实训四 液体、半固体、平板、斜面等培养基的制备讲诉
普通斜面培养基实训报告
一、实训目的本次实训旨在通过操作步骤，让学生掌握普通斜面培养基的制备方法，了解培养基在微生物培养中的应用，加深对微生物实验室基本操作的理解和认识，提高学生的动手能力和实验技能。
二、实训环境实验室环境清洁、通风良好，实验台面整洁，实验器材齐全，包括无菌操作台、无菌操作箱、无菌试管、无菌移液器、酒精灯、试管架、培养基、生理盐水、无菌水、无菌棉签、镊子、剪刀、火柴等。
三、实训原理普通斜面培养基是一种固体培养基，主要用于微生物的分离、纯化、计数和观察。
培养基由营养丰富的物质（如葡萄糖、酵母提取物、牛肉膏等）和凝固剂（如琼脂）组成。
在制备过程中，需要严格遵循无菌操作原则，以防止杂菌污染。
四、实训过程1. 准备工作（1）将无菌操作台、无菌操作箱、无菌试管、无菌移液器、酒精灯、试管架、培养基、生理盐水、无菌水、无菌棉签、镊子、剪刀、火柴等实验器材准备好。
（2）将培养基和生理盐水提前置于恒温箱中预热。
2. 制备斜面培养基（1）取无菌试管，加入适量的生理盐水。
（2）用无菌棉签蘸取生理盐水，均匀涂抹在试管内壁。
（3）将预热好的培养基倒入无菌试管中，每管约15ml。
（4）用无菌移液器将培养基均匀分布至试管底部。
（5）用无菌棉签将培养基表面抹平，使培养基呈斜面状。
（6）将试管置于恒温箱中，使培养基凝固。
3. 无菌操作（1）点燃酒精灯，将无菌操作台、无菌操作箱、无菌试管、无菌移液器、酒精灯、试管架、培养基、生理盐水、无菌水、无菌棉签、镊子、剪刀、火柴等实验器材置于无菌操作台上。
（2）将无菌试管放在无菌操作箱内，打开无菌操作箱盖。
（3）用无菌移液器将无菌水加入无菌试管中，每管约5ml。
（4）用无菌棉签蘸取无菌水，均匀涂抹在试管内壁。
（5）用无菌镊子将凝固的斜面培养基取出，放入无菌试管中。
（6）用无菌移液器将无菌水加入无菌试管中，每管约5ml。
（7）用无菌棉签蘸取无菌水，均匀涂抹在试管内壁。
（8）将试管置于恒温箱中，使培养基凝固。
培养基的配制实习报告
实习报告：培养基的配制一、实习背景与目的作为一名生物技术专业的学生，为了提高自己的实践操作能力，我参加了本次培养基配制实习。
本次实习的主要目的是学习培养基的配制方法，掌握微生物实验室常用的培养基及其配制过程，为后续的微生物实验打下基础。
二、实习内容与过程1. 实习前的准备在实习开始前，指导老师为我们讲解了培养基配制的基本原理、配制过程中需要注意的问题以及安全操作规程。
我们了解到，培养基是微生物生长、繁殖和生物化学反应的基础，其成分及配制方法对微生物的生长有很大影响。
2. 培养基的配制本次实习共配制了三种培养基，包括牛肉膏蛋白胨培养基、酵母膏麦芽膏培养基和琼脂培养基。
以下是配制过程：（1）牛肉膏蛋白胨培养基：步骤一：称取牛肉膏5g、蛋白胨10g、NaCl 5g、蒸馏水100mL，放入烧杯中。
步骤二：将烧杯置于磁力搅拌器上，加热至沸腾，持续搅拌10分钟。
步骤三：待培养基冷却至50℃左右，加入琼脂15g，搅拌均匀。
步骤四：将培养基倒入灭菌后的三角瓶中，补加蒸馏水至1000mL，摇匀。
（2）酵母膏麦芽膏培养基：步骤一：称取酵母膏10g、麦芽膏20g、NaCl 5g、蒸馏水100mL，放入烧杯中。
步骤二：将烧杯置于磁力搅拌器上，加热至沸腾，持续搅拌10分钟。
步骤三：待培养基冷却至50℃左右，加入琼脂15g，搅拌均匀。
步骤四：将培养基倒入灭菌后的三角瓶中，补加蒸馏水至1000mL，摇匀。
（3）琼脂培养基：步骤一：称取琼脂30g，放入烧杯中。
步骤二：加入蒸馏水100mL，加热至沸腾，持续搅拌至琼脂完全溶解。
步骤三：待培养基冷却至50℃左右，倒入灭菌后的三角瓶中，补加蒸馏水至1000mL，摇匀。
3. 培养基的灭菌将配制好的培养基倒入高压蒸汽灭菌锅中，进行高压蒸汽灭菌。
灭菌压力为1.05kg/cm²，温度为121℃，维持15分钟。
灭菌完成后，待培养基冷却至室温，备用。
三、实习心得与体会通过本次实习，我掌握了培养基的配制方法，对培养基的成分、配制过程及注意事项有了更深入的了解。
培养基的配置实训报告
一、实训目的通过本次实训，了解培养基配置的基本原理和操作步骤，掌握培养基的配制方法，熟悉不同类型培养基的配制特点，提高实验室操作技能，为后续微生物实验打下坚实基础。
二、实训时间2021年X月X日三、实训地点实验室四、实训材料1. 实验仪器：锥形瓶、烧杯、玻璃棒、煮培养基的铁盅（或小锅）、培养皿、量筒、滴管、pH试纸、纱布、棉花、灭菌锅等。
2. 实验试剂：牛肉膏、蛋白胨、琼脂、葡萄糖、氯化钠、蒸馏水、10%HCl、10%NaOH等。
五、实训内容1. 配制液体培养基（1）称量：根据配方，准确称取牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、氯化钠等试剂，放入锥形瓶中。
（2）溶解：向锥形瓶中加入适量的蒸馏水，用玻璃棒搅拌使试剂溶解。
（3）定容：用蒸馏水补足锥形瓶中的溶液至规定体积。
（4）调节pH值：用pH试纸测试溶液的pH值，如不符合要求，可用10%HCl或10%NaOH进行调节。
（5）过滤：用纱布过滤溶液，去除杂质。
（6）分装：将过滤后的溶液分装于锥形瓶中，封口膜封好，套上橡皮筋。
（7）灭菌：将装有培养基的锥形瓶放入灭菌锅中，按照说明书进行灭菌。
（8）冷却：待压力仪表的压力降为0时，打开灭菌锅取出培养基。
2. 配制固体培养基（1）称量：根据配方，准确称取牛肉膏、蛋白胨、琼脂、葡萄糖、氯化钠等试剂，放入锥形瓶中。
（2）溶解：向锥形瓶中加入适量的蒸馏水，用玻璃棒搅拌使试剂溶解。
（3）调节pH值：用pH试纸测试溶液的pH值，如不符合要求，可用10%HCl或10%NaOH进行调节。
（4）加热溶解琼脂：将锥形瓶放入电磁炉上煮沸，待琼脂完全溶解后，用玻璃棒搅拌均匀。
（5）过滤：用纱布过滤溶液，去除杂质。
（6）分装：将过滤后的溶液分装于锥形瓶中，封口膜封好，套上橡皮筋。
（7）灭菌：将装有培养基的锥形瓶放入灭菌锅中，按照说明书进行灭菌。
（8）冷却：待压力仪表的压力降为0时，打开灭菌锅取出培养基。
（9）制作斜面培养基：待培养基冷却至50℃左右，将锥形瓶倾斜，使培养基沿试管壁形成斜面。
培养基的制备实习报告
实习报告实习内容：培养基的制备实习时间：2023年2月24日实习地点：实验室一、实习目的通过本次实习，了解培养基制备的基本原理和步骤，掌握培养基制备的操作技能，为后续的微生物实验打下基础。
二、实习原理培养基是微生物生长和繁殖的营养物质，根据化学成分和用途可分为天然培养基、合成培养基和鉴别培养基等。
培养基制备的关键在于无菌操作，确保培养基不被杂菌污染。
三、实习步骤1. 准备材料：称量适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、葡萄糖等原料。
2. 溶解原料：将称量好的原料加入适量的蒸馏水，加热搅拌使其充分溶解。
3. 调节pH：用盐酸或氢氧化钠溶液调节培养基的pH值至所需范围。
4. 灭菌：将调好pH的培养基倒入锥形瓶，用纱布封口，放入高压蒸汽灭菌锅中，压力设定为1.05kg/cm²，温度为121℃，灭菌15-20分钟。
5. 倒平板：待培养基冷却至50℃左右时，倒入灭菌后的平板中，注意操作过程中避免污染。
6. 放置凝固：将倒入平板的培养基放置在培养箱中，使其凝固。
四、实习结果与分析通过本次实习，我成功制备了牛肉膏蛋白胨培养基，观察到培养基呈淡黄色，质地均匀，无明显颗粒。
将制备好的培养基放入培养箱中，待其凝固后，可以用于微生物的培养和实验操作。
在实习过程中，我了解到培养基制备的关键是无菌操作，避免杂菌污染。
此外，还需要注意称量、溶解、调节pH等步骤的精确度，以确保培养基的质量。
五、实习收获通过本次实习，我掌握了培养基制备的基本原理和操作技能，为后续的微生物实验奠定了基础。
同时，我也认识到实验操作中的细节问题，如无菌操作、精确称量等，这些技能将在今后的实验中发挥重要作用。
六、实习体会本次实习让我对培养基制备过程有了更深入的了解，也提高了自己的实验操作能力。
在实习过程中，我意识到理论知识与实践操作的密切关系，只有掌握了扎实的理论知识，才能在实际操作中游刃有余。
同时，我也感受到实验工作的严谨性，任何一个环节的失误都可能导致实验失败。
实训四液体、半固体、平板、斜面等培养基的制备
感谢您的观看
THANKS
液体培养基
优点是能够提供充足的营养 物质和氧气，适用于大规模 生产；缺点是需要搅拌或摇 动以保持悬浮状态。
半固体培养基
优点是能够观察微生物的运 动性，适用于研究微生物的 运动规律；缺点是操作较为 繁琐。
平板培养基
优点是能够形成单菌落，适 用于分离纯种微生物；缺点 是操作较为繁琐，需要无菌 操作。
斜面培养基
琼脂 葡萄糖
酵母膏
培养基原料
水等 各种维生素和矿物质
灭菌设备
01
高压蒸汽灭菌锅
02
电热恒温培养箱
03
干热灭菌器
04
紫外线灭菌灯
微生物菌种
大肠杆菌 酵母菌
枯草芽孢杆菌 霉菌等
其他辅助材料
玻璃器皿（试管、培养皿、 吸管等）
塑料器皿（培养皿、吸管等）
02
01 03
胶塞或棉塞
滤纸
04
05
标签和记号笔等
04
实训结果与分析
观察微生物在不同类型培养基上的生长情况
液体培养基
微生物在液体培养基中 生长良好，形成均匀的
菌落。
半固体培养基
微生物在半固体培养基 中生长，形成半透明的
菌膜。
平板培养基
斜面培养基
微生物在平板培养基上 生长，形成圆形、凸起
的菌落。
微生物在斜面培养基上 生长，形成连续的菌苔。
分析不同类型培养基对微生物生长的影响
将各种成分按比例混合后加热溶解， 调节pH值，加入琼脂粉并搅拌均匀， 分装于培养皿中，灭菌。凝固后即可 使用。
实验四 培养基的制备、器具包扎和
制备无菌水
无菌水为下一次微生物分离实验中所需要 的材料。 250mL三角烧瓶（装有玻璃珠），装自来 水45mL，试管中装9.0mL自来水，塞上棉 塞，包扎、灭菌备用。
物品的准备
三角烧瓶、试管、培养皿、吸管 等的包扎准备。
现场演示
思考题
固体培养基加琼脂后加热溶化时要注意哪些问 题？ 培养基中加琼脂的作用是什么？ 干热灭菌、高压蒸彻底？
3 ．调 pH 在未调 pH 前，先用精密 pH 试纸测量培养基的原始 pH 值，如果 pH 偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入 1mol/L NaOH ，边加边搅 拌，并随时用 pH 试纸测其 pH 值，直至达到所需 pH 值。反之， 则用 1mol/L HCL 进行调节。注意 pH 值不要调过头，以避免回调， 否则，将会影响培养基内各离子的浓度。 4 ．过滤 趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利结果的观察。一般无特殊要求 的情况下，这一步可以省去。 5 ．分装 按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装 过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起 污染。 （ 1 ）液体分装 分装高度以试管高度的 1/4 左右为宜。 （ 2 ）固体分装 分装试管，其装量不超过管高的 1/5 ，灭菌后制成 斜面，分装三角瓶的量不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
9 ．搁置斜面 将灭菌的试管培养基冷至 50 ℃ 左右，将试管棉塞端搁在玻棒上， 搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。
10 ．无菌检查 将灭菌的培养基放入 37 ℃ 的温室中培养 24 — 48 小时，以检查灭菌是否彻底。
培养基的配制方法和步骤
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基
（用于分离和培养细菌，是一种天 然培养基）配方如下：
培养基的制备ppt课件
2.普通琼脂平板培养基
第3.4.5.6组:各100ml
每组倒7枚平板供6小组下次用
6
四、方法
1.肉膏汤培养基的配制: ⑴称样： 牛肉膏0.5g 蛋白胨1g 氯化钠0.5g
加至100ml蒸馏水 中，加热溶化
(2) 待冷至40～50℃时，矫正酸碱度为pH7.6
(3) 分装于试管内（每管约2ml）置高压蒸汽 灭菌器内灭菌(121.3-20min)。
3
三、材料 牛肉膏、蛋白胨 氯化钠、蒸馏水 琼脂，10%NaOH pH试纸、三角烧瓶 量筒，天平 酒精灯、等。
4
四、方法 培 养 基 配 制 步 骤
⑴调配成分 ⑵溶解 ⑶调节 pH ⑷ 分装 ⑸灭菌 ⑹质量检验 ⑺保存
5
各组所需要配制的培养基
1.肉膏汤培养基 3.普通斜面培养基
第1组:各100ml （ 先分装7支）
半固体斜面培养基的制备细菌培养基的制备一目的掌握培养基的制备方法二原理培养基是人工合成的一种混合营养料用以分离细菌
食品微生物学实验
实验四
1
实验项目
细菌培养基的制备
肉膏汤培养基的制备 普通琼脂平板培养基的制备 半固体斜面培养基的制备
2
一、目的
掌握培养基的制备方法 二、原理
培养基是人工合成的一种混合营养料， 用以分离细菌。基础培养基中含有大多数 常见菌生长繁殖所需要的营养物质，并可 制成液体、半固体、固体三种不同的性状 以供选用。
配制出以下培养基： 1.肉膏汤培养基 2.普通琼脂平板培养基 3.普通斜面培养基
16
六、实验报告要求 实验报告中描述本组所配制的培养基。
七、思考题
何谓培养基？ 培养基的制备过程有哪几个步骤？
斜面培养基的制作方法
斜面培养基的制作方法
斜面培养基是一种常用于细菌培养的培养基。
它的特点是表面呈斜面形状，使得细菌在培养过程中能够自然地向上生长。
这样可以使得细菌在培养过程中更容易被观察和检测。
制作斜面培养基的方法如下：
1.准备所需的原料：培养基粉末、蒸馏水、烧杯、烧杯架、烧瓶、
温度计、制备烧瓶的抗菌膜。
2.将培养基粉末加入蒸馏水中，按照说明书上的比例进行配制。
一
般情况下，每克培养基粉末需要加入50-100毫升的蒸馏水。
3.将配制好的培养基倒入烧杯中，用烧杯架将烧杯放在烧瓶中。
4.用温度计测量培养基的温度，当培养基温度降到40-50°C时，放
入制备好的抗菌膜。
5.将烧瓶盖上，并在烧瓶上方用胶带粘贴一个斜面模板。
6.将烧瓶放置在37°C的恒温槽中，使培养基保持在37°C的温度
下进行培养。
7.在培养过程中，定期观察细菌的生长情况，并记录下来。
培养基的常规配置程序实验报告[总结]
![培养基的常规配置程序实验报告[总结]](https://img.taocdn.com/s3/m/1610d415b42acfc789eb172ded630b1c59ee9bbc.png)
培养基的常规配置程序一、目的要求1.掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
2.掌握培养基的配置原则和方法。
3.掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。
二、基本原理营养琼脂培养基：是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌：主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。
待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气阀继续加热。
此时蒸汽不溢出，压力增大，沸点升高，获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性，而达到灭菌的目的。
三、实验材料1.药品：营养琼脂、蒸馏水。
2.仪器及玻璃器皿：天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、锥形瓶、培养皿等。
3.其他物品：药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花等。
四、操作步骤（一）玻璃器皿的洗涤和包装1．玻璃器皿的洗涤将玻璃器皿浸入含有洗涤剂的水中．用毛刷刷洗，然后用自来水及蒸馏水冲净。
再置于烘箱中烘干后备用。
2．灭菌前玻璃器皿的包装（1）培养皿的包扎：培养皿由一盖一底组成一套，用报纸按传统包月饼的方法，将几套培养皿包成一包，准备灭菌。
（2）移液管的包扎：先将报纸裁成宽约5cm的长纸条，然后将移液管尖端放在长条报纸的一端，约成45℃角，折叠纸条包住尖端，用左手握住移液管身，右手将移液管压紧。
在桌面上向前搓转，以螺旋式包扎起来。
上端剩余纸条，折叠打结，准备灭菌。
（3）无菌水的制备：往两支洁净的试管中分别加入10ml蒸馏水，用试管塞塞好，准备灭菌。
（二）固体培养基的配制过程1．培养基配制（1）称取4g营养琼脂，溶于125ml的蒸馏水中，加热使其完全溶解。
（2）培养基的分装分装时，将4支洗净的试管放置在试管架上，用5ml的移液管分别移取适量的上述溶液于试管中（装入量不宜超过试管高度的1/5）；将剩余溶液倒入锥形瓶中（装入量以锥形瓶总体积的一半为限度），用橡皮塞塞好瓶口。
斜面培养基的制备
斜面培养基的制备1、配制溶液向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，最后补足所需水分。
对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。
2、配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。
并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。
2、调节pH值用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。
3、过滤用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。
用纱布过滤时，最好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。
4、分装已过滤的培养基应进行分装。
如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。
如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。
分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取培养基。
分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。
装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定。
一般制作斜面培养基时，每只15×150毫米的试管，约装3～4毫升（1/4～1/3试管高度），如制作深层培养基，每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。
每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为宜。
5、加棉塞分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。
堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。
棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。
制作棉塞时，要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度，揪取手掌心大小一块，铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中，用右手食指插入棉花中部，同时左手食指与拇指稍稍紧握，就会形成1个长棒形的棉塞。
棉塞作成后，应迅速塞入管口或瓶口中，棉塞应紧贴内壁不留缝隙，以防空气中微生物沿皱折侵入。
实训四 液体、半固体、平板、斜面等培养基的制备
一、目的
1、掌握各类培养基制备方法及注意事项； 2、掌握各类培养基的主要成分及各成分含量。
二、内容
1、液体培养基
1.2组－200ml； 2、半固体培养基 3.4组－200ml； 3、斜面培养基（固体） 5.6组－200ml； 4、固体培养基 1~6组－40作倒板， 故同学需要保持严谨、认真的态度。
三、步骤
1、称量
（注意：3～5g应取5g；称量后瓶塞 盖好，防止粉剂潮解；称量要准确，熟练使 用砝码天平）； 2、溶化 电炉100℃充分完全溶化（注意：溶 化前记号笔画好水线作标记；反复4～5次沸 腾达到完全溶化，看不到大的颗粒物质，呈 澄清透明状态）；
3、调整pH到7.4
培养基若偏酸，加入1d NaOH， 若偏碱，加入1d HCl；pH试纸滴加试样后立即 观察，不可长时间等待； 4、分装 液体、半固体和固体培养基需要先 分装入试管后高压灭菌，量约在试管1/3高度 为准，选好合适的塞子塞好，塞子大小要合 适，忌大忌小。
3、斜面培养基
成分：牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，NaCl 5g， 2～3％琼脂粉，蒸馏水1000ml； 4、固体培养基（营养琼脂或普通琼脂） 成分：牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，NaCl 5g， 2～3％琼脂粉（20～25g较好），蒸馏水1000ml； 5、血液琼脂（血平板） 成分：普通琼脂100ml，加入无菌脱纤维羊 血8～10％。
5、高压灭菌 15磅20min（15磅压力下温度为 121.3℃）； 6、倒板 固体培养基高压灭菌后倒板，严格 遵守无菌操作技术操作，防止培养基被污染； 7、鉴定 37℃24h，如培养后随即选中平板无 细菌生长则实验成功； 8、保存 4℃冰箱保存。
(完整版)斜面培养基的制作方法
斜面培养基制作方法(仅供参考)1斜面培养基斜面培养基（agarslantculture-medium ）：固体培养基（solid culture medium ）的一种形式；制作时应趁热定量分装于试管内，并凝固成斜面的称为斜面培养基，用于菌种扩大转管及菌种保藏。
其制作流程图如下图1.图12操作要点倒入培养基的体积以试管1/4左右为宜，斜面的长度不超过试管的一半，一般用15 ×150mm 试管，其容量为5ml。
2.1定型棉塞将制作松紧适宜的棉塞塞进试管，然后放进鼓风的干热灭菌箱中于160℃定型2小时。
定型后切记不能立即打开干热灭苗箱，否则棉塞易燃烧。
要让其冷至100℃以下才能打开，接近室温打开更理想。
这样制作的棉塞，便于培养基分装及接种，还有利于减少污染。
棉塞的制作方法见下图2.图2-a图2-b2.2分装试管将配制好的培养基按常规方法分装试管，在此过程中切勿将培养基沾到度管上部。
若沾到上部，一是影响试管的外观，二是易污染棉塞。
如下图3.图32.3捆扎试管管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。
在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。
如下图4.图42.4灭菌将手提式高压锅内的水换成干净的自来水，水按要求加入，不能过多。
将捆成把的试管立放装进高压锅的内桶中，在试管顶上放适量棉花使之成凸形，再在上面盖上一层牛皮纸，盖上盖进行高压灭菌，在灭苗放冷气的过程中，要尽量慢，以免减压过快，培养基沸腾，打湿棉塞。
冷气放彻底后，待压力达到灭苗要求时，稳压一定时间（培养基种类不同，灭苗时间要求不一样）。
当达到灭菌时间后、最好让压力自然下降至零时再打开高压锅。
打开高压锅时，移去试管上面的牛皮纸和棉花，然后盖上锅盖，并使锅留一条缝隙，让锅内余热烘干棉塞。
2.5摆斜面试管内的凝聚水主要是高温游离水在培养基凝固过程中遇外界温差过大形成的凝结水和摆放斜面时没有足够的热量烘干棉塞上的水分所致，要摆出高质量的斜面试管，必须在培养基凝固过程中避免温差过大，让其缓慢降温，使高温施离水被培养基所吸收，摆出的斜面才不会出现湿棉塞。
斜面培养基实验报告
一、实验目的1. 掌握斜面培养基的制备方法。
2. 了解斜面培养基在微生物培养中的应用。
3. 熟悉斜面培养基的接种方法。
二、实验原理斜面培养基是一种固体培养基，其主要成分是琼脂。
琼脂是一种天然的多糖，具有良好的生物相容性和生物降解性，可以提供微生物生长所需的营养物质。
斜面培养基在微生物培养中主要用于菌种扩大、纯化和保藏。
三、实验材料1. 琼脂：2.0g2. 蒸馏水：100mL3. pH试纸4. 灭菌锅5. 灭菌接种环6. 微生物培养箱7. 试管四、实验步骤1. 配制培养基：称取2.0g琼脂，加入100mL蒸馏水，搅拌均匀后煮沸，使琼脂完全溶解。
用pH试纸测试培养基的pH值，如不符合要求，可用10%HCl或10%NaOH 进行调节。
2. 灭菌：将配制好的培养基分装到试管中，每管约10mL。
将试管口用棉花塞住，放入灭菌锅中，进行高压蒸汽灭菌，压力为0.11MPa，灭菌时间为15分钟。
3. 冷却：将灭菌后的试管取出，待培养基冷却至约60℃时，进行斜面接种。
4. 接种：用灭菌接种环挑取适量菌种，从培养基底部向上划一道直线，然后以蛇形划线接种在琼脂斜面上。
5. 培养：将接种后的试管放入微生物培养箱中，培养温度为37℃，培养时间为24小时。
五、实验结果与分析1. 成功制备斜面培养基，培养基呈透明状，表面光滑。
2. 接种后的斜面培养基上出现了明显的菌落，说明菌种已成功接种。
3. 通过观察菌落形态、颜色和生长速度，可以初步判断菌种的特征。
六、实验总结1. 本实验成功制备了斜面培养基，并掌握了斜面培养基的接种方法。
2. 斜面培养基在微生物培养中具有重要作用，可以用于菌种扩大、纯化和保藏。
3. 在进行斜面培养基实验时，应注意以下几点：a. 培养基的配制要准确，避免误差；b. 灭菌过程要严格，确保培养基的无菌性；c. 接种时要避免污染，保证菌种的纯度。
七、实验反思1. 在本实验中，我掌握了斜面培养基的制备方法，提高了自己的实验技能。
培养基制备的实训报告
一、实训目的1. 理解培养基在微生物培养中的重要性。
2. 掌握培养基制备的基本原理和操作步骤。
3. 学会正确使用实验室常用玻璃器皿和实验器材。
4. 提高实验操作技能和实验室安全意识。
二、实训时间2023年X月X日三、实训地点XX大学微生物实验室四、实训原理培养基是微生物生长繁殖的营养基础，其制备质量直接影响到微生物的生长和实验结果。
培养基的制备主要包括原料的选择、计算与称量、混合溶解、调整pH值、加指示剂、溶化琼脂等步骤。
五、实训材料1. 原料：葡萄糖、酵母提取物、蛋白胨、琼脂、牛肉膏、氯化钠等。
2. 仪器：托盘天平、电子天平、烧杯、量筒、漏斗、试管、培养皿、电炉、pH试纸、高压蒸气灭菌器等。
3. 其他：无菌操作台、酒精灯、无菌棉签、无菌操作手套等。
六、实训步骤1. 原料的选择、计算与称量根据培养基配方，计算所需原料的准确数量，选择不同精度的称量工具进行称量。
如葡萄糖、酵母提取物、蛋白胨等固体原料可用托盘天平称量，琼脂、牛肉膏等需精确称量的原料可用电子天平称量。
2. 混合溶解将称量好的各种原料根据要求放入烧杯或其他容器中，加入少量水，用电炉加热溶解，不断搅拌。
固体培养基需最后加入琼脂，边加边搅拌，待完全溶解后，补足所失水分。
3. 调整pH值用pH试纸或pH计测定培养基的pH值，用1mol/L NaOH溶液或1mol/L HCl溶液调节培养基的pH值至所需范围。
注意等培养基稍降低一些温度后进行调节，避免pH值调节不均匀。
4. 加指示剂对某些培养基，按要求加入一定量的指示剂。
注意培养基温度不宜过高，也可以将指示剂单独灭菌，在用前按需要比例加入溶解后的培养基，摇匀备用。
5. 溶化琼脂固体或半固体培养基需加入一定量琼脂。
将琼脂加入后，置电炉上一面搅拌一面加热，直至琼脂完全熔化后停止搅拌，并补足水分（水需预热）。
注意控制加热速度，避免琼脂糊化。
6. 分装和灭菌将制备好的培养基分装到无菌试管或培养皿中，用高压蒸气灭菌器进行灭菌。
(完整版)斜面培养基的制作方法
斜面培养基制作方法(仅供参考)1斜面培养基斜面培养基（agarslantculture-medium ）：固体培养基（solid culture medium ）的一种形式；制作时应趁热定量分装于试管内，并凝固成斜面的称为斜面培养基，用于菌种扩大转管及菌种保藏。
其制作流程图如下图1.图12操作要点倒入培养基的体积以试管1/4左右为宜，斜面的长度不超过试管的一半，一般用15 ×150mm 试管，其容量为5ml。
2.1定型棉塞将制作松紧适宜的棉塞塞进试管，然后放进鼓风的干热灭菌箱中于160℃定型2小时。
定型后切记不能立即打开干热灭苗箱，否则棉塞易燃烧。
要让其冷至100℃以下才能打开，接近室温打开更理想。
这样制作的棉塞，便于培养基分装及接种，还有利于减少污染。
棉塞的制作方法见下图2.图2-a图2-b2.2分装试管将配制好的培养基按常规方法分装试管，在此过程中切勿将培养基沾到度管上部。
若沾到上部，一是影响试管的外观，二是易污染棉塞。
如下图3.图32.3捆扎试管管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。
在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。
如下图4.图42.4灭菌将手提式高压锅内的水换成干净的自来水，水按要求加入，不能过多。
将捆成把的试管立放装进高压锅的内桶中，在试管顶上放适量棉花使之成凸形，再在上面盖上一层牛皮纸，盖上盖进行高压灭菌，在灭苗放冷气的过程中，要尽量慢，以免减压过快，培养基沸腾，打湿棉塞。
冷气放彻底后，待压力达到灭苗要求时，稳压一定时间（培养基种类不同，灭苗时间要求不一样）。
当达到灭菌时间后、最好让压力自然下降至零时再打开高压锅。
打开高压锅时，移去试管上面的牛皮纸和棉花，然后盖上锅盖，并使锅留一条缝隙，让锅内余热烘干棉塞。
2.5摆斜面试管内的凝聚水主要是高温游离水在培养基凝固过程中遇外界温差过大形成的凝结水和摆放斜面时没有足够的热量烘干棉塞上的水分所致，要摆出高质量的斜面试管，必须在培养基凝固过程中避免温差过大，让其缓慢降温，使高温施离水被培养基所吸收，摆出的斜面才不会出现湿棉塞。
实训四 液体、半固体、平板、斜面等培养基的制备讲诉
❖ 成分：普通琼脂100ml，加入无菌脱纤维羊 血8～10％。
五、小结
❖ 本次实验重点在于称量和无菌操作倒板， 故同学需要保持严谨、认真的态度。
0.3～0.5％琼脂粉，蒸馏水1000ml
❖ 3、斜面培养基
❖ 成分：牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，NaCl 5g， 2～3％琼脂粉，蒸馏水1000ml；
❖ 4、固体培养基（营养琼脂或普通琼脂）
❖ 成分：牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，NaCl 5g， 2～3％琼脂粉（20～25g较好），蒸馏水1000ml；
?4分装液体半固体和固体培养基需要先分装入试管后高压灭菌量约在试管13高度为准选好合适的塞子塞好塞子大小要合适忌大忌小
实验四 液体、半固体、平板、 斜面等培养基的制备
一、目的
❖ 1、掌握各类培养基制备方法及注意事项； ❖ 2、掌握各类培养基的主要成分及各成分含量。
二、内容
❖ 1、液体培养基 1.2组－200ml； ❖ 2、半固体培养基 3.4组－200ml； ❖ 3、斜面培养基（固体） 5.6组－200ml； ❖ 4、固体培养基 1~6组－400ml。
三、步骤
❖ 1、称量 （注意：3～5g应取5g；称量后瓶塞 盖好，防止粉剂潮解；称量要准确，熟练使 用砝码天平）；
❖ 2、溶化 电炉100℃充分完全溶化（注意：溶 化前记号笔画好水线作标记；反复4～5次沸 腾达到完全溶化，看不到大的颗粒物质，呈 澄清透明状态）；
❖ 3、调整pH到7.4 培养基若偏酸，加入1d NaOH， 若偏碱，加入1d HCl；pH试纸滴加试样后立即 观察，不可长时间等待；
❖ 7、鉴定 37℃24h，如培养后随即选中平板无 细生长则实验成功；
❖ 8、保存 4℃冰箱保存。
斜面培养基,液体培养基,半固体培养基的用途
斜面培养基,液体培养基,半固体培养基的用途斜面培养基,液体培养基,半固体培养基是用于生物实验的不同
培养基,其用途如下:
1.
斜面培养基是一种混合了蛋白质、碳水化合物、脂肪、维生素、矿物质和水的培养基,通常用于细胞培养、组织培养和其他生物实验。
斜面培养基可以使细胞生长在一个适宜的培养基表面上,有利于观察细胞的形态和生长情况。
2.
液体培养基是一种液态的培养基,其中包含了营养物质、微生物生长因子和其他必需成分,通常用于微生物培养、植物组织培养和蛋白质发酵等方面。
液体培养基易于制备和运输,可以方便地进行实验操作。
3.
半固体培养基是一种介于固体和液体之间的培养基,其质地介于固体和液体之间。
半固体培养基中含有适量的碳水化合物、蛋白质和脂肪,以及一些微生物生长因子和必需成分,通常用于微生物培养和
植物组织培养。
半固体培养基的制备需要一些技巧和经验,因此需要对培养基的成分、制备方法和浓度等进行适当的调整。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
三、步骤
❖ 1、称量 用砝码天平）；
❖ 2、溶化 电炉100℃充分完全溶化（注意：溶 化前记号笔画好水线作标记；反复4～5次沸 腾达到完全溶化，看不到大的颗粒物质，呈 澄清透明状态）；
❖ 3、调整pH到7.4 培养基若偏酸，加入1d NaOH， 若偏碱，加入1d HCl；pH试纸滴加试样后立即 观察，不可长时间等待；
❖ 7、鉴定 37℃24h，如培养后随即选中平板无 细菌生长则实验成功；
❖ 8、保存 4℃冰箱保存。
四、各培养基成分
❖ 1、液体培养基（肉膏汤） ❖ 成分：牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，NaCl 5g，
蒸馏水1000ml； ❖ 2、半固体培养基 ❖ 成分：牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，NaCl 5g，
实验四 液体、半固体、平板、 斜面等培养基的制备
一、目的
❖ 1、掌握各类培养基制备方法及注意事项； ❖ 2、掌握各类培养基的主要成分及各成分含量。
二、内容
❖ 1、液体培养基 1.2组－200ml； ❖ 2、半固体培养基 3.4组－200ml； ❖ 3、斜面培养基（固体） 5.6组－200ml； ❖ 4、固体培养基 1~6组－400ml。
0.3～0.5％琼脂粉，蒸馏水1000ml
❖ 3、斜面培养基
❖ 成分：牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，NaCl 5g， 2～3％琼脂粉，蒸馏水1000ml；
❖ 4、固体培养基（营养琼脂或普通琼脂）
❖ 成分：牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，NaCl 5g， 2～3％琼脂粉（20～25g较好），蒸馏水1000ml；
5、血液琼脂（血平板）
❖ 成分：普通琼脂100ml，加入无菌脱纤维羊 血8～10％。
五、小结
❖ 本次实验重点在于称量和无菌操作倒板， 故同学需要保持严谨、认真的态度。
❖ 4、分装 液体、半固体和固体培养基需要先 分装入试管后高压灭菌，量约在试管1/3高度 为准，选好合适的塞子塞好，塞子大小要合 适，忌大忌小。
❖ 5、高压灭菌 15磅20min（15磅压力下温度为 121.3℃）；
❖ 6、倒板 固体培养基高压灭菌后倒板，严格 遵守无菌操作技术操作，防止培养基被污染；