分子生物学期末考试名词解释

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核小体(Nucleosome):是染色体的基本结构单位,由DNA和组蛋白构成,4种组蛋白H2A、H2B、H3和H4各两分子形成组蛋白八聚体,约146bp的DNA以左手方式环绕八聚体1.8圈即形成了核小体核心,再与一分子的H1松散结合,形成染色小体,这时核小体颗粒间由连接DNA 相连,即形成大小约200bp的核小体。

端粒(Telomeres):是形成真核生物染色体线性DNA分子末端的特化子的序列,由数以百计的短重复序列构成,这些序列是端粒酶以独立于正常DNA复制的机制合成的。CPG甲基化(CPG island methylation):是指在哺乳动物细胞中,一种可能传递信号使得表达基因位点出的染色体保持适当的包装水平的重要化学修饰是序列5’—CG—3’中对细胞嘧啶C—5的甲基化,称为CPG甲基化。

异染色质(heterochromatin):是间期染色体内保持高度浓缩的部分,但其紧密程度比中期是要差一些,在电子显微镜下能观察到细胞核四周较浓的区域,即异染色质区可能是由紧密压缩的30nm纤维构成,而且异染色质没有转录活性。

非编码DNA(Nocoding DNA):是指不包括制造蛋白质的指令、或者是只能制造无转译能力的RNA的DNA序列。卫星DNA(Satellite DNA):是指真核生物基因组中高度重复DNA由一些2bp至20—30bp的极短序列,以数千个串联方式排列,这种排列则称为卫星DNA.。

多顺反子:是指在原核细胞中,通常是几种不同的mRNA 连在一起,相互之间一般由短的不编码蛋白质的间隔序列所隔开,这种mRNA叫做多顺反子mRNA,这样的一条mRNA链含有指导合成N种蛋白质的信息,一个mRNA 分子编码多个肽键称为多顺反子。

复制子(Replicon):是DNA复制是从一个DNA复制起点开始,最终由这个起点起始的复制所完成的片段,DNA中发生复制的独立单位称为复制子。

复制起点(origins):指复制子控制启动复制的元件。

缺刻平移(nick translation):DNA聚合酶Ⅰ的5’—3’的聚合酶活性和5’—3’的外切酶活性协同作用,可以使DNA一条链上的切口从5’—3’方向移动,这种反应叫做缺刻平移。RNA引发(RNA Initiation):DNA复制过程中,由DNA 引物酶合成一段短的RNA引物,与DNA母联结合,再由聚合酶从引物处延长子链DNA的现象。

R点(限制点):细胞周期中种植细胞周期进程的关键点。R点是G1期的检验点,调控细胞由G1期进入S期DNA 复制的点,主要依靠对E2F转录因子的激活。

沉默突变(Silent mutation):发生在DNA的非编码区,非调节区或密码子的第三个碱基的一种点突变。

错义突变(Missense mutation):改变基因产物的一个氨基酸的点突变,其效应可以是无作用的,也可以是致死的。取决于被影响的氨基酸。

无义突变(Nonsense mutation):点突变中形成新的终止密码子的突变,结果会产生截短了的蛋白质产物。

移码突变(Frame shift mutations):基因突变中,插入或缺失涉及一个或多个碱基的增加或丢失引起的突变。直接诱变:起因于DNA中存在稳定的,具有改变了的一

配对特性的未修复的碱基。DNA的复制使得这种损伤成为

永久性,可以遗传的突变,典型的例子是T类似物引起的

突变。

间接诱变:绝大部分由物理和化学诱导剂导致的损伤,在

转移损伤DNA合成中,为保证染色体的完整性在损伤对

应位点插入错误的碱基而引起的突变。

转移损伤DNA合成(Transfer of damaged DNA

synthesis):DNA合成时,不考虑原始序列,在损伤对应

位点插入碱基以保持DNA复制链的完整性。

Holliday结构:在同源重组过程中,核酸酶和RecBco复合

体作用在一对同源染色体的一对非姐妹染色单体产生chi

特定序列切口。含有5’端切口的单链DNA被RecA包裹形

成RecA—ssDNA细丝。这些细丝相互交换寻找相对的

DNA双螺旋上的相应序列,之后切口被封好形成的四分支

结构即是Holliday。

DNA克隆(DNA Cloning):在体外将外源基因DAN插入

载体分子构成重组DNA分子,然后将重组分子导入原先

没有这类分子的宿主细胞中并能够稳定的繁殖的过程。

亚克隆(Subcloning):将克隆DNA的片段由一个载体转

移到另一个载体的过程称为亚克隆。可用来对较大克隆片

段上的较短区段进行仔细研究或是将基因转移到浓在特定

物种中表达的另一载体上。

粘性末端(cohesive ends):当一种限制性内切酶在一个特

异性的剪辑序列处切断DAN时,可在切口处留下几个未

配对的核苷酸片段,这些片段可以通过重叠的末端形成氢

键相连,或者分子内反应环化,因此称其具有粘性粘性末

端。

MCS(multiple cloning site):即多克隆位点,具有多个限

制酶酶切位点的一段DNA序列,能为外源基因DNA提供

多种插入位置或方案。

YAC(Yeast Artificial Chromosome ):即含有某种生物的

一段基因的酵母LZ染色体,主要用来构建大片段的DNA

文库,尤其用来构建高等真核生物的基因组文库。

BYC:一种以细菌内F质体为基础构建而形成的载体即细

菌人工染色体载体,主要用于构建大片段DNA文库,拷

贝数据、稳定、容易转化。

蓝白斑筛选(Blue white screening):基因工程中常用一种

重组菌筛选方法,其原理是宿主菌种的基因与质粒中的基

因的ɑ—互补,使其产物B—半乳糖苷酶使无色第五遍蓝

色,而重组质粒由于基因插入失活不能与宿主菌基因形成ɑ

—互补,不能形成蓝色菌斑显白色的达到区分重组与否。

穿梭质粒(Shuttle vectors):一类人工构建的具有两4种

不同复制起点和选择标记,因而可以在两种不同内群宿主

中存活和复制的质粒载体,利于对质粒生物学操作和大量

制备。

基因文库(Gene library):是来自某种生物的不同DNA

的总集,这些序列都已经被克隆进载体。

RT—PCR(反转录PCR):先将RNA反转录成cDNA,然后

以cDNA为模板进行PCR扩增。

Southern blotting:是进行基因组DNA特定序列定位

的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内

切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链

DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者

紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,

用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含

量。步骤包括:准备DNA;打断成片段;电泳;碱变性;

转膜和固定;探针标记;杂交(温育);检测与表达(信

号检测)

Northern blotting:Northern blot 首先通过电泳的方法

将不同的RNA分子依据其分子量大小加以区分,然后通过

与特定基因互补配对的探针杂交来检测目的片段。

“Northern blot”这一术语实际指的是RNA分子从胶上转

移到膜上的过程,当然它现在通指整个实验的过程。步骤

包括:准备RNA;电泳;转膜和固定;探针标记;杂交(温

育);检测与表达(信号检测)

EMSA(electrophoretic mobility shift assay):电泳

迁移率变动分析。利用电泳迁移率的变化来进行分析的技

术。如特定的DNA序列与特定的蛋白质因子结合后,在非

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳时可以观察到DNA迁移变慢

操纵子(operon):原核生物基因表达的单元,它包括被协

同调节的基因(结构基因)和被调节基因的产物所识别的调

控元件。

乳糖操纵子(LAC operon):乳糖操控子是大肠杆菌中控

制β半乳糖苷酶诱导合成的操纵子。包括调控元件P(启动

子)和O(操纵基因),以及结构基因lacZ(编码半乳糖苷酶)、

lacY(编码通透酶)和lacA(编码硫代半乳糖苷转乙酰基酶)。

色氨酸操纵子(TRP operon):色氨酸操纵子包括色氨酸

合成途径中相关的5个结构基因trpE—A。该操纵子编码

一个转录单元,即色氨酸启动子Ptrp和操纵基因位点Otrp

向下游转录出7kb的转录物。向许多涉及氨基酸生物合成

的操纵子一样,色氨酸操纵子也具有当细胞内缺乏生物合

成途径的产物色氨酸时可使这些基因协同表达的进化系

统。至于乳糖操纵子,其转录单元的RNA产物非常的不稳

定,使细菌能够对色氨酸的需求变化作出快速反应。

σ因子(σfactor):双重作用蛋白,负责识别启动子共有

序列并且只为转录起始所需,许多细菌产生不同系列的σ

因子。

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