半纤维素制备方法的改进及其应用

木 聚糖 与 木 质 素 结 合 在 一 起 以 木 聚 糖 一 质 素 复 合 木
物 的形 式 存 在 ， 坏 半 纤 维 素 与 木 质 素 的 结 合 ， 破 使
半纤 维 素 与 木 质 素 分 离 是 提 高 碱 溶 率 的 前 提．
１ ５’ 煮 ３ ｎ可 破 坏 半 纤 维 素 与 木 质 素 的 复 ３ Ｃ蒸 ０ ｍｉ 合 结 构 ， 木 聚 糖 与 木 质 素 分 离 ［ 但 常 规 的 碱 法 使 １ 引，
值 （ 明 圈 直 径 （ ／ 苔 直 径 （ ） 酶 活 力 的 透 Ｄ） 菌 ） 与
关系．
１ ３ 半 纤 维 素 提 取 原 料 的 选 取 ． 选 择 木 聚 糖 质 量 分 数 较 高 的 原 料 是 有 效 提 取
提 取 通 常对 原 料 不 经 预 处 理 或 预 蒸 煮 温 度 不 够 ， 因 此 起 不 到 破 坏 复 合 物 结 构 的 作 用 ， 而 影 响 提 从
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无
锡
轻 工 大
学 学
报
第２ ２卷
出 酶 活 高 低 ， 而 可 快 速 、 用 、 效 的 初 步 筛 选 出 从 实 有
为提取原料．
表 １ 部 分原 料 中纤 维 素 、 纤维 素和 木 质素质 量分 数［】 半 ’ ．
７ Ｏ ０ ２ 琼 脂 １ ．ｐ ７ ５ Ｈ２ ． ， ５ Ｈ ． ．
２ ）选 择 培 养 基 ： 分 （ ／ ： 组 ｇ Ｌ） ＮＨ． ） ３ ， Ｎ（３ ．０
Ｎａ ． Ｋ２ ２ ０ Ｍｇ Ｏ４・７ ０ ２ 酵 母 Ｃｌ ０， ５ ＨＰ ．， Ｓ Ｈ２ Ｏ ． ， 浸 出 汁 ４ ５ 半 纤 维 素 １ ． ， 脂 １ ．ｐ ７ ５ ．， ００琼 ５ Ｈ ． ． ３ ）摇 瓶 培 养 基 ： 分 （ ／ ： 皮 ３ ， Ｎ０ 组 ｇ Ｌ） 麸 ０Ｎ ３ ３０ Ｎ Ｃ ． ， 船 Ｑ ２ ０ Ｍｇ Ｏ ７ ｚ ０ ２ 半 纤 ． ， ａ １ ０ Ｋ２ ５ ． ， Ｓ ，・ Ｈ Ｏ ． ， 维 素 １ ． ．ｐ ７ ５ ０ ０ Ｈ ． ．
ｉ ｐ ｏ ｅ ｔ ａ ｉ ｎ ｒｔ ｆｅ ｔ ａ ｔｏ ｅ ｅｅ ｆ ｃｉ ｅｙ ｒ ｉｅ ｙ ｉ ｔ ｇ ａ ｉｎ ｏ ｏ ｋｉｇ ｗｉｈ ｍ ｒ ｖ ｄ，ｈｅｒ ｔｏ ａ ｄ ｐｕ ｉｙ ｏ ｘ ｒ ｃｉ ｎ ｗ ｒ ｆｅ ｔｖ ｌ ａｓ ｄ ｂ ｎ ｅ ｒ ｔｏ ｆｃ ｏ ｎ ｔ
能 性低 聚 糖 相 比 具 有 有 效 剂 量 低 、 热 稳 定 性 好 、 酸
选 择 性 高 等 优 点 ［ ， 聚 木 糖 的 生 产 已成 为 目前 食 １低 ］ 品 工业 研 究 开 发 的 热 点 ．
高 产 木 聚 糖 酶 菌 种 的 分 离 筛 选 是 低 聚 木 糖 酶
Ｉ ｐｒ ｖ ｄ Ｅｘｔ ａ ｔｏ ｅ ｈ ｄ ｆ ｒ Ｈｅ ｉ ｅ ｌ ｌ ｅ ａｎ ｔ ｍ ｏ ｅ ｒ ｃ ｉ ｎ Ｍ ｔ ｏ ｏ ｍ ｃ ｌｕ ｏｓ ｄ Ｉ ｓ Ａｐｐｌｃ ｔｏ ｉａ ｉｎ
Ｗ ＡＮ Ｇ ｅ ｐ ｎ ＧＵ ＡＮ ｎ， ＴＡＮ Ｇ ａ — ｉ ｇ， ＧＵ Ｏ ｈ ｎ ｎ Ｘｕ － ｅ ｇ， Ｂｉ Ｈ ｉｑ ｎ Ｓ ａ －ａ
了半 纤 维 素 的提 取 率 和 提 取 纯 度 ． 以提 取 的 半 纤 维 素 作 为 选 择 性 碳 源 ， 用 来 制 备 分 离 筛选 木 聚 可
耱 酶 产 生 茵的 分 离培 养基 ；探 讨 了半 纤 维 素 添加 方 式及 添加 量对 培 养 基 产 透 明 圈 效 果 的 影 响 ． 关 键 词 ：木 聚 糖 酶 ； 纤 维 素 ； 离 培养 基 半 分 中 国分 类 号 ： ５ ９ Ｑ ３ 文献 标 识 码 ：Ａ
菌 种初 筛 的 重 要 方 法 之 一 ． 自然 界 筛 选 和 诱 变 后 从 筛 选 优 良产 酶 菌 都 要 用 到 大 量 的 分 离 培 养 基 ， 离 分
收 稿 日期 ： ０ ３０ ・ ５ 修 回 日 期 ：０ ３０ ・ ５ ２ ０ —６０ ； ２ ０ —８２ ．
作 者 简 介 ：王 雪 鹏 （ ９ ０） 男 ， 东 惠 民人 ， 品 科 学 与 工 程 硕 士 研 究 生 ． １８－ ， 山 食
（ ｌｅ ｅｏ ｓ ｅｉｓ Ｃｏ ｌｇ ｆＦｉｈ ｒｅ ，Ｏｃ ａ ｎｖ ｒｉｙ ｏ ｉａ，Ｑｉｇ ａ ６ ０ ３， ｉ ａ ｅ ｎ Ｕ ｉ ｅｓｔ ｆＣｈｎ ｎ ｄ ｏ ２ ６ ０ Ｃｈ ｎ ）
Ａｂ ｔ ａ ｔ ｎ ｔ ｓ ｐ ｐ ｒ ｔ ｅ ｅ ｔ ａ ｔｎ ｅ ｈ ｄ ｎ ｏ ｄ ｔｏ ｓ ｏ ｅ ｉｅ ｌ ｌ ｓ ｒ ｍ ｏ ｎ ｏ ｅ ｅ ｓ ｒ ｃ ：Ｉ ｈｉ ａ ｅ ， ｈ ｘ ｒ ｃ ｉ ｇ ｍ ｔ ｏ ｓ ａ ｄ ｃ ｎ ｉｉ ｎ ｆｈ ｍ ｃ ｌｕ ｏ ｅ ｆ ｏ ｃ ｒ ｃ ｂ ｗ ｒ
１１３ ．． 测 定 方 法
１ ）半 纤 维 素 提 取 率 及 纯 度 的测 定 ： 提 取 率 一
半 纤 维 素 纯 度 以 提 取 产 品 中 的 多 聚 糖 质 量 分
数计 ， 聚糖质量 分数 （ ） 总糖 质量 分数 （ ） 多 ％ ＝ ％ 一
还原糖质量分数 （ ． ％）
总糖 的测定 ： 按文献 ［ ］ ７ 方法 ． 还原糖 的测定 ： 按文 献［ ３ ８ 方法． ２ ）酶 活 的 测 定 ： ０ １ｍＬ 适 当 稀 释 的 酶 液 ， 取 ．
加 １ｍＬ用 ０ ２ｍｏ／ Ｈ ． ． ｌＬ ｐ ４ ８醋 酸 缓 冲 液 配 制 的
质 量 浓 度 为 １ｇ ｄ 木 聚 糖 溶 液 ， ０℃ 酶 解 ３ ｎ ／Ｌ ５ ０ｍｉ ， 用 ＤＮＳ法 测 定 还 原 糖 （ 以木 糖 计 ）ｇ ［． ］
１ ２ 实验 流 程 ．
Ｔｈ ｓ ｓ ｌ ｃ ｉ ｅ ｍ ｅ ｉ ｍ ｏ ｌ ｒ ｄ ｃ ｂ ｉ ｕ ｒ ｎ ｐ ｒ ｎ ｏ ｅ ｎ ｈ ｙ ａ ａ ｅ ａ ｔｖ ｔ ｏ ｌ ｅ ｉ ｅ ｅ ｔ ｄ ｕ ｃ ｕ ｄ ｐ ｏ ｕ ｅ ｏ ｖ ｏ ｓ ｔ ａ ｓ ａ ｅ ｔ ｚ ｎ ｓ ａ ｄ ｔ ｅ ｘ ｌ ｎ ｓ ｃ ｉ ｉｙ ｃ ｕ ｄ ｂ ｖ ｉ ｅ ｔｆｅ ｙ ｈ ｓ ｔ ａ ｓ ａ ｅ ｔ ｏ ｅ ｅ ｅ ｅ ｔ ｒｌ ． Ｉ ｔ ｉ ｗ ａ ｄ ｎ ｉｉ ｄ ｂ ｔ ｅ ｅ ｒ ｎ ｐ ｒ ｎ ｚ ｎ ｓ ｌ ｍ ｎ ａ ｉ ｙ ｎ ｈｓ ｙ， ｔ ｅ ｆ ｉｉ ｎ ｙ ｆ ｒｍ ａ ｙ ｈ ｅ ｆｃｅ ｃ ｏ ｐ ｉ ｒ ｓ ｒ ｅ ｉ ｇ ｗ ｅ ｅ ｅ ｆｃ ｉ ｅｙ ｉ ｐ ｏ ｅ ． ｃ ｅ ｎ ｎ ｒ ｆｅ ｔｖ ｌ ｍ ｒ ｖ ｄ Ｋ ｅ ｒ ｓ ｙ ｗｏ ｄ ：ｘ ｌ ｎ ｓ ｙ ａ ａ ；ｈ ｍ ｉ ｅ ｌ ｌ ｓ ；ｓ ｌ ｃ ｉ ｅ ｍ ｅ ｉ ｍ ｅ ｃ ｌｕ ｏ ｅ ｅ ｅ ｔｖ ｄ ｕ
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第２ ２卷 第 ６期
２０ ０ ３年 １ １月
无 锡 轻 工 大 学 学 报
Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｕ ｉＵｎ ｖ ｒ ｉｙ ｏ ｇ ｔＩ ｄ ｓ ｒ ｏ ｒ ａ ｆ Ｗ ｘ ｉ ｅ ｓ ｔ ｆ Ｌｉ ｈ ｎ ｕ ｔ ｙ
Ｖ０ ． ２ Ｎｏ ６ １２ ．
ｈ ｍ ｉｅｌ ｌ ｓ ｈ ｃ ｎ ｌ ｅ ｃ ｄ ｔａ ｓ ａ ｅ ｔｚ ｎ ｓｃ ｕ ｅ ｙ ｔ ｅ ｓｒ ｉ ｓｏ ｈ ｌｔ ｒ ｔ ｄ ｅ ． ｅ ｃ ｌｕ ｏ ｅｗ ｉｈ ｉ ｆｕ ｎ ｅ ｒ ｎ ｐ ｒ ｎ ｏ ｅ ａ ｓ ｄ ｂ ｈ ｔａｎ ｎ ｔ ｅｐ ａ ｅ ｗｅ ｅ ｓｕ ｉｄ
法 生 产 上 游 工 程 中 的 关 键 步 骤 之 一 ， 明 圈 法 又 是 透
作 者 从 优 化 半 纤 维 素 提 取 方 法 及 培 养 基 配 制 方 式 人 手 ， 讨 了 一 种 可 产 生 明 显 透 明 圈 的 分 离 培 探
养 基 的 制 备 方 法 ， 产 生 透 明 圈 的 大 小 可 基 本 反 映 所
１ １ １ 菌种 ． ． 藏菌种．
芽 孢 杆 菌 ＡＳ ５ ： 者 所 在 实 验 室保 －６ 作
１ １ ２ 培 养 基 ．．
１ ）种 子 培 养 基 ： 分 （ ／ ： 萄 糖 ８ ， 组 ｇ Ｌ） 葡 ．０
ＮＨ‘ Ｎｏ３ ．０， Ｃ１ ５ ３ Ｎａ ．０， Ｐ Ｋ２Ｈ ２ ．０， ｇ Ｏ４ ・ Ｍ Ｓ
Ｎ ＯＶ ． ２０ ０３
文 章 编 号 ：０ ９０ ８ ２ ０ ）６０ ８ ‘４ １ ０ ・ ３ Ｘ（０ ３ ０ ・０ ５０
半 纤 维 素制 备 方 法 的 改 进 及 其 应 用
王 雪 鹏 管 斌 ， 汤 海 青 ， 郭 姗 娜 ，
（ 国海 洋 大 学 水 产 学 院 ， 中 山东 青 岛 ２ ６ ０ ） ６ ０ ３ 摘 要 ：对 玉 米 芯 中半 纤 维 素 的提 取 方 法 及 条 件 进 行 改进 ， 蒸 煮 法 与 碱 法 提 取 相 结 合 有 效 提 高 将
Ｔａ ｂ．１ Ｔｈｅ ￣ ｏｎｉ ｎｔ ｏｆ ｃ ｌｕｌｓｅ－ ｍ ｉ ｅｌ ￣ｅ ａ Ｉ ｅ ｅｌ ｏ ｈｅ ｅ ｌａｈ ｎｄ ｍ ａｔ ａｌ ｓ ｉ ｎ
优 良的 产 木 聚 糖 酶 菌 株 ．
１ 材 料 与 方 法
１ １ 菌 种 、 养 基 测 定 方 法 ． 培
１ ４ 半 纤 维 素 提 取 方 法 的 优 化 ．
从 玉米 芯 中提 取 半 纤 维 素 的 方 法 主 要 有 碱 法 、 蒸 煮 法 ］ 沉 淀 法 ， 中 以 碱 法 最 好 ］ 玉 米 芯 中 和 其 ．
培 养 基 制 备 的基 本 过 程 为 ： 选 取 合 适 的 半 纤 维 素 提 取 原 料 一 优 化 半 纤 维 素 提 取 方 法 一 改 进 分 离 培 养 基 的 制 备 方 式 一 对 照
低 聚 木 糖 可 有 效 促 进 体 内 双 歧 杆 菌 增 殖 ， 善 改 肠 道 微 生 态 环 境 ， 强 机 体 免 疫 力 ， 且 与 其 它 功 增 并
培 养 基 成 分 的质 量 直 接 关 系 到 筛 选 效 果 ． 于 纯 木 由
聚糖 产 品价 格较 高 ， 自制 半 纤 维 素 作 为 选 择 性 碳 以 源 制 备 透 明 圈 明 显 的 分 离 培 养 基 一 直 是 菌 种 初 筛 的难 点 ． 多 文 章 中 报 道 的 制 备 方 法 由 于 其 半 纤 维 许 素 提 取 纯 度 不高 及 培 养 基 配 制 方 法 等 原 因 ， 分 离 其 培 养 基 分 离效 果 不 明 显 ［ ￣ ２３ － ．
ａ ｋ ｌ ｒ ａ ｍ ｅ ｔ Ｔｈ ｘ ｒ ｃ ｅ ｅ ｉ ｅ ｌ ｌ ｓ ｒ ｓ ｄ ａ ｅ ｅ ｔｖ ａ ｂ ｎ ｓ ｕ ｃ ｏ ｅ ｅ ｔ ｅ ｌ ａｉ ｅ ｔ ｎ ． ｔ ｅ ｅ ｔ ａ ｔ ｄ ｈ ｍ ｃ ｌｕ ｏ ｅ ｗｅ ｅ ｕ ｅ ｓ ｓ ｌ ｃ ｉ ｅ ｃ ｒ ｏ ｏ ｒ ｅ ｆ ｒ ｓ ｌ ｃ ｉ ｖ ｍ ｅ ｉ ｍ ｏ ｓ ｐ ｒ ｔ ｎｄ ｃ ｅ ｎ ｘ ｌ ｎ ｓ ｐ ｏ ｕ ｉ ｇ ｓ ｒ ｉ ｓ Ｔｈ ｄ ｉｉ ｎ ｍ ａ ｎ ｒ ｎ ｄ ｓ ｆ ｄ ｕ ｔ ｅ ａ ａ ｅ ａ ｓ ｒ ｅ ｙ ａ ａ ｅ ｒ ｄ ｃｎ ｔ ａ ｎ ． ｅ ａ ｄ ｔｏ ｎ ｅ ａ ｄ ｏ ｅ ｏ