红细胞叶酸溶血试剂

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红细胞叶酸溶血试剂
用途:
Elecsys红细胞叶酸溶血试剂(RBC Folate Hemolyzing Reagent)与Elecsys红细胞内叶酸定量测定试剂(RBC-folate)配合应用。

概述:
要达到诊断叶酸缺乏的目的,建议测定血清及红细胞内的叶酸含量。

因为血液中95%的叶酸存在于红细胞内。

红细胞内的叶酸含量更能真实地反应组织中叶酸的实际含量。

原理:
含抗凝剂(肝素或EDTA)的全血用抗坏血酸溶液稀释,在20oC-25oC温育约90分钟,使红细胞溶解,释放出细胞内叶酸。

此溶血液(类似于血清)即可用于Elecsys叶酸测定。

全血测出的血细胞比容体积和因稀释带来的影响在最后计算红细胞叶酸浓度时已被考虑进去。

试剂:
ElecsysRBC叶酸溶血试剂2017741
抗坏血酸0.4克×4 200ml 空瓶1 只
0.2%抗坏血酸溶液配制:
将0.4g抗坏血酸全部倒入塑料瓶(200ml)中,加入蒸馏水至标签的上缘,室温(20-25度)放置5分钟,混匀即成。

储存和稳定性:
存放在2-8 度。

未开封,可稳定至标明的保质期。

抗坏血酸溶液14天
标本采集和准备:
采用全血,抗凝剂为肝素锂、钠或EDTA。

用于血细胞比积测定和制备溶血液。

稳定性:
全血:20-25度可稳定4小时,2-8度可稳定24小时,-20度可稳定1个月(EDTA抗凝)。

溶血液: 2-8度可稳定24小时,-20度可稳定1个月。

注意:
须在制备溶血标本开始后的3.5小时以内完成Elecsys测定。

如有必要可将溶血标本存放于2-8度或-20度。

检测步骤方法:
·用全血测定红细胞比积,记录结果。

·制备溶血标本:将3ml抗坏血酸溶液(0.2%)与100µl充分混匀的全血混匀。

避免形成气泡。

20 -25度温育90±15分钟。

· Elecsys叶酸测定:将溶血标本当作预稀释的标本(稀释31倍)置于仪器的标本区,输入标本识别数据。

按Elecsys叶酸试剂操作说明书进行检测。

在制备溶血标本开始后的3.5小时以内完成Elecsys测定。

质控:
与Elecsys叶酸测定法相同。

计算:
对每一个标本,仪器会自动计算叶酸含量,换算方法是
ng/ml×2.27=nmol/l nmol/l×0.44=ng/ml
以下公式在计算红细胞内的叶酸含量时,考虑了稀释因素以及红细胞比积:
RBC叶酸浓度= ×100
叶酸浓度×31
血清纠正:对于一些红细胞叶酸含量低但血清含量高的标本,RBC叶酸测定需%红细胞比积按
红细胞叶酸溶血试剂
以下方法进行纠正:
100-%血细胞比积
纠正的RBC-叶酸浓度= RBC叶酸-血清叶酸×%血细胞比积
干扰因素:
本法仅适用于全血标本。

干扰因素与Elecsys叶酸测定法相同。

Elecsys RBC-叶酸测定结果应结合病史、临床其他检查结果综合起来进行分析。

检测范围:
不考虑红细胞比积:可达620ng/ml(1407nmol/l)。

稀释:
高于检测范围的标本可用0.2%抗坏血酸溶液稀释。

建议1:2稀释。

稀释后的标本叶酸含量必须高于8ng/ml(16.2nmol/l)。

结果应乘上稀释倍数。

正常参考值:
由于人群和饮食习惯的不同可能会引起测定结果的差异,建议各实验室应对各自地区人群的叶酸正常值波动范围进行调查,最好自己测定一个参考值范围。

以下数据只供参考:
地区范围(2.5-97.5%)
n ng/ml nmol/l
美国111 342-786 776-1784
欧洲282 176-589 481-1338。

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