五维他口服溶液检验操作规程

[代号] C20

[品名] 五维他口服溶液

[拼音] Wuweita Koufurongye

[英文] Five Vitamins Oral Solution

[规格及包装] 500ml/瓶；2500ml/瓶；5000ml 瓶，玻璃瓶装。

本品每1ml 中含维生素B 1（C 12H 17ClN 4OS · HCl ）应为0.27mg ～0.33mg ，含维

生素B 2（C 17H 20N 4O 6）应为0.054mg ～0.066mg ，含维生素B 6（C 8H 11NO 3·HCl ）应为

0.081mg~0.099mg ，含烟酰胺(C 6H 6N 2O)应为0.27mg ～0.33mg 。

[处方]

维生素B 1 0.3g 维生素B 2 0.06g 维生素B 6 0.09g 橙皮酊 15ml

烟酰胺 0.3g 泛酸钙 0.03g 苯甲酸钠 3.0g 枸橼酸 1.5g 乙 醇 50ml 蔗 糖 246g 水 适量

[制法] 取蔗糖和适量的水加热溶解，加入维生素B 1，维生素B 2，烟酰胺，

维生素B 6，泛酸钙用适量的温水溶解后加入，然后加入乙醇及橙皮酊，搅拌，加

入苯甲酸钠溶解，滤过，滤液添加水至1000ml 即得。

[处方来源]《国家药品标准》(2002年国家药监局版)

[法定标准及标准依据]

【性状】本品为黄色微现绿色荧光的液体；味甜；气芳香。

检查方法：取本品10ml 置比色管中，在自然光下观察，颜色应符合规定；用舌尖舔少许样品，性味应符合规定。

【鉴别】在含量测定项下记录的色谱图中，供试品中烟酰胺、维生素B 6、维生素B 1与维生素B 2峰的保留时间应与对照品峰的保留时间一致。

【检查】

1、相对密度应为1.07～1.10

检验方法：取洁净、干燥并精密称定重量的比重瓶，装满供试品（温度应低于20℃或各品种项下规定的温度）后，插入中心有毛细孔的瓶塞，用滤纸将从塞孔溢出的液体擦干，置20℃(或各品种项下规定的温度)恒温水浴中，放置若干分钟，随着供试液体温度的上升，过多的液体将不断从塞孔溢出，随时用滤纸将瓶塞顶端擦干，待液体不再由塞孔溢出，迅速将比重瓶自水浴中取出，再用滤纸将比重瓶的外面擦净，精密称定，减去比重瓶的重量，求得供试品的重量后，将供试品倾去，洗净比重瓶，装满新沸过的冷水，再照上法测得同一温度时水的重量，按下式计算，即得。

供试品的相对密度= 供试品重量水重量

标准依据：来源于（《中国药典》二000年版二部附录VI A）。

2、PH值应为3.5～5.5

检验方法：（1）标准缓冲液的配制

（2）按仪器的使用操作规程进行操作。

标准依据：来源于（《中国药典》二000年版二部附录VI H）。

3、装量差异取供试品3瓶，开启时注意避免损失，将内容物分别倾入预经标化的干燥量筒（量入型）中，黏稠液体倾出后，将容器倒置15分钟，尽量倾净。读出每个容器内容物的装量（取三位有效数字），并求出其平均装量，应不少于标示量的97%，每个容器的装量不得少于标示装量，如有一个不符合规定，则另取3个复试，应全部符合规定。

W＝W

1

+W

2

+W

3

3

标准依据：来源于（《中国药典》二000年版一部附录XII C）。

4、其他应符合口服溶液剂项下有关的各项规定（《中国药典》二000年版二部附录I O）。

【含量测定】照高效液相色谱法（《中国药典》二000年版二部附录V D）测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-庚烷磺酸钠缓冲液（取0.2g庚烷磺酸钠加水溶解后稀释到500ml，加1.5ml三乙胺，用磷酸调节pH值至2.3）(20:80)为流动相；

流速为每分钟约1ml；检测波长为275nm。理论板数按维生素B

1

峰计算应不低于2000。分离度应符合要求。

对照品溶液的制备取维生素B

1、维生素B

2

、维生素B

6

与烟酰胺对照品适量，

分别精密称定，置同一量瓶中，加枸橼酸缓冲液（取枸橼酸0.15g，加水100ml 使溶解，用1mol/L氢氧化钠溶液调节PH值至4.5）制成每1ml中分别含0.3mg、0.06mg、0.09mg与0.3mg的溶液，即得。

测定法取本品滤过，取续滤液10µl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取对照品溶液同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。

【生物限度检查】按《中国药典》二000年版方法检验，结果应符合以下要求：

杂菌总数：≤100个/ml

霉菌总数：≤100个/ml

大肠杆菌：不得检出

活螨. 不得检出

检验操作方法：

1、前准备

（1）将供试品及所有已灭菌的平皿、锥形瓶、匀浆杯、试管、吸管（1ml、10ml）、量筒、稀释剂等移至无菌室内。每次试验所用物品必须事先计划，准备足够用量，避免操作中出入操作间。编号后将全部外包装（牛皮纸）去掉。

（2）开启无菌室紫外杀菌灯和空气过滤装置，并使其工作不低于30min。

（3）操作人员用肥皂冼手，关闭紫外杀菌灯，进入缓冲间，换工作鞋。再用0.1%苯扎溴铵溶液或其他消毒液洗手或用乙醇棉擦手，穿戴无菌衣、帽、口罩、手套。

（4）操作前先用乙醇棉球擦手，再用碘伏棉球（也可用乙醇棉球）擦拭供

试品瓶、盒、袋等的开口处周围，待干后用灭菌手术镊或剪将供试品启封。

2、试液的制备

（1）液体供试品取供试品10ml，置灭菌锥形瓶中，加入90ml稀释剂，摇匀，作为1：10供试液。

（2）固体、半固体或粘稠供试品称取供品10g，置于匀浆杯或适当灭菌容器中，加入100ml0.9％无菌氯化钠溶液，用匀浆仪（3000~5000r/，2/4min）,振荡器或乳钵研磨等方法分散混匀。

3、供试液的稀释（10倍递增稀释法）

（1）取2～3支灭菌试管，分别加入9ml灭菌稀释剂（此时操作一般为：左手执试管并将塞打开，倾斜，右手执10ml吸管吸量，注意：勿在乙醇灯焰将供试管中菌细胞杀灭）。加完稀释剂后，试管塞应立即塞上。

（2）另取1支1ml灭菌吸管吸1：10均匀供试液1ml，加入装有9ml灭菌稀释剂的试管中混匀，即为1：100供试液。以此类推，根据供试品污染程度，可稀释至1：10、1：100、1：1000等适宜稀释级（至少共3级），每递增1稀释级，必须另挽一支吸管。在作10倍递增稀释时，吸管插入1级稀释液内不低于液面2.5cm，反复吸吹约10次。吸液时，应先吸至高于吸管上部刻度少许，然后提起吸管，贴于试管内壁调整液量至刻度，再沿第2级稀释管的内壁靠近液面（勿接触液面）缓慢地吹出全部供试液（吸管内应无粘附或残留液体），然后将吸管放入消毒缸内。

4、注平皿在进行10倍递增稀释的同时，以刻稀释吸管，吸取各级稀释液各1ml至每个灭菌平皿中（从高稀释级至低稀释级吸液时可用1支吸管），每一稀释级注2～3个平皿（此时，一般为左手执平皿，将盖半开，右手执吸管），注平皿时，将1ml供试液慢慢全部注入平皿中，管内无残留液体，防止反流到吸管尖端部。注平皿时，将1ml供试液慢慢全部注完毕，另2个作霉菌、酵母菌数阴性对照，如另用YPD琼脂测定酵母菌数时，则再增加2个平皿作酵母菌数阴性对照）。

5、倾注培养基将预先配制好的培养基（细菌计数用营养琼脂，霉菌、酵母菌计数一般用玫瑰红钠琼脂）熔化，冷至约45℃时，倾注上述各个平皿约15ml，以顺时针或反时针方向快速旋转平皿混匀，注意，混匀时勿将培养基溅到皿边及皿盖上，置操作台待凝。