肾脏活检组织的取材与固定
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一、取材
取材是制作切片程序中的首要步骤,取材不当,将直接影响病理诊断和科研工作的质量。组织标本的选用非常重要,不能随意地切取组织来制作组织切片,否则病理检验的结果不会令人满意。
二、取材工具
取材刀具必须锋利。切取标本时不应该挤压和揉擦,以免人为损伤组织。
三、标本的选取
切取标本的原则是求准而不是求量多。
四、固定
固定是指将各种组织浸入防腐剂内,使细胞内的物质为不溶性。固定的作用是用一种方法将组织尽可能保持在它原来的形态,在制作切片过程中,固定是最为重要的步骤,一张优秀的组织学切片是建立在适当而完全的固定基础之上。
五、常用固定液
1.福尔马林是一种使用广泛、简便的固定剂,同时又是一种良好的标本保存液。经它固定的标本,可适应一些特殊染色。它的渗透性较强,固定均匀,能增加组织的韧性,组织收缩轻微,对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好,但经福尔马林固定时间长的组织,易产生黑色的沉淀。
2.多聚甲醛最大特点是穿透力强,因而可较好地固定大块组织。并可保存蛋白质、脂类和一些糖原,但不能保存多糖。
3.戊二醛其优点是对糖原、糖蛋白、微管、内质网和细胞基质等有较好的固定作用,对组织和细胞的穿透力比四氧化锇强,还能保存某些酶的活力,长时间的固定(几周甚至1 ~
2 个月)不会使组织变脆。缺点是不能保存脂肪,没有电子染色作用,对细胞膜的显示较差。
六、固定液选择
组织制片技术上所使用的固定剂种类繁多,性能各有不同,有的为氧化剂,有的为还原剂;有的呈酸性,有的呈碱性;有的渗透力强,有的渗透力弱;有些易使组织收缩,有些则使组织发生轻微膨胀现象。应根据标本制作需要选取理想的固定液(本室肾活检常用10% 福尔马林固定液、免疫组化标本常用4% 多聚甲醛固定、电镜标本常用2.5% 戊二醛固定)。七、固定液量
一般应为组织体积的5 ~10 倍,最少不应少于5 倍。
八、固定注意事项
1.组织固定越新鲜越好。固定最好在组织离体后30 s 至1 min。
2.组织固定,组织块不宜过大。凡是需要固定的组织,都不应该太大、太厚。
3.对不同类型的组织应适当合理地选择固定液。
4.组织固定,时间不宜太短,也不宜太长(本室常规标本固定8 ~24 h)。
5.固定液的量要充分。