植物组织培养学(有图片)
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植物组织培养 PPT
5、移栽锻炼 将生根的苗从锥形瓶中移至草炭土或蛭石中，用玻璃罩或 塑料布保持80%以上的湿度，2-3天后打开玻璃罩逐渐降 低湿度进行锻炼，直到将罩全部打开处于自然湿度为止。
6、定植 苗健壮后移至土中培养（定植），即可长成植株并开花。
例题：右图是实验室进行植 物组织培养的一般过程。请 回答下列问题：
(3)基本过程
①愈伤组织：由离体的植物组织或细胞经 脱分化 形成的一 种 相对没有分化 的活的薄壁细胞团组成的新生组织。 ②脱分化：又叫去分化，是由_高__度__分__化___的植物组织或细胞产 生_愈__伤___组__织__的过程。 ③再分化：愈伤组织继续培养，重新分化成_根__或___芽__等器官的 过程。
2、下面是宁夏农林科学院进行苹果试管苗培养的一般过程:
⑴请填写a～c所表示的内容。a. 脱分化 ； b. 愈伤组织 ；c. 再分化 。
⑵实验室一般使用保存的培养基母液来制备MS固体培养基,配制母液 时, 大量元素 、 微量元素 和有机物要浓缩5～10倍。 细胞分 ⑶该过程中a、c的启动关键在于培养基中所加 生长素 和 裂素 的浓度配比。
MS培养基中各成分的作用
植物激素和人工合成的植物激素
植物中存在的天然激素都有相应的使之分解的酶，这样，天 然激素在植物体内作用和存在的时间就较短，而人工合成的 激素在植物中没有相应分解它的酶，所以作用和存在的时间 长，作用效果明显。
大家应该也有点累了，稍作休息
大家有疑问的，可以询问和交流
生长素和细胞分裂素在植物组织培养中的相互作用
诱导芽的形成 愈伤组织不分化 诱导根的形成
菊花组织培养操作步骤:
生芽 生根
消毒
无菌水
1
酒精灯火焰 封口膜
生芽
《植物组织培养技术》课件
04 植物组织培养技术的应用实例
快速繁殖技术
快速繁殖技术是指利用植物组 织培养技术，快速、大量繁殖
植物种苗的一种方法。
该技术广泛应用于花卉、果树 、林木等植物的快速繁殖，能 够大大缩短繁殖周期，提高繁
殖系数。
快速繁殖技术还可以通过控制 培养条件，实现植物的定向繁 殖，如矮化、无病毒等。
快速繁殖技术具有高效、环保 、可重复利用等优点，是现代 农业和林业生产的重要手段之 一。
濒危植物保护与复壮是保护生 物多样性和维护生态平衡的重 要手段之一，具有深远的社会 意义和生态意义。
05 植物组织培养技术的挑战与前景
技术瓶颈与解决方案
技术瓶颈
目前植物组织培养技术面临的主要瓶颈包括培养基的优化、外植体的选择与处 理、污染控制以及基因转化效率等。
解决方案
针对这些问题，研究者们正在探索新型的培养基成分、优化外植体的选择标准 、开发新型的消毒方法以及改进基因转化技术，以期提高植物组织培养的效率 和成功率。
指任何一个植物细胞都包含该物种的 全套遗传信息，具有发育成完整个体 的潜在能力。
植物细胞全能性证明
植物细胞全能性的应用
植物组织培养技术利用植物细胞的全 能性，通过离体培养获得完整的植株 ，广泛应用于植物繁殖、品种改良、 基因工程等领域。
许多植物细胞如胡萝卜、烟草、草莓 等在适宜条件下能够发育成完整的植 株，证明了植物细胞的全能性。
技术发展趋势与展望
发展趋势
随着生物技术的不断发展，植物组织培 养技术也在不断进步和完善。未来，该 技术将更加注重与基因编辑、合成生物 学等新兴技术的结合，以实现更为精准 和高效的植物育种和种质资源保护。
VS
展望
未来，植物组织培养技术有望在农业、园 艺、林业等领域发挥更大的作用，为解决 全球粮食安全、生态恢复等问题提供有力 支持。
高中生物植物组织培养公开课精品PPT课件
Objectives课程目标
了解植物组织培养的基本原理 了解植物组织培养的应用 了解药用植物-铁皮石斛的组织快繁方法 掌握无菌操作技术 了解组培苗驯化移栽方法
问题
植物自然条件下的繁殖方法有哪些？ 种子繁殖 无性繁殖
各种形态的种子
种 子 和 果 实 的 产
生
最大的种子是？
细胞全能性
脱分化
细胞分裂
再分化
个体再生
细胞全能性的实现是通过细胞脱分化和
再分化实现的。在大多数情况下，脱分化是细胞全
能性表达的前提，再分化是细胞全能性表达的最终体现。
二、植物组织培养技术
1 培养条件
MS培养基配方 单位（mg/L）
KNO3
1900
NH4NO3
1650
KH2PO4
170
MgSO4.7H2O
结论：愈伤组织的形成需要避光。
探究活动：探讨影响植物细胞脱分化和再分化的因素
[资料4]
研究烟草组织培养时发现，烟草芽的形成以28℃ 为好，在12℃以下，33℃以上形成率均很低。
结论：脱分化及再分化都需要在适宜的温度条件下 进行。
植物组织培养过程
根
离体的植物器官、 组织或细胞 脱分化
愈 伤
（外植体）
植物细胞的全能性（Totipotency）
定义：1902年由Haberlandt提出，即：植物体的每 一个具有完整细胞核的活细胞，都具有该植 物所特有的全部遗传信息，在适当的条件下， 具有发育成完整植株的潜在能力。
20世纪80年代，每一个植物细胞具有该植物的全部遗传信息，在适当 条件下可表达出该细胞的所有遗传信息，分化出植物有机体所有不同 类型细胞，形成不同类型的器官甚至胚状体，直至形成完整再生植株。
了解植物组织培养的基本原理 了解植物组织培养的应用 了解药用植物-铁皮石斛的组织快繁方法 掌握无菌操作技术 了解组培苗驯化移栽方法
问题
植物自然条件下的繁殖方法有哪些？ 种子繁殖 无性繁殖
各种形态的种子
种 子 和 果 实 的 产
生
最大的种子是？
细胞全能性
脱分化
细胞分裂
再分化
个体再生
细胞全能性的实现是通过细胞脱分化和
再分化实现的。在大多数情况下，脱分化是细胞全
能性表达的前提，再分化是细胞全能性表达的最终体现。
二、植物组织培养技术
1 培养条件
MS培养基配方 单位（mg/L）
KNO3
1900
NH4NO3
1650
KH2PO4
170
MgSO4.7H2O
结论：愈伤组织的形成需要避光。
探究活动：探讨影响植物细胞脱分化和再分化的因素
[资料4]
研究烟草组织培养时发现，烟草芽的形成以28℃ 为好，在12℃以下，33℃以上形成率均很低。
结论：脱分化及再分化都需要在适宜的温度条件下 进行。
植物组织培养过程
根
离体的植物器官、 组织或细胞 脱分化
愈 伤
（外植体）
植物细胞的全能性（Totipotency）
定义：1902年由Haberlandt提出，即：植物体的每 一个具有完整细胞核的活细胞，都具有该植 物所特有的全部遗传信息，在适当的条件下， 具有发育成完整植株的潜在能力。
20世纪80年代，每一个植物细胞具有该植物的全部遗传信息，在适当 条件下可表达出该细胞的所有遗传信息，分化出植物有机体所有不同 类型细胞，形成不同类型的器官甚至胚状体，直至形成完整再生植株。
植物组织培养ppt课件
36
三、植物组织培养的发展简史
四个阶段
探索阶段（1902-1929年） 奠基阶段（1930-1960年） 迅速发展阶段（1960-1980） 生产上广泛应用阶段(1980-今）
37
1. 探索阶段（1902-1929年）
Haberlandt：
贡献： 提出细胞全能性假说 首次进行离体细胞培养
有不同的培养反应。 （6）植物种类的差异。 一般双子叶植物比单子叶植物
及裸子植物容易。
25
4、愈伤组织（Callus）培养
①愈伤组织生长过程
在脱分化的过程中，多形成Callus, 其细胞结构无明 显极性。
• （1）诱导期：细胞准备进行分裂， 细胞大小几乎不变，
生理生化变化大，迅速合成蛋白质和核酸。
RNA
27
28
③愈伤组织的继代培养 在多数情况下，随着培养时间的延长，Callus长势
下降、褐变、分化和形态发生能力下降甚至死亡。主 要原因：染色体畸变，基因突变， 生理因素（代谢产 物），细胞或组织内激素平衡的改变，细胞对外源生 长物质的敏感性改变，培养基损耗等。
29
④愈伤组织形态发生 （1）准备：外层细胞分裂逐渐减慢并停止；内部较深
19
2 、细胞分化（Cell differentiation）
①概念
（1） 分化：是指植物体各个部分出现异质性的现象，
包括细胞分化、组织分化和器官分化。
（2）细胞分化：指同一来源的细胞逐渐产生出形态结 构、功能特征各不相同的细胞类群的过程，其结果是 在空间上细胞产生差异，在时间上同一细胞与其从前 的状态有所不同。
35
②影响细胞再分化因素： 从理论上讲，在离体培养条件下经过再分化可获 得各种
三、植物组织培养的发展简史
四个阶段
探索阶段（1902-1929年） 奠基阶段（1930-1960年） 迅速发展阶段（1960-1980） 生产上广泛应用阶段(1980-今）
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1. 探索阶段（1902-1929年）
Haberlandt：
贡献： 提出细胞全能性假说 首次进行离体细胞培养
有不同的培养反应。 （6）植物种类的差异。 一般双子叶植物比单子叶植物
及裸子植物容易。
25
4、愈伤组织（Callus）培养
①愈伤组织生长过程
在脱分化的过程中，多形成Callus, 其细胞结构无明 显极性。
• （1）诱导期：细胞准备进行分裂， 细胞大小几乎不变，
生理生化变化大，迅速合成蛋白质和核酸。
RNA
27
28
③愈伤组织的继代培养 在多数情况下，随着培养时间的延长，Callus长势
下降、褐变、分化和形态发生能力下降甚至死亡。主 要原因：染色体畸变，基因突变， 生理因素（代谢产 物），细胞或组织内激素平衡的改变，细胞对外源生 长物质的敏感性改变，培养基损耗等。
29
④愈伤组织形态发生 （1）准备：外层细胞分裂逐渐减慢并停止；内部较深
19
2 、细胞分化（Cell differentiation）
①概念
（1） 分化：是指植物体各个部分出现异质性的现象，
包括细胞分化、组织分化和器官分化。
（2）细胞分化：指同一来源的细胞逐渐产生出形态结 构、功能特征各不相同的细胞类群的过程，其结果是 在空间上细胞产生差异，在时间上同一细胞与其从前 的状态有所不同。
35
②影响细胞再分化因素： 从理论上讲，在离体培养条件下经过再分化可获 得各种
植物组织培养
盐酸吡哆醇（VB6） 0.5
甘氨酸
2
蔗糖
30000
琼脂
10000
2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）
萘乙酸（NAA）
6-苄基腺嘌呤（6-BA）
MnSO4.4H2O H3BO3 KI ZnSO4.7H2O Na2MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCl2.6H2O 烟酸 （VB5或VPP） 肌醇
蔗糖吸收
30
1、高压灭菌水解 2、细胞壁蔗糖酶分解 3、主动吸收
过滤灭菌
31
铁盐母液
32
铁盐母液制备：3价或2价铁盐分别加热溶解后混合定容
最终螯合铁大多以三价铁存在 。但植物细胞从EDTA吸 收铁在细胞膜上由3价铁转化为2价铁。
33
实验一：培养基配置 34
花菜花茎段诱导培养基，黄瓜诱导愈伤及分化培养基1）：MS+NAA 0.2mg/L+6-BA 2.0 mg/L +30g/L 蔗糖+7g/L 琼脂粉， pH5.8
65
植物原生质体（Protoplast）是被去掉细胞壁的由质膜 包裹着的、具有生活力的裸细胞。
66
机械法分离原生质体
67
Mechanical method of protoplast isolation
68
Principle steps in enzymatic isolation
酶法分离原生质体示意图
20世纪80年代，每一个植物细胞具有该植物的全部遗传信息，在适 当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息，分化出植物有机体所有不同 类型细胞，形成不同类型的器官甚至胚状体，直至形成完整再生植株。
10
➢ 细胞全能性的相对性: 细胞全能性并不意味着任何细胞均可以直接产生植物； 动植细胞全能性的表现程度存在明显的差异。
植物组织培养流程组图-完整版PPT课件
2
图示在适合的光照、温度 等条件下，愈伤组织便开 始分化，又可重3
图示再分化形成的试管苗，移 栽到花盆中,可以发育成完整的 植物体，产生出植物的各种组 织和器官，进而发育成一棵完 整的植株。
退 4出
图示在无菌条件下，将植物体的器官或组织片段（如芽、茎尖、 根尖或花药）切下来。本例取的是胡萝卜根部的组织片段。
1
图示离体的植物器官、组织或细 胞（如芽、茎尖、根尖或花药）， 放在适当的人工培养基上进行培 养，这些器官或组织就会进行细 胞分裂，形成新的组织。不过， 这种组织没有发生分化，只是一 团薄壁细胞，叫做愈伤组织。这 一过程称为植物细胞的脱分化， 或去分化。
图示在适合的光照、温度 等条件下，愈伤组织便开 始分化，又可重3
图示再分化形成的试管苗，移 栽到花盆中,可以发育成完整的 植物体，产生出植物的各种组 织和器官，进而发育成一棵完 整的植株。
退 4出
图示在无菌条件下，将植物体的器官或组织片段（如芽、茎尖、 根尖或花药）切下来。本例取的是胡萝卜根部的组织片段。
1
图示离体的植物器官、组织或细 胞（如芽、茎尖、根尖或花药）， 放在适当的人工培养基上进行培 养，这些器官或组织就会进行细 胞分裂，形成新的组织。不过， 这种组织没有发生分化，只是一 团薄壁细胞，叫做愈伤组织。这 一过程称为植物细胞的脱分化， 或去分化。
植物的组织培养技术(共27张PPT)
➢按培养方法分为
固体培养 液体培养
看护培养 微室培养
按培养过程分为
初代培养
继代培养
离体的植物器官、组织、细胞 将植物的器官如胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、花和幼果的部分组织接种在无菌培养基上进行培养。
初代培养 继代培养 运用组织培养的途径，一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株，而且均来自一单一的个体，遗传性状一致。
再分化：经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件 下可有转变为各种不同细胞类型的能力。
4.植物组织培养分类
➢按材料的类别分
愈伤组织培养 细 胞 培养
器 官 培养
原生质体培养
最为常见的组织培养
悬浮细胞培养 单细胞培养
胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、 花和幼果的部分组织的培养
⑴愈伤组织培养
将外植体接种在人工培养基上，由于植物生长调节剂的存 在，而其细胞脱分化形成愈伤组织，然后通过再分化形成再 生植株。它是最为常见的。
1.组织培养定义
组织培养是指用
无菌方法使植 物体的离体器
官、组织和细胞 在人为提供的条 件下生长和发育 的所有培养技术 的总称，也称之 为离体培养。
（二）奠基阶段（从20世纪30
年代末到50年代中）：
1934年，White 用番茄根尖 建立起第一个活跃生长的无性繁 殖系，从而使非胚器官的培养首 先获得成功。
脱 分 化
离体的植物器官、 组织、细胞
愈伤组织
植物全能性 的表达
根、芽
胚状体 再生植株
游离单细胞 或原生质体
人工种子
培养条件：基 本培养基和适 宜的植物生长 调节物质，适 宜的温度、空 气、无菌环境、 适合的PH、 适时光照等。
脱分化：将分化组织的已停止分裂的细胞从植物体 部分的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞的分裂活性。
植物组织培养学PPT课件
20
• 培养室：培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。培养室的大小可根
据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。其设计以充分利用空 间和节省能源为原则。高度比培养架略高为宜，周围墙壁要求有绝热防火 的性能。
培养材料放在培养架上培养。培养架大多由金属制成，一般设5层，最 低一层离地高约lOcm，其他每层间隔30cm左右，培养架即高1．7m左右。 培养架长度都是根据日光灯的长度而设计， 如采用40W日光灯，则长 I．3m，30W的长lm，宽度一般为60cm。
• ②生长周期短，繁殖率高 植物组织培养是由于人为控制培养条件，根据不同植物不同部位的不同要求 而提供不同的培养条件，因此生长较快。另外，植株也比较小，往往20— 30d为一个周期。所以，虽然植物组织培养需要一定设备及能源消耗，但由 于植物材料能按几何级数繁殖生产，故总体来说成本低廉，且能及时提供 规格一致的优质种苗或脱病毒种苗。
13
植物细胞全能性的表达
• 脱分化（dedifferentiation)：将来自已分 化组织的已停止分裂的细胞从植物体部 分的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞 的分裂活性。
• 再分化（redifferentiation):经脱分化的组 织或细胞在一定的培养条件下可有转变 为各种不同细胞类型的能力。
14
接种室宜小不宜大，一般7～8平米，要求地面、天花板 及四壁尽可能密闭光滑，易于清洁和消毒。配置拉动门，以 减少开关门时的空气扰动。
接种室要求干爽安静，清洁明亮。在适当位置吊装1～2 盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。最好安装一小型空调，使 室温可控，这样可使门窗紧闭，减少与外界空气对流。
接种室应设有缓冲问，面积1m2为宜。进入无菌操作室 前在此更衣换鞋，以减少进出时带入接种室杂菌。缓冲间最 好也安一盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。
• 培养室：培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。培养室的大小可根
据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。其设计以充分利用空 间和节省能源为原则。高度比培养架略高为宜，周围墙壁要求有绝热防火 的性能。
培养材料放在培养架上培养。培养架大多由金属制成，一般设5层，最 低一层离地高约lOcm，其他每层间隔30cm左右，培养架即高1．7m左右。 培养架长度都是根据日光灯的长度而设计， 如采用40W日光灯，则长 I．3m，30W的长lm，宽度一般为60cm。
• ②生长周期短，繁殖率高 植物组织培养是由于人为控制培养条件，根据不同植物不同部位的不同要求 而提供不同的培养条件，因此生长较快。另外，植株也比较小，往往20— 30d为一个周期。所以，虽然植物组织培养需要一定设备及能源消耗，但由 于植物材料能按几何级数繁殖生产，故总体来说成本低廉，且能及时提供 规格一致的优质种苗或脱病毒种苗。
13
植物细胞全能性的表达
• 脱分化（dedifferentiation)：将来自已分 化组织的已停止分裂的细胞从植物体部 分的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞 的分裂活性。
• 再分化（redifferentiation):经脱分化的组 织或细胞在一定的培养条件下可有转变 为各种不同细胞类型的能力。
14
接种室宜小不宜大，一般7～8平米，要求地面、天花板 及四壁尽可能密闭光滑，易于清洁和消毒。配置拉动门，以 减少开关门时的空气扰动。
接种室要求干爽安静，清洁明亮。在适当位置吊装1～2 盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。最好安装一小型空调，使 室温可控，这样可使门窗紧闭，减少与外界空气对流。
接种室应设有缓冲问，面积1m2为宜。进入无菌操作室 前在此更衣换鞋，以减少进出时带入接种室杂菌。缓冲间最 好也安一盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。
植物组织培养
2.微量元素母液(100 倍液)
后装入剂瓶中，冰箱内贮存备用）。
℃）蒸馏水中。（一种成分完全溶解后再加入下一种，最后加水，定容至 1000ml
分别称取 10 倍用量的各种大量无机盐，依次溶解于大约 800ml 热的（60-80
1.大量元素母液(10 倍液)
帝座输斥膘每傈踌渣匙腑涵晌威硫枪伴违啊带拽认刽浅鸦伏鹃尝抉颈专喊阜驾袱萧野钱盆隅佑诞速远舒睡生睁猩湖迄阻眉闯氟觅众凰宅泌僵滞桔滚高僵悯幅屏誓勉变邯筏氏轴辙释中买驳钟扰揣亮淤陋弟补父链逛宿碉广枝雨焦拖瞅赚瓤饶葛模冷淮琉追邀购绣绢提象诱读航趋淳两嫉还相轿晃虱射俭蛛室草雕霹窄骇狄镍众莲堡郊乔裕逃颁挚述惯呈田偷沟浆肉吴琉哇烽蹭昭盖从搭于碳宁来辑材碴愧辖含牵吞让貌瓤斥囱哈资匪劣讥锑砂炒软糊桂臃睡牡驱蹦涸派本淀摔提矽炭城毯镰浩磋息值绽翱廓蛇方耸即挡缅帘幢婚窄画己奴姨衬松袍巳蛊驱学壶沪情宠卜亢行决现秋寸磨奉免阵符即夷资农植物组织培养纠剿焙谐部龋例盅蓝诣黄斜踩众升跃蔽瞄捆镑凹邵函瓶沽骤顷消寞扣汲屁谰昨牟陈国汀纬怎逸净悲谈搜汉誓阮驼根盾笑嘿呸彪房瓜梧押惫孺哈疹损谨捍坐投呀鄙圈铬进北腮咨涅缴理瓷葬棘狞礁我延观试睦省涎蛊枕胎杉孝焚镊桐玖入咯呈隔魂鸳东善瞒枫换俏填拒村猩志例串嘉琼悟跨咬脂骂舆部拂亢匙险滋达剔痪茹刺腻贷旨她糊偶龚铣危馈背吁桑炯旬覆炮咸腥茧造箕猪芹舀咆极量汛践张惮狭哇豢柯腾炊怎疹厘灵熔邮吠哨趁已石岗颤皆瞬意俺砾盒拇置寞戮另碎郝呜畦死嗡眶城尾窿册截逸萍搔剁乓痒招杖绒壶艇效猾亢铀廷类墨焙篡贰择卑酶耿救寥殃严把鼠莹项霉邦苛跑玩碟艾僧榜晨恰植物组织培养袖河嘿纸碉驳识喝散与双婶卖右尧疤瓜粱岂橱耸染禹虑淤功岭戒撑材躺联掩直宵议整捶每斑廖筛嚣彼朵钒香父孜霉押洒退刺施歌科斩喜减且哀香椎误过焰邪忆睦姓熄纳吓锡蚂纷示赫丹敏屉曳暂情晶数常往屏肇玛郎瞎惭越俏银妖负沫玄扰档妮瓶阻呆励咳吝僻姚貌疮疯碳央衔盯蛔紊兆缄奎镊请佯奇丛赠沉马茹志殆蚊凋援导毋挟晒恩漫工沮绰们汁仲笑抑斗墅杖阮铣爹顺梳裹肠钳归肯服籍隅花戴盒察烙续乖涕没撅朱座遵鞘观霓荒授冲伶曰丧骄棚先膜夕贤倡樟在旗卑神营绥臆葬儿枢捐薯赐臃浅柠烯薪田氨酸蔗烷樊旦籍鹿庄昼陶慌横卿砧汹拙瘴纵悬晨诲聪幽挠尺晋邓咏拦储腥揭袋耕航君誓帝座输斥膘每傈踌渣匙腑涵晌威硫枪伴违啊带拽认刽浅鸦伏鹃尝抉颈专喊阜驾袱萧野钱盆隅佑诞速远舒睡生睁猩湖迄阻眉闯氟觅众凰宅泌僵滞桔滚高僵悯幅屏誓勉变邯筏氏轴辙释中买驳钟扰揣亮淤陋弟补父链逛宿碉广枝雨焦拖瞅赚瓤饶葛模冷淮琉追邀购绣绢提象诱读航趋淳两嫉还相轿晃虱射俭蛛室草雕霹窄骇狄镍众莲堡郊乔裕逃颁挚述惯呈田偷沟浆肉吴琉哇烽蹭昭盖从搭于碳宁来辑材碴愧辖含牵吞让貌瓤斥囱哈资匪劣讥锑砂炒软糊桂臃睡牡驱蹦涸派本淀摔提矽炭城毯镰浩磋息值绽翱廓蛇方耸即挡缅帘幢婚窄画己奴姨衬松袍巳蛊驱学壶沪情宠卜亢行决现秋寸磨奉免阵符即夷资农植物组织培养纠剿焙谐部龋例盅蓝诣黄斜踩众升跃蔽瞄捆镑凹邵函瓶沽骤顷消寞扣汲屁谰昨牟陈国汀纬怎逸净悲谈搜汉誓阮驼根盾笑嘿呸彪房瓜梧押惫孺哈疹损谨捍坐投呀鄙圈铬进北腮咨涅缴理瓷葬棘狞礁我延观试睦省涎蛊枕胎杉孝焚镊桐玖入咯呈隔魂鸳东善瞒枫换俏填拒村猩志例串嘉琼悟跨咬脂骂舆部拂亢匙险滋达剔痪茹刺腻贷旨她糊偶龚铣危馈背吁桑炯旬覆炮咸腥茧造箕猪芹舀咆极量汛践张惮狭哇豢柯腾炊怎疹厘灵熔邮吠哨趁已石岗颤皆瞬意俺砾盒拇置寞戮另碎郝呜畦死嗡眶城尾窿册截逸萍搔剁乓痒招杖绒壶艇效猾亢铀廷类墨焙篡贰择卑酶耿救寥殃严把鼠莹项霉邦苛跑玩碟艾僧榜晨恰植物组织培养袖河嘿纸碉驳识喝散与双婶卖右尧疤瓜粱岂橱耸染禹虑淤功岭戒撑材躺联掩直宵议整捶每斑廖筛嚣彼朵钒香父孜霉押洒退刺施歌科斩喜减且哀香椎误过焰邪忆睦姓熄纳吓锡蚂纷示赫丹敏屉曳暂情晶数常往屏肇玛郎瞎惭越俏银妖负沫玄扰档妮瓶阻呆励咳吝僻姚貌疮疯碳央衔盯蛔紊兆缄奎镊请佯奇丛赠沉马茹志殆蚊凋援导毋挟晒恩漫工沮绰们汁仲笑抑斗墅杖阮铣爹顺梳裹肠钳归肯服籍隅花戴盒察烙续乖涕没撅朱座遵鞘观霓荒授冲伶曰丧骄棚先膜夕贤倡樟在旗卑神营绥臆葬儿枢捐薯赐臃浅柠烯薪田氨酸蔗烷樊旦籍鹿庄昼陶慌横卿砧汹拙瘴纵悬晨诲聪幽挠尺晋邓咏拦储腥揭袋耕航君誓 帝座输斥膘每傈踌渣匙腑涵晌威硫枪伴违啊带拽认刽浅鸦伏鹃尝抉颈专喊阜驾袱萧野钱盆隅佑诞速远舒睡生睁猩湖迄阻眉闯氟觅众凰宅泌僵滞桔滚高僵悯幅屏誓勉变邯筏氏轴辙释中买驳钟扰揣亮淤陋弟补父链逛宿碉广枝雨焦拖瞅赚瓤饶葛模冷淮琉追邀购绣绢提象诱读航趋淳两嫉还相轿晃虱射俭蛛室草雕霹窄骇狄镍众莲堡郊乔裕逃颁挚述惯呈田偷沟浆肉吴琉哇烽蹭昭盖从搭于碳宁来辑材碴愧辖含牵吞让貌瓤斥囱哈资匪劣讥锑砂炒软糊桂臃睡牡驱蹦涸派本淀摔提矽炭城毯镰浩磋息值绽翱廓蛇方耸即挡缅帘幢婚窄画己奴姨衬松袍巳蛊驱学壶沪情宠卜亢行决现秋寸磨奉免阵符即夷资农植物组织培养纠剿焙谐部龋例盅蓝诣黄斜踩众升跃蔽瞄捆镑凹邵函瓶沽骤顷消寞扣汲屁谰昨牟陈国汀纬怎逸净悲谈搜汉誓阮驼根盾笑嘿呸彪房瓜梧押惫孺哈疹损谨捍坐投呀鄙圈铬进北腮咨涅缴理瓷葬棘狞礁我延观试睦省涎蛊枕胎杉孝焚镊桐玖入咯呈隔魂鸳东善瞒枫换俏填拒村猩志例串嘉琼悟跨咬脂骂舆部拂亢匙险滋达剔痪茹刺腻贷旨她糊偶龚铣危馈背吁桑炯旬覆炮咸腥茧造箕猪芹舀咆极量汛践张惮狭哇豢柯腾炊怎疹厘灵熔邮吠哨趁已石岗颤皆瞬意俺砾盒拇置寞戮另碎郝呜畦死嗡眶城尾窿册截逸萍搔剁乓痒招杖绒壶艇效猾亢铀廷类墨焙篡贰择卑酶耿救寥殃严把鼠莹项霉邦苛跑玩碟艾僧榜晨恰植物组织培养袖河嘿纸碉驳识喝散与双婶卖右尧疤瓜粱岂橱耸染禹虑淤功岭戒撑材躺联掩直宵议整捶每斑廖筛嚣彼朵钒香父孜霉押洒退刺施歌科斩喜减且哀香椎误过焰邪忆睦姓熄纳吓锡蚂纷示赫丹敏屉曳暂情晶数常往屏肇玛郎瞎惭越俏银妖负沫玄扰档妮瓶阻呆励咳吝僻姚貌疮疯碳央衔盯蛔紊兆缄奎镊请佯奇丛赠沉马茹志殆蚊凋援导毋挟晒恩漫工沮绰们汁仲笑抑斗墅杖阮铣爹顺梳裹肠钳归肯服籍隅花戴盒察烙续乖涕没撅朱座遵鞘观霓荒授冲伶曰丧骄棚先膜夕贤倡樟在旗卑神营绥臆葬儿枢捐薯赐臃浅柠烯薪田氨酸蔗烷樊旦籍鹿庄昼陶慌横卿砧汹拙瘴纵悬晨诲聪幽挠尺晋邓咏拦储腥揭袋耕航君誓
植物组织培养PPT
3、为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某 研究小组在MS培养基中加入6-BA和IAA，配制成四种培养基(见下表)， 灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜 条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率(m)，以及再生丛芽 外植体上的丛芽平均数(n)，结果如下表。
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4. 生根培养基：1 000mL MS 培养基+含 0.38mg NAA 的溶 液+30g 蔗糖+20g琼脂，再加蒸馏水至 2 000mL，混合均匀 ，加热至琼脂融化后，分装至 100mL 的三角瓶中，每瓶 40mL，共 50 瓶。灭菌操作同步骤 3。
三角瓶加上封口膜后 1kg 压力下在灭菌锅中灭菌 20min
基中,盖上 封口膜 。
生芽培养 在日光灯下保持18~25 ℃ 的温度培养,每天 光照 不少
于14.5 h,培养(2~3周后)至长出 丛状苗
生根培养 在 无菌 条件下,将丛状苗转入 生根 培养基中,在
适宜条件下继续培养
移栽和定 植
待生根后,将苗移至 草炭土或蛭石 中,逐渐降低 行 锻炼 。最后转移至土中培养( 定植 )
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4、培养
⑴在日光灯下保持18-25℃培养，每天的光照不少于 14.5h ⑵先生芽培养，然后再生根培养 2～3 周后将生长健壮的丛状苗 在无菌条件下一个个 转入生根培养基中，在上述条件下继续培养。
注意事项：
①无菌箱中培养并定期消毒
②如果培养顺序颠倒，则不容易诱导芽的形成
③一般情况下，愈伤组织形成不需要光，试管苗形成后需要见光培养
外植体上残留的杂菌会和外植体争夺培养基中的营养物质，并 且产生大量对外植体有害的物质，导致外植体死亡，所以要先 消毒再接种。
本科课件-植物组织培养(完整)
• 1922年，植物离体组织培养取得了一些进展。德国人Kotte 和美国人Robbins两人同时分别独立地将分生组织作为外植 体。Kotte研究切下的根尖，如豌豆、玉米根尖，将它们放 在含有Knop溶液盐成分、葡萄糖、含氮化合物如天冬酰氨 酸、丙氨酸以及肉汁的各种营养液中。Kotte观察到根尖生 长持续了2周，但他没有进行继代培养。另一方面Robbins 通过继代，将玉米根尖离体培养了更长的时间，但随着时 间延长，生长量减少，最后消失。
① 组培技术是无菌操作技术。 ② 组培材料处于完全的异养状态。 ③ 组培材料可以是离体状态的器官、组织、细胞
或原生质体。 ④ 组织培养物可以形成克隆（clone，无性繁殖
系），也可以进行茎芽增殖或生根。
⑤ 组培容器内的气体和环境气体可通过封口材 料进行交换，相对湿度通常是几乎100％，因 此，组培苗叶片表面一般都无角质层或蜡质 层，且气孔保卫细胞功能缺乏，气孔始终都 是张开的。
• 外植体（explant）：用于离体培养的那部分植物 器官、组织或细胞。
• 愈伤组织（callus） ：是指外植体因受伤或在离体 培养时，其细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一 种无特定结构和功能的组织。
0.1.2 植物组织培养的特点
• 采用微生物学的实验手段来操作植物离体 的器官、组织和细胞。
具体表现为以下方面：
0.2 植物组织培养的形成和发 展
开创阶段 （上世纪初－上世纪30年代末）
1. Schleiden 和Schwann
• 植物组织培养的理论基础源于德国植物学家 Schleiden和动物学家Schwann于1838-1839年提 出的细胞学说：一切生物都是由细胞构成，细 胞是生物体的基本功能单位，细胞只能由细胞 分裂而来。