临检基础知识讲解：血涂片的制备方法
血涂片制备与染色
血涂片制备与染色一、血涂片制备【器材】清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片(25 mm x75 mm ，厚度为0.8-1.2mm) 。
【操作】血涂片制备方法很多，目前临床实验室普遍采用的是手工推片法，在玻片近端1/3 处，加一滴(约0.05 ml) 充分混匀的血液，握住另一张边缘光滑的推片，以30°- 45°角使血滴沿推片迅速散开，快速、平稳地推动推片至载玻片的另一端。
【附注】1. 血涂片通常呈舌状或楔形，分头、体、尾三部分。
2. 推好的血涂片应在空气中晃动，使其尽快干燥。
天气寒冷或潮湿时，应于37℃恒温箱中保温促干，以免细胞变形缩小。
3. 涂片的厚薄、长度与血滴的大小、推片与载玻片之间的角度、推片时的速度及红细胞比容有关。
一般认为血滴大、角度大、速度快则血膜厚;反之则血膜薄。
红细胞比容高于正常时，血液黏度较高，保持较小的角度，可得满意结果;相反，红细胞比容低于正常时，血液较稀，则应用较大角度、推片速度应较快。
4. 血涂片应在1 h 内染色或在1 h 内用无水甲醇(含水量<3% )固定后染色。
5. 新购置的载破片常带有游离碱质，必须用浓度约1 mol/LHCL浸泡24 h 后，再用清水彻底冲洗，擦干后备用。
用过的载玻片可放人含适量肥皂或其他洗涤剂的清水中煮沸20 min ，洗净，再用清水反复冲洗，蒸馆水最后浸洗，擦干备用。
使用时，切勿用手触及玻片表面。
二、血涂片染色(一)瑞氏( Wright) 染色法【原理】瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应，又有物理吸附作用。
各种细胞由于其所含化学成分不同，对染料的亲合力也不一样，因此，染色后各种细胞呈现出各自的染色特点。
【试剂】1.瑞氏染液(1)瑞氏染料0.1 g(2)甲醇(AR) 60.0 ml 。
瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料美蓝的氧化物(天青)组成。
将瑞氏染料放人清洁干燥研钵里，先加少量甲醇，充分研磨使染料溶解，将己溶解的染料倒人棕色试剂瓶中，未溶解的再加少量甲醇研磨，直至染料完全溶解，甲醇全部用完为止。
血涂片的制备与染色-PPT课件
2）pH值的影响：血细胞多种成分属 于蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所 带电荷随着溶液的pH而定。因此，血细 胞染色对氢离子浓度十分敏感。
染色时常用缓冲液（pH6.4～6.8）来调节
染色时的pH值，以达到满意的染色效果（表111）。
（2）试剂
1）Wright染液： Wright染液是由伊
红和亚甲蓝溶解于甲醇而成。甲醇的作用：
床常用的方法，主要用于观察血细胞形态
及仪器法检测结果异常的复查。
（2）厚血膜涂片法：取新鲜血液1滴于载
玻片的中央，用推片的一角将血滴由内向外旋
转涂布，制成厚薄均匀、直径约1.5cm的圆形 血膜，待自然干燥后，滴加数滴蒸馏水，使红 细胞溶解，脱去血红蛋白，倾去水，血涂片干 燥后即可染色并用显微镜检查。 本方法特别适合检查疟原虫、微丝蚴等。
（2）试剂：染液放置越久，其染色
效果越好。
（3）染色：Giemsa染色法的步骤与方 法见表1-11-2。
3．Wright-Giemsa染色法 Wright-
Giemsa染色法结合了Wright染色法和Giemsa
染色法的优点。在Wright染液配方的基础上，
每1.0g Wright染料添加0.3g Giemsa染料。染
色步骤与Wright染色法相同。
【方法学评价】血涂片染色的方法学评
价见表1-12。
【质量保证】染色过深、过浅与血
涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、 染液浓度、pH密切相关。Wright染色的
质量保证见表1-13。血涂片染色不佳的
原因及纠正措施见表1-14。
谢谢！
2．自动涂片法 目前有许多型号的自
动血液分析仪，配备有血涂片仪和染色仪，
可以按照检验人员的指令执行自动送片、 取血、推片、标记和染色等任务。
临床基础检验学：血涂片制备
30~45°
血涂片的制备：
推片 血液
载玻片
将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚 薄取决于速度和角度：快、大(厚)。 慢、小（薄）
一张满意的血涂片应笔在血涂片的头 部写上姓名和编号
B 123
李 四
血涂片的制备
血涂片质量保证
1、载玻片要求：
洁净： 避免红细胞形态改变 中性 ： 保证适当pH值 无油： 细胞分布均匀
• 染色情况(效果良好，偏酸、偏碱） 结 果 记 录 ：
• 细胞分布情况
Nsg 正
油镜下分类计数：体尾交界处。 Nst 一
分类时应按一定走向，不要重复计数。 L 正
M正
123
E正
李
四
B正
血涂片制备视频
作业：
1、HiCN的实验原理，实验结果，以及实验过程中 的影响因素和质量控制？
2、网织红细胞的检测原理，计数结果，其影响因 素有哪些？如何进行质量控制？
血涂片的制备
原理：
把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片
器材： 载玻片、推玻片、微量吸管、玻棒
30-45 ˚角
推片：挤出第二滴血置于载玻片的一侧
边缘光滑的推玻片，斜置于血滴的前缘，先向 后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开 成线状
两玻片的角度以30-45°为宜，轻轻将双凹 片向前匀速推进，涂成血液薄膜
4、血细胞比容与涂片关系
HCT增高 黏度较高 较小角度慢推 HCT降低 黏度较低 较大角度块推
5、血滴大，角度大，速度快，则血膜厚而短 血滴小，角度小，速度慢，则血膜薄而长
良好血涂片“五要素”
（ 1 ）厚薄适宜 （ 2 ）头体尾分明 （ 3 ）细胞分布均匀 （ 4 ）两侧留有空隙 （ 5 ）血膜边缘整齐
实验报告 血涂片的制备
实验报告血涂片的制备实验报告：血涂片的制备引言：血涂片是一种常见的实验技术，用于观察和分析血液中的各种细胞和细胞形态。
本实验旨在探究血涂片的制备方法和技巧，以及观察和分析血涂片的步骤和注意事项。
材料与方法：1. 血液样本：采集新鲜的静脉血，使用无抗凝剂的试管收集。
2. 血涂片材料：玻璃片、洗净的玻璃滴管、无纺布、无纺布夹子、显微镜玻璃片、显微镜盖玻璃片。
3. 实验仪器：显微镜、离心机。
步骤：1. 准备工作：将玻璃片和显微镜玻璃片用去离子水和无纺布擦拭干净，保证表面无杂质。
2. 血液制备：使用无纺布夹子固定玻璃片，用洗净的玻璃滴管将血液滴在玻璃片上。
滴管与玻璃片的接触角度应适中，以保证血液均匀地分布在玻璃片上。
3. 血涂片制备：用另一块玻璃片将血液滴在玻璃片上的血液涂抹均匀，使血细胞分散均匀并形成单层。
4. 干燥处理：将血涂片放置在通风处晾干，或使用离心机低速离心，去除多余的液体。
5. 固定处理：将干燥的血涂片固定在95%乙醇中，浸泡2-3分钟，以保持细胞形态。
6. 染色处理：将固定的血涂片浸泡在Wright染料溶液中，浸泡时间根据染料浓度和需要的染色效果而定。
7. 清洗处理：用去离子水将染色过的血涂片洗净，去除多余的染料。
8. 干燥处理：将血涂片放置在通风处晾干，确保完全干燥。
9. 封片处理：将干燥的血涂片放在显微镜盖玻璃片上，用透明胶带固定。
结果与讨论：制备完毕的血涂片可用于显微镜观察。
通过血涂片，我们可以观察到血液中的各种细胞，如红细胞、白细胞和血小板，并且可以分析它们的数量、形态和结构。
在制备血涂片的过程中，有几个关键的步骤需要特别注意。
首先，血液的滴取和涂抹要均匀、细致，以避免细胞聚集和不均匀分布。
其次，血涂片在制备过程中要保持湿润，避免细胞干燥和变形。
此外，染色过程中的浸泡时间和染料浓度要控制好，以保证染色效果的准确性和清晰度。
血涂片的制备是一项基础实验技术，广泛应用于医学、生物学和病理学等领域。
血涂片的制备
血涂片的制备
血涂片是一种常见的医学检查方法，它可以通过显微镜观察血液细
胞的形态和数量，从而帮助医生诊断疾病。
下面将从材料准备、制备
步骤和注意事项三个方面介绍血涂片的制备方法。
一、材料准备
制备血涂片需要的材料有：血液样本、玻璃片、无菌棉签、生理盐水、甲醇、乙醇、甲苯、染色剂（如吉姆萨染色液）等。
二、制备步骤
1.取一块干净的玻璃片，用无菌棉签在玻璃片上涂上一层薄薄的血液样本。
2.将玻璃片放在通风处晾干，使血液样本充分干燥。
3.将玻璃片浸泡在生理盐水中，轻轻摇晃，使血液样本充分溶解。
4.将玻璃片取出，用无菌棉签擦拭干净。
5.将玻璃片浸泡在甲醇中，固定细胞形态。
6.将玻璃片取出，用无菌棉签擦拭干净。
7.将玻璃片浸泡在乙醇中，使细胞脱水。
8.将玻璃片取出，用无菌棉签擦拭干净。
9.将玻璃片浸泡在甲苯中，使细胞透明。
10.将玻璃片取出，用无菌棉签擦拭干净。
11.将玻璃片浸泡在染色剂中，染色。
12.将玻璃片取出，用无菌棉签擦拭干净。
13.将玻璃片放在通风处晾干，制备完成。
三、注意事项
1.制备血涂片时要注意无菌操作，避免污染。
2.血液样本要新鲜，避免血液凝固。
3.制备过程中要注意时间控制，避免细胞形态变化。
4.染色剂的选择要根据需要进行，不同染色剂对细胞的染色效果不同。
5.制备完成后要注意保存，避免受潮和污染。
总之，血涂片的制备是一项细致的工作，需要严格按照步骤进行操作，才能得到准确的检查结果。
希望本文能对大家有所帮助。
血涂片的制备
● 常见血涂片质量不佳的原因:
● 2.厚血膜涂片法
● 取新鲜血液1滴于载玻片的中央，用推片的一角将血滴由内向外旋转涂布，制成厚薄均匀、直径约 1.5cm的圆形血膜，待自然干燥后，滴加数滴蒸馏水，使红细胞溶解，脱去血红蛋白，倾去水， 血涂片干燥后即可染色并用显微镜检查。
● 本方法特别适合检查疟原虫、微丝蚴等。
血涂片的制备
●(一)载玻片的清洁●(二)血涂片的制作
● (一) 载玻片的清洁
● 1.新玻片 1mol/L HCI泡24小时→水洗→干燥。
● 2.旧玻片 肥皂水或其他合成洗涤剂水中煮沸20分钟→ 热水洗→自来水洗→干燥。(→95%乙醇 泡1小时→蒸馏水洗→干后备用)。
● 血涂片的制作 ● 1.薄血膜法
● 方法: ● ● ● ● ●
(1) 取血滴。 (2)散开血滴。 (3) 推片。 (4)干燥。
● 取血液一滴，置于载玻片一端.以边缘平滑的推片(推片两端应平整光滑，比载玻片稍窄或磨去两 角)的一端，放在血滴前方，逐渐后移接触血滴，血液立即沿推片散开。
● 血膜的影响因素: ● (1)血滴大小、 ● (2)推片与载玻片之间的角度、 ● (3)推片时的速度有关。 ● 血滴愈大、角度愈大、推片时速度愈快，则血膜越厚;反之血膜越薄。
血涂片制作与染色
血涂片制作与染色1.血涂片的制备血涂片的制备需要用到标本采集工具如无菌化的注射器、针头、试管、硅化玻璃片以及一些实验室试剂如无菌生理盐水、巴氏溶液和电解溶液等。
具体步骤如下：（1）将患者指尖的表面清洁卫生。
（2）选择一个适合的静脉穿刺点，通常是患者的中指或无名指。
（3）用酒精棉球清洁穿刺点，使其干燥。
（4）将无菌化的注射器连接到无菌生理盐水的瓶口上，并抽取一定量的生理盐水。
（5）将针头插入穿刺点后，将生理盐水匀速注射入患者的静脉内。
（6）在生理盐水滴入试管的同时，用眼微观检查，如果有血液进入注射器和管道内，即可采集。
宜用自来水洗净试管外表面，先不带盖座放倾空液。
（7）用试管夹夹住注射针，将针头推入试管内，然后轻轻射入试管底部液面下，同时向上抽手，保持抽液缓慢，可避免气泡产生。
（8）将采集到的血液缓缓带走，同时注入试管内，让其与100ml巴氏溶液进行搅拌。
（9）将混合液倾入瓷漏斗中，从中取出干燥了的血细胞。
2.血涂片的染色血涂片染色可使用湿涂片法或干涂片法，其中湿涂片法应用更广泛。
下文将以湿涂片法为例进行介绍。
（1）取一根硅化玻璃片，用纸巾或棉球擦拭干净。
（2）用血涂片染色钳将准备好的血涂片床放在玻璃片上。
（3）将一滴适量的Wright液倒在血涂片的中段。
Wright液包含了染色剂和辅助剂，其中主要成分是吡啶基甲重氮盐和三氧二氮菲盐。
（4）用另一根玻璃片的尾部将液滴均匀地扩开，并迅速在血涂片上来回涂抹，在染液与血涂片上充分接触并混合。
（5）保持血涂片在室温下静置5-10分钟，以促进染色反应的进行。
（6）用蒸馏水冲洗玻璃片上的染料，并将其晾干。
3.血涂片的观察与分析观察血涂片需用光学显微镜，常规放大倍数为1000倍。
观察血涂片时，应注意血细胞的形态、大小、核形态、细胞质染色情况及相关细胞间的比例等。
根据各种细胞的数量和比例，可以初步评估出是否存在异常细胞，及其可能的病理性质，如感染、贫血等。
总结：血涂片制作与染色是血液检查中重要的步骤之一，它能够帮助医生判断病情，制定治疗方案。
血涂片制作
• 嗜中性粒细胞 是白细胞中较多的一种，约占白细胞总数5070%。体积比红细胞大，主要的特征是胞质中的特殊颗粒细小， 分布均匀，着淡紫红色。胞核着深紫红色，一般分3—5叶，叶 间以染色质丝相连。核分叶的多少与该细胞年龄有关，如核为 杆状，则为嗜中性粒细胞的幼稚型。
• 嗜酸性粒细胞 比中性粒细胞略大，数量少，约占7%以下。核 常分两叶，着紫蓝色。主要特点是胞质内充满粗大、圆形的颗 粒，色鲜红或桔红。
• 单核细胞 数量少，约占2%-8%，是细胞中体积最大的一种， 胞核呈肾形、马蹄形，常在细胞一侧，着色比淋巴细胞浅。
• 血小板 为形状不规则的细胞小体，其周围部分为浅蓝色，中 央有细小的紫色颗粒，常聚集成群，分布于红细胞之间。高倍 镜下一般只能看到成堆的紫色颗粒，在油镜下才能看到颗粒周 围的浅色胞质部分。
普通生物学——
实验六 血涂片的制作和 血细胞的观察
本文档后面有精心整理的常用PPT编辑图标，以提高工作效率
实验目的
• 掌握血涂片的制作，观察红血球的形态及 在不同环境下的反应。来自材料和用品• 材料
– 人血或鱼血
• 主要用品
– 显微镜 酒精 棉花 5﹪ NaCl 0.9% NaCl 盖玻片 蒸馏水 载玻片
• 嗜碱性粒细胞 数量很少，约占1%以下。在一般血涂片上不易 找到，体积比上述2种白细胞稍小。胞质中分散着许多大小不一 的深紫蓝色颗粒。胞核形状不定,圆形或分叶，也染成紫色，但 染色略浅，一般都被颗粒遮盖，形状不清。
• 淋巴细胞 数量较多，约占20%-40%，可见中、小型，淋巴细 胞。其中小淋巴细胞最多,略大于红细胞。核大而圆,几乎占据 整个细胞，染成深蓝紫色。胞质极少，仅在核的一侧出现一线 状天蓝色或淡蓝色的胞质。中淋巴细胞比红细胞大，胞质较小 淋巴细胞的稍多，着色较浅。核圆形或卵圆形，位于细胞中部， 也染成深蓝紫色。
血涂片制备方法(一)
血涂片制备方法(一)血涂片制备概述在医学领域中，血涂片制备是一种常见的实验技术，用于观察血液中细胞的形态和结构，以辅助疾病的诊断与治疗。
本文将介绍血涂片制备的各种方法，包括涂片准备、标本采集和染色技术等。
涂片准备1.消毒工具：在制备涂片之前，准备消毒液（如70%乙醇或碘酒）、棉花球和医用手套。
确保操作环境和仪器表面清洁无菌。
2.采集血液：选择合适的采集器具（如针头、注射器）消毒。
采用无菌技术取血，往常采取放血法，但可采用烏斯夫斯基移液管利用负压的方法来采用更少的血液，适应于孩童，有危险性患者的使用。
3.涂片制备：使用无菌涂片刷或平片，用一下方法制备涂片：–手背法：用棉球或纱布擦拭患者手背部位，等待干燥，然后轻轻划开皮肤，等待血液自然出现，迅速在涂片上涂抹一层血液。
–指尖法：用棉球或纱布擦拭患者指尖部位，等待干燥，然后用无菌针头将患者指尖刺破，等待血液自然出现，迅速在涂片上涂抹一层血液。
标本采集1.血液收集器：使用采血盒、染片管、小瓶等器具，确保标本的完整性和安全性。
2.血液标本处理：–静脉全血：将血液收集到采血盒中，以避免凝固，然后轻轻倾倒和摇晃，以保持混合状态。
–静脉血清：将血液收集到染片管中，等待血液凝固，然后使用离心机将血液分离为血清和血细胞。
染色技术1.Wright-Giemsa染色法：这是制备血涂片的常用染色法，可显示出细胞的细节和染色质的颗粒分布。
具体步骤包括：–将涂片浸入Wright染料溶液中，浸泡2-5分钟。
–用蒸馏水冲洗涂片，直到冲洗液变清。
–将涂片浸入Giemsa染料溶液中，浸泡10-20分钟。
–最后用蒸馏水冲洗涂片，直到冲洗液变清。
2.Giemsa染色法：这是另一种常用的染色法，适用于观察红细胞、白细胞和寄生虫等。
–将涂片浸入Giemsa染料溶液中，浸泡10-30分钟。
–用蒸馏水冲洗涂片，直到冲洗液变清。
结果分析通过观察血涂片下显微镜下的细胞形态和结构，可以识别和计数不同类型的血细胞。
血涂片制备的操作方法
血涂片制备的操作方法血涂片制备是一种用于检查血液细胞形态和计数的常见实验方法。
以下是血涂片制备的详细操作方法：1. 实验前准备：- 准备好所需的实验器材和试剂，包括玻璃刮片、镊子、培养皿、荧光显微镜片、血液采集管、无菌生理盐水、硝酸盐涂片、形态涂片、涂片染色试剂（Wright 染色液）等。
- 仔细阅读实验操作方法，并进行必要的安全措施。
2. 血液采集：- 选择一个合适的采集部位，一般为患者的指尖或耳垂侧面。
- 用无菌棉球或无菌纱布清洁采集部位，消毒使用无菌棉球沾取酒精擦拭。
- 使用无菌注射器或针头，通过轻轻按压患者的采集部位，采集足够的血液样品。
3. 血涂片制备：- 先将玻璃刮片清洗干净，并在一侧的一个角落上写上标签，以示采集来源。
- 取一滴血液样品，将其滴在玻璃刮片的一端，并迅速将另一张刮片斜放在接触点上。
- 刮片形成一个小角度，然后将两张刮片迅速向前移动，使血液样品均匀涂开。
- 在制备血涂片的同时，要注意控制制片速度和角度，以保证血液样品的均匀和适当稀释。
4. 干燥与固定：- 制片完成后，应将其垂直放置在一个干净、无尘的地方，以允许刮片的自然干燥。
在炎热的季节或高湿度的环境中，可以使用加温脱水槽，将温度设定在37-40摄氏度，以加速干燥过程。
- 干燥后，将血涂片固定，可使用60-70%乙醇或其他合适的固定液，将刮片浸泡在固定液中1-2分钟，然后取出并晾干。
5. 涂片染色：- 取出固定的血涂片，逐一浸泡在Wright染色液中，浸泡时间一般为3-5分钟，可根据需要调整。
- 取出血涂片，用流动自来水轻轻冲洗，将多余的染色剂冲洗掉，直至冲洗水流变为清澈。
- 将血涂片倒挂在流动自来水下自然干燥，避免用纸巾擦拭，以免造成细胞形态的破坏。
6. 显微镜检查：- 取一滴橄榄油滴于血涂片中心，并将其覆盖与荧光显微镜片。
- 将显微镜调至合适的倍数，放入血涂片下进行观察和分析。
- 观察细胞形态，计算细胞数目，评估红细胞形态、白细胞分类及数量、血小板计数等。
血涂片的制备
血涂片的制备血涂片是一种常见的实验室技术，用于观察和分析血液中的细胞形态和数量。
它是一种简单而有效的方法，广泛应用于临床诊断、疾病监测和科学研究等领域。
下面将详细介绍血涂片的制备过程。
准备好所需的材料和设备，包括血液样本、玻片、洗涤液、染色剂和显微镜。
确保所有设备和材料的清洁和无菌。
接着，取一滴新鲜的全血样本，通常是从患者的指尖或静脉采集。
使用无菌的针头或采血针，在无菌条件下采集血液样本，并将其滴在玻片的一个端面上。
然后，迅速将另一片玻片倾斜放置在滴在玻片上的血液样本上。
保持两片玻片之间的角度，使血液在两片玻片之间均匀分布。
接下来，用轻而均匀的压力将两片玻片滑动开，使血液在玻片上均匀分布。
这个过程需要快速进行，以避免血液凝固。
然后，将制备好的血涂片立即在通风处晾干。
这个过程一般需要几分钟时间，取决于环境的温度和湿度。
血涂片晾干后，可以进行染色。
常用的染色剂有Wright染料和Giemsa染料。
将血涂片浸入染色剂中，按照染色剂的说明进行染色，一般需要数分钟至数十分钟。
染色完成后，用洗涤液轻轻冲洗血涂片，以去除多余的染色剂。
然后，用纸巾轻轻擦干血涂片，并将其放在通风处晾干。
使用显微镜观察血涂片。
将血涂片放在显微镜载物台上，调整倍率和焦距，以获得清晰的图像。
通过观察血涂片中的细胞形态和数量，可以进行疾病诊断、治疗监测或科学研究。
总结起来，血涂片的制备包括采集血液样本、制备涂片、晾干、染色和观察等步骤。
正确的制备过程和技术操作对于获得准确的结果至关重要。
血涂片的制备是一项简单但非常重要的实验室技术，它为疾病的诊断和治疗提供了有力的支持。
血涂片的制备-干货分享
1
实验原理 • 涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本，染色后可
对血液中各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、细胞大小测量等工作针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片 、
8
再取另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿 玻片端展开成线状。
9
两玻片的角度以30~45°为宜，轻轻将双凹片向前匀速推进，即涂成 血液薄膜。
30~45°
10
染色 • 待涂片在空气中完全干燥后，滴加数
滴Wright’s染液盖满血膜为止，染色 1～3 min。然后滴加等量蒸馏水，使 其与染液均匀混合，静置10～15 min。 用蒸馏水冲去染液，吸水纸吸干，镜 检。
台测微尺的刻度； 3.移动镜台测微尺,同时转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺平行靠近,
并将两尺的“0”点刻度线或某刻度线对齐.然后从左向右查看两尺刻度 线另一重合处,记录重合线间目镜测微尺与镜台测微尺的格数.按下式 计算目镜测微尺每格等于多少微米。
21
目镜测微尺的标定
n×a X=
M
X:目镜测微尺每格的实际长度 a:镜台测微尺每格的实际长度 n:镜台测微尺的刻度数。 M:目镜测微尺的刻度数。
18
共分为10格 总长1mm
镜台测微尺
每个大格又可分为10个小格， 每小格的实际长度为0.01mm
总长0.1mm
19
目镜测微尺
可以通过旋转旋钮移动 目镜测微尺中交叉线的
位置
20
使用方法
1.取下目镜,将目镜测微尺的刻度面向下放入目镜中,旋上透镜； 2.将镜台测微尺盖片面朝上放在载物台上,用低倍镜观察,调节焦距看清镜
检验技师检验资料：血涂片制备与染色
检验技师检验资料：血涂片制备与染色检验技师检验资料：血涂片制备与染色血涂片是通过特定的方法将血液按一定方向均匀涂开的过程，微观上使细胞是由球形变为平面形或近平面形平铺在载片上。
血涂片的显微镜检查是血液细胞形态学检查的基本步骤，特别是对于各种血液病的诊断和鉴别诊断，具有重要价值。
血涂片制备是否合格、染色的好坏直接关系到检验结果的质量。
(一)血涂片制备1.载片的准备新载片常带有游离碱质，须用浓度为lmol/L的HCl浸泡24h，再用清水彻底冲洗，干燥后备用。
旧载片要用含洗涤剂的清水中煮沸20min，洗掉血膜，再用清水反复冲洗，最后用0.95L/L乙醇浸泡1h，干燥备用。
使用载片时，不要用手触及片表面，保持片清洁、干燥、中性、无油腻。
2.血涂片制作方法取血液标本一滴置载片的一端，以边缘平滑的推片一端，从血滴前沿方向接触血液，使血液沿推片散开，推片与载片保持30～45○夹角，平稳地向前推动，血液即在载片上形成薄层血膜。
涂片的厚薄与血滴大小、推片与载片之间的角度、推片时的速度及血细胞比容有关。
血滴大、角度大、速度快则血膜越厚;反之则血膜越薄。
一张良好的血涂片，要求厚薄适宜，头体尾明显，细胞分布均匀，血膜边缘整齐并留有的空隙。
(二)血涂片染色染色的目的是使细胞的主要结构，如细胞膜、细胞质、细胞核等染上不同的`颜色，以便于镜下观察识别。
血涂片染色包括两个过程：固定和染色。
固定是将细胞蛋白质和多糖等成分迅速交联凝固，以保持细胞原有形态结构不发生变化。
常用的染色方法有瑞特染色法(Wright)、姬姆萨染色法(Giemsa)等。
1.瑞特(Wright)染色法本法的特点是将固定和染色合并在一起进行，手续简便，染色时间短，对白细胞特异性颗粒着色较好，但对核的着色略差。
2.姬姆萨(Giemsa)染色法姬姆萨染料由天青和酸性染料伊红组成的复合染料。
染色原理、缓冲液与瑞特染色法大致相同。
本法对细胞核结构和寄生虫着色较好，结构显示更为清晰，但细胞质和颗粒着色较差。
二、血涂片制备
•
图1-8
涂制血片的方法
推好的血片
2．血片的染色 血片的染色有多种方法，但常用瑞特氏染色法。 瑞特氏染色法： 先用玻璃铅笔在血膜两端各划一线，以防染液外 溢，将血片平放于水平支架上；滴加瑞氏染液于 血片上，直至将血膜盖满为止；待染色1~2min后， 再加等量磷酸盐缓冲液，并用洗耳球轻轻吹动， 使染色液与缓冲液混合均匀，再染色3~5min；最 后用蒸馏水冲洗血片，待自然干燥或用吸水纸吸 干后镜检。所得血片呈樱红色者为佳。
二、血涂片的制备
一般分血液涂片制作、染色、镜检分类计数三步进行。 1．血片的制作 选取一边缘光滑平整的载玻片作推片，用左手的拇指 和中指夹持一洁净载玻片，取被检血液一滴（最好是新鲜 的未加抗凝剂的血液），置于其右端，右手持推片置于血 滴前方，并轻轻向后移动推片，使与血液接触，待血液扩 散开后，再以30°～40°角度向前均速推进涂抺，即形成 一血膜，迅速自然风干（图1-8）。 涂片时，血滴越大，角度（两玻片之间的锐角）越大， 推片速度越快，则血膜越厚；反之则血膜越薄。血液分布 应均匀，厚度适当，对光观察呈霓虹色，血膜位于玻片中 央，两端留有适当空隙，以便注明动物类别、编号及日期， 即可染色。反之，重行制作，直至合格后，再行染色。
染色
பைடு நூலகம்
冲 洗
临床经验基础血涂片知识点
临床经验基础血涂片知识点
血涂片是一种观察血液细胞的方法，制备厚薄适宜、分布均匀、染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。
以下是临床经验基础血涂片知识点：
1. 瑞氏染料：由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料，溶于甲醇后重新解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。
2. 血涂片的制作：取末捎血一滴置于玻片的一端，左手持载玻片，右手以边缘平滑的推片的一端从血滴前方后移接触血滴，血滴即沿推片散开。
然后保持30-45度的夹角稳地向前移动，载片上保留下一薄层血膜。
3. 血细胞观察：通过显微镜观察血涂片中的红细胞、白细胞和血小板等血细胞的数量和形态，可以判断血液是否正常。
例如，观察白细胞的数量和形态可以判断是否存在感染；观察血小板数量和形态可以判断是否存在血小板减少或增多等异常情况。
4. 血型鉴定：通过观察血涂片中的红细胞上的抗原，可以确定ABO血型。
5. 细胞染色：为了更好地观察细胞内部结构、识别各种细胞及其异常变化，需要对血涂片进行染色。
常用瑞特染色法。
6. 仪器设备：Motic光学显微镜是常用的观察血涂片的仪器设备。
以上信息仅供参考，如果需要获取更准确的信息，建议咨询医生或相关专业人士。
血涂片的制备
血涂片的制备
血涂片是一种常用的医学检查方法，它可以用于诊断各种疾病和病理状态。
制备血涂片是血液学和临床检验中最基本的技术之一。
下面将介绍血涂片的制备步骤和注意事项。
1.采集血液样本：血涂片的制备需要采集一定量的新鲜血液样本。
通常使用静脉采血或割破手指采血的方法。
2.涂片处理：将采集到的血液样本滴在干净无菌玻璃片上，并用另一个无菌玻璃片将血液样本压扁，使其均匀地覆盖整个玻璃片。
3.烘干和固定：将血涂片在通风干燥处晾干，或者使用电热板加热干燥，直到血液完全干燥。
然后在草酸钠溶液或其他固定剂中固定片子。
4.染色：将固定后的血涂片浸泡在适当的染液中，如吉姆萨染液。
一般染色时间为5-10分钟，然后用水洗净。
5.干燥和观察：将染色后的血涂片在通风干燥处晾干，然后使用显微镜观察。
通常可以观察到血细胞、白细胞、红细胞和血小板等。
注意事项：
1.严格遵守无菌操作规范，防止污染。
2.血液样本需新鲜，避免凝块。
3.制备血涂片的过程要快，以避免血液样本干燥和变形。
4.固定血涂片的时间和染色时间要控制好，否则会影响结果。
总之，制备血涂片是一项基本的、重要的技术，需要严格按照操作规范进行操作，以确保检测结果的准确性和可靠性。
血涂片的制作流程和注意事项
血涂片的制作流程和注意事项
嘿呀！今天咱们来聊聊血涂片的制作流程和注意事项呢！
首先，咱们说说制作流程哇！第一步，准备好干净的载玻片和推片呀！这可重要得很呢！第二步，用微量吸管吸取血液，轻轻滴在载玻片的一端，哎呀呀，可别滴多了！第三步，拿着推片，让它与载玻片成30 到45 度的角，然后从血滴的前沿开始，平稳地向前推，哇，这样血涂片的雏形就有啦！第四步，把做好的血涂片放在空气中自然干燥，记住，千万别用嘴去吹或者用火烤呀！
接下来，讲讲注意事项啦！第一，采血的时候要保证血液的新鲜和干净呢，要是血不干净，那可就麻烦啦！第二，滴血液的时候，量一定要控制好，太多或者太少都会影响涂片的质量哟！第三，推片的速度和力度要均匀，不然涂片会厚薄不均，这可不行呀！第四，干燥的时候一定要自然干燥，不能心急呀！第五，制作过程中要保持操作环境的清洁，不能有灰尘啥的捣乱呢！第六，推片使用完要及时清洗和消毒，为下一次使用做好准备哦！第七，操作人员要注意自身的安全，别不小心弄伤自己啦！第八，制作好的血涂片要妥善保存，避免损坏和污染呀！
哎呀呀，这血涂片的制作流程和注意事项是不是还挺多的？不过只要咱们认真仔细，按照步骤来，肯定能做出满意的血涂片呢！哇，大家都记住了吗？。
第二节血涂片制备与染色
（4）染色效果
正常情况下，经瑞特染色后血膜外观呈淡紫红色。
显微镜下：红细胞呈粉红色圆盘状；白细胞的细胞核染紫红色，核染色质结构清 楚，胞质中颗粒清楚，并显示出各种细胞特有的色；血小板染成紫红色。
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2．吉姆萨染色法
（1）原理：吉姆萨染色原理与瑞特染色相同，但提高了噻嗪类染料亚甲蓝的 质量，加强了天青的作用。与瑞特染色法比较，该法对细胞核着色效果较好 ，但对中性颗粒着色较差。 （2）试剂：由吉姆萨染料、甲醇和甘油组成。
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（三）质量保证
1．玻片 载玻片需清洁、干燥、中性、无油腻，勿用手触及玻片表面。 2．标本 抗凝血需在 4小时内制备血涂片，否则细胞形态会发生改变。
3．制片 ①制备厚薄适宜的血涂片： 厚：血滴大、角度大、速度快—— 大、大、快 薄：血滴小、角度小、速度慢—— 小、小、慢
②制备血膜分布均匀的血片：
推片时使推片与载玻片成 30°～45°角度，让推片接触血滴， 使血液沿推片下缘散开，再向血滴前方向匀速移动推片。
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合格的血涂片：厚薄适宜，头、体、尾分明，两端和两侧留有空隙，
血膜至少长 30~50mm，两侧空隙 2~3mm。
如果用力不均匀、载片不清洁可造成血涂片分布不均
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（2）仪器推片法：目前有多种型号的血细胞分析仪或 血细胞形态分析仪配有血涂片仪和染色仪，可以根据需 要进行自动送片、取血、推片、标记和染色等操作。
2．厚血膜推片法
采血→取 1 小滴血液于载玻片中央→以推片的一角将血滴由
内向外旋转涂布，制成直径约 1.5cm 的圆形厚血膜，干燥 →滴加蒸馏水，溶解红细胞，脱去血红蛋白→倾去水， 干燥。