龙胆苦苷
宁夏六盘山产地秦艽龙胆苦苷提取工艺
宁夏六盘山产地秦艽龙胆苦苷提取工艺【摘要】目的优选秦艽的最佳提取工艺。
方法采用正交试验法，以提取物中的龙胆苦苷为考察指标，对影响龙胆苦苷提取工艺的因素进行了研究。
结果龙胆苦苷的最佳提取工艺为 50%乙醇，8倍量，回流提取3次，每次1h。
结论该工艺下的秦艽龙胆苦苷含量提取可达6.3%。
【关键词】正交试验; 秦艽; 龙胆苦苷; 提取工艺秦艽为龙胆科植物秦艽(Gentianna macrophylla Pall)、麻花秦艽(G.straminea Maxim) 、粗茎秦艽(G.crassicaulis Duthieex Burk) 或小秦艽(G. dahurica Fisch)的干燥根[1]，是我国重要的传统中药，具有祛风湿，清湿热，止痹痛的作用，用于风湿痹痛，筋脉拘挛，骨节酸痛，日哺潮热，小儿疳积发热等，主产于陕西、甘肃、宁夏、四川、内蒙古，陕西、甘肃两省是其地道产区[2]。
秦艽主要含有裂环环烯醚萜苷类、生物碱、甾醇苷类等[3]。
龙胆苦苷属于裂环环烯醚萜苷类，是秦艽的主要活性成分。
本次实验根据回流提取方法，就秦艽龙胆苦苷在提取溶剂浓度、溶剂用量、提取时间、提取次数四方面进行四因素三水平的正交设计并通过HPLC对提取物中龙胆苦苷进行含量测定，来确定中药材秦艽中龙胆苦苷的最佳提取工艺。
1 仪器及试药1.1 仪器 LC-20AT高效液相色谱仪(日本岛津)、F W135型中药材粉碎机(天津泰斯特仪器有限公司)、210电子分析天平(日本岛津)、RE-52A真空旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)、HH.SYII-NiZ-C电热恒温水浴锅(北京长源实验设备厂)、SHB-III循环式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)、WFO-700W送风定温干燥箱(上海爱郎仪器有限公司)。
1.2 试药秦艽中药材(购自宁夏明德饮片有限公司)、龙胆苦苷标准品(购自中国药品生物制品检定所)、甲醇为色谱纯(天津市瑞金特化学品有限公司)、乙腈为色谱纯(天津福晨化学试剂厂)、无水乙醇为分析纯(天津市盛奥化学试剂有限公司)。
龙胆苦苷的药理作用及分子机制研究进展
龙胆苦苷的药理作用及分子机制研究进展李生浩１），李俊义２），武昆利３），徐晶晶１），常国楫１），王卫群４），张燕玲５），马志强６），王文林４），李树德７）（1）昆明市第三人民医院肝病综合科；2）肝病介入科；3）人力资源部，云南昆明650041；4）昆明医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系，云南昆明650500；5）昆明市第三人民医院感染性疾病科，云南昆明650041；6）昆明市第三人民医院检验科，云南昆明650041；7）昆明医科大学基础医学院分子生物学与生物化学系，云南昆明650500）［摘要］龙胆苦苷（gentiopicroside ，GPS ）是龙胆科植物中的主要活性成分，口服或静脉给药后在体内多个器官广泛分布，包括肺脏、肝脏、心脏、脑组织等，具有抑制炎症反应、抗氧化应激、抗纤维化、抗细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖等多种药理作用，既往主要应用于抗炎保肝、健胃利胆等。
近年研究证实，在酒精性/非酒精性脂肪肝、药物性/中毒性肝损害、爆发性肝炎等多种肝脏疾病领域值得进一步开发利用。
除在肝脏相关疾病外，许多研究也显示GPS 在胃肠道疾病、胰腺疾病、肿瘤、神经精神疾病、心血管疾病、呼吸系统疾病、骨与关节疾病、抗病原微生物等方面也有很大的应用潜力。
［关键词］龙胆苦苷、药理作用、分子机制［中图分类号］R34；R963［文献标志码］A ［文章编号］2095－610X （2020）01－0158－05Progress in the Pharmacological Action and Molecular Mechanism of GentiopicrosideLI Sheng-hao １），LI Jun-yi ２），WU Kun-li ３），XU Jing-jing １），CHANG Guo-ji １），WANG Wei-qun ４），ZHANG Yan-ling ５），MA Zhi-qiang ６），WANG Wen-lin ４），LI Shu-de ７）（1）Dept.of Comprehensive Hepatology ，The Third People's Hospital of Kunming ，Kuming Yunnan 650041；2）Dept.ofInterventional Hepatology ，The Third People's Hospital of Kunming ，Kuming Yunnan 650041；３）Dept.of Human Resource ，The Third People's Hospital of Kunming ，Kuming Yunnan 650041；4）Dept.of Parasitology ，Kunming Medical University ，Kunming Yunnan 650500；5）Dept.of Infectious Diseases ，The Third People's Hospital of Kunming ，Kuming Yunnan 650041；6）Dept.of Clinical Lab ，The Third People's Hospital of Kunming ，Kuming Y unnan 650041；7）Dept.of Molecular Biology And Biochemistry ，KunmingMedical University ，Kunming Yunnan 650500，China ）［Abstract ］Gentiopicroside （GPS ），the main active ingredient of Gentianace which is a kind of prettypopular Chinese traditional herb drug ，will be widely distributed in human's tissue and organs （including the lungs ，liver ，heart ，brain ，etc ）as being used by oral or intravenous administration.GPS always has efficacy of anti-inflammatory ，anti-fibrosis ，anti-oxidative stress ，anti-apoptosis ，or inhibition of tumor cell proliferation.Journal of Kunming Medical UniversityCN 53-1221R［收稿日期］2019－08－01［基金项目］国家自然科学基金资助项目（81360252）；云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项基金资助项目（201801PH00065）；云南省教育厅科学研究基金资助项目（2018JS157）；云南省地方本科高校基础研究联合专项基金资助项目（2018FH001-087）；昆明市科技保障民生发展计划基金资助项目（昆科计字2019-1-S-25318000000808）［作者简介］李生浩（1983~），男，云南富源人，在读博士研究生，主治医师，主要从事肝脏病诊治工作。
龙胆苦苷的体外稳定性_陈国锋
复旦学报(医学版)Fudan U niv J M ed Sci 2008M ar ,35(2)龙胆苦苷的体外稳定性陈国锋 高东雁 张文鑫 王建新■(复旦大学药学院药剂教研室 上海 200032)【摘要】 目的 研究龙胆苦苷(G T P )在体外生物样品中的稳定性。
方法 将龙胆苦苷溶解在不同pH 的磷酸盐缓冲液、pH 1.2的盐酸溶液及大鼠胃肠黏膜匀浆、胃肠道内容物、肝组织匀浆和血浆中,37℃恒温水浴,孵育一定时间后取样,高效液相色谱法测定龙胆苦苷的浓度,考察其在不同pH 缓冲液和生物样品中的稳定性。
结果 37℃孵育48h 后,龙胆苦苷在pH 1.2的盐酸溶液、pH 6.8、7.4和8.0的磷酸盐缓冲液中的降解百分率分别为2.6%、7.9%、20.2%和34.4%。
龙胆苦苷在胃内容物、胃黏膜、小肠内容物、肠黏膜、肝组织匀浆中稳定,而在大肠内容物中12h 降解79.8%,血浆中24h 降解46.9%。
结论 G T P 在偏酸性环境中较稳定,随碱性增加稳定性显著降低;G T P 在胃、小肠、肝脏中稳定,而在血液和大肠中易降解。
【关键词】 龙胆苦苷; 生物样品; 稳定性【中图分类号】 R 284 【文献标识码】 A 上海市科委中药现代化专项项目(06DZ 19720) ■Cor responding author E -mail :jxwang @s hmu .edu .cnStability of gentiopicrin in biological fluids in vitroCH EN Guo -feng ,GAO Dong -y an ,ZH ANG Wen -xin ,WANG Jian -x in■(Department o f Pharmaceutics ,School o f Pharmacy ,Fudan University ,Shanghai 200032,China )【Abstract 】 Objective T o investigate the stabili ty of gentiopicrin (G TP )in biological fluids in vitro . Methods T otal gentian glycosides w as dissolved in phosphate buffer solutions and diluted hydro -chloric acid at different pH ,liver homogenate ,plasma ,gast rointestinal contents and mucosa homoge -nat es of rats ,t hermostatically maint ained at 37℃.A t time intervals af ter degradation ,samples were withdrawn and the concent rations of G T P w ere determined by HP LC ,from w hich stability of it at dif -ferent biological specimen was evaluated . Results Deg radation of gentiopicrin did not f ollow appar -ent first -order kinetics equation .Af ter 48h of incubation ,G TP deg raded by 2.6%,7.9%,20.2%and 34.4%respectively at pH 1.2diluted hydrochloric acid and pH 6.8,pH 7.4and pH 8.0phos -phate buffer solutions .The degradation profile of G TP in gast ric content s and mucosa homogenates ,small intestinal contents ,intestinal mucosa homogenates and liver homogenates was similar to that in the aqueous buff er .G TP w as found only 20%of it s original concent ration after 12h of incubation spiked in the large intestinal contents ,and 53%after 24h spiked in plasma . Conclusions GT P is st able in stomach ,small intestine and liver .Blood and large intestine are possible sites w here G T P might be deg raded .【Key words 】 gentiopicrin ; biological fluids ; stability 龙胆为龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshu -rica Kitag .、龙胆Gentiana scabra Bge .、三花龙胆Gentiana tri f lora pall .或坚龙胆Gentiana reges -cens Franch .的干燥根及根茎[1],为中医常用的清肝胆实火,除下焦湿热的要药。
龙胆苦苷纳米乳处方优化及其质量评价_0
龙胆苦苷纳米乳处方优化及其质量评价目的筛选处方并制备龙胆苦苷纳米乳，并对其质量进行评价。
方法根据龙胆苦苷的基本性质，基于单因素试验和伪三元相图法选择纳米乳处方，对其理化性质进行考察，采用HPLC对其含量进行评价。
结果筛选得到龙胆苦苷纳米乳制剂处方为：龙胆苦苷∶乙酸乙酯∶聚氧乙烯醚（35）蓖麻油∶无水乙醇∶水=1.77∶7.66∶5.94∶11.91∶72.71；测得龙胆苦苷纳米乳平均粒径为23.08 nm；建立了HPLC测定龙胆苦苷纳米乳中龙胆苦苷含量的方法，专属性良好，线性范围为0.004 28～0.214 mg/mL；在不同温度、光照和湿度条件下含量无明显变化，稳定性良好。
结论本研究筛选的龙胆苦苷纳米乳制备工艺简单，为提高龙胆苦苷口服生物利用度提供了依据。
關键词：龙胆苦苷；纳米乳；制备工艺；质量评价Prescription Optimization and Evaluation of Quality of Gentiopicroside NanoemulsionXIA Peng-fei1，2，3，MA Xiao4，WU Guo-tai1，5，LI Yang1，2，3，FAN Qin1，2，3，ZHAO Lei1，2，31. Gansu University of Chinese Medicine，Lanzhou 730000，China；2. Key Laboratory of Chemistry and Quality for Traditional Chinese Medicines，College of Gansu Province，Lanzhou 730000，China；3. Gansu Province Engineering Laboratory for TCM Standardization Technology and Popularization，Lanzhou 730000，China；4. Second People’s Hospital of Gansu Province，Lanzhou 730000，China；5. Key Laboratory of Pharmacology and Toxicology of TCM of Gansu Province，Lanzhou 730000，ChinaAbstract：Objective To optimize prescription of gentiopicroside nanoemulsion；To evaluate its quality and security. Methods According to the basic properties of gentiopicroside，single-factor test and pseudo-ternary phase diagram were adopted to optimize prescription of gentiopicroside nanoemulsion. The physicochemical property was investigated，and the content was evaluated by HPLC. Results Optimal prescription was obtained as gentiopicroside/ ethyl acetate/ EL-35/ absolute ethyl alcohol/ ultrapure water （1.77：7.66：5.94：11.91：72.71）；the particle size of nanoemulsion was 23.08 nm；the content of gentiopicroside was determined by HPLC；the specificity of the method was good with a linear range of 0.004 28–0.214 mg/mL；stability of prepared gentiopicroside nanoemulsion was good in the state of different temperatures，illumination intensity and humidity conditions，without significant changes. Conclusion The optimized preparation technology of gentiopicroside nanoemulsion is simple，repeatable and stable，which can provide references for improving the bioavailability of gentiopicroside.Keywords：gentiopicroside；nanoemulsion；preparation technology；quality evaluation龙胆苦苷是秦艽、龙胆等龙胆科植物的主要有效成分。
龙胆苦苷裂解规律
龙胆苦苷裂解规律《龙胆苦苷裂解规律的奇妙之旅》嘿呀，今天咱就来聊聊龙胆苦苷裂解规律这个听起来有点专业但其实超有趣的事儿！你知道吗，龙胆苦苷就像是一个藏着秘密的小盒子，而裂解规律就是打开这个盒子的钥匙。
咱就像是一群好奇的探险家，一点点地去揭开它神秘的面纱。
一开始啊，面对龙胆苦苷裂解规律，感觉就像是进入了一个陌生的森林，有点迷茫，有点不知所措。
但咱可不能怕呀，得鼓起勇气往前冲！慢慢地，通过不断地研究和探索，开始发现一些蛛丝马迹。
哇塞，原来在不同的条件下，龙胆苦苷会有不同的裂解表现呢！这就像是它在给我们变魔术一样，一会儿这样，一会儿又那样。
有时候会产生一些奇妙的变化，让人忍不住惊叹：“哎呀呀，这也太神奇了吧！”在这个过程中，也会遇到一些小挫折啦，比如说实验结果不太理想呀，或者是有些规律怎么都搞不明白呀。
但咱可不能灰心丧气哟！得给自己打气，告诉自己“加油加油，一定能行！”然后继续埋头苦干。
随着了解的深入，就越发觉得龙胆苦苷裂解规律真的好有意思呀！就好像是在玩一个超级有趣的游戏，每一步都充满了惊喜和挑战。
而且呀，和小伙伴们一起探讨研究的时候，那氛围可热烈啦！大家你一言我一语的，各种奇思妙想都冒出来了。
哎呀呀，现在想想，这一路探索龙胆苦苷裂解规律还真是不容易呢，但也是超级有收获呀！就像那句话说的，“不经历风雨，怎么见彩虹”。
咱现在对龙胆苦苷裂解规律可是有了更深的认识和理解啦！总之呢，龙胆苦苷裂解规律这个领域还有好多好多值得我们去探索和发现的呢，未来的路还长着呢，但咱充满信心呀！让我们继续这场奇妙的旅程吧，说不定还会有更多更惊人的发现等着我们呢！哈哈！好啦，就说到这儿啦，下次再和你们分享更多关于龙胆苦苷裂解规律的有趣事儿哟！拜拜啦！。
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龙胆中龙胆苦苷研究进展1.龙胆苦苷简介1.1龙胆苦苷的基本性质龙胆有效药用成分中主要成分为龙胆苦苷，其广泛分布于龙胆属植物中。
龙胆苦苷属于裂环烯醚萜苷类化合物的一种，容易在乙醇、甲醇以及水溶剂中发生溶解，其分子式为C16H20O9。
龙胆苦苷性状为淡红/黄色或者白色针状结晶，存在内酯苷类化合物颜色反应，龙胆苦苷具有较强亲水性，而脂溶性则相对较差。
英文名:Gentiopicroside分子式：C16H20O9化学名:5-Ethenyl-6-(β-D- glucopyranosyloxy)-5,6- dihydro- 1H,3H - pyrano[3,4-C]pyran-1-one分子量：356Mp: 191℃[α]D: -196.3(H2O)UV:λmax 270(MeOH)1.2龙胆苦苷的结构2.龙胆苦苷的来源与应用2.1龙胆苦苷的来源本品为龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshurica Kitag.、龙胆Gentiana scabra Bunge 、三花龙胆Gentiana triflora pall 或坚龙胆Gentiana rigescens Franch. 的干燥根及根茎.龙胆苦苷(Gent iopicroside)是龙胆科龙胆属植物龙胆的有效成分之一, 也是当药及獐芽菜等植物中的苦味成分, 属于裂环环烯醚萜苷类, 分子式为C16H20O9 , 白色粉末或淡黄(红)色结晶, 易溶解于水、甲醇及乙醇等溶剂, 阳光下易变色.龙胆具有利胆、抗炎、健胃、降压等作用。
龙胆中主含环烯醚萜苷类成分，龙胆苦苷为其中主要有效成分。
2.1.1龙胆苦苷的植物来源全球龙胆属龙胆科( Gentiana L．) 植物超过500种，其中以热带高山以及温带地区分布较为广泛，此类植物在我国也有广泛分布，其种类超过230 种，西南部为其主要产地，大部分龙胆属龙胆科植物均用于观赏，也有部分可入药。
2.1.2龙胆苦苷的药物来源来源于龙胆的干燥根及根茎，也是当药及獐牙菜等植物的苦味成分。
2.2龙胆苦胆的应用龙胆苦苷具有保护肝脏、抗氧化、抗炎、镇痛及抗肿瘤等作用.2.2.1抗炎作用陈长勋等[ 1]报道, 秦艽所含龙胆苦苷具有抗炎作用, 即龙胆苦苷可减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀, 抑制冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的增加, 阻止角叉菜胶及酵母多糖所致大鼠足跖肿胀, 但对制霉菌素所致的炎症模型无明显作用.2.2.2保肝作用刘占文等[2]研究探讨了龙胆苦苷的肝保护作用, 发现龙胆苦苷可明显降低四氯化碳所致急性肝损伤小鼠血清A LT ,AS T 水平, 增加肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶活力, 提高大鼠胆流量及胆汁中胆红素含量, 故认为龙胆苦苷具有明显的肝保护作用.研究发现, 龙胆苦苷可显著抑制由四氯化碳和D-氨基半乳糖所致急性肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶的升高, 从而对肝脏起保护作用.刘涛等[3]通过对四氯化碳损伤大鼠肝脏和新鲜肝细胞体外筛选模型进行观察, 证实龙胆苦苷具有明显的抗四氯化碳肝损伤作用;李艳秋等[4]通过对四氯化碳、TAA 及D-氨基半乳糖所致小鼠肝损伤及豚鼠同种免疫性肝损伤模型的研究发现, 龙胆苦苷对化学性及免疫性肝损伤具有保护作用, 即龙胆苦苷可显降低多种急性肝损伤和慢性肝损伤动物血清氨酶, 减轻肝组织片状坏死、肿胀及脂肪变性的程度,促进肝脏的蛋白质合成.Kondo 等[5]将龙胆苦苷分别作用于四氯化碳和脂多糖/卡介苗所致的肝损伤模型, 均发现龙胆苦苷具有一定的保肝作用.2.2.3 镇痛作用陈雷等[6] 报道, 龙胆苦苷具有镇痛作用, 即经皮下注射给予小鼠龙胆苦苷, 可减少小鼠的扭体次数, 提高小鼠痛阈阈值, 且此作用呈良好的量效关系;龙胆苦苷可明显减轻二甲苯所致小鼠耳廓肿胀, 降低蛋清所致大鼠足趾肿胀, 抑制大鼠肉芽肿.Chen 等[7]报道, 龙胆苦苷通过下调N R2B 受体, 对持久性炎症性疼痛起显著的镇痛作用.2.2.4健胃作用研究发现, 经胃瘘管注入龙胆苦苷可使胃液中游离酸含量提高, 降低胃内pH 值;舌下涂抹龙胆苦苷可使胃液量稍微增加, 而静脉给药胃液量基本不增加, 提示龙胆苦苷刺激胃液和胃酸分泌的作用方式为直接作用[8] .2.2.5抗肿瘤作用Cho u 等[9]对龙胆苦苷对肝癌细胞Hep 3B 的细胞毒作用进行了研究, 结果表明收效甚微.另据报道, 龙胆苦苷在体外对人肺腺癌细胞株A 549 具有一定的抑制作用.黄馨慧等[10]报道, 龙胆苦苷可抑制SMMC-7721 人肝癌细胞的增殖. 2.2.6抗氧化作用龙胆苦苷具有清除自由基的能力, 龙胆苦苷标准品质量浓度在0.25 ～10.00 g/L时清除氢氧自由基能力随质量浓度的增加呈增长趋势, 清除率达40.74 %～87.03 %.据报道, 龙胆苦苷抗氧化活性RC50为0.75 g/L[11] .2.2.7其他作用2.2.7.1利胆作用龙胆苦苷可促进大鼠胆汁分泌,促进胆囊收缩[12] .2.2.7.2 促进伤口愈合作用Ozt¨urk 等[13]通过鸡胚成纤维细胞研究发现, 龙胆苦苷具有较好的促进伤口愈合作用.2.2.7.3 平滑肌松弛作用将龙胆苦苷质量浓度依赖性地作用于豚鼠离体回肠, 可阻碍由组胺、乙酰胆碱、氯化钡和氯化钾引起的回肠收缩, 表明龙胆苦苷可能干扰钙涌入平滑肌细胞, 起到平滑肌松弛作用[14].2.2.7.4 中枢神经系统作用从黄龙胆中得到的龙胆苦苷、当药苦苷和当药苷对小鼠的中枢神经系统有兴奋作用.3.龙胆苦苷的提取与分离3.1龙胆苦苷的提取方法3.1.1超声提取综合龙胆苦苷的提取因素：乙醇浓度、加热回流时间、提取次数和溶媒量，以70%乙醇，加热回流1h，重复提取3 次，从中药龙胆中提取的龙胆苦苷含量较高，是龙胆苦苷的最佳提取工艺。
所提取的龙胆苦苷的最高含量为 5.79% 。
其中乙醇用量和提取次数是龙胆苦苷提取的主要影响因素。
3.1.2 大孔吸附树脂富集法D-101大孔吸附树龙胆苦苷具有较好的吸附能力, 且解吸附快, 洗脱率大, 经过D-101 大孔吸附树脂处理后的药液固形物含量较上柱前原药液显著降低, 有效成分含量明显提高.验证实验表明, 用D-101大孔吸附树脂富集龙胆苦苷时, 以蒸馏水和250 mL/L 乙醇依次洗脱的工艺稳定可行.3.1.3酒炙法以水浸出物含量及水浸出物中龙胆苦苷的含量为指标, 采用正交设计筛选炮制工艺.以龙胆切短段(5 ～ 10 mm), 加入药材质量1/5 的白酒, 闷润2 h , 文火炒制的炮制品中水浸出物含量及水浸出物中龙胆苦苷的含量最高.1.4 乙醇提取法1.4.1 乙醇冷浸法采用正交试验法,以龙胆苦苷含量为指标筛选出合理的提取工艺为乙醇体积浓度为700 mL/L , 浸提时间为36 h , 溶媒用量为药材的10 倍, 提取3 次.1.4.2 乙醇热回流法利用正交试验筛选出的龙胆中龙胆苦苷的提取工艺为以600 mL/L 乙醇回流提取3 次, 每次2 h ,乙醇用量为药材量的18 倍.1.5 高速逆流色谱法利用制备型高速逆流色谱仪, 以氯仿-甲醇-正丁醇-水(5 ∶4 ∶2 ∶4)为溶剂系统对龙胆甲醇粗提取物进行分离, 上相为固定相, 下相为流动相, 转动速度为820 r/min , 流动速度为2.0 mL/min .所得龙胆苦苷经HPLC 分析, 纯度达到96.68 %(峰面积百分比).1.6 高速逆流色谱结合大孔树脂法对药材醇提取液经D-101 大孔吸附树脂柱的层析物直接进行高速逆流色谱分离纯化, 以醋酸乙酯-正丁醇-水(2 ∶1 ∶3)为溶剂系统, 下相为流动相, 流动速度为1.5 mL/min , 检测波长为254 nm , 分离温度为30 ℃, 所得产物经HPLC 与质谱分析检测, 并与标准品进行对照.3.2龙胆苦苷的分离方法3.2.1试验方法3.2.1.1微波辅助萃取-大孔树脂分离法萃取剂为600 mL/L 乙醇,流动速度为3 mL/min ;大孔树脂分离富集优化条件为上样速度为2.0 mL/min , 洗脱液为500 mL/ L 乙醇, 流动速度为1.0 mL/min .3.2.1.2回流提取龙胆药材的提取称取坚龙胆药材500 g，用70% 的乙醇溶液5 L、4 L 依次回流提取，每次回流提取2h，滤过，合并滤液，减压浓缩至无醇味，冷冻干燥。
3.1.2纯化方法采用经大孔吸附树脂AB-8分离得到的龙胆苦苷粗品经MCI树脂进一步分离纯化。
3.2.3实验结果在优化的萃取及纯化条件下测得龙胆原料中龙胆苦苷平均含量为34.57mg/g .，纯化后得到浓度大于97% 的龙胆苦苷此方法采用树脂结合技术，可直接从龙胆药材中分离得到高纯度的龙胆苦苷，简单、快捷、无毒、得率高，可以用于龙胆苦苷的大批量生产和标准品的制备。
3.2.3方法对比讨论经过以上分析龙胆苦苷的提取工艺条件为:在龙胆中加入8倍量的乙醇，超声提取2次，每次20min乙醇浓度70%、料液比1:10、提取时间3h、提取温度71.5℃. 在此条件下, 龙胆苦苷得率较高.，此工艺能保证坚龙胆中龙胆苦苷提取较完全。
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