痰液标本细菌学检验(二)

痰液标本细菌学检验（二）

关键词：细胞库菌株培养中心 atcc 对照品标准品北京标准物质网

1．鉴定直接涂片或染色镜检的目的是推断病原菌，制定分离培养和鉴定方向。遇危重患者或发现形态特征明显的病原菌时，可以先发出一级(初步)检验报告。必要时可与临床医生沟通探讨，做出更具针对性的鉴定方案。分离培养和鉴定的目的是，获得病原菌的纯培养或疑似病原菌的优势生长菌株，并在此基础获得明确的鉴定结果。

(1)形态学鉴定：对标本进行湿片观察(最好用相差显微镜)和染色镜检(革兰染色是最基本的染色，必要时进行细菌的特殊结构染色、抗酸染色、金胺“O”荧光染色等)。例如在痰中发现了抗酸分枝杆菌，需要做出一级(初步)检验报告。疑似放线菌，如查见中间部分的菌丝为革兰阳性，而四周放射的末端为革兰阴性，抗酸染色为非抗酸性者，则可疑似放线菌。抗酸染色为弱阳性，则疑似诺卡菌。分离培养生长的不同特征菌落要逐一进行染色镜检，以此验证标本培养前后观察到的细菌种类是否吻合。

(2)生理生化鉴定：在形态学检查的基础上，选择合适的分离培养方案。获得纯培养菌株或疑似病原菌优势生长菌株后，进行系统的生理生化实验鉴定。根据实验结果判断细菌的种类和型别。自动化检测技水主要依据的是细菌的牛物化学反应特征。

(3)免疫学鉴定：形态学和生理生化特征可初步判断细菌的科属类别，再利用血清学实验鉴定其种和型。敏感性较高的免疫学标记技术，如酶联免疫吸附试验(ELISA)等，可对患者的呼吸道标本或血清等体液标本中的病原菌抗原物质或特异性抗体进行检测。

(4)分子生物学鉴定：利用聚合酶链式反应(PCR)、核酸杂交、核酸测序技术和生物芯片技术等分子生物学技术，可以直接对各种取白患者的标本或分离培养后的菌株进行检测。例如，进行16sRNA序列扩增测序，可以将病原茵鉴定到型。

(5)药物敏感试验：分离培养获得纯培养或判断出疑似致病菌菌落后，应该存第一时间进行药物敏感试验，用以指导临床用药。

(6)微生物自动化检测：分离培养获得纯培养或判断出疑似致病菌菌落后，利用细菌生理生化特性进行自动化鉴定与药敏检测，仪器系统自动检索数据库自动生成鉴定报告和药敏试验报告。