高效液相色谱法测定龙胆中龙胆苦苷的含量_刘少文
高效液相色谱法测定中药龙胆酊中龙胆苦苷的含量
高效液相色谱法测定中药龙胆酊中龙胆苦苷的含量栾庆祥; 金晓峰; 黄鑫; 杨强; 钱莘莘【期刊名称】《《安徽农业科学》》【年(卷),期】2019(047)005【总页数】3页(P196-198)【关键词】高效液相色谱法; 龙胆酊; 龙胆苦苷; 含量测定【作者】栾庆祥; 金晓峰; 黄鑫; 杨强; 钱莘莘【作者单位】贵州省兽药饲料监察所贵州贵阳550003【正文语种】中文【中图分类】R284龙胆为龙胆科植物条叶龙胆、龙胆、三花龙胆或滇龙胆的干燥根和根茎，是我国传统药材之一，具有清热燥湿、泻肝胆火的功效[1]。
近年来，随着现代中药的发展，从龙胆中发现的化学成分已多达60余种，其多种成分具有一定的药理活性作用[2-4]，研究表明龙胆苦苷为其主要活性成分，具有保肝、利胆、健胃、抗炎、抗菌等活性[5-8]，是评价龙胆质量标准的首要指标[9]，并且在《中国兽药典》2015年版中，龙胆苦苷作为中药龙胆和其制剂龙胆泻肝散质量标准控制的目标成分[10]。
龙胆酊是龙胆经加工制成的酊剂，具有健胃的功效，用于治疗家畜食欲不振[11]。
《中国兽药典》2015年版收载了该药，但对该药主要活性成分龙胆苦苷含量测定的方法没有收载，为了弥补该标准的这一欠缺，笔者对中药龙胆酊主要活性成分龙胆苦苷的含量测定进行方法研究，建立中药龙胆酊中龙胆苦苷的含量测定方法，以期为完善中药龙胆酊的质量标准提供方法和依据。
1 材料与方法1.1 仪器 Agilent 1260高效液相色谱仪，配四元泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器等(美国Agilent公司)；Waters 2695高效液相色谱仪，配四元泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器等(美国Waters公司)；ZORBAX SB-C18(4.6 mm× 250 mm，5 μm)色谱柱和XDB-C18(4.6 mm× 250 mm，5 μm)色谱柱(美国Agilent公司)；XS105型和ME802E型电子天平(瑞士Mettler公司)；KQ-500DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
高效液相色谱法测定苦胆草片中龙胆苦甙的含量
高效液相色谱法测定苦胆草片中龙胆苦甙的含量
杨文刚;薛满
【期刊名称】《南京中医药大学学报》
【年(卷),期】1999(000)003
【摘要】苦胆草片具有清热燥湿、泻火的功效，是用于治疗目赤口燥、咽喉肿痛
的常用中成药，该药以坚龙胆为主要原料制成。
龙胆苦甙是坚龙胆的主要活性成分。
本文以反相高效液相色谱法，对其中龙胆苦甙的含量进行测定，以此为苦胆草片的质量控制提供实验数据。
１仪器与试药１．１仪...
【总页数】1页(P176)
【作者】杨文刚;薛满
【作者单位】江苏省苏州市药品检验所;江苏省苏州市药品检验所
【正文语种】中文
【中图分类】R28
【相关文献】
1.HPLC法测定苦胆草片中龙胆苦苷的含量 [J], 臧红梅;张慧峰
2.高效液相色谱法测定苦胆草片中龙胆苦苷的含量 [J], 王发义;陈关祥
3.薄层色谱扫描法测定龙胆和苦胆草片中龙胆苦甙的含量 [J], 饶高雄;李倩然;高运玲;阮志国;杨树德
4.RP-HPLC法测定苦胆草片中龙胆苦苷的含量 [J], 王安虎
5.高效液相色谱法测定苦胆草胶囊中龙胆苦苷的含量 [J], 李虹
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高效液相色谱法测定龙胆泻肝汤颗粒中龙胆苦苷含量
高效液相色谱法测定龙胆泻肝汤颗粒中龙胆苦苷含量许仲;叶胜体;张妥【摘要】Objective To establish a HPLC method for determining the gentiopicroside content in Longdanxuegan Granules. Methods The Diamonsil Cis column(250 mm×4. 6 mm, 5μm) was used with CH3OH -H2O(21 : 79) as the mobile phase. The UV detection wavelength was 270 nm,at the flow rate of 1.0 mL/min and the column temperature was 40℃. Results Gentiopicroside in the concentration range of 20.42-61.26μg showed the good linear relationship (r = 0. 996 9), the average recovery rate was 98.17% , RSD was 0.6% (n = 6). Conclusion This method is simple, accurate with good reproducibility and can be used for the quality control of Longdanxiegan Granules.%目的建立测定龙胆泻肝汤颗粒中龙胆苦苷含量的高效液相色谱法.方法采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5 μm),以甲醇-水(21:79)为流动相,检测波长为270 mm,流速为1.0 mL/min,柱温为40℃.结果龙胆苦苷选样量在20.42～61.26μg范围内与峰面积有良好的线性关系(r=0.996 9),平均回收率为98.17%,RSD为0.6%(n=6).结论该方法简便、准确、重复性好,可用于龙胆泻肝汤颗粒制荆的质量控制.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2012(021)008【总页数】2页(P54-55)【关键词】龙胆泻肝汤颗粒;龙胆苦苷;高效液相色谱法【作者】许仲;叶胜体;张妥【作者单位】广东省阳江市药品检验所,广东阳江,529500;广东省阳江市药品检验所,广东阳江,529500;广东省阳江市中医医院,广东阳江,529500【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R286.0龙胆泻肝汤颗粒是广东省阳江市中医医院自拟处方制成的中成药制剂，具有清热解毒、泻肝经实火、清利肝胆湿热的功效，主治头晕止赤、肋痛口苦、尿赤涩痛、湿热带下等诸症。
HPLC法测定骨刺消痛胶囊中龙胆苦苷的含量
确 ， 法专属性 强 ， 密度 高 ， 方 精 重复性好 ， 用 于骨刺 消痛胶 囊 的质 量控 制 。 可
主 题 词 龙 胆 苦 苷 ／ 学 色 谱 法 ， 压 液 相 ＠ 骨 刺 消 痛 胶 囊 化 高 【 图分 类 号 】 Ｒ９ ７ ２ 【 献 标 识 码 】 Ａ 中 ２ ． 文 【 章 编 号 】 １ ０ － ３ ９ ２ １ ） １０ ９ —２ 文 ０ ０７ ６ （ ０ ０ ０ — ０ ６０
２ 方 法 和 结 果
２ １ 溶 液 的 பைடு நூலகம் 备 ．
骨刺 消痛胶囊 主要 由制 川乌 、 草乌 、 艽 、 制 秦 白芷 、 甘草 、 萆薜 、 山龙 、 苡仁 、 南 星、 花 、 粉 穿 薏 天 红 当归 、 徐 长卿等 十二 味药 组成 ， 主要 功效为祛 风止痛 。 于骨质 用 增生 、 风湿性关 节炎 、 风湿痛 等症 。 目前骨 刺消痛 胶囊
色 谱 柱 （． ｍｍ ×２ ０ ４６ ５ ｍｍ ，５ ｍ） 以 乙腈 一０ ３ 乙酸 溶 液 （ ０ ９ ） 流 动 相 ； 速 ：． ， ． １ ：０ 为 流 １０
ｍＬ・ ｎ ； ｍｉ～ 柱温 ： ５ 检测 波长 ：５ ｎ 结果 ： 胆苦苷进 样 量在 ０ ３ ～１ ４ ３ Ｃ； ２ ０ ｍ。 龙 ． ６ ． ６ ｇ范围 内 与峰 面积 线性 关 系良好 （ ｒ一 ０ ９ ９ ） ． ９ ６ 。骨刺 消痛胶 囊 中龙胆 苦 苷的平 均 回收率 ９ ． 。 ９７
下 ， 照 品 、 品 及 阴 性 样 品 分 离 的 色 谱 图 见 图 １ 对 样 。
HPLC法测定龙胆草中龙胆苦苷的含量
HPLC法测定龙胆草中龙胆苦苷的含量【关键词】龙胆草龙胆苦苷含量测定龙胆草系习用药材,其来源为龙胆科龙胆属植物头花龙胆Gentiana cephalantha Franch的干燥全草。
主产于四川、云南、贵州等。
用于湿热黄疸,阴肿阴痒,带下,湿疹瘙痒,目赤,耳聋,肋痛,口苦,惊风抽搐等。
龙胆草主要含龙胆苦甙和当药苦甙[1]。
由于该药品未做过含量测定。
笔者采用HPLC法对龙胆草中所含龙胆苦苷进行了含量测定。
1 仪器与试药仪器:waters515泵、2478检测器。
试剂:甲醇为色谱纯,水为超纯水,其余试剂均为分析纯。
对照品:龙胆苦苷对照品(中国生物制品检定所供,含量为99.1%)。
样品:龙胆草(共4批)所用样品粉末均过三号筛。
色谱柱:①PhenomenexC18 250×4.5mm 5μm;②Hanbon Lichrospher C18 250×4.5mm 5μm;③Waters Syrnmetry C18 250×4.5mm 5μm;④Waters Symmetry C18 150×4.5mm 5μm。
2 实验部分2.1 测定波长的选择以甲醇作溶剂制备的龙胆苦苷对照品溶液,在200～400nm波长下进行扫描,结果在270nm处有最大吸收,与参考文献一致[2],故测定波长选定为270nm。
2.2 流动相的选择以甲醇-水(33:67)为流动相对本品供试品溶液进行系统适应性考察,结果在该流动相下,龙胆琶:苷峰形,理论板数,分离度符合要求。
故选用甲醇—水(33:67)作为测定流动相。
2.3 提取溶剂的考察取本品粉末约0.5 g,共4分,精密称定,分别精密加入表1中各提取溶剂50 mL,超声处理30min。
滤过,取续滤液。
进样量10μL,按上述选定的色谱条件进行实验,结果见表1。
2.4 提取方法及时间的考察取本品粉末0.2 g,共7份,精密称定,精密加入甲醇50 mL,浸渍12 h。
HPLC法测定白龙散中龙胆苦苷和小檗碱的含量
Ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｇｅ ｎ ｔ ｉ ｏ ｐ ｉ ｃ ｒ ｏ ｓ ｉ ｄ ｅ ａ ｎ ｄ Ｂ ｅ ｒ ｂ ｅ ｒ ｉ ｎ ｅ ｉ ｎ Ｂ ａ ｉ ｌ ｏ ｎ ｇ Ｓ ａ ｎ ｂ ｙ ＨＰ ＬＣ
Ｂ Ａ Ｏ Ａ ｉ － ｑ ｉ ｎ ｇ， Ｚ ＨＵ Ｃ ｏ ｎ ｇ — ｙ ｉ ｎ ｇ， Ｌ Ｕ Ｃ ｈ ｕ ｎ － ｂ ｏ， Ｌ Ｉ Ｎ Ｘ ｉ ａ ｎ － ｊ ｕ ｎ
２ ６ ｍ ｇ ／ ｍＬ（ ｒ ：１ ． ０ ０ ００ ） ，ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ａ ｖ ｅ ｒ ａ ｇ ｅ ｒ ｅ ｃ ｏ ｖ ｅ ｒ ｙ ｗ ａ ｓ ９ ８ ． ６ ３ ％ ａ ｎ ｄ ９ ７ ． ７ ８ ％ ｗ ｉ ｔ ｈ Ｒ Ｓ Ｄ ％ ｏ ｆ． ９ ６ ％ ａ ｎ ｄ １ ． ２ ３ ％， ｒ ｅ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｌ ｙ ．
Ｔ ｈ ｉ ｓ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｗ ａ ｓ ｃ ｏ ｎ ｖ ｅ ｎ ｉ ｅ ｎ ｔ ，ａ ｃ ｃ ｕ ｒ ａ ｔ ｅ ｎｄ ａ ｒ ｅ ｌ ｉ ａ ｂ ｌ ｅ ｏｒ ｆ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｍｉ ｒ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｇ ｅ ｎ ｔ ｉ ｏ ｐ ｉ ｅ ｒ ｏ ｓ ｉ ｄ ｅ ａ ｎ ｄ ｂ ｅ ｒ ｂ ｅ ｒ ｉ ｎ ｅ ｉ ｎ Ｂ ￣ｌ ｏ ｎ ｇ Ｓ ａ ｎ．
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｔ ｏ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ａ ＨＰ Ｌ Ｃ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｇ ｅ ｎ ｔ ｉ ｏ ｐ ｉ ｃ ｒ ｏ ｓ ｉ ｄ ｅ ａ ｎ ｄ ｂ ｅ ｒ ｂ ｅ ｒ ｉ ｎ ｅ ｉ ｎ Ｂａ ｉ ｌ ｏ ｎ ｇ Ｓ ａ ｎ，ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｗ ａ ｓ ｐ ｅ ｒ —
【推荐下载】高效液相色谱法测定龙胆花中4种活性成分含量
101.0%(RSD=1.1%,n=5)and99.7%(RSD=3.6%,n=5,)，respectively.ConclusionThe
method is rapid and precise .
【关键词】反相高效液相色谱落干酸獐牙菜苦苷龙胆苦苷獐牙菜苷龙胆花
Abstract：ObjectiveToestablishaquantitativemethodofsimultaneousdeterminationof
loganicacid,swertiamarin,gentiopicrosideandswerosideinGentianaveitchiorumHemslby
热咳嗽、胃炎、脑膜炎、尿道炎、气管炎、阴痒及阴囊湿疹、天花等[1]。
2
[键入文字]
龙胆花主要含有裂环环烯醚萜苷类活性成分，如落干酸(loganicacid)、獐牙菜苦苷
(swertiamarin)、龙胆苦苷(gentiopicroside)和獐牙菜苷(sweroside)等[2]。龙胆花常作为藏
成药的君药或臣药，如龙胆花丸、十五味龙胆丸、三味龙胆丸等，对龙胆花及制剂中
分析纯，水为自制三重蒸馏水。
龙胆花2007-08采于青海省果洛州玛沁县，由青海普兰特藏药研究所孙洪发研究员
鉴定，阴干后粉碎过80目筛，冷藏保存。
3
[键入文字]
2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱为ZORBAXSB-C18(250mm4.6mm,5流动相为甲醇∶水(含0.04%磷酸)为
15∶85;流速1mlmin-1;检测波长238nm;柱温30℃。该色谱条件下落干酸、獐牙菜苦
高效液相色谱法测定藏药三味龙胆花丸中龙胆苦苷含量
本 法 简便 、 确 、 准 重现 性好 ， 用于 三味 龙胆 花 丸 中龙 胆 苦 苷 的含 适
关键词 三味 龙胆花 九 龙 胆苦苷 高效液相 色谱 法
中图分 类号 Ｒ ９ ２
文 献标识码
Ａ
ＤＥＴＥＲＭ Ｉ ＮＡＴＩ ｏＮ ｏＦ ＧＥＮＴＩ ｏＰＩ ＣＲＩ Ｉ Ｎ Ｎ
张巍云
（青海省 中医院 ） 摘 要 目的 测 定藏 药 三味 龙胆 花 丸 中龙胆 苦 苷 含 量 。 方 法 采 用 高效 液 相 色谱 法测
定龙胆 苦 苷 的含 量 。 结 果 龙 胆苦 苷在 ０ ２ ２～１ ８ ６ ｇ范 围 内线性 关 系 良好 ， 均 回 收 率 为 ．３ ．５ 平 ９ ． ％ 、 Ｓ 为 １ ５ 。结论 ７７ Ｒ Ｄ ．％
ＴＨＲＥＥ — Ｓ ＰＥＣｍ Ｓ ＧＥＮＴ Ｎ ＦＬｏＷ ＥＲ ＬＬ ＰＩ ＢＹ ＨＰＬＣ
Ｚｈ ｎ ｅｙ ｎ ａ ｇ Ｗ ｉｕ
（ ｏｐｔ ｆ ｒｄｔ ｎ ｈ ｅｅＭｅ ｉ ｎ ｆ ｉ ｈｉ ｒｖ ｃ ） Ｈ ｓｉ ｌ ａｉｏａ Ｃ ｉ ｓ ｄｃ ｅｏ ｎ ａ ｐｏｉ ｅ ａｏＴ ｉｌ ｎ ｉ Ｑ ｇ ｎ
１１ 仪 器 ： ｔｒ 效 液相 色谱 仪 ； ｔｒ ０ Ｅ泵 ； ． Ｗａ 高 ｅ Ｗａ ０ ｅ６ ４ １紫外 检测 器 ； ｎ ｔ 色 谱 工 作 站 ； 声 波 振 荡 ４ Ａ ａａ ｓ ｒ 超
张巍云（９９～） 女 ， １６ ， 汉族 ， 青海籍 ， 副主任药师
６１
Ｎ 理论塔 板 数 ， 龙 胆 苦苷 峰 计 算 理 论 塔 板 数 不 ｍ； 按 低 于 ２０ 。 ５ ０ ２ ２ 对照 品溶液 的制备 ： ． 精密 称取龙 胆苦 苷对 照 品 ｌ ． ｇ 置 １ ｏ ｍ 容 量 瓶 中， 甲醇 稀 释 至 刻 度 ， １ ６ｍ ， ０ ｌ 加
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2
0.664 1 1.236 5 1.1246 2.312 4 99.15 99.28 1.01
4
0.658 2 1.210 9 1.1246 2.281 0 99.09
5
0.661 0 1.230 1 1.1246 2.301 2 99.07
2.9 稳定性考察 取相同的供试品溶液 5.0 μl，，分别在 0、4、8、12、24、36、
该方法的重现性、精密度以及分离度均符合规定，并且 测定方法稳定，经过对样品检测数据的反复考察结果，确定 了高效液相色谱法用于中药龙胆中有效成分龙胆苦苷含量 测 定 的 可 行 性 ，具 有 可 应 用 性 [9]。
[参考文献]
[1] 李馨,王金宏,金迪,等.HPLC 法测定龙胆中龙胆苦苷的含量[J].黑龙江 医 药 ,2010,23(3):319-321.
[4] 国家药典委员会.中国药典[M].部.北京:化学工业出版社,2005:64. [5] 王臣,邢秀芳,马力祥,等.栽培条叶龙胆各形态类型龙胆苦苷含量的测
定[J]. 中 国 中 药 杂 志,2004,29(9):841. [6] 黄 铭 涛,许 波,田 颂 九.HPLC 法 测 定 肝 胃 气 痛 胶 囊 中 龙 胆 苦 苷 的 含 量
48 h 后注入高效液相色谱仪中，测得其龙胆苦苷的峰面积的 RSD=0.96%，结果表明，48 h 内龙胆苦苷样品的稳定性良好。 2.10 样品含量的测定
分别取 10 批龙胆苦苷药材粉末各 0.5 g， 精密称定后， 按照上述样品溶液的制备方法制备供试品溶液，按照选取的 色谱条件测定 10 批龙胆药材中龙胆苦苷的含量， 测定结果 见表 2。 3 结论
2011 年 1 月第 18 卷第 3 期
论著
高效液相色谱法测定龙胆中龙胆苦苷的含量
刘少文 （广东省佛山市中医院，广东佛山 528000）
[摘要] 目的：建立龙胆中龙胆苦苷的高效液相色谱测定方法 。 方法：采用 HPLC 法，其 中色 谱 柱 为 Techpshere ODS
C18（250×4.6 mm，5 μm）,（流动相：甲醇:水＝25:75），流速：1.0 ml/L；检测波长：270 nm；进样量为 5.0 μl，柱温为室温。
实验过程中对文献报道的流动相的比例选择作了反复 的 试 验[2]，当 采 用 甲 醇∶水=25∶75 时 ，龙 胆 苦 苷 与 其 干 扰 峰 可
样品编号 1
表 2 10 批龙胆药材中龙胆苦苷的含量测定结果
取样量
峰面积
龙胆苦苷含量 龙胆苦苷含量
（g）
（mAU/s）
（mg）
（%）
0.5
178 9
13.3
Agrilent 1100 高效液相色谱仪，紫外光谱检测器，Agilent 1100 色谱工作站，C18 色谱柱（Techpshere ODS C18，250×4.6 mm， 5 μm），Agrilent 进样瓶，分析天平（美国梅 特 勒 有 限 公 司 ，精 密度 0.001）。 1.2 试剂
甲醇（北京北化精细化学有限责任公司，批号20081116，分 析纯），甲醇（北京北化精细化学有限责任公司，批号20081201， 色 谱 纯 ），水 （娃 哈 哈 纯 净 水 ），龙 胆 苦 苷 对 照 片 （中 国 药 品 生 物制品检定所，批号 20071203），10 批龙胆药材（分别各粉碎 后过 5 号筛，后置 50℃的干燥烘箱中干燥至恒重）。
[J]. 中 国 药 事 ,2007,21(9):731. [7] 李 虹.高 效 液 相 色 谱 法 测 定 苦 胆 草 胶 囊 中 龙 胆 苦 苷 的 含 量[J].时 珍 国
龙胆为龙胆科植物以及中药材龙胆的统称。 植物龙胆 在中国大陆、俄罗斯、日本、朝鲜等均有分布，生长于海拔 400～1 700 米的地区。 中国有龙胆属 240 多 种 ，多 产 于 西 南 高山地区，北京周边只有少数的几种，龙胆更是重要的药用 植物，其根和根茎入药具有清热、泻肝、定惊等功效。 《中华 人 民 共 和 国 药 典 》2005 版 记 录 ，龙 胆 的 干 燥 根 及 根 茎 ，具 有 清热燥湿、泻肝胆火之功效，龙胆的药用历史悠久，历代本 草 均 有 记 载 ，是 常 用 的 苦 寒 健 胃 保 肝药 物[1]。 研 究 表 明 龙 胆 苦苷为其主要的活性成分，具有保肝、利胆、健胃、抗炎以及 抗菌等功效，因此，为了更好的控制药品的质量，笔者采用 高效液相色谱法测定龙胆中龙胆苦苷的含量， 以期为该药 材有效成分的含量测定提供更好的鉴定方法， 现将结果报 道如下： 1 仪器与试剂 1.1 仪器
24.6
4.92
以完全分开。 本实验还对超声时间作了对比 ，分别采用 20、 30、40 min 对龙胆苦苷的提取率进行比较，结果，采用超声时 间为 30 min 时的提取率与 40 min 的提取率相同， 因此实验 确定了超声提取时间为 30 min[3]。
在选择检查波长时， 笔者取样品在 200～375 nm 的波长 范围内进行扫描， 结果在 270 nm 波长处龙胆苦苷有最大吸 收，因此实验过程中选择 270 nm 作为本次监测实验的波长。 龙胆苦苷的含量测定方法相关的文献已经有报道[4-6]。 本文建 立的高效液相色谱方法用于对中药龙胆中龙胆苦苷进行含 量测定，经对对照品和供试品的制备方法的考察、测定条件 的选择、线性关系的考察、精密度测定、重现性考察、回收率 的测定、稳定性试验等方法学的考察，确定了正确的含量测 定 方 法 [7-8]。
采 用 Techpshere ODS C18(250×4.6 mm，5 μm)，流 动 相 ： 甲醇∶水＝25∶75，流速：1.0 ml/min，检测波长：270 nm，室温，进 样量为 5.0 μl。 采用上述色谱条件的分离度均大于 1.5，理论 塔板数以龙胆苦苷计算≥8 000。 2.4 空白对照实验
CHINA MODERN MEDICINE 中国当代医药 11
论著
2011 年 1 月第 18 卷第 3 期
线性关系良好。 结果见图 1。
图 1 样品中龙胆苦苷色谱图（2 号为龙胆苦苷）
2.6 精密度考察 精 密 吸 取 对 照 品 溶 液 5.0 μl，重 复 进 样 6 次 ，从 而 测 定
龙胆苦干的平均峰面积为 2 356.589 7，RSD=0.96%， 显示进 样的精密度良好。 2.7 重现性考察
表 1 样品回收率测定结果
取样量 样品中龙胆苦 对照片加 测定量 回收 平均回收 RSD 样品编号
（g） 苷含量（mg） 入量（mg） （mg） 率（%） 率（%） （%）
1
0.654 8 1.203 5 1.1246 2.251 4 99.04
2
0.657 9 1.212 0 1.1246 2.245 6 99.10
[2] 郜尽,孙文基,冯英菊,等.反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中龙胆苦 苷 的 含 量 [J]. 陕 西 中 医 学 院 学 报 ,2002,25(3):58-59.
[3] 聂中越,程淑娟.HPLC 法测定龙胆复方制剂中龙胆苦苷的实验研究[J]. 深 圳 中 西 医 结 合 杂 志 ,2002,12(3):174-175.
2 色谱条件与结果 2.1 对照品溶液的制备
精密称取龙胆苦苷标准品 10.0 mg，加甲醇定容至 25 ml 容量瓶中，作为对照品溶液，储存备用。 2.2 供试品溶液的制备
精密称取粉碎后过筛的 10 批龙胆苦苷药材粉末各 2.5 g， 分别加入甲醇 25 ml，置超声过滤器中 ，超 声 30 min，冷 却 后 过滤，移液管各移取续滤液 1 ml 置 5 ml 容量瓶中，分别用甲 醇定容至刻度，作为供试品备用。 2.3 色谱条件的选择
[关键词] 高效液相色谱法；龙胆；龙胆苦苷；含量测定
[中图分类号] R927.2
[文献标识码] A
[文章编号] 1674-4721（2011）01（c）-011－02
Determination of Gentiopicrin in Gentian by HPLC
LIU Shaowen （Traditional Chinese Medicine Hospital of Foshan City, Guangdong Province, Foshan 528000, China ） [Abstract] Objective: To establish a HPLC method for the Gentiopicroside gentian chromatographic. Methods: Used HPLC method, in which column was Techpshere ODS C18(250×4.6 mm, 5 μm), (mobile phase:methanol:water＝25:75), flow rate: 1.0 ml/L; detection wavelength:270 nm; injection volume: 5.0 μl, Nm. Results: Gentiopicrin 0.2～1.0 mg/ml good linear relationship between the linear regression equation was Y＝304.95X-17.886,r＝0.9997; measured gentian recovery Gentiopicroside was 99.12%, RSD was 1.01%. Conclusion: The method is simple, and good separation, detection sensitivity, reproducibility, and can be used to determine the content of gentian gentiopicroside detection method. [Key words] HPLC; Gentian; Gentiopicrin;Content determination