检验项目标准操作规程-HCV Ab
丙型肝炎病毒核酸定量检测标准作业指导书
丙型肝炎病毒核酸定量检测标准作业指导书1.目的采用PCR技术、实时荧光探针技术，用于临床血清或血浆标本中的丙型肝炎病毒核酸的定性检测，适用于丙型肝炎病毒感染的辅助诊断。
2.范围适用于丙型肝炎病毒核酸定量检测。
3. 职责操作人员：负责标本制备检测、仪器操作、报告发送。
专业组组长：负责本组耗材的请购，监督本组标本检测、仪器操作、报告发送、质控管理等各方面工作。
实验室主任：负责监督和指导实验室各方面工作。
4. 原理采用荧光PCR技术，以丙型肝炎病毒基因编码区的高度保守区为靶区域，设计特异性引物及荧光探针，进行一步法RT-PCR扩增，并检测荧光信号，仪器软件系统自动绘制出实时扩增曲线，根据阈循环值(CT)实现对未知样本的检测。
另外，本试剂盒带有内标物质，用于对核酸提取的整个过程进行监控，减少假阴性结果的出现。
5. 样本要求适用标本类型：血清标本采集用一次性无菌注射器抽取受检者静脉血 2 ml，注入无菌的真空采血管中（未加抗凝剂），室温（22-25℃）放置30-60min血标本可自发完全凝集析出血清，或直接使用水平离心机，1500rpm离心5min；吸取上层血清，转移至灭菌离心管。
标本保存和运送所采集的标本可立即用于测试或长期保存于-70℃，也可保存于-20℃待测，保存期为3个月，标本应避免反复冻融。
标本运送采用干冰（或者冰袋）保持低温，运输时间不应超过4天。
拒收标本：拒绝重度溶血样本、肝素抗凝的血浆。
6. 仪器和试剂设备AB7500核酸扩增仪、恒温金属浴、生物安全柜、低温离心机等。
试剂生产厂家：中山大学达安基因股份有限公司产品标准批号：YZB/国 7271-2013最低检出量：最低检出量为500 IU/ml试剂各组分见表1：表1 试剂盒组分表7. 操作步骤试剂准备（试剂储存和准备区）进入试剂准备区，打开通风设备，按照消毒清洁程序擦拭实验台面，并在检验流程记录表上做相应记录。
PCR反应液配制取出HCV反应液A、HCV反应液AB，室温溶化后振荡混匀，8000rpm离心数秒后使用。
丙型肝炎病毒核酸HCV-RNA扩增荧光定量检测标准操作sop
毒核酸定量的检测。
2.适用范围：2.1适用于进行丙肝病毒核酸定量检测的检验人员。
2.2适合仪器：LightCycler480型核酸扩增荧光检测仪2.3方法原理：采用PCR方法结合荧光探针的扩增技术2.4样品要求：血清3.职责：实验操作人员应严格按操作规程进行实验。
4.试剂来源：深圳凯杰公司HCV RNA荧光PCR检测试剂盒。
5.质控物：阴性、阳性对照及阳性参控品系列均来源于试剂盒6.标准操作：6.1 试剂准备（在试剂准备区操作）6.1.1将试剂盒及其它所需试剂置室温解冻，完全融解后混匀。
6.1.2根据当次实验标本量，取出相应试剂（1管=28ul反应液+2ul Enzyme Mix）总的需求量于一管中（其余随即放回原温度保存），如所需要的管数为n (n=标本数+1管阴性对照+1管阳性对照+1管临界阳性对照+4管阳性参控品)（定性检测无需做阳性参控品），取PCR反应管转移至样本制备区。
6.2.实验前准备步骤：6.2.1所需试剂置室温平衡，裂解液和洗液1如出絮状沉淀，37℃温浴至沉淀完全消失。
6.2.2在洗液1中加入16ml无水乙醇，做好标记,室温保存,使用前摇匀。
6.2.3在洗液2中加入23ml无水乙醇，做好标记,室温保存,使用前摇匀。
6.2.4将310ul的洗脱液加入含有310ug的Carrier RNA中,充分混匀,分装,-20℃储存.不要反复冻融3次.6.2.5裂解液工作液的制备混合后2-8℃稳定保存48小时,裂解液工作液必须每次实验前新鲜配制裂解液工作液制备表6.2.6将1.4ml蛋白酶溶解液加入蛋白酶冻干粉试剂瓶中,混匀至完全溶解,避免有泡沫,2-8℃保存.6.3样本制备及加样（在标本制备区操作）6.2.1取n个1.5ml的灭菌离心管（n=样本数＋1管阴性对照+1管强阳性对照＋1管临界阳性对照），做好标记。
6.2.2分别加入25ul蛋白酶溶液.6.2.3分别加入待测样本,阴性对照,强阳性对照,临界阳性对照各200ul6.2.4加200ul新鲜配制的裂解液工作液盖上盖子,振荡15秒,混匀(不可把蛋白酶溶液加入到裂解液中).6.2.5 56℃温浴15min,瞬时离心,去除盖上液滴.6.2.6加入250ul无水乙醇,盖上盖子,振荡15s,室温静置5min. ,瞬时离心,去除盖上液滴.(室温超过25℃,无水乙醇要预冷.)6.2.7将n个纯化柱放入收集管中,将6.2.7的液体移入到纯化柱中,盖上盖子,6000g 离心1min,倒掉废液.6.2.8打开纯化柱的盖子,加入500ul洗液1, 6000g离心1min,倒掉废液.6.2.9打开纯化柱的盖子,加入500ul洗液2, 6000g离心1min,倒掉废液.6.2.10打开纯化柱的盖子,加入500ul无水乙醇, 6000g离心1min,倒掉废液.将纯化柱放入新的收集管中.6.2.11 20000g高速离心3min,除去乙醇.6.2.12将纯化柱放入干净的1.5ml离心管中,开盖,56℃温浴3min,以除去残留液体.6.2.13将纯化柱放入另一个干净1.5ml离心管中,加入60ul洗脱液(加到膜中央).盖上盖子,室温静置5min.20000g离心1min收集滤出液.4℃保存备用.应在2h内用于PCR扩增,或-70℃保存一个月6.2.14取20ul的6.2.13的RNA溶液及定量标准品,加入PCR反应管中.6.3 PCR扩增（在扩增区操作）6.3.1打开稳压器电源，再打开计算机电源。
20HCV临床检验标准操作规程
丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒（化学发光法）临床检验标准操作规程项目名称：丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒（化学发光法）操作规程文件号：KM-SOP-CLIA-020第1版第 1 页共 4 页2008年1月1日起实施，2010年9月1日修订起草人：起草日期：2007-12-14复核人：复核日期：批准人：批准日期：分发部门或个人：1.实验原理：本品采用合成多肽的HCV core、NS3、NS4、NS5区特异性抗原包被化学发光微孔板，待测血清中HCV抗体与包被抗原结合，再与抗人IgG-HRP反应，充分洗涤后，加入化学发光底物液，于5 -30分钟内测定其发光强度（RLU），根据临界值判断样本中是否含有HCV抗体。
本品应用间接法原理检测人血清或血浆中的抗-HCV IgG抗体。
2.临床应用：丙型肝炎（Hepatitis C，HC），是由丙型肝炎病毒（Hepatitis C Virus，HCV）引起的一种世界性的肝脏疾病。
HCV基因组为一线状单股正链RNA病毒，直径50-60nm，其基因组为10kb单链RNA分子，编码区包括两部分，即结构区与非结构区，属于黄病毒属。
HCV主要通过血液传播、性传播、母婴传播等等，我国的HCV感染途径主要以输血或血制品为主，尤其反复输入多个献血员的血或血制品更易发生。
3.标本采集及处理：3.1检测标本种类要求：静脉血或动脉血的血清或血浆标本均可作为检测标本；溶血、脂血、黄疸血不宜使用，如需使用，应在报告单上注明“标本溶血/脂血/黄疸”。
3.2受检者准备：受检者无需做特殊准备；3.3标本采集及处理：宜空腹采集静脉血，无需抗凝，采用离心方法分离血清，分离血清应彻底，不含纤维蛋白；使用抗凝剂（浓度为21.8mmol/L枸橼酸钠，5mmol/L EDTA-Na，15IU/mL肝素，10mmol/L草酸钠）不影响检测结果。
样本中含有0.15mg/mL的胆红素，10.0mg/mL的血红蛋白或1.0mg/mL的甘油三酯的阴性样本均无交叉反应，3.4标本保存：留取的标本最好在当天检测，不能立即检测的应放置于2-8℃不应超过3天，血清置于-20℃以下可长期保存，但应避免反复冰融3.5标本容器：盛放标本的容器必须为洁净的一次性真空采血管、玻璃试管、一次性的不同规格的塑料离心管；3.6标本外送：如涉及到需要外送的标本，必须以规定的容器（0.5ml塑料离心管）存放并密封，并根据邮寄规则和要求进行包装，运送时还要放入冰袋（2-8℃）或干冰（-10℃）由专人运送至指定地点指定接收人。
丙型肝炎病毒抗体操作规程
丙型肝炎病毒抗体操作规程【试剂盒组份】1.HCV抗原包被板48孔*1块2.酶结合物5ml*1瓶3.阳性对照0.5 ml*1管4.阴性对照0.5 ml*1管5.浓缩洗涤液：用前每瓶1：20稀释30 ml*1瓶6.显色剂A 3ml*1瓶7.显色剂B 3ml*1瓶8.终止液3ml*1瓶9.样品稀释液5ml*1瓶10.封口纸2片11.说明书1份【检测方法】1.每次试验设阴性，阳性对照各两孔，分别加入阴，阳性对照血清100μl，再设一孔空白对照，加样品稀释液100μl。
其余孔加入100μl样品稀释液，再加待测血清10μl。
充分混匀后，置37℃温育30分钟。
弃去孔内样品，扣干。
2.用洗涤液注滿每孔（至少300μl洗涤液/孔），勿溢出，静置5秒钟后扣干，重复5次。
3.每孔加酶结合物100μl（空白对照孔除外），置37℃温育20分钟，同上法洗反应板5次。
4.每孔加显色剂A液、B液各50μl,轻轻振荡后，37℃避光静置10分钟。
5.每孔加终止液50μl终止反应，以空白调零，在酶标仪中读取各孔OD450。
【结果判定】1.阳性对照平均值大于1.20，实验结果有效。
2.实验设计要求阳性、阴性对照OD值之差应大于1.20，否则本次实验无效。
3.若阴性对照读数小于0.050时，按0.050计算。
4.临界值（Cut off value）=阴性对照平均值+0.1。
5.测试标本的计算值小于Cut off value则为HCV抗体阴性。
6.测试标本的计算值等于或大于Cut off value则为HCV抗体阳性。
【注意事项】1.从冷藏环境中取出的试剂盒应置室温平衡20分钟再进行测试。
2.若洗涤液不够可自行配制。
PH7.2 0.1MPBS-0.5℅Tween20。
用前10倍稀释成0.01MPBS-0.5℅Tween20。
3.本试剂盒中的样品稀释液采用变色技术，在加原始血清或血浆标本后由工黄绿色变为蓝绿色。
非原始血清或血浆（如稀释标本等）颜色变化不明显或变为其他颜色，为正常现象。
丙肝患者血清HCV-Ab、HCV-cAg、HCV-RNA检测的比较及肝功能的相关性研究
丙肝患者血清HCV-Ab、HCV-cAg、HCV-RNA检测的比较及肝功能的相关性研究王中东;黄麦华【摘要】目的探讨HCV-Ab、HCV-cAg、HCV-RNA及ALT、AST、γ-GT的相关性及临床应用价值.方法 ELISA方法检测HCV-Ab、HCV-cAg,PCR-荧光探针法检测HCV-RNA,全自动生化分析仪检测ALT、AST、γ-GT.结果检测HCV感染者186例,其中HCV-Ab、HCV-cAg的阳性率分别为95.7％、25.3％、82.7％.ALT、AST、γ-GT水平与HCV病毒载量呈正相关(P＜0.01).结论同时检测HCV-Ab、HCV-cAg、HCV-RNA可充分掌握丙肝患者病毒感染情况,以及检测ALT、AST、γ-GT对抗病毒治疗的疗效评价及治疗时间有重要意义.【期刊名称】《泰山医学院学报》【年(卷),期】2014(035)001【总页数】3页(P27-29)【关键词】丙型肝炎患者;HCV-Ab;HCV-cAg;HCV-RNA;ALT;AST;γ-GT【作者】王中东;黄麦华【作者单位】山东省泰山疗养院,山东泰安271000;泰山医学院附属泰山医院,山东泰安271000【正文语种】中文【中图分类】R512.6+3丙型肝炎是一种主要经血液传播的疾病，丙型肝炎病毒(hepatitisC virus, HCV)慢性感染可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，感染者中绝大部分发展成慢性感染进而发生肝硬化和肝细胞性肝癌[1]。
世界卫生组织估计世界大约2.35%的人感染HCV，每年新发丙型肝炎病例约3.5万例,是严重威胁人类健康的传染病之一，呈世界性分布。
丙型肝炎病毒是丙型肝炎的病原体，其致病机制主要是通过病理性免疫应答导致肝细胞损伤，它还有诱发原发性肝癌的可能。
而高度慢性化是该病的最大特征[2]。
由于尚无有效的预防和治疗方法，因此，控制HCV感染的形势十分严峻，而早发现、早诊断和早治疗是防控HCV传染源、阻断传播途径最为有效的手段。
丙型肝炎病毒抗体IgG (抗-HCV·IgG)标准操作程序SOP文件
4、加酶：除空白对照孔外，每孔加入2滴酶标记物，轻轻振荡封板后，置37℃水浴15分钟。
5、洗涤：同步骤3。
6、显色：每孔加底物液A、B各1滴，轻拍混匀后，置37℃水浴15分钟。
7，每孔加终止液50ul。
2、试剂用前先平衡至室温。含血球的标本易出现假阳性，应避免使用。
3、未用完的板条应及时封存于易封袋中。
4、滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。
5、若浓缩洗涤出现结晶，可于37℃放置至溶解。洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内游离酶不能洗净。
6、本试剂盒应视为为有传染性物质，请按传染病实验室规程操作
临界值（C.O.）=0.140+阴性对照平均OD值；
样本OD值＞临界值,为抗-HCV·IgG阳性;否则为阴性。
注：阴性对照孔OD值小于0.05时，按0.05计算；大于0.05时，按实际值计算。
[质量控制]
每批检测同步进行质控品测定，绘制室内质控图。其它按室内质量控制管理规定进行。
[参考范围]
酶联免疫吸附试验：阴性
[临床意义]:
（1）在输血后患肝炎有80－90%的病人是丙型肝炎，其中大部分为阳性。
（2）在乙型肝炎患者中，特别是经常使用血制品（血浆、全血）的病人可以引起丙肝病毒的合并感染，使疾病转为慢性化、肝硬化或者肝癌。所以对乙型肝炎的复发病人或是慢性肝炎病人要进行HCV－Ab的检测。
[注意事项]
1、不同批号的试剂不可混用。
ＡＢＣＤ医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-SOP-01-15
丙型肝炎病毒抗体IgG(抗-HCV·IgG)
检验项目标准操作规程模板
检验项目标准操作规程资料内容仅供参考，如有不当或者侵权，请联系本人改正或者删除。
检验标本的采集一、标本的正确采集标本采集必须符合2个条件，即必须满足检测结果正确性的各项要求和检测结果必须能真实地反映检验对象当前病情,避免干扰因素的存在。
二、标本的贮存标本采集后尽快送至实验室,若不能及时送检,已采集的标本要按检验规定的贮存条件,如室温、冰浴、温浴或防腐贮存,将标本直立置于稳定、干燥、避光、密闭的环境中，避免振摇，以免标本遗洒或溶血影响检测结果。
三、标本的运送必须保证运送后标本所分析的结果与刚采集标本后分析的结果一致。
四、标本的签收临床工作人员从口才采集标本并将标本从临床运送到实验室及实验室人员接收临床标本，均应按标准化要求进行"做到认真核对,包括标原来源、标本属性、检查项目、标本采集和运送是否合乎要求等，标本送出人员和标本接收人员都要做认真的记录并签字存档。
五、标本的处理1、实验室接收标本后应及时正确地予以处理，否则会影响检测资料内容仅供参考，如有不当或者侵权，请联系本人改正或者删除。
结果的准确性。
2、如果取血后未尽快转送或分离血清、血浆，血清与血块簪时间接触可发生变化。
3、实验室接收标本后处理应注意事项：（1）、时间:实验室接收标本后应尽快予以分类和离心。
①、促凝标本应尽早处理,可在采血5-15分钟后离心;②抗凝标本可采血后立即离心；③非抗凝（无促凝）标本采血30-60分钟后离心；④抗凝全血标本（全血细胞分析、ESR等）不需要离心。
（2）、温度：一般标本为室温（最好是22-25 ℃）放置；冷藏标本（对温度依赖性分析物）应保持在2-8℃直到温度控制离心。
（3）、采血管放置:应管口（盖管塞）向上，保持垂直立位放置。
（4）、采血管必须封口:管塞移去后会使血PH改变,影响检测结果,封口能够减少污染、蒸发、喷洒和溢出等。
六、分析前的可变因素1、生物因素:可引起所检测物质在体内的变化,此种变化与检测方法无关,分为可变的和固定的生物因素。
ABPCR仪操作规程
ABPCR仪操作规程1.前言2.安全措施-在使用PCR仪之前，确保工作区域干净整洁，并且定期清理和消毒所需器材和工作台。
-在操作PCR仪时，必须佩戴实验室服，并戴上手套和护目镜以保护个人安全。
-所有涉及到的试剂和样品必须按照实验室安全规定妥善处理，避免直接接触或摄入。
3.PCR试剂准备-根据实验需求准备PCR试剂，确保试剂处于恰当的温度范围内。
-制备PCR混合液时，确保按照试剂说明书中的配方比例准确配制试剂。
-避免试剂的交叉污染，使用干燥、无菌的试剂枪或者专用试剂吸头进行操作。
4.PCR模板和引物处理-确保PCR模板的质量和纯度，使用纯净水或适当的缓冲液稀释。
-引物设计和合成时，确保引物满足实验要求，并保证质量和纯度。
-确保PCR模板和引物的储存温度和环境符合要求，避免冻融循环。
5.PCR仪设置-打开PCR仪电源，并等待仪器初始化完成。
-设置PCR仪的反应体系、反应时间和温度程序，根据实验要求调整合适的参数。
-检查PCR仪的温度控制系统，确保温度控制精确，避免温度突变或漂移。
6.PCR实验操作步骤-在冰上或者低温环境下将PCR反应管中的试剂快速混合均匀。
-将混合好的PCR试剂吸入PCR反应管中，切勿直接将试剂注入PCR 仪内。
-将PCR反应管加入PCR仪的样品台中，确保管盖紧密，避免反应体系蒸发和污染。
-关闭PCR仪的盖子，确保PCR仪处于密闭状态，启动PCR程序。
-在PCR反应过程中，尽量避免移动PCR仪和样品管，确保反应体系稳定。
7.PCR实验结果分析-在PCR反应结束后，立即将PCR反应管从PCR仪中取出，避免反应继续进行。
-根据实验需要，将PCR反应产物进行凝胶电泳或其他分析方法进行分析。
-将PCR反应产物和PCR仪的废弃物妥善处理，避免交叉污染和环境污染。
8.清洁和维护-在使用PCR仪结束后，关闭电源并将仪器清洁干净，使用适当的清洁剂和消毒剂进行清洁。
-定期检查PCR仪的温度控制系统和其他功能模块，确保其正常工作。
HCV-cAg与HCV-Ab联合检测的互补作用及HCV阳性者与ALT的关系
HCV-cAg与HCV-Ab联合检测的互补作用及HCV阳性者与ALT的关系陈小龙;唐荣德;华关民;陈敏;谭亮庆【期刊名称】《中外医疗》【年(卷),期】2014(033)007【摘要】目的探讨丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)与丙肝病毒抗体(HCV-Ab)联合检测对诊断丙肝病毒(HCV)感染的互补作用及HCV感染阳性者与丙氨酸氨基转移酶(ALT)的关系.方法检测手术前检查组2061例患者和ALT＞80 U/L组242例患者的HCV-cAg、HCV-Ab和ALT等指标,然后将检测结果作出统计分析.结果手术前检查组联合检测有2.7％的阳性率,显著高于单独HCV-cAg和单独HCV-Ab的1.6％(P＜0.05); ALT＞80 U/L组联合检测有14.5％的阳性率,显著高于单独HCV-cAg的7.0％(P＜0.01);手术前检查组ALT均值和ALT＞80U/L例数是2项均阳性高于HCV-Ab阳性、HCV-Ab阳性高于HCV-cAg.结论 HCV-cAg和HCV-Ab 2项联合检测明显优于单项检测,这对HCV感染的诊断能起到很好的互补作用,加上ALT等肝功能指标的检测,有利于HCV感染的正确诊断.【总页数】3页(P1-2,6)【作者】陈小龙;唐荣德;华关民;陈敏;谭亮庆【作者单位】广东省江门市新会中医院,广东江门529100;广东省江门市新会中医院,广东江门529100;广东省江门市新会中医院,广东江门529100;广东省江门市新会中医院,广东江门529100;广东省江门市新会中医院,广东江门529100【正文语种】中文【中图分类】R4【相关文献】1.HCV-Ab、HCV-cAg和HCV-RNA联合检测的临床价值 [J], 顾娟;孙明忠2.联合检测血清HCV-RNA、HCV-cAg与HCV-Ab对丙型肝炎的诊断价值分析[J], 卢庆文;董娅;刘红霞3.HCV-cAg和HCV-Ab联合检测对HCV感染诊断价值的研究 [J], 林俊填;余晋林;伍伟健;陈展泽;龚道元4.HCV-cAg与HCV-Ab联合检测对丙型肝炎的诊断价值 [J], 付金玉5.联合检测血清丙型肝炎核心抗原(HCV-cAg)与丙型肝炎抗体(HCV-Ab)对丙型肝炎的诊断价值分析 [J], 黎秋如;肖亮因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HCV 操作规程
d.浓缩洗液：1瓶(40 m1)，使用前用去离子水做1：25倍稀释
e.增强液：1瓶(20 m1)
f.微孔反应板：一块(12*8，包被有HCV抗原)
g.吸头：20支
h.封片纸：3张(封板用)
i.说明书：1份
医院：
科：
室
丙型肝炎病毒抗体定性诊断试剂盒
9.3试剂盒与被测样本使用前必须达到室温。
8.4振荡器按照《2510变频振荡器标准操作规程》设定需要的振荡频率。
9.5微孔洗涤机按照《Egate2310全自动微孔洗涤机标准操作规程》在每天使用前应进行校正注液量和残自量，注意管道是否畅通。洗涤时，确认每孔必须是干的，洗涤液都注满微孔。洗涤后，每个孔必须是干的，如果仍有水则需拍干。
2.样本处理
血液样本尽快送实验室，室温下离心分离出血清，置于洁净离心管中保存。
3.试剂
本科室使用苏州新波生物技术有限公司丙型肝炎病毒抗体（HCV）时间分辨免疫荧光法诊断试剂盒，试剂盒主要组分如下：
a.阴阳性对照：2瓶(1m1)
b.生物素标记HCV抗原冻干品：1瓶(1m1)，使用时复融后作1：21倍稀释
时间分辨免疫荧光分析法
标准操作规程
版本：
执行日期：
共3页 第2页
4.仪器（用户自备）
4.1时间分辨荧光分析仪，ANYTEST2000；
4.2微孔洗涤机，Egate2310；
4.3微孔振荡器，2510变频振荡器；
5.操作步骤
5.1工作洗液：将浓缩洗液做1：25倍稀释，作为工作洗涤液；
5.2生物素标记抗原工作液：每瓶生物素标记HCV抗原的冻干粉加1000uL纯水，静置30分钟，待其充分溶解。使用前一小时内将其按所需量1：21倍稀释并一次用完(使用一次性的塑料容器来配制)。
丙型肝炎病毒抗体(胶体金法)标准操作规程
丙型肝炎病毒抗体(胶体金法)标准操作规程1.检验目的用于体外定性检测人血清或血浆样本中的丙型肝炎病毒(HCV)抗体。
2.检验程序的原理和方法采用胶体金免疫层析技术，应用间接法原理定性检测人血清(浆)HCV抗体。
在玻璃纤维素膜上预包被金标鼠抗人IgG抗体(anti-IgGAb),在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被重组丙肝混合抗原(Core、NS3、NS4、NS5,源自大肠杆菌)和人IgG 抗体(丙种球蛋白)。
检测阳性样本时，血清样本中HCV-Ab与胶体金标记鼠抗人IgG 抗体结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的抗原结合形成“Au-anti-IgGAb-HCVAb-HCVAg”夹心物而凝聚显色，游离金标鼠抗人IgG抗体则在对照线处与人IgG抗体结合而富集显色。
阴性标本则仅在对照线处显色，15分钟内观察结果即可。
3.性能特征3.1用国家参考品测定，产品性能应符合以下要求。
3.1.1阴性参考品符合率：对20份阴性参考品进行检测，要求在15分钟内全部显示阴性结果。
3.1.2阳性参考品符合率：对20份阳性参考品进行检测，要求在15分钟内全部显示阳性结果。
3.1.3最低检出量：灵敏度1号1:8进行检测，要求在15分钟内显示阳性结果。
灵敏度2号1:64进行检测，要求在15分钟内显示阳性结果。
3.1.4精密性：用精密性参考品平行检测10次，均在15分钟内显示出清晰可辨的检测线，且显色深度无显著差别。
3.1.5稳定性：试剂盒置37℃20天，阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、最低检出量和精密性均应符合要求。
3.2乙肝、人类免疫缺陷病毒(HIV)、甲肝、庚肝、戊肝、类风湿因子(RF)、红斑狼疮等各种类型的标本不会对测试产生干扰。
3.3胆红素(342.0μmol/L)、胆固醇(20.7mmol/L)、血红蛋白(5.0g/L)、甘油三酯(28.2mmol/L)),不影响检测结果。
丙型肝炎病毒核酸扩增检测标准操作规程
丙型肝炎病毒(HCV)核酸扩增(PCR)荧光定量检测标准操作程序一、目的：明确丙肝病毒核酸定量检测的操作规程，指导检验人员正确进行丙肝病毒核酸定量的检测,保证检测结果及时可靠。
二、范围：适用于进行丙肝病毒核酸定量检测的检验人员。
三、职责：实验操作人员应严格按操作规程进行实验。
四、检测原理：本试剂盒从血清或血浆中提取HCV RNA，在逆转录酶作用下将RNA逆转录为HCV cDNA，在引物的指导下，以四种脱氧核苷酸为底物，通过耐热DNA聚合酶的酶促作用，对cDNA进行体外扩增，用Taqman探针法检测扩增产物。
通过标准曲线，即可计算出被检物的含量。
五、试剂：1. 来源：上海科华生物工程股份有限公司HCV核酸扩增荧光定量检测试剂盒〔国药准字S2*******〕。
2. 规格：32人份/盒。
3. 试剂盒组成：3.1 病毒RNA提取试剂：用于从血清或血浆中提取HCV RNA。
裂解液 4ml×1瓶含有硫氰酸胍的溶液助沉剂1瓶含有助沉剂的冻干粉末去抑制剂1瓶含有去抑制剂的冻干粉末洗涤液A 14ml×1瓶含有硫氰酸胍的溶液洗涤液B 4ml×1瓶含有Tris的溶液洗脱液 1.8ml×2支含0.04% NaN3的灭菌双蒸水（无RNase）核酸提取柱32支×1包含连接套管3.2 核酸扩增（PCR）―荧光检测试剂：RT―PCR试剂PCR主反应液 250ul×1支含有一对引物和dNTP的溶液酶混合物 180ul×1支含有Taq酶、逆转录酶和RNA酶抑制剂的溶液荧光探针20ul×1支含有荧光探针的溶液对照品阴性对照 250ul×1支含有0.05% NaN3的HCV RNA阴性的混和人血清强阳性对照 250ul×1支含有约2×106IU/ml的HCV基因片段的非传染性体外转录RNA弱阳性对照 250ul×1支含有约2×104 IU/ml的HCV基因片段的非传染性体外转录RNA工作标准品①250ul×1支含有适量的HCV基因片段的非传染性体外转录RNA 工作标准品②250ul×1支含有适量的HCV基因片段的非传染性体外转录RNA 工作标准品③250ul×1支含有适量的HCV基因片段的非传染性体外转录RNA 工作标准品④250ul×1支含有适量的HCV基因片段的非传染性体外转录RNA 工作标准品①～④的参数和强、弱阳性对照的定值允许范围根据批号不同而不同。
HCV—cAg与HCV—Ab联合检测的互补作用及HCV阳性者与ALT的关系
HCV—cAg与HCV—Ab联合检测的互补作用及HCV阳性者与ALT的关系目的探讨丙肝病毒核心抗原（HCV-cAg）与丙肝病毒抗体（HCV-Ab）联合检测对诊断丙肝病毒（HCV）感染的互补作用及HCV感染阳性者与丙氨酸氨基转移酶（ALT）的关系。
方法检测手术前检查组2061例患者和ALT>80 U/L 组242例患者的HCV-cAg、HCV-Ab和ALT等指标，然后将检测结果作出统计分析。
结果手术前检查组联合检测有 2.7%的阳性率，显著高于单独HCV-cAg 和单独HCV-Ab的1.6%（P＜0.05）；ALT>80 U/L组联合检测有14.5%的阳性率，显著高于单独HCV-cAg的7.0%（P＜0.01）；手术前检查组ALT均值和ALT>80U/L 例数是2项均阳性高于HCV-Ab阳性、HCV-Ab阳性高于HCV-cAg。
结论HCV-cAg和HCV-Ab 2项联合检测明显优于单项检测，这对HCV感染的诊断能起到很好的互补作用，加上ALT等肝功能指标的检测，有利于HCV感染的正确诊断。
标签：丙肝病毒核心抗原；丙肝病毒抗体；丙氨酸氨基转移酶；联合检测；互补作用丙型肝炎（丙肝）是一种主要经血液传播的传染病，而丙肝病毒（HCV）是其主要的致病因素，HCV感染的实验室检查是丙肝诊断的重要依据。
近些年来的HCV检测技术主要是丙肝病毒抗体（HCV-Ab）和丙肝病毒核酸（HCV-RNA）检测，二者均存在一定的局限性。
该院于2013年3月起正式开展了丙肝病毒核心抗原（HCV-cAg）检测，这与HCV-Ab联合检测能起到一定的互补作用，可望提高HCV感染的阳性检出率。
但2项联合检测到底能起到多少互补作用以及HCV阳性者与丙氨酸氨基转移酶（ALT）的关系如何还值得探讨，现报道如下。
1 对象与方法1.1 研究对象该研究的研究对象为2013年3月1日—5月31日这一时段来我院作疾病诊治的并来源于2个方面的患者，一是手术前（含输血前）作例行检查的患者，共2 061例；二是ALT>80 U/L的肝炎和疑似肝炎患者，共242例。
区人民医院丙肝抗体检测操作规程
区人民医院丙肝抗体检测（HCV-Ab）操作规程1.方法：胶体金法2.原理：本品采用胶体金免疫层析专业技术，在玻璃纤维素膜上预包被金标鼠抗人IgG抗体，在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被丙肝混合抗原和人IgG抗体。
检测阳性标本时，血清样本中HCV-Ab与胶体金标记鼠抗体IgG抗体结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的抗原结合形成“Au-anti-IgG Ab-HCV Ab-HCV Ag”夹心物而凝聚显色，游离金标鼠抗人IgG 抗体则在对照线处与人IgG抗体结合而富集显色。
阴性标本则仅在对照线处显色，15分钟内观察结果即可。
3 .试剂英科新创（厦门）科技有限公司4 .试剂组成4.1HCV胶体金试纸条 50条 4.2说明书 1份4.3样品稀释液 4.4塑料滴管5 .仪器目测6 .操作步骤6.1将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。
6.2用塑料滴管加1滴样本血清或血浆，加到试纸条指示箭头下端的加样处。
6.3 随即加2滴样本稀释液。
6.4加样后，阳性标本可在1-15分钟内检出，建议15分钟再最终观察并记录试验结果。
7.结果判断阴性：出现一条红线。
阳性：出现二条红线。
无效：不出现红线。
8 .正常参考值阴性9 .临床意义同ELISA法测定。
10 .标本采集10.1 无菌条件下抽取静脉血2毫升，及时分离血清。
10.2 如采用血浆测定，临床常用抗凝剂（EDTA、肝素、枸橼酸钠）不影响实验结果。
10.3 标本溶血、脂血、严重黄疸或加热灭活的血清标本均可能影响检测结果。
11. 注意事项11.1标本应新鲜澄清。
11.2在良好光线下判断结果。
11.3试剂从包装中取出后，应尽快进行实验，避免放置于空气中时间过长，导致受潮。
11.4检测线颜色的深浅程度与样品中抗体的滴度没有一定的必然；联系。
11.5任何一种测试都不能绝对保证样品中没有低浓度抗体存在，所以阴性结果任何时候不能排除含有HCV暴露和感染的可能。
丙肝抗体(Anti-HCV)实验操作规程(吉比爱)
1.目的和适用范围：1.1.为保证血液检测的结果正确性，规范实验操作，特制定本操作规程。
1.2.适用于本实验室，全体工作人员都必须严格按照本操作规程进行操作。
2.术语：无。
3.职责：3.1.实验室工作人员都必须严格按照本操作规程进行操作。
3.2.实验室负责人负责最终实验室报告的签发。
4.工作程序4.1.操作说明4.1.1.实验原理：本试剂盒应用间接法酶联免疫法原理检测人血清或血浆中的HCV抗体。
用高纯度基因重组HCV 抗原包被酶标板，待检血清或血浆中的-HCV抗体可与包被抗原反应，再与酶标抗人lgG抗体结合，形成抗原-抗体-酶标抗体复合物。
加底物（TMB）显色，在酶标仪上测定后根据吸光值（A值）判定有无HCV抗体的存在。
4.1.2.检验方法：准备：本试剂盒在使用前应在室温（18~25℃）平衡30分钟；包被板平衡至室温后才可打开外包装铝箔袋，以防止板条吸收空气中水蒸气；将20倍浓缩洗涤液用纯化水20倍稀释后备用。
设定：将待测样品按序排列设定加样顺序。
每板试验设空白对照1孔（若用双波长检测，可不设空白对照孔），阴性对照3孔，阳性对照2孔。
加样：将所需数量的板条固定于板架。
在包被板孔中加入样品稀释液，每孔100ul。
除空白对照孔外，在相应孔中再加入HCV阴性、阳性对照和待检样品10ul。
温育第一次：贴上封口胶，置37℃温育60分钟。
洗涤：小心撕去封口胶。
手工洗操作：弃去各孔中液体、拍干。
每孔注满洗液，静置5-10秒后弃尽，洗涤5次，拍干；洗板机操作：没空加入350ul洗液，每次洗涤间隔5-10秒，洗涤5次，拍干。
加酶：除空白对照孔外，每孔加入HCV酶工作液100ul.温育第二次：贴上封口胶，置37℃温育30分钟。
洗涤同操作5.显色：每孔加入底物液A50ul,再加入底物液B50ul，轻拍混匀，置37℃避光显色30分钟。
测定：显色完毕后，每孔加入终止液50微升，轻拍混匀，立即在单波长450nm(须以空白对照孔调零)或双波长（主波长450nm，参考波长600-650nm）下测定各孔A值。
ABPCR仪操作规程
ABPCR仪操作规程1、标本先处理，放入仪器后再进行以下操作。
记住标本所放的位置，设定反应板位置。
2、打开AB7500 PCR仪，双击桌面上。
3、点左上角文件（file）→ne w→出一界面点下一步（next），添加HBV（或HCV）探针，下一步，选中标本位置，选中Use HBV，close,点完成Finish。
稍等，提示与仪器连接完成。
4、选中标准品位置，task中选standard，单个设标准品浓度，Quantity，如5E5。
5、双点击U，添加sample name 如1，每个标本位置设置完成，包括质控。
6、点Instrument，在这一界面设扩增程序。
7、另存实验文件名（Fin e→sava as→E:date→Fine name 如20090429 保存。
8、在Instrumen 中选start，仪器开始运行（时间可能稍长一点，等待），时间倒记时，至实验结束。
9、在Result s→Amplifiantion Plot 选中全部标本（用鼠标同时按Ctrl或 Shift键操作）.10、Manual ct→ Manual Baseline →stant 6 →End 12,调整阈值，分析结果（Analyze），保存。
11、结果导出到D盘。
Fil e→Expor t→Result s→D:YT X→文件名，如20090429→save。
12、双击桌面中，解码程序中（或点左上角重启接口，显示解码程序），点结果文件如20090429，点检验项目如HBVDNA，入库。
13、在报告单中修改低于500的结果，为〈5.0E+2，打印报告单。
用已经设置好的程序打开（在桌面上），如HBV-KH或HCV-KH 标本先处理，放入仪器后再进行以下操作。
记住标本所放的位置，设定反应板位置。
1、打开AB7500 PCR仪，打开桌面上的HBV-KH或HCV-KH，（点击Retry,）提示与仪器连接完成。
2、选中标本位置点击（可全部选中，用Ctrl键），选中Use HBV，close。
雅培抗-HCV操作规程 (4)
1、目的为了规范雅培丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒的检测工作，保证血液检测结果的准确性、正确性和可靠性，保障血液质量，根据《》制定本操作规程。
2、职责血液检测岗位人员负责献血者血液标本丙型肝炎病毒抗体的检测。
3、适用范围适用于献血者血液标本丙型肝炎病毒抗体的检测。
4、原理在Murex抗-HCV4.0试剂中，稀释后的样品与包被在微孔板上的超纯度的核心。
NS3，NS4，NS5抗原一起孵育，样品中的抗-HCV抗体与包被抗原结合。
通过洗涤去除未结合的物质，被捕捉的抗体和过氧化物酶标的抗人IgG单克隆抗体孵育形成抗原-抗体-酶结合物，通过洗涤去除多余的酶结合物后，加入底物TMB和过氧化氢显色，当样品中有抗-HCV 抗体存在，颜色呈紫色。
加入硫酸终止酶反应，应用酶标仪测吸光值，样品中的浓度与颜色深浅有直接关系。
5、标本要求5.1血液标本容器和添加（抗凝）剂分离胶试管或不抗凝试管5.2 5ml静脉血离心分离后的血清或血浆（血辫）。
6、所需仪器设备微量振荡器、可调微量移液器、电热恒温水浴箱、离心机、全自动酶免检测系统（STARLET前处理和FAME16/20后处理）、MUTISKAN MK3酶标仪、汇松洗板机、定时器。
7、试剂材料7.1 一次性移液器（与微量加样器配套），一次性加样尖（与STARLET 配套）、量筒、蒸馏水。
7.2贴有本站质量管理科“质检合格”标签的由Murex Biotech S.A.(PTY)Ltd.生产的丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒（ELISA）。
康彻思坦生物或卫生部临床检验中心提供的弱阳性质控血清。
8、检测环境要求温度18-25℃，湿度30%-70%。
9、步骤与方法9.1实验前的准备9.1.1环境确认观察实验室环境温度、湿度是否在要求范围内，如不在范围应使用空调、加湿器等设备使检测环境条件符合要求。
9.1.2仪器设备的准备对本次检测需用的设备MUTISKAN MK3酶标仪、汇松洗板机、微量振荡器、可调微量移液器运行状态和37℃水浴箱的温度及环境温湿度进行确认，按《MUTISKAN MK3酶标仪操作规程》和试剂盒说明书编制结果判读程序（如酶标仪中贮存有相应的程序可直接调用）。
人民医院基因扩增实验室丙型肝炎病毒核酸检测标准操作程序
人民医院基因扩增实验室丙型肝炎病毒核酸检测标准操作程序1 项目名称丙型肝炎病毒核酸检测2 检验方法名称TaqMan荧光定性检测3 方法学原理对丙肝病毒进行逆转录反应生成cDNA，PCR扩增时加入一对丙型肝炎病毒cDNA特异性引物，同时加入一个特异性的、能与PCR产物杂交的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个荧光报告基团（R）和一个荧光淬灭基团（Q）。
探针完整时，R基团发射的荧光信号被Q基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使R荧光基团和Q荧光基团分离，Q基团对R基团的抑制吸收作用消失，荧光监测系统就可接收到R基团的荧光信号。
每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成。
被切割产生的荧光分子数与PCR产物的数量成比例，这样就实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
因此根据PCR反应液的荧光强度即可计算出初始模板的数量。
4 标本要求4.1 血清：用一次性无菌注射器抽取受检者静脉血2毫升，注入无抗凝剂普通试管，待凝固后1500r/min离心5分钟，吸取上层血清，转移至1.5ml灭菌离心管；4.2 血浆：用一次性无菌注射器抽取受检者静脉血2毫升，注入EDTA或枸橼酸钠抗凝剂的试管，轻轻颠倒混匀5~10次，使抗凝剂与静脉充分混匀，5~10分钟后即可分离出血浆，转移至1.5ml灭菌离心管；4.3 标本保存：分离后的血清或血浆在2~8℃条件下保持不应超过72小时；-20℃可保存1个月；要长期保存的，需分装后储存于-70℃。
5 试剂5.1 试剂名称：丙型肝炎病毒核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）5.2 生产厂家：XXXXXXX5.3 试剂货号：#DA-B070；5.4 包装规格：10人份/盒；5.6 试剂储存条件：保存于—20℃，有效期6个月。
6 仪器ABI 7500全自动基因扩增检测仪7 操作步骤7.1 RNA提取7.1.1 阴性质控品处理7.1.1.1 取出阴性质控品，8000rpm离心数秒；7.1.1.2 取灭菌的0.5ml离心管加入10µlRNA提取液A（充分混匀后吸取），加入100µl 阴性质控品，再加入200µlRNA提取液B，振荡混匀，室温放置5分钟，8000rpm离心1分钟，小心吸去上清；7.1.1.3 加200µlRNA提取液B，充分混匀（用移液器吹打），000rpm离心1分钟，小心吸去上清；7.1.1.4 加预冷的75%乙醇400µl，充分混匀，8000rpm离心1分钟，小心吸去上清；7.1.1.5 加预冷的75%乙醇400µl，充分混匀，8000rpm离心1分钟，小心吸去上清；7.1.1.6 打开管盖，65℃干燥10分钟，盖上管盖待用于逆转录。
丙型肝炎病毒实验室检测技术规范
《丙型肝炎病毒实验室检测技术规范》中国疾病预防控制中心二○一○年五月二十日前言丙型肝炎已呈全球性流行。
据世界卫生组织统计，全球HCV的感染率约为3%，估计约1.7亿人感染HCV，每年新发丙型肝炎病例约3.5万例。
我国病毒性肝炎的发病人数一直位于所有传染病的前列，而丙型肝炎报告发病率在病毒性肝炎中也呈现上升趋势。
丙型肝炎是一种主要经血液传播的疾病，丙型肝炎病毒慢性感染可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞癌，对患者的健康和生命危害极大，已成为严重的社会和公共卫生问题。
丙型肝炎给人类带来了如此巨大的危害，在目前还没有疫苗的情况下，早期发现、早期治疗至关重要。
然而，大众对于丙型肝炎认知的欠缺、患者缺乏明显症状、在高危人群中早期发现丙型肝炎患者的机制的缺乏，都使丙型肝炎防治面临巨大的挑战。
目前丙型肝炎病毒检测已经在疾病预防控制机构、医疗机构、采供血机构、出入境检验检疫机构等广泛开展，但是我国在丙型肝炎病毒实验室检测方面尚存在检测策略不明确、检测程序不标准、检测结果解释不规范等问题。
临床实验室检测中存在大量的假阳性、假阴性结果。
鉴于此，为加强全国丙型肝炎检测工作，提高实验室检测质量，急需制订关于丙型肝炎病毒实验室检测的技术规范。
受卫生部委托，中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心于2008年10月25日在北京召开了首次《丙型肝炎病毒实验室检测技术规范》（以下简称《规范》）编写组工作会议。
卫生部及中国疾病预防控制中心的有关领导从全国丙型肝炎防控管理角度，为《规范》编写内容提出了几点要求：1．《规范》内容要考虑为公共卫生服务，要考虑到基层的具体情况。
《规范》制订的标准要有实用性及可操作性。
2．《规范》内容要有发展的眼光，要考虑经济发展和技术进步。
《规范》内容要有一定的前瞻性，要有较长的使用寿命。
3．《规范》内容要有大局观念，要考虑有利于各系统的发展。
《规范》编写要借鉴国外经验、立足国内具体情况。
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检验项目标准操作规程LIAISON 丙型肝炎病毒抗体
（HCV Ab）
(化学发光法，CLIA)
类别信息
用途LIAISON® XL murex丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒（化学发光法）采用化学发光免疫检测（CLIA）技术，定性检测人血清或血浆样本中的丙型肝炎病毒特异性抗体
（anti-HCV）。
临床意义丙型肝炎病毒（HCV）于1988年被发现，是非甲非乙（NANB）肝炎的主要病因，占输血后肝炎的80-90%。
HCV是一种单股正链RNA病毒，分布于全球。
感染HCV的患者可能最初会经历轻微症状或无症状的急性期，但是，超过80%的感
染者都会发展成慢性肝炎，长期会发展成肝硬化并增加肝细胞癌的患病风险。
HCV主要通过非肠道传播，比如输血、血液透析和静脉注射毒品。
HCV抗体不仅存
在于急性或慢性丙型肝炎患者体内，许多无症状的献血者中血清转换后也存在。
HCV抗体筛查可以防止丙型肝炎感染的传播，虽然存在HCV抗体并不能诊断丙型肝
炎。
此免疫试剂盒使用HCV多肽，可以识别HCV抗体。
多肽含HCV结构区和非结构区的
抗原决定簇。
样本信息样本类型样本管/抗凝剂最小样本量
血清25 µL 标本+ 150 µL 死体积
血浆∙柠檬酸盐
∙EDTA
∙肝素
∙草酸钾
∙ACD
∙CPDA
标本保存样本在收集后7天内检测，可保存在2-8°C 条件下; 否则，标本需要分包装冷冻保存(–20°C 或更低)。
如果标本冷冻保存，使用前需要解冻并混匀。
标本的特定要求∙含有颗粒物质、浑浊、脂血或红细胞残片的样本使用前需要过滤或离心。
∙严重溶血或脂血样本以及含有。
颗粒物质或明显微生物污染的样本不能用于检
测。
∙检测前检查并去除泡沫。
方法学丙型肝炎病毒（HCV）IgG抗体定性检测试剂盒采用间接化学发光免疫分析法（CLIA）。
试剂 1. LIAISON® 丙型肝炎病毒抗体测定试剂盒
2. 1.1 磁微粒：(2.5mL) 包被有HCV核心和NS4重组抗原（分别来源于杆状病毒
和大肠杆菌），链霉亲和素包被的磁微粒，BSA，PBS缓冲液，EDTA，防腐剂。
3. 1.2 校准品：(3.9 mL ) 含有低水平抗HCV抗体的稀释的抗血清，BSA，PBS缓
冲液，EDTA，0.2%ProClin®300，一种黄色惰性染料。
校准品的浓度溯源至一内部
参考品。
4. 1.3 样本稀释液：(18.5 mL ) BSA，酪蛋白，非特异性重组蛋白（来源于大肠杆
菌），磷酸盐缓冲液，EDTA，防腐剂，一种蓝色惰性染料。
5. 1.4 结合物:(13 mL ) 抗人IgG小鼠单克隆抗体与异鲁米诺衍生物的结合物，胎
小牛血清，磷酸盐缓冲液，0.2%ProClin® 300，防腐剂，一种红色惰性染料。
6. 试剂盒储存条件
2.1试剂盒必须竖直放置以利于磁微粒的重新悬浮。
不能冷冻保存。
过效期的试剂盒
不能再使用。
2.2 当试剂盒处于密封和竖直放置的储藏条件下，能够在2-8°C 条件下稳定至效期。
2.3 打开密封膜后，试剂盒可在2-8°C 条件下或仪器试剂区中稳定储藏4周。
2.4 使用与LIAISON® XL分析仪同时提供的储存架来储存试剂盒，使其竖直向上放
置。
7. 试剂有效期
试剂盒的有效期为15 个月。
定标 1. 试剂盒中校准品可使分析仪设定本项目的阈值。
2. 如果出现以下的情况需要重新定标，每次定标需要做3份重复测试:
∙使用新批号的试剂盒或启动试剂。
∙分析仪经过维护。
∙每次使用新的试剂盒。
∙质控结果超出期望范围值。
质量控制监测试剂性能时，应对LIAISON® XL质控品各检测一次。
必须通过检测LIAISON® XL murex丙型肝炎病毒抗体质控品来进行质量控制。
（a）使用当天在检测前至少运行一次，
（b）使用新的试剂盒时，
（c）对试剂盒进行校准后，
（d）使用新批号的启动试剂时，
（e）使用新的NS3试剂时，或根据当地法规或公认组织的指导或要求进行时。
质控值必须在预期范围内：当一个质控品或两个质控品检测值都超出预期范围时，
需要重新进行校准并对质控品重新进行检测。
如果校准成功后，质控值仍然超出规
定范围，则应使用未开封的质控品重新检测。
如果质控值超出规定范围，则不能报
告患者结果。
使用其他质控品前，应先评估质控品与本试剂盒的兼容性。
然后建立合适的质控范
围。
检测程序 1. 试剂盒的准备
1.1 装载试剂盒至试剂区:在打开试剂盒中各组分的封口膜前，水平轻摇试剂
盒，避免产生泡沫。
打开各组分的封口膜并转动磁微粒组分底部的齿轮直到悬浮液变
为褐色。
该步骤可使磁微粒重新悬浮。
然后，使试剂盒上的条形码面向左侧将试剂盒
滑入分析仪中的试剂区，使用前需在分析仪中放置30分钟。
分析仪可自动搅动使磁
微粒充分悬浮。
根据分析仪操作手册的规定装载标本并开始检测。
1.2 HCV NS3 抗原:丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒（化学发光法）提供的NS3 抗
原为冻干粉。
此试剂具有批特异性，必须与批号相匹配的试剂盒一起使用。
LIAISON® XL 分析仪会自动检查试剂盒与NS3 之间批号的匹配性。
此试剂可以进行
100 次检测。
即使属于相同批号，不能混合不同试剂瓶中的NS3 抗原。
–用3.5 mL 缓冲液K 复溶。
–盖上瓶盖，轻轻混匀。
避免产生泡沫。
–将试剂瓶在18-25°C 静置10-15 分钟，使其完全溶解。
–使用前，将复溶后的抗原溶液装载到仪器的辅助试剂区域。
使用后，盖上瓶盖并
于2-8°C 储存。
–开瓶并复溶后，储存于2-8°C 试剂可在4 周内保持稳定。
2. 必要时申请定标
3. 加载样本
4. 申请检测
5. 按下START检测
检验方法的局限性要得到准确可靠的结果，必须严格地遵照操作手册使用熟练操作仪器。
细菌污染或热灭活样本可能会影响检测结果。
此试剂仅适用于单个样本的检测，不能用于检测稀释样本、混合样本或热灭活本。
HCV抗体阴性的检测结果不能排除暴露于或感染HCV的可能性。
事实上，个体的抗体水平可能低于本试剂的检测限。
感染性疾病的诊断不能仅依赖单次检测结果，而应与临床表现和其他诊断程序以及医学诊断联合诊断。
丙型肝炎及其相关临床情形的鉴别诊断检查应包括患者的免疫状态和病史。
接受维生素H（生物素）治疗的患者样本可能会干扰生物素化试剂的免疫检测。
分析特异性分析特异性可定义为样本基质中存在潜在干扰因素（例如，抗凝剂、溶血、样本处理的影响）或交叉反应抗体时，试剂盒准确检测出特定分析物的能力。
∙干扰：针对潜在干扰物或条件的研究表明，本项目性能不受抗凝剂（柠檬酸钠、
EDTA钾、肝素锂和肝素钠、草酸钾、ACD、CPDA）、溶血（高达1000 mg/dL的血
红蛋白）、脂血（高达3000 mg/dL的甘油三酯）、胆红素血（高达20 mg/dL胆红
素）、高达10 ng/mL维生素H的血清或有限次数的样本冻融循环的影响。
在25份新鲜
收集样本的比较研究中，使用同一天采集的新鲜阳性样本对结果没有影响。
∙交叉反应：LIAISON® XL murex丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒交叉反应的研究旨在
评估其他可能引起感染性疾病的抗体（EBV、hCMV、风疹病毒、细小病毒B19、刚
地弓形虫、梅毒螺旋体、包柔氏螺旋体、HSV、VZV、HAV、HBV、HIV、HTLV-
I/II）和导致非典型免疫系统活动（抗核自身抗体、类风湿因子、人抗小鼠抗体）的其
他情形的潜在干扰。
此研究中的样本已预先通过另一种商业HCV抗体试剂筛查。
HCV
抗体阴性样本用于潜在的交叉反应研究。
样本中的交叉反应物使用已获得CE认证的
试剂盒检测。
潜在交叉反应样本的特异性与普通群体样本的特异性具有可比性。
结果单位不适用
检测结果说明信号值与cut-off（S/CO）的比值小于1.00的样本，其HCV抗体呈阴性。
信号值与cut-off（S/CO）的比值大于等于1.00的样本，其HCV抗体呈阳性。
参考文献《LIAISON XL分析仪用户手册》
丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒（化学发光法）说明书。