会采用火焰光度法来检测有机磷，但这种方法检测时间长、费用高，很难迅速地鉴定出蔬菜中农药的残留量。
为了防止消费者食用有机磷农药的蔬菜，我国应该探索出一种简单、快捷、灵敏度高的农药残留检测方法。
农业科技人员通过多方面的试验发现，乙酰胆碱酯酶能灵敏地检测出有机磷、氨基甲酸酯类农药的残留量，该方法在蔬菜农药检测领域得到了广泛应用，能迅速地检测出含有农药残留的蔬菜，从而使消费者放心食用安全绿色的蔬菜。
一、有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的检测材料与方法1.检测方法的基本原理马血清中含有乙酰胆碱酯酶，该酶能与氯化乙酰胆碱产生作用，生产醋酸，反应的化学方程式为：CH2COOCH2CH2N（CH3）5+H2O+ACH e→ CH3COOH+ HOCH2CH2N（CH3）3从上述化学反应方程式可以看出，醋酸产生的量越多，就说明反应进行得越彻底。
然而有机磷、氨基甲酸酯类农药会抑制乙酰胆碱的酶活性，导致醋酸的生成量减少，使反应前后的PH值发生变化。
KJ01蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测(精)
§3.1 蔬菜中有机磷和氨基甲 酸酯类农药残留量的快速检测
1.农药残留测试的相关知识点 2.农药残留的快速检测技术 3.多功能食品安全检测仪的使用
上海农林职业技术学院
一、背
景
2001年，杭州的空心菜有机磷中毒事件。 2003年，南京蔬菜有机磷残留导致中毒的事件。
2007年，福建大田发生有机磷污染水源导致中毒事件。
品种类中的“空白测”项，按“确认”键。
将放置10min的样液倒入比色皿中，加入0.1 mL低物摇匀，吹吸混匀
马上放入仪器中，按“检测”键，进行空白检测，记录反应3 min，过
程中请勿打开盖子。
《食品安全快速检测》
上海农林职业技术学院
实验：蔬菜农药残留快速检测技术-仪器法
3、 样品溶液测定
先于试管中加入2.5 mL样品提取液，再加入0.1 mL酶液、0.1 mL显色 剂。摇匀后于35 ℃放置10 min以上。 于“检测”状态下选择“农药残留”项目，按“确认”键，选择样品 种类中的“蔬菜”项，按“确认”键。 将放置10min的样液倒入比色皿中，加入0.1 mL低物摇匀，吹吸混匀 马上放入仪器中，按“检测”键，进行空白检测，记录反应3 min， 过程中请勿打开盖子。
药的总称。大多为磷酸酯类或硫代磷酸酯类。
有机磷类农药包括：甲胺磷、水胺硫磷、乐果、敌百虫、敌敌畏、氧化 乐果、马拉硫磷、甲基异柳磷、辛硫磷、甲基对硫磷、甲拌磷、乙酰甲 胺磷、久效磷、杀螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱等。 氨基甲酸酯类农药包括：叶蝉散、速灭威、西维因、涕灭威、克百威 （呋喃丹）、异丙威、灭多威等。
《食品安全快速检测》
上海农林职业技术学院
实验：蔬菜农药残留快速检测技术-仪器法
有机磷和氨基甲酸酯类农药残留标准
有机磷和氨基甲酸酯类农药残留标准摘要：一、有机磷和氨基甲酸酯类农药概述二、有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的危害三、有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的检测方法四、我国相关标准及规定正文：一、有机磷和氨基甲酸酯类农药概述有机磷和氨基甲酸酯类农药是我国农业生产中大量使用的杀虫剂。
有机磷农药是含有有机磷的农药化合物，品种多、药效高、用途广，但部分品种对人、畜的急性毒性较强。
氨基甲酸酯类农药则是一类具有广泛应用的农药品种。
二、有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的危害有机磷和氨基甲酸酯类农药残留对人体健康造成危害，主要通过三条途径进入人体：一是偶然大量接触，如误食；二是长期接触一定量的农药，如农药厂的工人、周围居民和使用农药的农民；三是日常生活接触环境和食品、化妆品中的残留农药。
三、有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的检测方法有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的检测方法主要包括酶抑制法等。
如RP100型农药残毒速测仪，是按国家标准GB/T5009.199-2002所规定的有酶抑制率法测定蔬菜（水果）中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速测定方法所开发的检测仪器。
四、我国相关标准及规定我国对于有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的检测标准有GB/T5009.199-2002等，同时还规定了肉中有机磷及氨基甲酸酯农药残留量的简易检验方法、酶抑制法（GB/T 18626-2002）。
这些标准旨在保障农产品质量和人体健康，对于农业生产者和消费者都具有重要的指导意义。
总结：有机磷和氨基甲酸酯类农药在我国农业生产中占据重要地位，但其残留问题不容忽视。
了解农药残留的危害、掌握检测方法以及遵循国家相关标准，有助于保障农产品质量和人体健康。
植物酶抑制技术用于检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留
植物酶抑制技术用于检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留随着现代农业的发展，农药在农作物的种植和保护中发挥着非常重要的作用。
农药残留问题也备受关注。
蔬菜作为人们日常饮食中不可或缺的一部分，其安全性更是备受关注。
有机磷及氨基甲酸酯类农药作为常用的农药之一，在蔬菜的生产过程中广泛使用，其残留量是否符合国家安全标准成为了备受关注的问题。
为了能够准确快速地进行蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的检测，研究人员提出利用植物酶抑制技术进行检测的方法。
下面将详细介绍植物酶抑制技术在检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留中的应用。
一、植物酶抑制技术的基本原理植物酶抑制技术是一种利用植物酶特异性反应来进行检测的方法。
在植物细胞中存在着多种酶，这些酶对不同的底物具有特异的反应活性。
有机磷及氨基甲酸酯类农药可以抑制某些植物酶的活性，因此可以利用这些受到抑制的植物酶来进行农药残留的检测。
基于植物酶抑制技术的检测方法具有快速、简单、灵敏等优点，因此在农药残留的检测中得到了广泛的应用。
1. 样品的处理在进行有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的检测之前，需要对蔬菜样品进行处理。
首先是提取样品中的目标化合物，通常采用的方法是将样品经过适当的分散和提取过程，将目标化合物从样品中提取出来，以保证后续的检测过程可以得到准确的结果。
2. 检测方法的建立植物酶抑制技术在检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留时，需要建立相应的检测方法。
这包括选择适当的植物酶作为检测底物、确定反应条件和标准曲线等。
通过不断的试验和优化，建立一套适合于蔬菜中农药残留的检测方法是非常重要的。
1. 快速性基于植物酶抑制技术的检测方法具有很高的快速性，可以在短时间内完成对蔬菜样品的检测。
这对于农产品质量监测中的紧急情况有很大的帮助。
2. 灵敏性植物酶抑制技术可以对目标化合物进行高灵敏度的检测。
这对于蔬菜中微量有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的检测非常有帮助。
3. 简便性相比于传统的检测方法，基于植物酶抑制技术的检测方法更为简便，不需要复杂的仪器和操作步骤。
蔬菜中有机磷类农药残留的快速检测
近年来，由蔬菜中农药残留超标而引起的中毒事故时有发生，因此对蔬菜中农药残留的监测显得尤为重要。
在蔬菜生产中，所使用的农药主要包括有机磷类和氨基甲酸酯类农药[1]。
传统的有机磷类和氨基甲酸酯类农药的残留分析方法主要有气相色谱法、液相色谱法、薄层色谱法及质谱联用[2]等，这些方法测试灵敏、准确度高，但预处理较为烦琐，测试时间较长，且仪器比较昂贵，对仪器的使用条件和操作人员要求也比较严格，只适用于实验室检测[3]。
如果能在蔬菜上市前快速检测出其农药残留是否超标，将能防止许多农药中毒事件的发生，确保消费者的安全。
为了满足市场需求，九十年代快速检测方法应运而生[4]，其中植物酯酶抑制法以其操作简单、方法灵敏、检测快速、原料来源广、成本低廉、保存期长、适合现场检测等优点被广泛使用[5]。
目前用于快速检测的植物酯酶主要是从大米、小米、玉米、面粉[6]、大豆[7]等粮食作物中提取，在很大程度上造成了粮食的浪费。
本实验通过使用从苜蓿这种非粮食作物中提取的植物酯酶，以2，6—二氯乙酰靛酚为显色剂，通过对蔬菜中常用的氧化乐果、甲基对硫磷、甲拌磷、甲胺磷、久效磷等5种有机磷农药的敏感性研究，确定了蔬菜中有机磷农药残留的快速检测方法。
实验结果表明，该方法农药残留最低检测限较低，可以满足国内和欧盟对以上5种有机磷农药最低残留量的检测要求。
1试剂与仪器1.1仪器UV-2802PCS 型紫外可见分光光度计（上海尤尼柯仪器有限公司），高速冷冻离心机（法国JOUAN ），蔬菜中有机磷类农药残留的快速检测王亚飞，张金艳（黑龙江八一农垦大学文理学院，大庆163319）摘要：通过研究蔬菜中常用的5种有机磷农药对植物酯酶的抑制作用，以2，6—二氯乙酰靛酚为显色剂，确立了蔬菜中有机磷农药残留的快速检测方法。
实验结果表明：该方法能快速检测氧化乐果、甲基对硫磷、甲拌磷、甲胺磷、久效磷等5种有机磷农药在蔬菜中的残留，最低检测限范围为0.002~0.05μg ·mL -1。
酶抑制法检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留
酶抑制法检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留以及对该检测方法的评价王志波（如皋市农产品质量检验测试中心 226500）摘要：在人们广泛关注食品质量安全的今天，作为监控农产品质量安全的最直接的有效手段，蔬菜农药残留速测技术得到迅速发展。
蔬菜农药残留速测法主要有酶抑制法和化学试剂速测法两种。
它们都具有快速、简便、灵敏、成本低等特点。
在基层监督部门、蔬菜生产基地及市场得到广泛应用。
本文根据行业标准《NY／T448-2001》，利用酶抑制法和相关农残速测仪及配套试剂盒对我市主要批发市场、农贸市场、超市的蔬菜样品进行了检测。
关键词：质量安全；农药残留；速测；酶抑制Abstract：The increasing concern on the food security has stimulated the development of methods for rapid detection of pesticide residues which is the most direct and most effective means of quality-safety monitoring of agricultural products. The methods of rapid detection of pesticide residues on vegetables, including enzyme inhibition method and chemical method, have been widely used in primary regulation departments、vegetable production bases and markets due to their simple, rapid, sensitive and low costing characters. Vegetable samples collected from wholesale markets、farmer markets、supermarkets were detected by enzyme inhibition method using pesticide residues detector coupled with reagent set according to standard (NY／T448-2001) in this paper.Key words: agricultural products security;Pesticide residues; rapid test;enzyme inhibition1仪器与试剂1.1检测仪器RP－410速测仪，T－200型电子天平，电热恒温培养箱，可调移液枪（10～100微升；1-5毫升），配套玻璃仪器及其它配件。
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准1. 范围本标准规定了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法。
本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。
测试方法酶抑制率法2. 原理在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。
正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在410nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
3.试剂3.1 pH8.0缓冲溶液：分别取43.5g无水磷酸氢二钾与2.2g磷酸二氢钾，用510mL蒸馏水溶解。
3.2 显色剂：分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg 碳酸氢钠，用20mL缓冲溶液溶解，4°C冰箱中保存。
3.3 底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.1mL蒸馏水溶解，摇匀后置4℃冰箱中保存备用。
保存期不超过十天。
3.4 乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，3 min 的吸光度变化D A0值应控制在0. 3以上。
摇匀后置4℃冰箱中保存备用，保存期不超十天。
3.5 可选用由以上试剂制备的试剂盒。
乙酰胆碱酯酶的ΔA0值应控制在0.3以上。
4 仪器4.1 分光光度计或相应测定仪。
4.2常量天平。
4.3 恒温水浴或恒温箱5 分析步骤5.1 样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加入5mL 缓冲溶液，静制十五分钟，之间需振荡几次，待用。
5.2 对照溶液测试：先于试管中加入2.5mL缓冲溶液，依次加入0.lmL酶液、0.1mL显色剂、0.lmL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录反应3 min的吸光度变化值ΔA0。
有机磷类和氨基甲酸酯类农药的快速检测
有机磷类和氨基甲酸酯类农药的快速检测集团文件发布号：（9816-UATWW-MWUB-WUNN-INNUL-DQQTY-有机磷类和氨基甲酸酯类农药的快速检测（农药速测卡使用说明）方法编号：CDC-1011 1 适用范围：本方法适用于蔬菜、水果、相应食物、水及中毒残留物中有机磷类和氨基甲酸酯类农药的快速检测。
本方法摘自国家标准快速检测方法GB/T5009.199-2003。
2 检测原理：胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱酯酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此判断样品中是否含有过量有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留。
3 检测试材3.1 固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的农药速测卡。
3.2 乙酸乙酯3.3 pH7.5磷酸盐浸提（缓冲）溶液：分别取15.0g磷酸氢二钠[Na2HPO4·12H2O]与1.59g磷酸二氢钾[KH2PO4]，用500mL蒸馏水溶解。
3.4 称量天平3.5 有条件时配备专为农药速测卡而设计的“农药残留速测仪”和超声波提取器。
4 蔬菜、水果中农药残留量的检测、结果判断与注意事项4.1 表面测定法（粗筛法）：擦去蔬菜表面泥土，滴2～3滴浸提液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
取一片速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
放置10min进行预反应，将速测卡对折（红色药片与白色药片叠合）后，用手捏3min时，打开与空白对照实验卡比较，白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。
白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同为阴性结果。
有条件时，将纸片插入“农药残留速测仪”自动恒温、定时检测。
4.2 整体测定法：选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm 左右见方碎片，取5g放入带盖瓶中，加入10mL浸提液（样品与浸提液的比例为1+2），震摇50次（有条件时，可将提取瓶放入超声波提取器中震荡30秒），静置2min以上。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测随着人们对食品安全和健康的重视，关于农产品中农药残留的检测变得愈发重要。
尤其是蔬菜这一日常饮食中不可或缺的食物，其安全性更是受到广泛关注。
而蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测就显得尤为重要。
那么，有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的检测又是如何进行的呢？我们需要了解一下有机磷及氨基甲酸酯类农药。
有机磷农药是一类广泛使用的杀虫剂，其在农业生产中有着广泛的应用。
由于其毒性较大，如果不当使用或者残留量超标，就会对人体健康造成危害。
检测蔬菜中有机磷农药残留量就显得尤为重要。
而氨基甲酸酯类农药则是一类常见的除草剂和杀虫剂，同样需要重点检测其在蔬菜中的残留情况。
目前，对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法主要包括化学方法和生物方法两种。
化学方法是指利用化学分析的方法，通过检测农产品中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的含量来判断其安全性。
这种方法主要包括气相色谱法、液相色谱法、质谱法等。
而生物方法是指利用生物学技术进行检测，通过检测样品中农药残留物对生物体的影响来判断其安全性，包括细胞毒性实验、细胞生长抑制实验等。
值得注意的是，传统的化学方法检测效率较低，且需要较长的检测时间，无法满足农产品快速检测的需求。
近年来，一种新型的快速检测技术——光谱检测技术逐渐受到关注。
光谱检测技术是一种利用物质对光的吸收、散射、发射等特性进行检测的方法，其具有快速、准确、非破坏性等优点。
在蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测中，光谱检测技术可以通过测定蔬菜样品中特定波长下的光谱吸收情况来判断其中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留物的含量。
通过光谱检测技术，可以实现对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速、准确、非破坏性检测。
除了光谱检测技术，纳米材料技术也是一种新型的快速检测技术。
纳米材料技术是一种利用纳米材料的特殊性能进行检测的方法，其具有灵敏度高、响应速度快、操作简便等特点。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留是造成食品安全问题的一个重要因素。
这些农药常用于农田中，以控制病虫害，帮助提高农作物产量。
过量或长期使用这些农药会导致其在农产品中残留过量，对人体健康造成潜在威胁。
快速检测蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留成为了食品安全监管的重要任务之一。
为能快速准确地检测出这些农药的残留量，科学家们进行了大量的研究，并开发了许多不同的检测方法。
一种常用的检测方法是高效液相色谱法（HPLC）。
这种方法基于样品中目标物与色谱柱中填充物之间的相互作用，通过控制样品在柱中的流动速度，分离并测量目标分析物。
利用此方法，可以快速、准确地检测出蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留。
还有一些新兴的技术用于快速检测蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量。
基于免疫分析的方法，如酶联免疫吸附测定法（ELISA）和免疫层析法，利用特异性抗体与目标农药残留物结合，从而实现快速、灵敏的检测。
还有基于生物传感器的方法，如电化学生物传感和光学生物传感，利用生物分子与目标化合物之间的相互作用来检测、定量目标农药残留。
在选择适合的检测方法时，需要考虑多个因素，包括检测的灵敏度、准确性、简便性和快速性等。
目前，各种方法已经在实践中得到应用，并逐渐得到改进和完善。
蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测是保障食品安全的重要环节。
通过选择适当的检测方法，并加强监管，能够有效地控制这些有害物质在蔬菜中的残留，保障公众食品安全。
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测—酶抑制率法(分光光度法)
结果计算
抑制率(%)=[(ΔA0-ΔAt)/ ΔA0]×100 式中： ΔA0对照溶液反应3min吸光度的变化值； ΔAt样品溶液反应3min吸光度的变化值；
结果判定
结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。 当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时,表 示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农 药存在，样品为阳性结果。 阳性结果的样品需要重复检验2次以上。
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原理
在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱 酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度 呈正比。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物 （乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产 生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度 随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以 判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类 农药的存在。
原理
试剂 pH8.0缓冲溶液 分别取 11.9g无水磷酸氢二钾与３. ２g磷酸二氢钾，用1000mL 蒸馏水溶解。
显色剂 分别取160mg二 硫代二硝基苯甲酸（DTNB） 和15.6mg碳酸氢钠，用20mL 缓冲溶液溶解，4℃冰箱中 保存。
试剂 底物：取25.0mg硫代乙酰 胆碱，加3.0mL蒸馏水溶解， 摇匀后置4℃冰箱中保存备 用。
乙酰胆碱酯酶 根据酶的 活性情况，用缓冲溶液溶 解，3min的吸光度变化ΔA0 值应控制在0.3以上。摇匀 后置4℃冰箱中保存备用。
分析步骤
样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪 成1cm左右见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加 入5mL缓冲溶液，振荡1~2min，倒出提取液,静置3~5min,待 用。 对照溶液测试： 先于试管中加入2.5mL缓冲溶液，再加入 0.lmL酶液、0.1mL显色剂，摇匀后于37℃放置15min以上 （每批样品的控制时间应一致）。加入0.lmL底物摇匀，此 时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录反应 3 min的吸光度变化值Δ A0 样品溶液测试：先于试管中加入2.5mL样品提取液，其它操 作与对照溶液测试相同，记录反应3min的吸光度变化值Δ At
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测随着现代城市化发展和经济的迅速增长，人们对食品的质量和安全性越来越关注。
由于蔬菜作为人们日常饮食中不可或缺的组成部分，因此其安全性备受关注。
然而，蔬菜中存在着各种农药残留，其中包括有机磷和氨基甲酸酯类农药，这些化合物被广泛用于蔬菜生产中的虫害和病害防治。
因此，蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测具有重要的现实意义。
有机磷和氨基甲酸酯类农药对人体健康有潜在的危害。
有机磷类农药与乙酰胆碱酯酶的结合会引起中毒作用，而氨基甲酸酯类农药也有潜在的毒性。
在食品中，这些化合物的残留量可能会对人体健康造成不利影响。
因此，为了保障食品安全，有必要开发一种快速和准确的检测方法，以检测有机磷和氨基甲酸酯类农药在蔬菜中的残留量。
目前，常用的农药残留检测方法包括高效液相色谱（HPLC）、气相色谱法（GC）、液相质谱法等。
这些方法通常需要耗费大量的时间和成本，且需要复杂的仪器设备和高度技术人员的操作技能。
这使得这些方法不适合于在食品加工和销售过程中进行快速检测。
近年来，基于生物技术手段，如酶联免疫吸附试验（ELISA）、荧光探针法等新的农药残留检测方法得到了广泛的研究和应用。
这些方法具有快速、准确、低成本和易操作等优点，且可以实现高通量检测和多重残留物的同时检测。
其中，基于ELISA技术的快速检测方法是目前应用最广泛的一种方法。
ELISA技术是一种基于免疫反应原理的化学测量方法，通常用于快速检测多种化合物的残留量。
它通过检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药的抗原抗体结合反应，确定蔬菜中的农药残留量。
基于ELISA技术的农药残留检测方法具有很多优势。
首先，它可以提高检测速度和准确性，同时可以检测多种化合物的残留量。
其次，它可以在不需要复杂的化学试剂和设备的情况下进行实验操作，降低检测成本和提高检测效率。
此外，ELISA技术还能够在食品加工和销售过程中进行快速检测，以保障食品安全。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
技术应用J1392019年6月·下蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测袁柱良1 李海英2（1.2东莞市常平镇农业技术服务中心，广东 东莞 523560）摘 要 蔬菜中农药残留作为食品安全管理的重要内容，关于检验蔬菜中的农药残留量主要是检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量。
气相色谱法是检测这两类农药的主要标准方法，尽管所具有的灵敏度较高，但是需要耗费较长时间，不适合在临床检验中进行大力推广。
为此，找到快速检测方法刻不容缓。
关键词 蔬菜；有机磷；氨基甲酸酯类农药；残留量；快速检测通过检测农产品中的农药残留可充分确保农产品的质量安全，为此农产品检测的重点在于科学的检测农药残留量。
当下，我国有一百多种有机磷与氨基甲酸酯类农药，质量参差不齐，品种复杂，在检测时很难有效的应用色相谱方法[1]。
若使用CL-BIII残留农药测定仪，对于假阳性问题很难得到有效避免。
现就两种快速检测方法进行详细介绍，详情如下。
1 酶抑制法1.1 原理有机磷与氨基甲酸酯类农药在一定情况下能够对胆碱酯酶的正常功能进行有效抑制，且抑制率的高低直接取决于农药浓度。
通过对待测样品的检测可掌握对乙酰胆碱酶活性抑制情况的了解，根据紫外可见分光光度计原理和412nm 波长的吸光度随时间的变化值可将抑制率计算出来，同时能够初筛/定性分析待测样品。
阴性：抑制率不足50%、阳性：超过50%[2]。
1.2 调试仪器采用CL-BIII 八通道残留农药测定仪。
将电源接通后，开机进行半小时预热；设置参数，选择通道，对照试样与样品试样可分别在第1、2-8通道放置；设置当日测试日期；调0使吸光度为0.000.1.3 试剂配制显色剂：取二硫代二硝基苯甲酸160mg、碳酸氢钠15.6mg，20ml 提取溶解，保存在4℃条件下。
提取溶液：取无水磷酸氢二钠11.9g、磷酸二氢钾3.2g，溶解时采用1000ml 蒸馏水，所制成的提取液pH 为8.0.乙酰胆碱酯酶：使用提取液进行溶解，控制3分钟吸光度变化值超过0.3，摇匀后保存在4℃条件下备用，保存期小于4天。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测随着世界人口的不断增长和养分需求的提高，人们对农作物的生产和流通进行了广泛的农药使用。
虽然农药的大量使用使得农作物的产量得以提高，但是同样也是导致食品中有害农残残留的主要原因之一。
农药残留不仅会对人体健康产生潜在威胁，而且会危害环境生态系统稳定性。
因此，在对农产品进行贸易和出口时，对食品中的农残残留进行严格控制是非常重要的。
近年来，对食品中农药残留的检测逐渐受到了广泛关注。
有机磷和氨基甲酸酯类农药是食品中存在的最常见的两类农药残留。
在许多国家和地区，这些农药已成为必要的化学农药处理工具，以控制各种害虫，因此它们常常出现在大部分常见蔬菜中。
这就需要高效、精确的检测方法来评估蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药的含量。
目前，用于检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药的方法有很多种，但是由于在进行检测过程中所需的成本和技术难度，许多检测方法并不实用。
因此，需开发出一种高效、便捷、快速、准确和经济的检测方法，帮助人们评估蔬菜中的农药残留。
近年来，蛋白质印迹技术已成为一种快速检测食品中农药残留的有效方法。
蛋白质印迹技术是一种基于分子识别原理的有效生物传感器技术，它可利用特定的分子识别机制，并产生特定的选择性，以实现对被测样品中的农药残留物的高灵敏度识别。
蛋白质印迹技术需要通过两个步骤来获得高选择性的蛋白质生物传感器。
第一步，将目标农药材料的印迹模板与生物传感器上的信号转导区结合。
在此步骤中，目标农药的分子结构被镶嵌在生物传感器的信号转导区，从而形成有选择性的绑定位点。
第二步，将生物传感器与蔬菜样本接触，旨在使目标农药残留物与生物传感器结合，进而产生信号输出。
蛋白质印迹技术是一种非常有前途的技术，可以用于快速、准确地检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的含量，具有很好的选择性。
不过，目前仍需进一步完善该技术，如降低干扰信号甚至是交叉反应产生的影响、提高灵敏度和检测速度等，才能被广泛应用。
蔬菜农药残留的快速检测方法原理和检验标准
蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标准1、目前农药在蔬菜中残留的问题1。
1、农药是把“双刃剑”，对促进农业增产有极其重要的作用。
但由于农药本身固有的化学属性和对其使用不当,导致农产品农药残留严重超标,严重危害到广大人民群众的健康。
1.2、在我国农药中,70%为有机磷农药,而在我国生产使用的有机磷农药中，70％为剧毒、高毒类，而且较多是禁止在蔬菜作物上使用的。
2、农药中毒事件常有报道，究其原因2。
1、农产品不按规定的用药量、次数、方法或安全间隔期施药,或施用不允许在蔬菜上使用剧毒、高毒类农药;2。
2、现在标准施行的农药残留测定需要通过有机溶剂提取、净化和用大型分析仪器进行，无法对廉价的蔬菜进行随时随地或快速检测而形成的监管不到位。
3、农药分类:3。
1、矿物源农药3。
1.1、有效成分起源于矿产无机物和石油的农药。
3.1。
2、代表有硫酸铜、硫磺、石硫合剂、磷化铝、磷化锌和石油乳剂等。
3.2、生物源农药3.2。
1、包括植物源农药和动物源农药及微生物源农药。
3。
2.2、植物类别有植物毒素、植物内源激素、植物源昆虫激素、拒食剂、引诱剂、驱避剂、绝育剂、增效剂、植物防卫素、易株克生物质等.3.2.3、动物资源开发的农药包括动物毒素、昆虫激素、昆虫信息素和天敌等。
3。
3、按作用方式分类3.3.1、胃毒素农药(敌百虫、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷）3.3.2、触杀性农药(对硫磷、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷）3。
3.3、内吸性农药（乐果、甲胺磷、氧乐果、久效磷)3.3.4、熏蒸性农药（溴甲烷、磷化铝、敌敌畏）3。
3.5、特异性农药（乙烯利、毒霉素、灭幼脲）4、目前所使用的农药按其化学结构大致可以分为以下几类：有机氯类、有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、杂环类化合物、其他（苯氧羧酸类、脲类化合物）等。
A、有机磷类敌敌畏、甲拌磷、乐果、对氧磷、对硫磷、喹硫磷、优杀硫磷、敌百虫、氧化乐果、磷胺、甲基嘧啶磷、马拉硫磷、辛硫磷、亚胺硫磷、甲胺磷、地亚农、甲基毒死蜱、毒死蜱、倍硫酸、杀扑磷、乙酰甲胺磷、巴胺磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷、异柳磷、异柳磷等。
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蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准
1. 范围
本标准规定了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法。
本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。
测试方法酶抑制率法
2. 原理
在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。
正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在410nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
3.试剂
3.1 pH8.0缓冲溶液：分别取43.5g无水磷酸氢二钾与2.2g磷酸二氢钾，用510mL蒸馏水溶解。
3.2 显色剂：分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg 碳酸氢钠，用20mL缓冲溶液溶解，4°C冰箱中保存。
3.3 底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.1mL蒸馏水溶解，摇匀后置4℃冰箱中保存备用。
保存期不超过十天。
3.4 乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，3 min 的吸光度变化D A0值应控制在0. 3以上。
摇匀后置4℃冰箱中保存备用，保存期不超十天。
3.5 可选用由以上试剂制备的试剂盒。
乙酰胆碱酯酶的ΔA0值应控制在0.3以上。
4 仪器
4.1 分光光度计或相应测定仪。
4.2常量天平。
4.3 恒温水浴或恒温箱
5 分析步骤
5.1 样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加入5mL 缓冲溶液，静制十五分钟，之间需振荡几次，待用。
5.2 对照溶液测试：先于试管中加入2.5mL缓冲溶液，依次加入0.lmL酶液、0.1mL显色剂、0.lmL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录反应3 min的吸光度变化值ΔA0。
5.3 样品溶液测试：先于试管中加入2.5mL样品提取液，其它操作与对照溶液测试相同，但在加底物之前必须放置15分钟，记录反应3min的吸光度变化值ΔAt。
6 结果的表述计算
6.1 结果计算
检测结果按公式计算：抑制率(%)=[ (ΔA0-ΔA t)/ ΔA0]×100式中：ΔA0－对照溶液反应3min吸光度的变化值；
ΔA t－样品溶液反应3min吸光度的变化值；
6.2 结果判定
结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。
阳性结果的样品需要重复检验2次以上。
对阳性结果的样品，可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。
7 附则
7.1酶抑制率法技术指标
7.1.1 灵敏度指标：酶抑制率法对部分农药的检出限见表2酶抑制率法对部分农药的检出限
表2 酶抑制率法对部分农药的检出限
7.1.2 符合率：在检出的抑制率≥50％的30份以上样品中，经气相色谱法验证，阳性结果的符合率应该在80％以上。
8说明
8.1葱、蒜、萝卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的次生物质，容易产生假阳性。
处理这类样品时，可采取整棵蔬菜萃取或采用表面测定法。
对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株蔬菜萃取的方法，减少色素的干扰。
8.2 当温度条件低于37度，酶反应的速度随之放慢，加入酶液和显色剂后放置反应的时间应相应延长，延长时间的确定，应以胆碱酯酶空白对照测试3min吸光度变化差值在0.3以上，即可往下操作。
注意样品放置时间应与空白对照溶液放置时间一致才有可比性。
胆碱酯酶空白对照测试3min吸光度变化差值在0.3以下的原因：一是酶的活性不够，二是温度太低。