《厌氧菌的检验》PPT课件

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厌氧手套箱培养法：厌氧条件好，操作 复杂，设备要求较高，一般实验室不太 适用。
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厌氧产气袋法：操作简便，不需要特殊 实验条件，适合临床常规操作。但应注 意厌氧产气袋产热导致细菌死亡，造成 假阴性的产生。
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培养及鉴定
1.培养：标本应迅速接种，然后放厌氧环 境，一般培养48小时;特殊的可以延长。
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形态特征：革兰阳性粗长杆菌，芽胞为 卵圆形，位于菌体次极端，一般不大于 菌体。
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形态特征：肉毒梭菌为革兰阳性粗短杆 菌同，单、双排列。芽胞位于次极端形 成椭圆形芽胞，芽胞大于菌体，使细菌 呈汤匙状或网球拍状。
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艰难梭菌
艰难梭菌是严格厌氧菌，对氧十分敏感， 不易培养。在肠道寄生，为肠道正常菌 群。当肠道正常菌群被破坏后，该菌可 大量繁殖，引起假膜性结肠炎。临床表 现为腹泻、腹痛并伴有全身中毒症状。
2.不适合做厌氧培养的标本：鼻咽拭子、 痰和气管抽取物、肛拭或肠道内容物、皮 肤或粘膜表面的分泌物、排出的尿或导尿、 阴道或子宫拭子、前列腺分泌物等。
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标本的采集与运送是否适当，对厌氧菌 培养能否成功至关重要。在采集和运送 时应注意：
标本不能被正常菌群所污染；
应尽量避免接触空气；
在牛乳培养基中能分解乳糖产酸，使酪 蛋白凝固，同时产生大量的气体，将凝 固的酪蛋白冲成蜂窝状，并将液面上的 凡士林向上推挤，甚至冲开管口棉塞， 气势汹涌，称为“汹涌发酵”，为本菌 的特征。
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肉毒梭菌
肉毒梭菌主要引起食物中毒，偶有感染 人的报道。该菌产生一种毒性极强的外 毒素－－肉毒毒素。
2．发生在粘膜附近的感染，口腔、肠道、 鼻咽腔、阴道等粘膜，均有大量厌氧菌寄 生，这些部分及其附近有破损，极易发生 厌氧菌感染。
3．深部外伤如枪伤后，人被动物咬伤后 的继发感染，均可能是厌氧菌感染。
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4．分泌物有恶臭，或为暗血红色，并在紫外 光下发出红色荧光，均可能是厌氧菌感染。 发红色荧光的分泌物，可能有产黑色素普鲁 沃菌和不解糖紫单胞菌；分泌物或脓汁中有 硫磺颗粒，为放线菌感染。
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厌氧球菌
在临床是有重要意义的主要有： 消化球菌 消化链球菌 韦荣球菌
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革兰阴性无芽胞厌氧杆菌
类杆菌：是临床上分离最多的厌氧菌
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梭状芽胞杆菌属
为一大群厌氧或微需氧的粗大芽胞杆菌， 革兰阳性，均具有芽胞，故名。临床上 有致病性的主要有以下几种：
尽快送到实验室。
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临床可行的操作方法： 1. 床旁接种； 2. 转运拭子； （有商品化的，也可自制：如刃天青甘
油肉汤）
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二、标本的检验
直接镜检：
分离培养：常用的培养基有强化血琼脂 平板、卡那－万古霉素冻溶血琼脂平板、 七叶苷胆汁平板等
鉴定：主要根据菌落性状、染色情况、 耐氧试验、生化反应等来鉴定
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厌氧菌感染的条件
1.组织缺氧或氧化还原电势降低，如 局部组织供血障碍、大面积外伤或刺 伤等；
2. 机体免疫功能下降，如长期使用广 谱抗生素、激素、免疫抑制剂等。
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厌氧菌感染的临床及细菌学指征
凡有下列情况者应怀疑有厌氧菌感染：
1．感染组织局部产生大量气体，造成组 织肿胀和坏死，皮下有捻发音， 是产气荚 膜梭菌所引起感染的特征。
1、直接涂片 2、厌氧培养 3、毒力试验 4、鉴定
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产气荚膜梭菌
是引起气性坏疽的主要病原菌，或产生 外毒素和多种侵袭性酶类。
形态特征： 革兰阳性粗短大杆菌，两端纯圆，呈单
或双排列，芽胞体于菌体中央或次极端， 不大于菌体，镜下不易观察到。动力阴 性。
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培养特性：不严格厌氧，在血平板上， 多数菌株呈双层溶血环，内环为β 溶血， 外环为不完全溶血。
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直接镜检
1.将临床标本直接涂片,革兰染色。 可以提供临床医生有关感染的性质，可
以给临床医生预处理提供帮助； 可以帮助选择合适的培养基。
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分离培养方法
厌氧菌的培养方法：
厌氧罐：可用于大量标本的操作，操作 较简便，实验设备要求不高。
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2.鉴定：首先做耐氧试验，耐氧试验阳性 的做革兰染色等染色方法，再做生化鉴 定。
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耐氧试验
待测菌（厌氧环境下生长）
有氧环境(普通和CO2环境） 厌氧环境
生长 不生长
生长
兼性厌氧菌
厌氧菌
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厌氧菌的分类
主要分为以下几个类型 厌氧革兰阳性球菌 厌氧革兰阴性球菌 革兰阴性无芽胞厌氧杆菌 革兰阳性无芽胞厌氧杆菌 梭状芽胞杆菌属
5．分泌物涂片经革兰染色，镜检发现有细菌， 而常规培养阴性者； 或在液体及半固体培养 基深部长的细菌，均可能为厌氧菌感染。
6．长期应用氨基糖甙类抗生素治疗无效的病 例，可能是厌氧菌感染。
7．最近有流产史者，以及胃肠手术后发生的 感染。
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厌氧菌的检验
一、标本的采集与运送
1.适合做厌氧培养的标本：无菌体液、深 部脓肿、深部组织或穿刺液；
厌氧菌的检验
华中科技大学同济医学院 附属协和医院检验科 曾吉
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பைடு நூலகம்
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概述
厌氧菌（anaerobic bacteria)是指一大群必 须在无氧的条件下才能生长的细菌。
厌氧菌在人体内的很多部位都存在，包 括口腔、肠道，上呼吸道、女性阴道等。
在维持人的正常生理代谢提供了重要保 证。
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破伤风梭菌 产气荚膜梭菌 肉毒梭菌 艰难梭菌
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破伤风梭菌
可引起破伤风，故名。 形态特征：本菌细长，革兰阳性，动力
阳性，芽胞正圆形，比菌体大，位于菌 体顶端，使菌体呈“鼓槌状”，为该菌 的特征。
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微生物检验：根据临床表现可作出诊断， 一般不作细菌学检查，若临床需要可按 下列方法进行。