同源重组基因敲除共34页
第六章：常用分子生物学技术——RNA干扰技术
识别并切割(qiēgē)与siRNA反义链互补的靶mRNA
（5）dsRNA的再生成
第十ānrǎo)
第十七页，共四十页。
RNA干扰(gānrǎo)
（RNA interference, RNAi）
siRNA（小干扰RNA）：21-23nt，由dsRNA裂 解而成的小片段，可诱导mRNA降解。siRNA主要
药学 分子生物 (yào xué)
学
第一页，共四十页。
生物芯片 （biochip） (shēnɡ wù xīn piàn)
以生物、电子、机械和信息技术为基础，在 固相支持物表面建立集成、连续、微型分析系 统(xìtǒng)，形成芯片，实现对生物大分子的准确、 快速、高通量、自动化检测。
第二页，共四十页。
第三十一页，共四十页。
REGγ基因敲除鼠（下图）出现脊椎(jǐ zhuī)弯曲等早衰现象
第三十二页，共四十页。
Gab1基因(jīyīn)敲除导致小鼠缺血性血管新生、侧枝循环建立出现 缺陷（图示上半部分），主要是由于血管内皮细胞管状结构形成的 信号调控通路出现障碍而引起的（图示下半部分）。
第三十三页，共四十页。
2、 RNA干扰技术缺点
“脱靶效应”（off-target effects）
第二十四页，共四十页。
RNA干扰技术(jìshù)的应用
1、基因功能研究（功能失活策略） “基因敲减（knockdown）”
2、基因治疗（基因(jīyīn)失活性治疗） （1）病毒感染性疾病
通过RNAi抑制 RNA病毒(bìngdú)复制 （2）基因过表达引起的疾病（如肿瘤）
特定功能基因的部分片段被同源的外源DNA片 段替代，从而使靶基因失活。
同源重组基因敲除原理
同源重组基因敲除原理引言随着基因工程技术的快速发展，人类对基因编辑和修饰的需求日益增加。
同源重组基因敲除是一种有效的基因编辑技术，可以精确地删除目标基因，进而研究其功能和影响。
本文将从基本原理、步骤以及应用场景等方面详细介绍同源重组基因敲除的原理。
基本原理同源重组基因敲除是一种人工改变生物体基因组的方法。
其基本原理是利用同源重组原理在特定基因位点引入外源DNA序列来替换目标基因或其部分序列。
这个外源DNA序列通常包含选择标记基因和辅助基因，用于筛选和鉴定敲除细胞。
在同源重组基因敲除中，通常选择目标基因的第一个外显子或关键区域进行敲除，以达到有效丧失目标基因功能的目的。
通过设计特异性的核酸引物，将外源DNA序列与目标基因特定区域相结合，通过同源重组来替代目标基因。
步骤同源重组基因敲除包括以下几个关键步骤：1.设计外源DNA序列：根据目标基因序列，设计与目标基因特定区域同源的外源DNA序列。
外源DNA序列通常包含选择标记基因和辅助基因。
2.制备敲除载体：将设计好的外源DNA序列插入到敲除载体中。
敲除载体通常是由质粒构建而成，具有选择性标记基因，如抗生素抗性基因，以方便后续筛选。
3.细胞转染：将敲除载体导入目标细胞内。
转染方法有多种，包括化学法、电穿孔法和病毒介导转染法等。
转染后，对细胞进行培养和筛选。
4.筛选敲除细胞：根据选择性标记基因的特性，可使用对应的抗生素或其他筛选条件来选择敲除细胞。
只有敲除了目标基因的细胞才能存活下来，形成筛选突变株。
5.鉴定敲除细胞：通过PCR、Southern blot等分子生物学方法对转染细胞进行鉴定。
PCR扩增特定区域并进行测序分析，可确认目标基因是否被成功敲除。
应用场景同源重组基因敲除技术在基因编辑领域具有广泛的应用前景。
以下是该技术在一些应用场景中的具体应用：1.基因功能研究：同源重组基因敲除可以用于研究基因的功能和调控机制。
通过敲除特定基因，观察编辑细胞或生物体的表现差异，从而揭示该基因对生物体的重要性和功能。
分子生物学课件：基因敲除
Neo gene Neor基因进入ES细胞的基因组 在G418、单核苷酸类似物的培养 基中，可以存活。
P53 gene Neo gene HSV-Tk
Neor基因和HSV-TK基因同时进入ES 细胞的基因组 在G418培养基中存活，但是含有单核苷 酸类似物培养基中死亡。
2
3A
3B
嵌合体
与阴性小鼠 交配
1
3D
基因敲除的 纯合子小鼠
杂合子小鼠
3C
扩展知识：
上述基因打靶策略虽然实现了目标基因的特异失活， 但基因组中引入了一个外源标记的基因（NeoR), 该基因会 影响机体正常的功能。怎么改进？
有些基因是胚胎生长发育过程中非常重要的基因，一旦被 敲除可导致胚胎发育受损甚至不能发育为一个个体, 针对这 类基因如何采用基因敲除技术进行研究呢？
➢ 如果Tk 基因进入细胞，在含单核苷酸类似物的培养基中生长时会 因为以上分解反应产生的有毒物质而死亡
筛选标志在这个过程中如何发挥作用的？
正负筛选系统பைடு நூலகம்作原理
1. 同源重组
10-5-10-6
Neo HSV-Tk P53 gene
ES cells
P53 gene P53基因被替换
2. 随机插入，非同源重组
如果基因组序列是：
123
待敲除基因
4
基因敲除载体的结构是：
LoxP
TK
4
LoxP
LoxP
Neo
•使待敲除基因位于两个LoxP位点之间
基本流程：
•条件性基因敲除载体的构建 •在ES细胞中进行第一次常规性基因敲除
Genomic DNA:
123
基因敲除同源重组方法
基因敲除同源重组方法
哇塞，基因敲除同源重组方法，这可真是个超厉害的生物技术手段呢！
首先来说说它的步骤和注意事项哈。
一般呢，先得设计针对目标基因的同源臂，这就像是给基因做手术准备的精准工具。
然后把这些同源臂和筛选标记等构建到载体上，就像给工具找个合适的盒子装起来。
接着把这个载体导入到细胞中，让它们去发挥作用。
这里要注意载体的质量和导入的效率哦，可不能马虎。
在筛选的时候也要仔细，确保得到的是真正敲除了目标基因的细胞。
再说说这个过程中的安全性和稳定性。
其实啊，只要操作规范，安全性还是挺高的。
就像走在一条规划好的路上，只要不偏离轨道，就不会出大问题。
而且这个方法的稳定性也不错，一旦成功敲除，一般都能稳定遗传下去呢，这多让人放心呀！
那它的应用场景和优势可就多啦！可以用来研究基因的功能，这就好比是揭开基因这个神秘宝库的钥匙。
还能用于疾病模型的建立，为治疗疾病提供重要的线索和依据。
它的优势就是准确性高呀，能精确地敲除目标基因，这可太牛了！
比如说在癌症研究中，通过基因敲除同源重组方法，科学家们成功地研究了某些与癌症发生发展密切相关的基因，为癌症的治疗找到了新的方向。
这效果，简直太棒啦！
我觉得基因敲除同源重组方法真的是生物技术领域的一颗璀璨明星呀！它为我们探索生命的奥秘、解决疾病难题提供了强大的工具和手段，让我们对未来充满了希望！。
同源重组基因敲除原理
同源重组基因敲除原理同源重组技术是一种常用的基因编辑方法，它可以通过精确地改变某一特定基因的序列，从而实现对该基因的敲除或修饰。
同源重组基因敲除原理是基于DNA双链断裂修复机制的原理，通过引入外源DNA片段来实现对目标基因的敲除。
下面我们将详细介绍同源重组基因敲除的原理及其应用。
首先，同源重组基因敲除的原理是基于DNA修复机制的。
在细胞中，DNA双链断裂是一种常见的DNA损伤形式。
细胞会通过两种主要的修复途径来修复这种损伤，即非同源末端连接（NHEJ）和同源重组（HR）。
在同源重组修复过程中，细胞会利用同源DNA片段来修复断裂的DNA，从而实现对目标基因的敲除或修饰。
其次，同源重组基因敲除的实现需要引入外源DNA片段。
这些外源DNA片段通常包含有与目标基因相同或相似的序列，以便在同源重组修复过程中与目标基因发生配对。
一旦发生同源重组，外源DNA片段会替代目标基因的部分或全部序列，从而实现对目标基因的敲除。
同源重组基因敲除技术在基因编辑领域有着广泛的应用。
首先，它可以用于研究基因功能。
通过敲除特定基因，研究人员可以了解该基因在生物体内的功能及其对生物体的影响，从而揭示基因与生物性状之间的关系。
其次，同源重组基因敲除还可以用于生物工程和生物医学研究。
研究人员可以利用这一技术来改良农作物、动物，甚至进行基因治疗，为人类健康和农业生产提供新的解决方案。
总之，同源重组基因敲除是一种重要的基因编辑技术，它基于DNA修复机制，通过引入外源DNA片段来实现对目标基因的敲除。
这一技术在基因功能研究、生物工程和生物医学研究等领域有着广泛的应用前景。
随着基因编辑技术的不断发展，同源重组基因敲除技术将为人类社会带来更多的福祉和进步。
博士专题：基因功能研究技术之基因敲除及基因编辑技术 ppt课件
2011年8月， Nature Biotechnology 上同时发表了用TALEN 技术 进行基因敲除的4篇研究文章，另加一篇综述。
• 一篇人类干细胞 《Genetic engineering of human pluripotent cells using TALE nucleases》
• 一篇大鼠 《Knockout rats generated by embryo microinjection of TALENs》
ppt课件
15
条件型基因打靶的优势： 1. 克服了重要基因被敲除所导致的早期致死 2. 并能客观、系统地研究基因在组织器官发生、发育以及
疾病发生、治疗过程中的作用和机制
这一技术亦存在一些缺点： 1. 费用太高 2. 周期较长 3. 许多基因在剔除后并未产生明显的表型改变，可能是这
些基因的功能为其他基因代偿所致
ppt课件
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TALEN 发展过程
ppt课件
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TALEN 基因敲除
TALEN (TALE+FOK I) 表达质粒对
TALEN 表达质粒对转染、表达 切割靶位点
切割诱发DNA损伤修复机制 （nonhomologous end-joining， NHEJ）。由于在此修过程中总是 有一定的错误率存在。在修复中发 生移码突变错误的个体即形成目标 基因敲除突变体
• 常见的几种诱导型基因敲除类型有：四环素诱导型； 干扰素诱导型；激素诱导型；腺病毒介导型。
ppt课件
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III、基因编辑技术
• ZFN系统 • TALEN系统 • CRISPR/Cas 系统
ppt课件
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（一）ZFN技术系统
ppt课件
20
《基因敲除技术》PPT课件
1.什么是传统机械按键设计？
传统的机械按键设计是需要手动按压按键触动PCBA上的开关按键来实现功 能的一种设计方式。
传统机械按键结构层图：
按键
PCBA
开关键
传统机械按键设计要点：
1.合理的选择按键的类型，尽量选择 平头类的按键，以防按键下陷。
2.开关按键和塑胶按键设计间隙建议 留0.05~0.1mm，以防按键死键。 3.要考虑成型工艺，合理计算累积公 差，以防按键手感不良。
系统来介导Cre 的表达，则可省去建立携带 Cre 的转基因动物的过程。
15
2.2利用随机插入突变进行基因敲除。
2.2.1 原理：
此法利用某些能随机插入基因序列的病毒，细菌或 其他基因载体，在目标细胞基因组中进行随机插入 突变，建立一个携带随机插入突变的细胞库，然后 通过相应的标记进行筛选获得相应的基因敲除细胞 （原理见图5）[11,12] 。根据细胞的不同，插入载 体的选择也有所不同。逆转率病毒可用于动植物细 胞的插入；对于植物细胞而言农杆菌介导的T-DNA 转化和转座子比较常用；噬菌体可用于细菌基因敲 除。
ｄ．选择筛选已击中的细胞：由于基因转移的同源重组自然 发生率极低，动物的重组概率为10－2～10-5，植物的概率 为10－4～10－5。因此如何从众多细胞中筛出真正发生了同 源重组的胚胎干细胞非常重要。目前常用的方法是正负筛选 法（PNS法），标记基因的特异位点表达法以及PCR法。其中 应用最多的是PNS法。
并且这种效应可以传递到子代细胞中,所以 RNAi的反应过程也可以用于基因敲除。近年 来，越来越多的基因敲除采用了RNAi这种更 为简单方便的方法。
23
2.3.1 RNAi阻断基因表达的机理 双链RNA进入细胞后，能够在Dicer酶的作用下被裂
同源重组的基因敲除
3.RNA干扰引起的基因敲除
RNA干扰（RNA interference, RNAi）是指在进 化过程中高度保守的、由双链RNA（doublestranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效 特异性降解的现象。简单的说是指一种分子生物学上 由双链RNA诱发的基因沉默现象。所以RNAi的反应过 程也可以用于基因敲除。
反转录病毒转染法：把含有重组的逆转录病毒载体病毒颗粒去感染卵 裂期胚胎，于是携带外源基因的逆转录DNA可以在感染过程中，整合 到宿主细胞的染色体上。
体细胞核移植
二、基因敲除技术
定义：通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。
1、应用DNA同源重组原理进行基因敲除。
2、利用随机插入突变进行基因敲除 3、RNA干扰也可以引起基因敲除
摘自《中华医学信息》 2007年第22卷第21期
文献：
Construction of pha-Operon-Defined Knockout Mutants of Pseudomonas putida KT2442 and their Applications in Poly(hydroxyalkanoate) Production
花粉管通道法：在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液，利用 植物在开花、受精过程中形成的花粉管通道，将外源DNA导入受精 卵细胞，并进一步地被整合到受体细胞的基因组中，随着受精卵的 发育而成为带转基因的新个体。
3、动物转基因技术
显微注射法：在显微镜下，直接将DNA注射到胚胎的细胞核内， 再把注射过DNA的胚胎移植到动物体内，使之发育成正常的幼仔。
基因敲除技术与诺贝尔奖
医学领域的诺贝尔奖（2007年）已经揭晓。三位在基因敲除技术方面进行了 卓越、开拓性工作并取得了显著成就的科学家分享了诺贝尔生理或医学奖，他们 是美国盐湖城犹他州大学的Marie Capecchi教授、美国北卡罗来纳州大学的 Oliver smithies教授以及英国加蒂夫大学的Martin Evans教授
同源重组原理的基因敲除
同源重组原理的基因敲除同源重组原理是指在相同基因家族中存在有相似的基因序列，在细胞发育或疾病发生过程中，通过交叉互换和基因重组的方式，产生新的基因序列和突变。
同源重组原理的基因敲除是指通过特定方法使某一特定基因失去功能，从而研究该基因在细胞、组织或整个生物体中的作用、功能和调控机制。
同源重组原理的基因敲除方法主要有两种，一种是传统的基因敲除方法，另一种是CRISPR/Cas9系统。
传统的基因敲除方法是通过基因转座，引导同源重组技术来实现基因敲除。
基因转座是指基因序列从一个部位移到其他部位的过程。
以酵母为例，可以构建一个含有基因敲除所需片段的DNA质粒，并通过大量的复制使其进入靶基因的基因座位，然后利用同源重组方式使这个基因座排挤原基因，从而实现基因敲除。
这种方法的优点是简单易行，但存在着一些问题，如基因敲除效率低、通过杂合性培养获取敲除株困难等。
CRISPR/Cas9系统是一种新出现的基因编辑技术，通过修改CRISPR序列和Cas9蛋白使其成为靶向特定基因的工具。
CRISPR序列是一种存在于原核细菌和古细菌基因组中的一段重复序列，与Cas9蛋白一起组成CRISPR/Cas9系统。
Cas9蛋白具有核酸酶活性，可以识别和切割特定的DNA序列。
通过设计合成特异性的CRISPR序列和构建指向目标基因的合适sgRNA（single guide RNA），CRISPR/Cas9系统可以实现高效、准确的基因敲除。
CRISPR/Cas9系统的基因敲除步骤为：首先是设计和合成与目标基因靶向序列相对应的sgRNA，并将其与Cas9蛋白复合；然后将sgRNA和Cas9蛋白复合体导入到细胞中，靶向特定基因的DNA序列；接下来，Cas9蛋白将sgRNA引导到目标基因上，并通过识别和切割目标基因的DNA序列导致其断裂；最后，细胞通过自身修复机制修复断裂的DNA片段，导致错误的连接和缺失，从而使目标基因失去功能。
基因敲除的应用非常广泛。
同源重组的基因敲除
RECOMBINATION
第一次重组
A、B为一段DNA序列，并非是基因
A
A1 A2
目的基因
B
a1
a2
a
构建质粒 b
A1
a2
b
a1
A2
目的基因
B
第二次重组的第一种情况 A1 a2
b
a1
A2
目的基因
B
b A1 a2 b1 b2 a1 A2
目的基因
B2
B1
B
A1 a2 b1 B2 目的基因 a1 A2
花粉管通道法：在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液，利用 植物在开花、受精过程中形成的花粉管通道，将外源DNA导入受精 卵细胞，并进一步地被整合到受体细胞的基因组中，随着受精卵的 发育而成为带转基因的新个体。
3、动物转基因技术
显微注射法：在显微镜下，直接将DNA注射到胚胎的细胞核内， 再把注射过DNA的胚胎移植到动物体内，使之发育成正常的幼仔。
实验目的： 在P.Putida KT2442基因组中敲掉目的基因
phaC1-phaZ-phaC2,检测不同phaC基因的特 异性
运用原理：同源重组的基因敲除
Abstract
Pseudomonas putida KT2442 could accumulate medium-chainlength poly(hydroxyalkanoate)s (PHA) consisting of 3hydroxyhexanoate, 3-hydroxyoctanoate, 3-hydroxydecanoate, and 3-hydroxydodecanoate from a wide range of carbon sources. In this study, the PHA synthase pha operon (phaC1-phaZ-phaC2) was knocked out and the vgb gene encoding vitreoscilla hemoglobin protein (VHb), which could enhance oxygen uptakerate especially at low oxygen concentration, was integrated into the P. putida KT2442 genome to replace the deleted fragment. The resulting mutant P. putida KTOY01 or gene-replaced mutant KTOY02 was used as the host to study PHA synthase properties and PHA production. Different PHA polymerase (PhaC) genes, phaCRe from Rastonia eutropha H16, phaCAc from Aeromonas cavie, and phaC2Ps from
DNA重组
6.1 同源重组
同源重组又称一般性重组。同源重组发生在DNA的同 源序列之间，真核生物非姊妹染色单体的交换，姊妹染色 单体的交换，细菌及某些低等真核生物的转化，细菌的转 导、接合等都属于这—类型。
Holliday对遗传重组的可能机制成功提出了一个模型予 以说明。在分子水平上了解重组过程是在细菌的研究中加 以解决的。
第18页/共68页 图6-3 同源重组的双链断裂模型
6.2 位点特异性重组
位点特异性重组是指发生在DNA特异性位点上的重组。参与 重组的特异性位点需要专门的蛋白质识别和结合。尽管在许多情 况下，它也需要在重组位点具有同源的碱基序列，但同源的碱基 序列较短。
位点特异性重组既可发生在2个DNA分子间，也可以发生在 1个DNA分子内部。前一种情况通常会导致2个DNA分子间发生 整合或基因发生重复，而后一种情况则可能导致缺失或倒位。
第30页/共68页
图6-15 第一类转座子的结构
第31页/共68页
图6-16 第一类转座子的转座机制
第32页/共68页
6.3.1.2 第二类转座子
称为复杂转座子(complex transposon)，含有转座酶基因、 解离酶(resolvase)基因以及抗生素抗性基因，两端为反向重复， 无插入序列。
如果两个插入序列正好位于抗性基因两侧该转座单位携带的性状对宿主细胞是有利的因而具有选择优复合型转座子的两个插入序列以正向或反向更常见位于两端它们的序列可以不完全相同有时只有一个插入序列具有转座活性另一个已在多次传代中失去活性
此外，DNA重组还参与许多重要的生物学过程。 它为DNA损伤或复制障碍提供修复机制。某些病毒利 用重组将自身的DNA整合到宿主细胞的DNA中。
第26页/共68页
同源重组双交换原理基因敲除
同源重组双交换原理基因敲除一、同源重组原理同源重组是指两个染色体上的相同区域发生交换，交换的两个染色体必须来自于同一个亲本。
同源重组是常见的染色体遗传现象之一。
1.1 同源染色体同源染色体是指来自不同亲本但具有相似基因序列的两条染色体，它们在大小、形态和基因排列方面都相似。
人类有23对同源染色体。
1.2 交叉互换交叉互换是指发生在同源染色体上的交换现象。
在减数分裂中，配子形成前，同源染色体间会发生互换，使得每个配子都包含来自母本和父本的遗传物质。
1.3 同源重组原理在减数分裂中，当两条同源染色体上的相似区域发生交叉互换时，就会产生新的组合形式。
这种现象被称为同源重组。
二、双交换原理双交换原理是指在一对杂合子中，如果两个位点A和B位于不同的染色体上，则它们之间存在独立分离和随机联合关系。
这意味着，位于不同染色体上的两个基因在遗传过程中是相互独立的。
2.1 杂合子杂合子是指一个个体拥有两个不同等位基因的情况。
例如，在人类中，如果一个人的父母分别是Aa和Bb，则该人就是AB杂合子。
2.2 独立分离独立分离是指在一对杂合子中，两个位点A和B之间的遗传关系是相互独立的。
例如，在一个AaBb杂合子中，位于不同染色体上的A和B基因会随机分配到不同的配子中。
2.3 随机联合随机联合是指在一对杂合子中，两个位点A和B之间的遗传关系是随机组合的。
例如，在一个AaBb杂合子中，由于A和B基因在遗传过程中相互独立，所以会出现AB、Ab、aB和ab四种可能性。
三、基因敲除基因敲除是指通过技术手段使得特定基因失去功能或被删除。
这种技术可以用来研究特定基因在生物体发育、生长、代谢等方面所起到的作用。
3.1 RNA干扰技术RNA干扰技术是一种常见的基因敲除技术。
它是通过引入特定的RNA 分子，来抑制目标基因的表达。
RNA干扰技术可以用于研究基因在生物体发育、生长、代谢等方面所起到的作用。
3.2 CRISPR-Cas9技术CRISPR-Cas9技术是一种新兴的基因编辑技术。
red同源重组基因敲除原理与步骤
red同源重组基因敲除原理与步骤下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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基因编辑方法敲除同源重组酶
基因编辑方法敲除同源重组酶基因编辑，听起来是不是有点高大上？别急，咱们今天要聊的，就是基因编辑里的一个大明星——敲除同源重组酶。
嗯，名字听着有点吓人，但别担心，咱们慢慢捋，搞明白了也不觉得复杂。
什么是“基因编辑”？其实就像是我们在一篇文章里改动几个字，基因编辑就是科学家通过一种方法，给生物的基因组做修改，改改错别字，换换地方，甚至直接删除某些信息。
这可是一个大活儿哦，能让我们搞清楚很多疾病的成因，甚至帮助治病。
现在大家都在瞪大眼睛，想知道到底“敲除同源重组酶”是个啥？其实也不难理解，咱们直接拆开说。
先说“敲除”。
在生物学里，敲除这个词，简单来说就是把一个基因或者一段基因的功能给“关掉”。
就像家里WiFi坏了，网断了，你也就上不去网了，敲除就是让那个“网”不能用了。
你一旦把某个基因敲除掉了，就能观察到生物发生了什么变化，科学家就能知道这个基因究竟在身体里有什么作用。
再来说“同源重组酶”。
这听起来是不是更像外星语？别慌，咱们慢慢琢磨。
同源重组酶是一种酶，也就是一种蛋白质，通常在细胞分裂时起到非常重要的作用。
它帮助细胞把DNA里的信息进行正确的“拼接”，确保基因传递的时候不出错。
你想想，它就像是一位非常细心的拼图高手，帮助把遗传信息拼接得整整齐齐，不乱七八糟。
所以，这个酶在基因编辑中是非常重要的。
没有它，DNA的重组就变得非常困难，编辑也就没法顺利进行。
那既然这样，敲除同源重组酶到底有什么用呢？有点意思了。
科学家们会通过敲除同源重组酶，来“放弃”细胞自然的DNA修复能力。
为啥这么做呢？因为如果细胞自己不修复DNA，科学家就能利用一些外部的工具，给基因组插入他们想要的基因。
你可以把它想象成，科学家们拿着“工具箱”，在没有这个修复酶的帮助下，直接动手修改遗传信息，像换轮胎一样简单。
这样一来，基因编辑就变得更精准，操作起来也不容易出错。
可是，敲除同源重组酶听起来也没那么简单。
你得有一种非常高端的基因编辑工具，叫做CRISPRCas9。
同源重组的基因敲除36页PPT
同源重组的基因敲除
16、自己选择的路、跪着也要把它走 完。 17、一般情况下)不想三年以后的事， 只想现 在的事 。现在 有成就 ，以后 才能更 辉煌。
18、敢于向黑暗宣战的人，心里必须 充满光 明。 19、学习的关键--重复。
20、懦弱的人只会裹足不前，莽撞的 人只能 引为烧 身，只 有真正 勇敢的 人才能 所向披 靡。
Байду номын сангаас
谢谢！
51、 天 下 之 事 常成 于困约 ，而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
同源重组的基因敲除-生物化学与分子生物学共36页文档
6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。——斯宾诺莎 7、自知之明是最难得的知识。——西班牙 8、勇气通往天堂，怯懦通往地狱。——塞内加 9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。——赫尔普斯 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。——笛卡儿
同源重组的基因敲除-生物化学与分子 生物学
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6、黄金时代是在我们的前面，而不在 我们的 后面。
Hale Waihona Puke •7、心急吃不了热汤圆。
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8、你可以很有个性，但某些时候请收 敛。
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9、只为成功找方法，不为失败找借口 (蹩脚 的工人 总是说 工具不 好)。
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10、只要下定决心克服恐惧，便几乎 能克服 任何恐 惧。因 为，请 记住， 除了在 脑海中 ，恐惧 无处藏 身。-- 戴尔． 卡耐基 。